Visfatin对SW872脂肪细胞胰岛素信号分子蛋白表达的影响

目的:观察visfatin对胰岛素抵抗状态下的SW872成熟脂肪细胞胰岛素信号分子胰岛素受体底物-1(IRS-1)、胰岛素受体底物-2(IRS-2)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)蛋白表达的影响。方法:体外培养SW872前脂肪细胞,诱导细胞分化成熟,建立胰岛素抵抗模型,用含有100nmol/L visfatin的无血清培养液孵育1h后收获细胞,采用Western印迹法检测visfatin刺激前后信号分子IRS-1、IRS-2和PI3K的蛋白表达水平。结果:在正常状态下(正常组内比较),visfatin促进脂肪细胞IRS-1、IRS-2和PI3K的蛋白表达,分别增加了51.65%(P<0.01)、44.74%(P<0.01)和61.38%(P<0.01)。在胰岛素抵抗状态下,visfatin刺激组的IRS-1、IRS-2和PI3K的蛋白表达水平,分别比基础状态组增加了26.98%(P<0.05)、35.59%(P<0.05)、27.61%(P<0.01)。结论:在胰岛素抵抗状态下,visfatin通过调节脂肪细胞胰岛素信号分子IRS-1、IRS-2和PI3K蛋白表达而发挥促进葡萄糖转运、改善胰岛素抵抗的生物学作用。     

姜黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响及机制研究

目的:探讨姜黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法:以XTT法检测3T3-Ll前脂肪细胞的增殖;油红O染色并通过比色定量分析检测3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积,实时定量荧光PC(real-time-PCR)检测脂肪细胞增殖、分化相关基因内脂素、抵抗素、脂联素mRNA的表达。结果:姜黄素组A值显著高于空白对照组并随着剂量增加而增大,且具有显著性差异(P0.05);姜黄素作用细胞48 h时,促进或抑制细胞增殖的作用最强,40μmol/L以上浓度的姜黄素出现细胞毒性作用,大部分细胞成片脱落死亡;72 h时,15~35μmol/L姜黄素组细胞的生长率有所增加,而40μmol/L以下姜黄素处理组细胞生长率仍维持在较低水平;脂肪细胞油红O染色分光光度法结果显示2.5,5,10,15和20μmol/L姜黄素剂量组的细胞吸光度值与空白对照组相比有显著性差异(P0.05);姜黄素组、吡格列酮组的内脂素、抵抗素mRNA表达均较对照组显著降低,而脂联素较对照组明显升高,且具有显著性差异(P0.05)。结论:姜黄素能够促进前脂肪细胞分化,低浓度时促进其增殖,高浓度时则抑制其增殖,降低内脂素、抵抗素mRNA表达,促进脂联素mRNA的表达。     

姜黄素对甲状腺癌细胞增殖与迁移能力的影响

目的 观察姜黄素对甲状腺癌细胞SW579侵袭力影响,并探讨姜黄素抗癌的作用机制.方法 甲状腺鳞癌SW579细胞株经5～20 μmol/L的不同浓度姜黄素作用48 h后,MTT法测定细胞增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期;RT-PCR方法检测细胞CD147及p21 mRNA的表达.结果 伴随姜黄素作用浓度的升高,SW579细胞的生长呈显著抑制状态,呈剂量、时间依赖性.肿瘤细胞生长滞留在G1期,CD147mRNA表达水平均显著下调,而p21 mRNA表达水平均显著上调,呈剂量、时间依赖性.结论 姜黄素能有效抑制甲状腺癌细胞的增殖,并且可能通过下调CD147的表达抑制肿瘤细胞的迁移.     

姜黄素对人结肠癌细胞SW480增殖周期及凋亡的影响

目的探讨姜黄素对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法采用甲基噻唑（MTT）比色法和生长曲线测定不同浓度姜黄素在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响，同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果姜黄素可在G0／G1期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖，使S期细胞比率降低；在一定范围内，姜黄素的浓度越高、作用时间越长，对肿瘤细胞生长的抑制作用越强，凋亡率也越高。结论姜黄素能抑制人结肠癌细胞SW480细胞生长，并诱导细胞凋亡而阻止细胞周期。     

白细胞介素6对人原代脂肪细胞增殖分化的影响

目的:近来研究显示,肥胖是一种慢性低度炎症,脂肪组织能够分泌众多炎性因子,其中,白细胞介素6(IL-6)是最重要的介质之一.文中观察IL-6对人原代脂肪细胞的增殖和分化的影响.方法:用酶消化法获得人原代脂肪细胞,MTT法检测人原代脂肪细胞生长增殖的状况.分化液诱导脂肪细胞分化至产生脂滴,同时用不同浓度IL-6(0、1、5、10、50、100、1000pg/ml)干预脂肪细胞分化,油红O染色测定脂肪细胞脂滴合成状况.结果:IL-6能抑制脂肪细胞的增殖,其中5pg/ml组细胞增殖被抑制14.1%(P＜0.05),10 pg/ml组被抑制18.7%(P＜0.05).IL-6能够抑制细胞分化,减少脂肪的合成,其中1pg/ml组最为明显(P＜0.05).结论:IL-6能有效抑制人原代脂肪细胞的增殖,并且抑制人原代脂肪细胞从前脂肪细胞向成熟脂肪细胞的分化.     

蒲黄总黄酮对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及相关基因表达的影响

目的 脂肪细胞分化的调控与肥胖及胰岛素抵抗的发病机制有密切关系.文中研究蒲黄总黄酮(pollen typhae total flavone, PTF)对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响,并通过相关基因的表达分析其可能机制. 方法 通过XTT法检测各剂量PTF干预的前脂肪细胞增殖的变化,对PTF干预分化的细胞进行油红O染色并通过比色定量分析脂肪细胞分化程度.RT-PCR检测脂肪细胞分化相关基因过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferator activated receptorγ, PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer binding proteinα, C/EBPα)mRNA的表达. 结果 PTF明显促进前脂肪细胞的增殖,在0.2 g/L时可明显促进前脂肪细胞的分化,但分化程度低于罗格列酮组.PTF可提高PPARγ和C/EBPαmRNA表达,与对照组比较差异有显著性意义(P<0.01). 结论 PTF促进前脂肪细胞增殖分化水平,其机制可能与提高PPARγ和C/EBPα的mRNA表达有关.     

大黄酸对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响

目的:研究大黄酸(rhein,Rh)对人前体脂肪细胞增殖与分化的影响,并进一步探讨其作用机制.方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法测定RH对人前体脂肪细胞增殖的影响;通过形态学观察脂肪细胞的分化程度及形态学变化;并用油红O染色法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化;应用RT-PCR检测RH干预后分化抑制基因CHOP mRNA的表达.结果:各浓度组RH(0.1、1、2.5、5、10 ug/ml)抑制人前体脂肪细胞增殖,作用呈剂量依赖性;RH对脂肪细胞分化的抑制作用亦呈剂量依赖性;1 ug/ml的RH使CHOP mRNA表达增加.结论:RH可抑制人前体脂肪细胞增殖与分化,该作用可能与CHOP表达上调有关.     

黄芪多糖对3T3-L1前脂肪细胞增殖和分化的影响

目的:探讨黄芪多糖(Astragalus polysaccharides,APS)对前脂肪细胞增殖、分化的影响及其机制。方法:以XTT法检测3T3-Ll前脂肪细胞的增殖;油红O染色并通过比色定量分析检测3T3-L1前脂肪细胞分化过程中胞浆脂质的堆积;采用实时聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹(Western blotting)技术检测前脂肪细胞分化相关基因过氧化物体增殖剂活化受体γ(peroxi some proliferator activated receptorγ,PPARγ)、CAAT/增强子结合蛋白α(CAAT/enhancer binding proteinα,C/EBPα) mRNA以及蛋白质的表达。结果:APS浓度从0.025到0.8g/L,在24、48和72h各时间段对前脂肪细胞的生长均表现为增殖趋势,且呈一定的量效关系;0.4g/L APS处理的前脂肪细胞,胞浆中出现较大量脂滴,其作用与噻唑烷二酮(thiazo-lidinedione,TZD)类药物罗格列酮(rosiglitazone,ROS)相似;APS使前脂肪细胞分化相关基因PPARγ和C/EBPα mRNA与蛋白的表达明显增加,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论:APS能够促进前脂肪细胞的增殖和分化,增加脂肪细胞分化过程中脂质的堆积,其机制可能与其促进PPARγ和C/EBPα mRNA与蛋白质表达有关。     

姜黄素对甲状腺癌细胞SW579增殖和凋亡的影响

目的天然药物以毒性低、安全范围广、药源丰富越来越受到人们的关注,本课题旨在研究姜黄素对甲状腺癌SW579细胞增殖、细胞周期和凋亡的影响,并探讨姜黄素抗癌的作用机制。方法甲状腺癌SW579细胞株经0~40μmol/L的不同浓度姜黄素作用12 h、24 h、48 h后,采用MTT法检测姜黄素对细胞增殖的抑制作用;经0~20μmol/L的不同浓度姜黄素作用7 d后,平板克隆形成实验检测姜黄素对甲状腺癌SW579细胞增殖的抑制作用;经0~20μmol/L的不同浓度姜黄素作用24 h后,采用流式细胞仪检测甲状腺癌SW579细胞周期;经0~20μmol/L的不同浓度姜黄素作用48 h后,采用流式细胞仪检测甲状腺癌SW579细胞凋亡率,并采用蛋白质印迹法检测甲状腺癌SW579细胞株中Cyclin B1、p21、bad和Bcl-xl的蛋白水平。结果 MTT结果显示姜黄素能显著抑制人甲状腺癌SW579细胞的生长增殖,抑制作用呈现时间及浓度依赖性;平板克隆实验提示,姜黄素作用甲状腺癌细胞后克隆形成数目下降,形成集落变小,并且呈浓度依赖性;流式细胞仪分析显示姜黄素能阻滞细胞周期于G0/G1期,并且呈浓度依赖性;流式细胞仪分析显示姜黄素能增加甲状腺癌细胞凋亡率;western blot检测显示姜黄素可抑制细胞周期蛋白Cyclin B1的表达,同时下调凋亡相关蛋白Bcl-xl,而姜黄素对P21和Bad的表达无影响。结论姜黄素能下调Cyclin B1、Bcl-xl的表达,显著抑制人甲状腺癌SW579细胞在体外的增殖。     

大黄酸对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响

目的 研究大黄酸(rhein,Rh)对大鼠前体脂肪细胞增殖与分化的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术测定RH对大鼠前体脂肪细胞增殖的影响.采用油红O染色提取法,检测脂肪细胞内甘油三酯积聚量的变化;采用形态学观察,检测前体脂肪细胞充脂率、充脂程度及形态变化.结果 RH在5～160 μmol&#183;L-1内,对前体脂肪细胞增殖与分化的抑制作用呈剂量和时间依赖性变化,并可在一定程度上诱发脂肪细胞凋亡.结论 Rh可抑制前体脂肪细胞的增殖与分化,具有潜在的减肥降脂作用.     

大黄素对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化及脂肪代谢的影响

目的　探讨大黄素对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞增殖分化和对脂肪代谢的影响 ,以及探讨大黄素可能的减肥作用的药理机制。方法　MTT法测定细胞的增殖速度 ,油红O染色法测定细胞的分化速度 ,分光光度法测定脂肪酸合成酶活性。结果　大黄素在较低浓度下对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞的增殖有一定的促进作用 ,但当浓度升高时 ,转化为剂量依赖性抑制作用 ;大黄素对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞向脂肪细胞的分化以及对脂肪酸合成酶活性有剂量依赖性抑制作用。结论　本研究在国际上第一次报道大黄素对 3T3 L1小鼠前脂肪细胞增殖与分化及脂肪代谢有影响 ;大黄素可能具有潜在的减肥、降脂作用。     

姜黄素对人卵巢癌SK细胞增殖活性及PCNA、P53 mRNA表达的影响

目的探讨姜黄素抗卵巢癌SK细胞增殖活性的作用及机制。方法培养好的人卵巢癌SK细胞,分别加入10、20、30、40、50μmol/L姜黄素,对照组加等量溶剂二甲基亚砜(DMSO),分别孵育24、48 h,应用MTT方法和细胞计数方法测定SK细胞生长抑制率。40μmol/L姜黄素孵育48 h后,收集细胞,RT-PCR方法测定PCNA和P53 mRNA的表达。结果姜黄素对SK细胞增殖具有明显的抑制作用。在10～50μmol/L浓度范围内,姜黄素对SK细胞增殖的抑制率随浓度增高和时间延长而增加。40μmol/L姜黄素处理SK细胞48 h后,PCNA mRNA表达显著下降(P<0.01),P53 mRNA表达显著上升(P<0.01)。结论姜黄素可通过下调PCNA表达、上调P53 mRNA表达,发挥其抑制卵巢癌SK细胞增殖的作用。     

ox-LDL对破骨细胞增殖及分化的影响

目的：检测ox-LDL对破骨细胞增殖及分化的影响。方法CuSO4氧化法制备ox-LDL,硫代巴比妥法鉴定低密度脂蛋白氧化程度,将制备的 ox-LDL 配置成不同的浓度,对破骨细胞进行干预,MTT 法测定其对破骨细胞增殖及分化的影响。结果不同浓度的ox-LDL对破骨细胞的增殖及分化的影响有差别ox-LDL浓度分别为100 mg/ L,150 mg/ L,200 mg/ L 时,破骨细胞抑制率为0.65±0.732,0.48±0.068,0.31±0.039,都较对照组破骨细胞的1.28±0.147低,P ﹤0.05。而 ox-LDL 浓度为25 mg/ L 及50mg/ L 时,破骨细胞抑制率为1.134±0.120,1.189±0.112,P ﹥0.05。结论成功制备了氧化性低密度脂蛋白及诱导形成破骨细胞,一定浓度的ox-LDL可促进破骨细胞的增殖及分化。     

姜黄素对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨姜黄素对Jurkat细胞增殖及凋亡的影响。方法:体外培养条件下,用姜黄素处理Jurkat细胞12h后,MTT法检测细胞的生存率和IC50值;Hoechst33342染色观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞学检测细胞凋亡率。结果:体外培养条件下,姜黄素对Jurkat细胞的增殖有明显抑制作用,呈剂量依赖性,IC50值为31μmol/L。激光共聚焦扫描显微镜观察,随着姜黄素浓度的增加,Jurkat细胞凋亡增多。流式细胞学分析表明,低浓度姜黄素使Jurkat细胞发生早期凋亡,高浓度姜黄素使Jurkat细胞出现晚期凋亡。结论:姜黄素明显抑制Jurkat细胞增殖,同时诱导Jurkat细胞发生凋亡。     

低氧对LLC-PK1细胞增殖及去分化的影响

目的：研究低氧对近端肾小管细胞株(LLC-PK1)细胞增殖和去分化的作用。方法：LLC-PK1细胞分别置于低氧（3％ O2）和正常氧（18％ O2）孵箱中培养,用3H-胸腺嘧啶掺入法和细胞计数,观察细胞增殖情况;以钠依赖葡萄糖和氨基异丁酸(AIB)转运为指标,观察细胞分化程度;用放射核素法测定蛋白激酶C(PKC)活性。结果：与正常氧培养比较,低氧培养16 h,3H-胸腺嘧啶掺入显著增加;培养24 h,细胞数显著增加;培养72 h,细胞摄取α-甲基糖甙和AIB显著降低。细胞低氧培养4 h,细胞膜与细胞质PKC活性比率增高,随后降至原先水平;但继续培养至24 h,PKC活性再次增高,直至72 h,表明PKC呈急性和持续双相激活。PKC抑制剂可显著抑制低氧诱导的3H-胸腺嘧啶掺入,并显著增加α-甲基糖甙和AIB转运。结论：慢性低氧可诱导LLC-PK1细胞的增殖和去分化,这些作用部分由PKC持续激活介导。     

长链非编码RNA-ROR对结直肠癌SW620细胞增殖的影响

目的了解长链非编码RNA-ROR（LncRNA-ROR）在结直肠癌SW620细胞增殖中的作用。方法选择40例结直肠癌组织及相应正常组织（距肿瘤切缘5cm以外）,首先采用qRT-PCR技术检测LncRNA-ROR在结直肠癌组织中的表达情况,并分析其表达与病人临床病理因素的相关性。构建慢病毒载体LV5-ROR、LV5-Vector转染到结直肠癌细胞SW620中,验证LncRNA-ROR的表达,分析LncRNA-ROR过表达对结直肠癌细胞CCK-8功能及SW620平板克隆形成的影响。结果与正常组织比较,LncRNA-ROR在结直肠癌组织中低表达（P < 0.01）,其表达水平与TNM分期具有相关性（P < 0.05）。经转染筛选后,qRT-PCR检测证实SW620中的LncRNA-ROR表达增加,其高表达导致SW620增殖能力的下降（P < 0.01）。结论LncRNA-ROR的过表达抑制了结直肠癌细胞SW620的增殖。     

姜黄素对鼻咽癌CNE—1细胞增殖和周期的影响

目的讨论姜黄素对鼻咽癌CNE-1细胞增殖和周期的影响。方法 MTT法检测增值抑制率,流式细胞术分析细胞周期和细胞凋亡。结果不同浓度的姜黄素作用细胞48h时,抑制率随浓度的增加而增加,流式细胞仪分析证实姜黄素能使CNE-1细胞阻滞在G2/M期,并出现亚二倍体凋亡峰。结论 姜黄素对CNE-1细胞具有增殖抑制作用,并阻滞细胞于G2/M期和诱导细胞凋亡。     

神经干细胞增殖分化的影响因素

神经干细胞（neural stem cells,NSCs）是具有高度自我更新能力并能分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的神经前体细胞。它能增殖成恰当数量的细胞,在脑部各个区域按正确顺序排列组合,分化为神经元,星形胶质细胞、少突胶质细胞,这是发育过程中必不可少的过程。     

姜黄素对膀胱癌细胞增殖及凋亡的影响

目的探讨中药姜黄素对膀胱癌细胞（T24）增殖及凋亡的影响及可能机制。方法以培养的T24细胞为研究对象,姜黄素组加入终浓度为1、10、100μmol／L的姜黄素,对照组不加姜黄素,12、24、48h后观察T24细胞的形态变化。分别用MTT法、TUNEL染色、RT-PCR、免疫印迹及图像分析技术检测各组细胞生长、凋亡发生、AKT1蛋白及转录水平、caspase 3蛋白含量的变化。结果姜黄素组124细胞生长抑制率显著上升,细胞凋亡发生显著升高,AKTI蛋白活性水平降低,转录水平无显著变化,caspase 3蛋白含量显著升高。结论姜黄素能抑制T24细胞的生长并促进其凋亡,其发生与其抑制T24细胞PKB／AKT信号通路有关。     

姜黄素对人膀胱癌T24细胞增殖的抑制作用

目的 本研究旨在探讨姜黄素对人膀胱癌T24细胞增殖的影响。方法 培养人膀胱癌T24细胞,施加不同浓度姜黄素（10,50,100,250,500μM）,观察对细胞增殖的影响。应用四唑盐比色法（MTT法）观察细胞增殖抑制情况;应用彩色图像分析系统观察细胞形态学特征（HE染色）。结果 姜黄素各组较对照组增殖降低;姜黄素各组,存在剂量一效应关系（10～500μM）和时间-效应关系（12h,24h,48h,72h）。结论 姜黄素抑制人膀胱癌124细胞增殖。