降糖药二甲双胍对甲状腺未分化癌细胞增殖及凋亡的作用

目的:研究二甲双胍对甲状腺未分化癌细胞增殖及凋亡的作用,初步探讨其作用机制?方法:以不同浓度二甲双胍作用于未分化癌SW1736细胞,MTT法检测其增殖,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况?结果:二甲双胍可显著抑制SW1736细胞增殖,其抑制作用呈剂量依赖性,并随着作用时间的延长抑制作用逐渐增强,于72 h达到最大抑制效果?流式细胞检测结果显示二甲双胍可阻滞未分化癌细胞周期至G0/G1期;并可促进肿瘤细胞凋亡,随着二甲双胍作用浓度的递增,肿瘤细胞的凋亡率逐渐增加,20 mmol/L二甲双胍作用48 h后,可使SW1736细胞凋亡率从8.3%增加至13.3%,与对照组相比,有显著统计学差异?结论:二甲双胍可抑制甲状腺未分化癌细胞的增殖活性,阻滞细胞周期进程,诱导细胞凋亡,为甲状腺未分化癌的治疗研究提供了新的方向?     

二甲双胍联合照射抑制人肺癌细胞的侵袭和转移的研究

目的探讨二甲双胍联合照射对人肺癌细胞的侵袭和转移能力的影响,为研发肺癌有效的靶向治疗方案提供新思路。方法应用MTT法检测二甲双胍联合照射对肺癌肿瘤细胞的抑制作用,划痕和侵袭实验观察肿瘤细胞迁移和侵袭能力的改变,Western blot检测其侵袭转移相关因子MMP-2、MMP-9、VEGF的表达情况。结果 MTT显示,不同浓度的二甲双胍对肺癌细胞A549具有显著的增殖抑制作用。二甲双胍组、照射组和联合处理组12 h和24 h的迁移距离均低于对照组。联合处理组作用于A549细胞的侵袭抑制作用也明显高于单用二甲双胍组和照射组。联合处理组可下调MMP-2、MMP-9和VEGF的表达。结论二甲双胍降低了肺癌肿瘤细胞的生长,下调了MMP-2、MMP-9、VEGF的表达,并有效抑制肺癌细胞的侵袭能力,提示二甲双胍在肺癌转移过程中起重要作用,可以作为肺癌的潜在治疗方案。     

二甲双胍抗肿瘤作用机制研究进展

近年来大量研究表明一线降糖药物二甲双胍在肿瘤治疗领域表现出较为明显的作用。其抗肿瘤的主要机制为:二甲双胍能够有效抑制肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞的凋亡,改善肿瘤细胞微环境等。此外,二甲双胍还能够降低肿瘤的转移潜能及增强肿瘤细胞对化疗反应的敏感度等。从以上这些方面可以看出二甲双胍具有很大研究潜力及广阔的应用前景。本文总结了近10年的研究成果,总结二甲双胍在抗肿瘤方面的作用机制,为将二甲双胍或者双胍类药物应用于抗肿瘤治疗方面奠定了良好的理论基础。     

二甲双胍抑制IL-6诱导的LNCaP增殖及上皮-间质转化

目的 初步探讨二甲双胍抑制前列腺癌发展的作用.方法 使用慢病毒感染构建IL-6过表达细胞株LNCaP-IL-6(IL-6过表达病毒转染)和LNCaP-ctr(空病毒转染),运用激光共聚焦扫描确定转染效果,ELISA检测LNCaP、LNCaP-IL-6和LNCaP-ctr细胞IL-6分泌水平,倒置显微镜观察细胞形态.实验分为LNCaP-ctr组、LNCaP-IL-6组、LNCaP-ctr+二甲双胍组和LNCaP-IL-6+二甲双胍组,MTT技术检测相对细胞数量,流式细胞技术检测二甲双胍对细胞周期的影响.实验分为LNCaP-IL-6和LNCaP-IL-6+二甲双胍组,运用细胞迁移实验检测两组细胞迁移速度,Western blot技术检测两组细胞TWIST和E-Cadherin表达水平.结果 激光共聚焦扫描和ELISA检测证明IL-6过表达细胞株LNCaP-IL-6构建成功,LNCaP-IL-6细胞IL-6分泌水平约为LNCaP-ctr的5 000倍.MTT实验显示第5天LNCaP-IL-6相对细胞数量约为LNCaP-ctr的1.4倍,处理组的LNCaP-IL-6相对细胞数量约为LNCaP-ctr的1.6倍;流式细胞仪检测显示二甲双胍阻滞LNCaP的细胞周期为S期.细胞形态学观察和Western blot检测证实IL-6诱导LNCaP发生上皮-间质转化,细胞迁移实验显示二甲双胍可抑制LNCaP-IL-6细胞的迁移,Western blot进一步证实二甲双胍降低LNCaP-IL-6 TWIST表达及升高E-Cadherin表达.结论 二甲双胍能够抑制IL-6诱导的LNCaP细胞的上皮-间质转化.     

SCD1对甲状腺乳头状癌细胞增殖和侵袭的影响及其机制研究

目的:探讨硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase 1,SCD1)对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid cancer,PTC)细胞TPC1增殖、迁移及侵袭的影响.方法:采用Western blot方法检测人甲状腺滤泡上皮正常细胞Nthy-ori 3-1和甲状腺乳头状癌细胞株...     

转化生长因子β1在血小板促进甲状腺未分化癌侵袭迁移中的作用

  目的  探索肿瘤患者血小板（platelet,PLT）是否通过分泌转化生长因子β1（transforming growth factor β1,TGFβ1）参与调控甲状腺未分化癌（anaplastic thyroid carcinoma,ATC）的转移。  方法  通过ELISA和Real-time PCR实验测定ATC细胞上清TGFβ1蛋白和mRNA表达情况;通过Transwell迁移实验、划痕实验和Western Blot方法探究TGFβ1对ATC细胞迁移及侵袭能力的影响及其作用机制。  结果  PLT与ATC细胞共培养上清液中TGFβ1蛋白水平显著上调（P < 0.001）而mRNA水平不变;PLT或rhTGFβ1可使穿过小室的ATC细胞显著增加（P < 0.001）,提示PLT或rhTGFβ1能显著增强ATC细胞的迁移能力（P < 0.001）;划痕实验也证实rhTGFβ1可显著增强ATC细胞的迁移能力（P < 0.001）。  结论  PLT可通过分泌TGFβ1诱导ATC细胞EMT进程最终增强ATC细胞迁移和侵袭能力,表明TGFβ1可能成为ATC患者靶向治疗的潜在靶标。     

二甲双胍对人肝细胞癌SMMC7721增殖的抑制作用

[摘要]目的检测二甲双胍作用下肝细胞癌SMMC-7721细胞的增殖和凋亡情况,并初步探讨了其中的机制。方法以不同浓度(0.2、1、2、5 mmol/L)二甲双胍处理SMMC-7721,用CCK-8法检测其对细胞增殖的影响,Hochest33342 DNA染色检测细胞凋亡,实时定量PCR法检测Bcl-2和Bid mRNA的表达情况。结果二甲双胍处理48 h 和96 h后,人肝细胞癌SMMC7721细胞的增殖明显受到抑制(P<0.05),以2 mmol/L和5 mmol/L组最为明显(P<0.01),并呈时间和剂量依赖性。Hochest33342染色发现,1 mmol/L和5 mmol/L浓度的二甲双胍可促进细胞凋亡,细胞凋亡率与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。二甲双胍处理后,SMMC7721细胞内抗凋亡分子Bcl-2表达下降(P<0.01),促凋亡分子Bid表达升高(P<0.05)。结论二甲双胍能抑制人肝细胞癌SMMC7721细胞增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与细胞内抗细胞凋亡分子Bcl-2表达下降及促凋亡分子Bid表达升高有关。     

二甲双胍对肝细胞癌的诊断、预防及治疗作用

肝细胞癌是全球最常见的恶性肿瘤之一,虽然对肝细胞癌的治疗有手术切除、介入治疗、放射治疗、化学治疗、靶向治疗以及肝移植等多种方案,但总体效果并不理想。这严重影响患者的生活质量,也加重了社会和经济负担。二甲双胍原为2型糖尿病的一线用药,但人们发现其在恶性肿瘤防治中也具有一定的作用。二甲双胍在肝细胞癌防治中具有潜在作用,如调控肝细胞癌微环境、增殖信号通路、代谢、侵袭和转移、凋亡、自噬和表观遗传学等,为肝细胞癌的防治提供了新选择。     

二甲双胍通过调控糖代谢抑制甲状腺结节的研究进展

甲状腺结节是指各种原因导致甲状腺内出现的一个或多个组织结构异常的团块。近年来甲状腺结节患病率不断增加,糖代谢异常可能是其重要原因之一,主要涉及胰岛素/胰岛素样生长因子１、瘦素、炎症、遗传免疫等机制。二甲双胍作内应用最广泛的抗糖尿病药物,可以通过不同信号通路发挥抑制甲状腺结节的作用。文章就此方面研究进展进行综述。     

二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及机制

目的探讨二甲双胍对肾癌细胞凋亡的影响及其机制。方法通过Annexin V-FITC/PI染色镜下观察及流式细胞仪检测观察二甲双胍对786-O细胞凋亡的影响,通过免疫印迹检测AMPK信号及Caspase 9表达探讨可能分子机制。结果二甲双胍能够诱导786-O在低浓度血清环境凋亡,激活Caspase 9,二甲双胍能够激活786-O细胞中AMPK信号,但与其凋亡诱导效应无关。结论二甲双胍能够诱导肾癌细胞在低浓度血清环境凋亡,具有潜在治疗肾癌作用。     

穿心莲内酯对人乳腺癌细胞迁移和侵袭的抑制作用

目的:探究穿心莲内酯对人乳腺癌MDA-MB-231细胞迁移和侵袭的抑制作用及机制。方法:用穿心莲内酯0,5,10,20,40和80 μmol/L处理MDA-MB-231细胞24 h,MTT法检测细胞存活率;伤口愈合和Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力;逆转录聚合酶链反应检测解偶联蛋白2（uncoupling protein 2,UCP2） mRNA表达;蛋白质印迹法检测UCP2和丙酮酸脱氢酶（pyruvate dehydrogenase,PDH）蛋白表达水平;乳酸试剂盒检测乳酸含量;JC-1染色后共聚焦显微镜检测线粒体膜电位。结果:穿心莲内酯对MDA-MB-231细胞增殖的抑制作用具有浓度依赖性;与0 μmol/L组相比,10,20,40 μmol/L组MDA-MB-231细胞的迁移与侵袭能力受到抑制（P<0.05或P<0.01）;UCP2的mRNA和蛋白表达下调（P<0.05或P<0.01）,线粒体膜电位升高,PDH蛋白表达上调,细胞内乳酸含量下降（P<0.05或P<0.01）。结论:穿心莲内酯可能通过抑制乳腺癌的糖酵解和改变能量代谢的方式抑制MDA-MB-231细胞的迁移与侵袭,其机制可能与UCP2有关。     

不同病理类型甲状腺癌及其周围结构侵犯和转移的CT表现

目的 通过ＣＴ表现特征判断中晚期甲癌的病理类型,为临床制定正确的治疗方案提供依据。方法 对比分析３６例不同病理类型中晚期甲癌的原发灶ＣＴ表现类型、周围结构侵犯、淋巴结转移灶等的ＣＴ表现特点。结果 （１）原发灶ＣＴ表现属局限型者多为滤泡癌;ＣＴ表现属混合型者我为混合癌及未分化癌。（２）最易侵犯腺外结构者属未分化癌,其次是滤泡癌的混合癌;外侵比例最少者为乳头状癌。（３）不同病理类型甲癌淋巴结转移灶变具     

miR-454-3p在结肠癌中的表达及其对结肠癌增殖、侵袭及肝转移能力的影响

目的研究miR-454-3p在结肠癌中的表达及其对结肠癌增殖、侵袭及肝转移能力的影响。方法收集20例结直肠癌患者 的肿瘤组织,癌旁组织作为正常对照。应用原位杂交检测结肠癌组织和正常结肠组织中miR-454-3p的表达水平。在结肠癌细 胞株SW480中,运用慢病毒转染技术过表达miR-454-3p。应用Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 和细胞克隆形成实验检测结肠癌 细胞增殖能力的变化,Transwell实验检测结肠癌细胞侵袭能力的变化。脾脏注射结肠癌细胞构建小鼠结肠癌肝转移模型,研究 过表达miR-454-3p对结肠癌肝转移的影响。结果原位杂交结果显示miR-454-3p在结肠癌组织中的表达水平显著高于正常结 肠组织,差异有统计学意义（P<0.05）;在人结肠癌细胞SW480中上调miR-454-3p表达能够显著促进肿瘤细胞的增殖和侵袭（P< 0.05）。小鼠过表达miR-454-3p组中肝转移结节较对照组显著增多（P<0.05）。结论miR-454-3p在结直肠癌患者肿瘤组织中表 达显著上调,miR-454-3p 可能通过促进结肠癌细胞增殖和侵袭进而促进肿瘤的肝脏转移,从而参与了结直肠癌的发展进程。 miR-454-3p有望成为结直肠癌诊断和预后评估的一个新的潜在标志物。     

RNA沉默LASS2基因促进人前列腺癌细胞体外侵袭及其机制研究

目的：研究特异性沉默人源性长寿保障基因2 ( homosapiens longevity assurance homologue 2, LASS2,亦称TMSG1)的小干扰RNA ( small interfering RNA, siRNA)对人前列腺癌细胞系低转移潜能亚系PC-3M-2B4的体外侵袭能力的影响及相关机制。方法：通过脂质体转染法将特异性沉默LASS2基因的siRNA转染入PC-3M-2B4细胞。分别用实时荧光定量PCR( real-time fluorogenetic quantitative PCR, RFQ-PCR) 和Western blot方法检测LASS2 siRNA对PC-3M-2B4 细胞LASS2基因和蛋白表达的抑制作用,筛选有效的siRNA片段;运用液泡型ATPases（vacuolar H⁺-ATPases,V-ATPases）活性测定试剂盒来检测PC-3M-2B4细胞的V- ATPases活性;运用BCECF氢离子敏感荧光探针检测PC-3M-2B4细胞外氢离子浓度;采用Western blot方法分析PC-3M-2B4细胞的基质金属蛋白酶2 (matrix metalloproteinase 2,MMP-2 )的表达及分泌情况;应用明胶酶谱法检测PC-3M-2B4细胞上清液中MMP-2的活性;利用细胞划痕修复实验和Transwell法检测细胞体外迁移及侵袭能力。结果：通过RFQ-PCR 和Western blot筛选后, siRNA-2能显著抑制PC-3M-2B4 细胞LASS2基因mRNA和蛋白的表达,对mRNA表达的抑制率可达84.5%,对蛋白表达的抑制率可达60%。PC-3M-2B4细胞转染LASS2 siRNA-2后,其V-ATPases的活性及细胞外氢离子浓度明显升高,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.05) ;MMP-2蛋白的表达及分泌无明显变化,但分泌的MMP-2的活性形式增加,与空白对照组相比明显提高,差异有统计学意义(P<0.05);且细胞的体外迁移及侵袭能力明显高于空白对照组( P<0.05 )。结论：特异性siRNA沉默LASS2基因能促进人前列腺癌细胞体外侵袭能力,其机制与沉默LASS2基因后激活V-ATPase,从而使细胞外氢离子浓度升高,进而激活MMP-2有关,提示LASS2基因是一新的肿瘤转移抑制基因。     

MiRNA-381 抑制肾癌侵袭能力及其分子机制

目的：研究miRNA-381对肾癌侵袭的抑制作用,并探索其机制。方法：上调miRNA-381表达后,观察 miRNA-381对肾癌细胞侵袭的抑制作用。通过miR数据库starBase研究miRNA-381靶基因,再通过双荧光素酶实验验 证。分析miRNA-381及相应靶基因在细胞和组织水平的表达丰度。结果：转染miRNA-381后,其表达增加,跨膜细胞 数目显著下降,细胞侵袭力受抑制。生物信息学分析显示miRNA-381靶基因为CREB绑定蛋白(CREB binding protein, CBP)、β-catenin和淋巴增强因子-1(lymphoid enhancer binding factor-1,LEF-1);包含野生型靶基因3'-非编码区载体组的 荧光素酶活性明显降低。实时定量PCR显示肾癌细胞中miRNA-381低表达,在高转移潜能肾癌细胞株786-OHM中表达 更低;相反,在细胞、组织水平miRNA-381靶基因CBP,β-catenin与LEF-1表达均增高。结论：MiRNA-381可抑制肾癌 细胞的侵袭能力,其机制可能是通过CBP,β-catenin和LEF-1实现的。     

IL-17及其受体调控JAK/STAT3信号通路促进喉癌血管生成的作用

目的 探讨白细胞介素17(IL-17)及其受体调控酪氨酸激酶(JAK)/转录激活因子-3(STAT3)信号通路促进喉癌血管生成的作用. 方法 收集喉癌手术切除标本70 例,癌组织通过不同病理分级,采取70 例喉癌患者的外周血. 采用ELISA 法检测外周血中 IL-17、血管内皮生长因子 A ( VEGF-A)的浓度,分析其与临床病理特征的关系. Western blot 法检测喉癌组织中IL-17、IL-17受体( IL-17R)、JAK1/2、p-JAK1/2、STAT3、p-STAT3、VEGF-A、环氧合酶-2 ( COX-2 )、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)等信号分子水平的变化. 结果喉癌患者血清中IL-17、VEGF-A的含量与喉癌的分化程度、淋巴结有无转移和TNM分期有关( P<0. 05 ) , Western blot结果显示在喉癌发展的不同时期,随着喉癌的恶化, IL-17、IL-17R的表达逐渐增强,相关信号通路分子JAK1/2、p-JAK1/2、STAT3、p-STAT3、VEGF-A、COX-2、MMP-9 表达也显著增加. 结论 IL-17可能调控JAK/STAT3信号通路,在喉癌的血管生成中起到重要的作用.     

结直肠癌组织CypB表达及其对癌细胞迁移和侵袭能力的影响

目的观察伴或不伴淋巴结转移的结直肠癌组织中亲环素B（CypB）的表达变化,研究CypB质粒敲除对结直肠癌细胞迁移和侵袭能力的影响。方法采用免疫组织化学法检测结直肠癌组织芯片中59例结直肠癌组织CypB表达,其中31例无淋巴结转移,28例伴淋巴结转移。构建CypB的RNA干扰质粒,测序鉴定后转染结直肠癌细胞系SW1116（SW1116-siCypB）,设立阴性对照（SW1116-NC）;Westernblotting分析CypB敲除效果。分别采用划痕实验和细胞侵袭实验评估和检测CypB敲除对SW1116细胞迁移和侵袭能力的影响。结果伴淋巴结转移结直肠癌组织中CypB表达显著高于无淋巴结转移结直肠癌组织（P〈0．01）。与SW1116-NC比较,SW1116-siCypB的CypB表达明显减少,细胞迁移和细胞侵袭能力均显著降低,差异均有统计学意义（均P〈0．01）。结论CypB在结直肠癌淋巴结转移过程中具有重要作用,有望成为防治结直肠癌淋巴结转移的分子靶点。     

二甲双胍对小鼠衰老过程中学习记忆能力的影响

目的探究D-半乳糖诱导小鼠衰老过程中补充二甲双胍对小鼠学习记忆能力的影响及可能机制。方法将24只雌性ICR小鼠随机分为3组:对照组、衰老组、衰老+二甲双胍组,每组8只,连续给药16周。监测各组小鼠体重及食物摄取量;行为学检测小鼠学习记忆能力;HE染色观察小鼠海马组织结构;比色法检测各组小鼠海马组织中谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。结果与衰老组相比,衰老+二甲双胍组小鼠体重降低(P0.05);Morris水迷宫逃避潜伏期、游泳路程明显减少(P0.01或P0.05),目标象限内游泳时间延长(P0.05),游泳速度加快(P0.05);穿梭实验中主动回避次数升高(P0.05);HE染色显示海马齿状回中核皱缩、深染的海马神经元明显减少;海马组织GSH水平显著升高(P0.05)。结论补充二甲双胍可以明显延缓小鼠衰老过程中学习记忆能力的下降,维持海马神经元正常结构,其机制可能与降低小鼠体重及增强海马组织抗氧化水平有关。     

ZEB1对食管癌细胞侵袭转移的影响及作用机制研究

目的 探讨E盒结合锌指蛋白1（zinc finger E-box-binding protein 1,ZEB1）对食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma,ESCC）增殖和侵袭转移的影响和机制。 方法 选择人ESCC细胞系EC9706细胞为研究对象,采用ZEB1 shRNA对EC9706细胞进行转染,敲除ZEB1表达;采用CCK8法检测细胞活力;细胞侵袭转移能力通过划痕实验检测;利用实时荧光定量聚合酶链反应（real-time quantitative PCR,RT-qPCR）技术检测转染后细胞ZEB1 mRNA表达水平;ZEB1,细胞外调节蛋白激酶（extracellular regulated protein kinase,ERK）1/2,p-ERK1/2, E-cadherin和N-cadherin蛋白表达水平通过免疫印迹（Western blot,WB）检测。 结果 与对照组相比,敲除ZEB1的EC9706细胞系的细胞活力明显降低,并抑制了ESCC的侵袭转移能力（P＜0.05）。ZEB1表达水平降低减少了ERK1/2激活水平,促进E-cadherin表达,抑制N-cadherin表达（P＜0.05）。 结论 下调ZEB1表达抑制ESCC细胞增殖和侵袭转移能力,其作用机制与ERK1/2激活抑制及调控E-cadherin、N-cadherin相关。     

miRNA-374a在乳腺癌侵袭与转移中的作用及机制

目的 探讨miRNA-374a在乳腺癌侵袭转移过程中的作用及机制.方法 选取实验标本48例,其中高侵袭转移性乳腺癌前缘组织标本（A组）、低侵袭转移性乳腺癌前缘组织标本（B组）、正常乳腺组织标本（C组）各16例.每组随机选取6例标本混合后分别进行高通量基因组学分析.筛选出差异表达的miRNA-374a.通过生物信息学工具预测miRNA-374a的靶蛋白BMP-2.运用qRT-PCR及Western blot方法检测各组剩余10例标本的miRNA-374a mRNA、BMP-2 mRNA及BMP-2蛋白表达水平以进行验证.所得数据运用SPSS 18.0统计分析.结果 miRNA-374a mRNA的表达次序为：C组＞B组＞A组（P＜0.05）,BMP-2 mRNA表达次序为：C组＜B组≈A组（P＜0.05）,BMP-2蛋白表达次序为：C组＜B组＜A组（P＜0.05）.相关性分析显示miRNA-374a mRNA与BMP-2蛋白存在明显负相关（P=-0.412 8）.结论 miRNA-374a通过调节BMP-2的蛋白表达抑制乳腺癌侵袭转移.