探讨小鼠排卵后老化的卵母细胞对生殖发育的影响

目的研究小鼠排卵后老化的卵母细胞对生殖发育的影响及其相关机制。方法将小鼠腹腔注射促排卵药后获取的卵母细胞分成对照组和继续体外培养24 h后得到的老化组,采用孤雌激活检测卵母细胞的发育潜能,免疫荧光分别检测纺锤体的形态和活性氧的水平。结果与对照组相比,老化组中的卵母细胞原核形成率明显下降(P0.05),二细胞胚胎形成率显著降低(P0.05),破碎的胚胎比例明显增加(P0.05),并出现异常的纺锤体表型(P0.05)和高浓度的活性氧(P0.05)。结论小鼠排卵后老化的卵母细胞的质量下降可能与氧化应激密切相关,从而影响了细胞的生殖发育能力。     

小鼠腔前卵泡体外培养方法的建立

目的建立可供毒理学研究的小鼠腔前卵泡体外培养方法。方法采用机械方法分离出生后12～14天(C57B1/6JxCBA/Ca)小鼠卵巢内直径为100～130μm的腔前卵泡,96孔板单个卵泡连续培养12天后诱导排卵16h,观察卵泡发育、激素分泌和卵子形成,并将体外卵母细胞的成熟情况(IVG)与体内卵母细胞的生长情况(IVM)进行比较,以判断体外培养方法是否成功。结果分离完整卵泡率为89.74%(376/419);培养12天卵泡存活率为96.81%(364/376),有腔形成率为48.94%(184/376);卵泡和卵母细胞直径显著增加。诱导排卵后卵丘细胞-卵母细胞复合体排出率为56.38%(212/376);培养卵泡经历从腔前卵泡到卵母细胞成熟和极体排出的形态学变化,也有部分卵泡不发生腔样结构改变。体外培养卵泡分泌E2和P激素与体内分泌特征一致。IVG组4.61%(10/217)卵母细胞不能恢复成熟[停止在生发泡期(GV期)],76.50%(166/217)停止减数分裂在生发泡破裂期(GVBD期),18.89%(41/217)卵母细胞停止在第2次减数分裂(MII期)(PB);而IVM组1.24%(3/241)的卵母细胞不能恢复成熟(停止在GV期),45.23%(109/241)停止减数分裂在GVBD,53.53%(41/241)卵母细胞停止在MII期(PB);卵母细胞染色体核型完整,无染色体数目和结构异常。结论本研究建立的小鼠腔前卵泡体外培养方法基本成功,可作为卵泡发育生理研究和毒理学研究的模型。     

化学联合方法对小鼠卵母细胞孤雌激活的实验研究

目的:探讨较为优化的小鼠卵母细胞孤雌激活方法,为小鼠孤雌激活研究、胚胎克隆和核移植重构胚激活提供较规范的实验方法与数据。方法:采用单个化学激活剂(乙醇、氯化锶、钙离子霉素)分别与细胞松弛素B联合的实验方法对CD-1(小鼠卵母细胞孤雌激活作用进行研究,并对所形成的胚胎进行进一步的培养、形态学观察和分析。结果:乙醇组激活5 min较7 min、10 min的囊胚形成率、囊胚孵出率有显著差异(P<0.05);氯化锶组激活30 min较1 h、2 h的囊胚形成率、囊胚孵出率有显著差异(P<0.05);钙离子霉素组激活3 min较5 min、7 min的囊胚形成率、囊胚孵出率有显著差异(P<0.05);3组间比较,乙醇组较其它两组的卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率方面均有显著差异(P<0.05)。联合激活中,两种物质同时激活较先后激活有显著差异(P<0.05)。经H-E染色,激活胚胎的卵裂球细胞核呈蓝紫色、胞质呈粉色,与正常授精的胚胎卵裂球形态相同。结论:①乙醇与细胞松弛素B联合激活法对小鼠卵母细胞行孤雌激活5 min在卵裂率、囊胚形成率、囊胚孵出率等方面均有明显优势。②联合激活方法比单纯激活剂激活率高,联合激活中,两种激活剂同时应用较先后应用激活效果好,并且实验方法简单、激活时间缩短,减少非激活因素对卵母细胞的影响。③从一般形态观察,提示激活胚胎形态和发育均较正常,乙醇组激活的胚胎可能更具有后续发育潜能,这是激活目的重要所在。     

D-酪氨酸联合万古霉素对体外耐甲氧西林金黄色葡萄球菌及生物膜的消除作用研究

目的观察D-酪氨酸(D-tyrosine)联合万古霉素对体外培养耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)及其生物膜的消除作用,旨在为假体周围感染(PJI)的临床治疗提供可行性依据。方法导片法建立体外MRSA生物膜模型,将实验分为空白组,D-酪氨酸组,万古霉素组,联合组(D-酪氨酸+万古霉素),每组干预1h、6h、12h、24h后分别用结晶紫及荧光染色,分别在高倍镜及激光共聚焦显微镜(CLSM)下观察不同组MRSA及其生物膜的变化情况。结果除空白组外其他组中细菌密度随时间增加而降低,D-酪氨酸和联合组明显,每组之间均有统计学差异;12小时内万古霉素组及联合组中死菌比例会随着时间增加而增加,且联合组与万古霉素组比较有统计学意义(P<0.05),12小时后万古霉素组死菌比例无明显变化,联合组死菌比例进一步增加。结论D-酪氨酸对体外培养MRSA生物膜具有分散作用;D-酪氨酸联合万古霉素对生物膜中的MRSA具有更好的消除作用。     

精卵孵育时间对体外受精-胚胎移植结局的影响

[目的]比较体外受精-胚胎移植中精卵孵育不同时间(4～6h和16～18h)对体外受精-胚胎移植结局的影响。[方法]272例体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期根据精卵孵育不同时间分为两组:A组:199例采集的卵子,在加精后4～6h取出放入新鲜培养液中培养;B组:73例采集的卵子,加精过夜培养后(16～18h)取出放入同种培养环境中培养。比较两组的受精率(包括正常受精率和异常受精率)、卵裂率、优质胚胎率、临床妊娠率以及胚胎种植率。[结果]A组受精率明显高于B组,差异有统计学意义(P﹤0.01);A组正常受精率及优胚率高于B组,差异有统计学意义(P﹤0.05);两组的卵裂率、临床妊娠率及胚胎种植率的差异均无统计学意义。[结论]缩短精卵孵育时间能够提高正常受精率和胚胎的质量,从而提高胚胎的种植潜能。     

人卵细胞在体外成熟培养28或36h后的发育

在体外,相当比例的卵子能恢复减数分裂达到M Ⅱ期,有证据表明,许多卵子在体外培养的第1天就已经到M Ⅱ期,本研究评价将成熟培养时间由36 h缩短培养至28 h的效果,以确认卵子成熟早期有无长时间的减数分裂停滞。 48例因男性因素和/或输卵管因素准备接受胞浆内精子注射(ICSI)或体外受精(IVF)的月经规律的妇女,无多囊卵巢和不排卵。月经第3d开始监测卵泡发育,在月经第8 d和第12 d之间,优势卵泡直径达到10mm后取卵。从取卵日开始口服17β-E_2,2 mg     

细胞松弛素B在人类体外成熟卵子冷冻中的作用

目的:探讨细胞松弛素B在人类体外成熟卵子玻璃化冷冻中的作用。方法:收集常规胞浆内单精子显微注射-胚胎移植(ICSI-ET)周期中未成熟卵母细胞234枚(包括生发泡期即GV期和第1次减数分裂中期即MⅠ期),在体外培养24～48 h,181枚卵母细胞成熟(排出第2极体),随机分成3组并行玻璃化冷冻。A组(43枚)用细胞松弛素B(CB)预处理30 min后行玻璃化冷冻;B组(66枚)用CB预处理20 min后行玻璃化冷冻,C组(72枚)未用CB预处理直接行玻璃化冷冻。D组为对照组30枚体内成熟卵子未用CB处理直接玻璃化冷冻。各组卵子冷冻3周后解冻,复苏的卵子行ICSI辅助授精,观察各组成活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率。结果:冻融后的体外成熟卵子,其成活率、受精率、卵裂率及囊胚形成率均显著低于体内成熟卵子(P<0.05)。A组的成活率显著低于B、C两组(P<0.05),A、B、C 3组间的受精率、卵裂率差异无统计学意义(P>0.05),A、B两组未获囊胚,C组仅有1枚囊胚。结论:冻融体外成熟卵子,成活率、受精率、卵裂率均下降,囊胚形成率低,胚胎后期发育潜能显著降低。CB预处理未能提高卵子冷冻的成活率、受精率、卵裂率及胚胎的发育潜能。     

ICSI周期未成熟卵母细胞24h体外成熟后受精 发育潜能和临床结局分析

目的 研究胞浆内单精子注射(ICSI)周期中未成熟卵母细胞体外培养24 h成熟后进行ICSI的受精、发育潜能和临床结局，以期为未成熟卵母细胞的临床应用提供参考。方法 回顾性分析华中科技大学同济医学院附属同济医院生殖医学中心2018年1月—2021年10月行辅助生殖助孕治疗的不孕症患者的临床资料，以ICSI周期中未成熟卵母细胞比例>50%的69例患者作为研究对象，将263枚24 h体外成熟(IVM)的卵母细胞(B组)与来自相同周期的241枚体内成熟的同胞卵母细胞(A组)进行对比，分别比较两组胚胎的受精、发育潜能及临床结局。结果 B组成熟的卵母细胞(MII)比率59.63%明显高于A组的34.63%,差异有统计学意义(P<0.01),两组其余的基础资料比较差异均无统计学意义(P>0.05)。在受精方面，B组2原核(2PN)受精率50.57%与A组的51.45%接近；1PN率3.42%、3PN率3.42%和退化(DA)率16.73%与A组相比(分别为2.07%、3.32%、12.45%)呈升高趋势，但差异均无统计学意义(P>0.05)。B组第3天(D3)继培数68.42%较A组的50.81%明显增多，D3优胚率15.79%和可利用囊胚率20.88%较A组(分别为28.23%、39.68%)明显下降，差异均有统计学意义(P<0.05);第2天(D2)卵裂率90.98%、囊胚形成率34.07%、优质囊胚率8.79%与A组相比(分别为95.97%、49.21%、11.11%)呈下降趋势，但差异均无统计学意义(P>0.05)。A组复苏移植18例：妊娠3例(分娩1例，正在进行的妊娠2例);B组复苏移植15例：妊娠3例(分娩2例，正在进行的妊娠1例),分娩胎儿均健康无畸形及并发症。结论 对于MII卵母细胞较少的ICSI周期，未成熟卵母细胞体外培养24 h成熟后进行ICSI具有一定的临床应用价值，充分利用这部分卵母细胞可以提高卵子利用率和增加妊娠机会。     

小鼠卵母细胞程序化和玻璃化冷冻效果的比较

目的本实验通过建立小鼠的实验模型,比较程序化和OPS玻璃化冷冻效果,探讨卵子冷冻的具体方法,为卵子冷冻技术应用于临床提供实验依据。方法通过促排卵获取小鼠MII期卵母细胞,随机分组,观察不同冷冻方法、高浓度的冷冻保护液,对卵子的成活及进一步发育潜能的影响;不同的IVF前培养时间对冻融卵子的受精及继续发育的影响。结果（1）OPS玻璃化冷冻组与程序化冷冻组的存活率、受精率、卵裂率及6—8cell胚形成率均无显著差异。（2）玻璃化冷冻组与暴露组的卵母细胞存活率分别为35．3％,100％,有显著性差异（P〈0．05）。暴露组与对照组比较的受精率、卵裂率,无显著性差异（P〉0．05）。而暴露组与对照组的6—8cell的胚形成率分别为41％,63％,两组比较,有显著差异（P〈0．05）。（3）无论OPS玻璃化冷冻法还是程序化冷冻法,冻融后的培养2h组和培养1h组的,受精率、卵裂率。两组比较,均有显著性差异（P〈0．05）。结论本实验证实,OPS玻璃化冷冻法至少可以达到程序化冷冻法同样的效果,而OPS玻璃化冷冻法有好于程序化冷冻法的趋势。加之,其简便、省时、经济等优点,因而,更有发展前景。     

静脉溶栓治疗急性心肌梗死42例临床分析

目的通过对急性心肌梗死（AMI）患者早期静脉溶栓治疗进行临床分析，探讨开通急性心肌梗死闭塞冠脉的最佳时间。方法42例AMI患者2h之内溶栓9例，2—6h内溶栓26例，7—12h之内溶栓7例，观察不同溶栓时间再通率的差别。结果2h内和2～6h组溶栓再通例数比较无统计学差异（P=0．648），但两组再通例数均分别显著性高于7～12h溶栓组（P=0．009，P=0．005）。结论早期（6h内）静脉溶栓治疗急性心肌梗死效果好。     

未成熟卵体外成熟技术在卵巢高反应患者IVF-ET中的应用

目的:探讨未成熟卵体外成熟(IVM)技术在卵巢高反应患者体外受精-胚胎移植(IVF-ET)中的应用价值。方法:在IVF-ET促排治疗中,对双卵巢卵泡数过多,有可能发生卵巢过度刺激综合征(OHSS)或继续治疗可能发生重度OHSS的患者,根据其意愿即刻停药,全部取卵改行IVM治疗12个周期(A组)或取部分小卵泡改行IVM治疗,同时保留部分卵泡继续行IVF-ET常规治疗18个周期(B组)。小卵泡体外培养成熟后,通过卵胞浆内单精子注射(ICSI)获得受精卵并行胚胎移植或冷冻。统计分析未成熟卵的成熟率、卵母细胞的受精率、胚胎的发育情况及临床结局。结果:两组30个取卵周期,共获未成熟卵240个,经IVM、ICSI和体外培养后,成熟率、受精率、正常卵裂率及优质胚胎率分别为61.25%(147/240),77.55%(114/147),92.98%(106/114)和29.25%(31/106)。A组8例行IVM新鲜胚胎移植(8周期)4例临床妊娠,A、B两组有8例行IVM解冻胚胎移植(9周期)3例临床妊娠,已有3例分娩。A组12例无OHSS发生,促性腺激素用量少于B组,B组18例中3例有OHSS风险而取消胚胎移植。结论:对常规IVF促排周期中卵巢高反应患者及时改行IVM,可以避免周期取消及OHSS的发生,减少促排卵药物的使用量,同时获得较好的临床妊娠率。     

卵巢高反应对体外受精-胚胎移植的影响

目的探讨控制性超促排卵周期中卵巢高反应对卵母细胞、胚胎质量及妊娠结局的影响。方法回顾性分析2012年因输卵管因素和(或)男方因素初次行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization and embryo transfer,IVF-ET)和卵胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)周期治疗的259例不孕患者的临床资料。根据绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotrophin,HCG)注射日血清雌二醇(estradiol,E2)水平及获卵数分为卵巢高反应组(114例)和正常反应组(145例),比较两组卵母细胞和胚胎参数、妊娠结局。结果卵巢高反应组获卵数、MII卵数、优质胚胎数、移植周期取消率和冻胚率均显著高于正常反应组(P0.05);MII卵率、受精率、优质胚胎率和种植率均显著低于正常反应组(P0.05)。两组间卵裂率、临床妊娠率、流产率和中重度卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome,OHSS)发生率均无统计学差异(P0.05)。结论卵巢高反应引起的高雌激素环境可能对卵母细胞及胚胎质量造成一定的影响,最终影响到妊娠结局。     

In vitro maturation of oocytes from non-stimulated common wombats

Assisted reproductive techniques, such as in vitro oocyte maturation in conjunction with in vitro fertilisation, may be used as a tool to manipulate reproduction. Using the common wombat as a model for the critically endangered northern hairy-nosed wombat, the present study examined whether oocyte maturation could be achieved under field conditions. At the time of collection, no oocytes were at the metaphase II (MII) stage (0/42). After 60 h culture using the submarine incubation system, 34% of oocytes (24/70) matured to telophase/MII, as indicated by the presence of a polar body. The proportion of oocytes that reached MII was higher for oocytes collected from follicles >2 mm in diameter compared with follicles <2 mm (40% v. 22%, respectively). The presence of cumulus cells alone did not influence the maturation potential. Oocytes without cumulus cells collected from follicles >2 mm in diameter had the highest maturation rate (58%). Maturation was not affected by the reproductive status of the common wombat or a delay of up to 5 h before oocyte collection. In conclusion, the present study demonstrated that oocytes collected from non-stimulated common wombats can mature to MII in culture.     

注射HCG后延迟时间取卵对IVF-ET的卵子及胚胎质量的影响研究

目的探讨注射HCG后延迟时间取卵对体外受精-胚胎移植周期卵子及胚胎质量的影响。方法以2010年10月～2012年3月间因不孕症就诊我中心行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵胞浆内单精子注射(ICSI)的辅助生育治疗周期为研究对象,以获卵率、受精率、2PN胚胎卵裂率、优质胚胎形成率、临床妊娠率等为观察指标,按照HCG后的不同取卵时间分组,回顾性分析注射HCG后不同取卵时间的IVF结局:对照组C(34.00～35.99 h取卵组,n=41),研究组A(36.00～36.99 h取卵组,n=457),研究组B(37.00～38.00 h取卵组,n=132)。结果 A、B两组获卵率、受精率分别为71.4%(4841/6779)与83.5%(4041/4841)、71.9%(1477/2054)与80.7%(1192/1477),分别与C组比较[65.8%(321/488)与80.4%(258/321)],差异均有统计学意义(p<0.05)。A、B两组2PN胚胎卵裂率、优质胚胎形成率分别为98.9%(3970/4041)与48.5%(1927/3970)、98.7%(1177/1192)与45.6%(537/1177),分别与C组比较[96.2%(249/258)与45.8%(114/249)],差异均有统计学意义(p<0.05)。A、B两组临床妊娠率分别为40.5%(173/427)、40.3%(50/124),分别与C组比较[29.7%(11/37)],差异均有统计学意义(p<0.05)。而A、B两组之间差异无统计学意义。结论注射HCG后适当延迟时间取卵或可提高体外受精-胚胎移植周期的获卵率、受精率及妊娠率。     

OOCYTE MEMBRANE MATURATION AND OOCYTE-SPERM RELATIONSHIP: TRANSMISSION ELECTRON MICROSCOPY STUDY

The success of in vitro maturation (IVM) depends greatly on the acquisition of immature oocytes. Immature oocytes in prophase I (PI) and metaphase I (MI), aspirated after controlled ovarian hyperstimulation, were incapable of fertilization, leading to a lower fertilization rate. Therefore, they must be evaluated on a fine structure level for their in vitro maturation (IVM) processes and their relationship with sperm. Oocyte membrane maturation and oocyte-sperm relationship were studied using transmission electron microscopy. A total of 55 human oocytes obtained from 20 patients at various times and 83 oocytes obtained from the dissected ovarians of female Wistar rats were used for transmission electron microscopy (TEM) evaluation. Despite being in either prophase I and metaphase I or in metaphase II, the oocytes were not fertilized after 48 h of incubation. At the various stages of maturation between PI and MII, the number and the size of microvilluses on the oocyte membrane increased as MII approached and decreased after full maturation. Oocyte activation was related to oocyte membrane maturation and has an effect on the oocyte sperm penetration.     

利用IVF结局评估胚胎培养系统的稳定性

目的：分析不同批次卵裂期胚胎培养液所获得的体外受精（IVF）结局,以进一步评估不同批次培养液的稳定性。方法：病例资料为本中心2011年8月—2012年9月患者年龄＜35岁、卵巢储备功能正常、采用常规长方案促排卵并且获卵数＞5枚的移植周期,根据卵裂期培养液的批次不同收集了18组,随机抽取6组,分析各组患者一般情况及IVF结局。结果：6组患者年龄、既往IVF次数、基础卵泡刺激素（FSH）水平、体质量指数（BMI）和人绒毛膜促性腺激素（hCG）日子宫内膜厚度比较差异无统计学意义（均P＞0.05）。各组平均获卵数、卵子成熟率、受精率和卵裂率差异无统计学意义（均P＞0.05）,优质胚胎率差异有统计学意义（P＜0.05）。各组间平均移植胚胎数、妊娠率、种植率和流产率差异无统计学意义（均P＞0.05）。结论：本中心IVF实验室整体质控系统稳定,不同批次培养液的IVF结局稳定。     

Bovine in vitro oocyte maturation as a model for manipulation of the gamma-glutamyl cycle and intraoocyte glutathione

Glutathione (GSH) is the main non-enzymatic defence against oxidative stress and is a critical intracellular component required for oocyte maturation. In the present study, several modulators of intracellular GSH were assessed for their effect on the in vitro maturation (IVM) and intracellular GSH content of bovine metaphase (MII) oocytes. Of the five GSH modulators tested, only the cell-permeable GSH donor glutathione ethyl ester (GSH-OEt) significantly increased the GSH content of IVM MII oocytes in a concentration-dependent manner without adversely affecting oocyte maturation rate. The GSH level in IVM MII oocytes was greatly influenced by the presence or absence of cumulus cells and severely restricted when oocytes were cultured in the presence of buthionine sulfoximine (BSO), an inhibitor of GSH synthesis. The addition of GSH-OEt to cumulus-denuded or BSO-treated oocytes increased the GSH content of bovine MII oocytes. Supplementation of the maturation medium with bovine serum albumin (BSA) or fetal calf serum (FCS) affected the GSH content of IVM MII oocytes, with greater levels attained under BSA culture conditions. The addition of GSH-OEt to the maturation medium increased the GSH content of IVM MII oocytes, irrespective of protein source. Spindle morphology, as assessed by immunocytochemistry and confocal microscopy, displayed distinct alterations in response to changes in oocyte GSH levels. GSH depletion caused by BSO treatment tended to widen spindle poles and significantly increased spindle area. Supplementation of the IVM medium with GSH-OEt increased spindle length, but did not significantly alter spindle area or spindle morphology. GSH-OEt represents a novel oocyte-permeable and cumulus cell-independent approach for effective elevation of mammalian oocyte GSH levels.     

小鼠巨细胞病毒对体外成熟卵母细胞超微结构的影响

目的:探讨小鼠巨细胞病毒对小鼠卵母细胞体外成熟过程中超微结构的影响。方法:将小鼠未成熟卵母细胞置于含不同浓度小鼠巨细胞病毒的培养液中培养,观察卵母细胞的生发泡破裂率和第一极体释放率,用共聚焦显微镜和电子显微镜观察体外成熟过程中卵母细胞超微结构的改变。结果:各组卵母细胞生发泡破裂率和第一极体释放率差异无显著性(P>0.05),100TCID50组卵母细胞的超微结构及纺锤体结构未见明显异常。结论:小鼠巨细胞病毒对未成熟卵母细胞体外成熟过程中超微结构无明显不良影响。     

左右侧卵巢卵泡液中白血病抑制因子与卵子质量关系的研究

目的:对比性分析左右侧卵巢卵泡液中白血病抑制因子(LIF)含量及其与卵子和胚胎质量的关系。方法:选择首次实施体外受精/卵胞浆内单精子注射(IVF/ICSI)不孕症妇女37例,采卵日采集血清及左右侧卵巢卵泡液,按左右标记后编号。ELISA法测定LIF含量。结果:右侧卵巢卵泡液中LIF含量明显高于左侧(P0.05);右侧卵巢减数分裂中期(MII期)卵数、正常受精的双原核(2PN)数、可移植胚胎数明显多于左侧(P0.05);双侧卵泡液中LIF浓度与可移植胚胎数呈明显正相关(P0.05)。结论:右侧卵巢内卵子的数量和质量优于左侧,卵泡液中LIF含量有可能作为评估卵子正常受精及早期胚胎质量的参考指标之一。     

脂多糖体外刺激对小鼠B10细胞的影响

目的:探索脂多糖(LPS)体外刺激对小鼠B10细胞的影响。方法:在LPS刺激下,体外培养小鼠脾脏和腹腔细胞5h或48h,流式细胞仪分析CD19+IL-10+B细胞比例。结果:PIM刺激5h,小鼠脾脏和腹腔CD19+IL-10+B细胞比例分别升高至1.22%和14.82%(P<0.01),在PIM刺激的基础上加入LPS,小鼠脾脏和腹腔中CD19+IL-10+B细胞比例分别升高至平均2.35%和26.58%(P<0.01)。LPS刺激48h可进一步升高CD19+IL-10+B细胞比例,脾脏和腹腔分别为6.42%和38.38%,明显高于PIM48h刺激组(P<0.01)和L+PIM5h刺激组(P<0.05),但LPS刺激48h不改变CD5、CD1d的表达水平。结论:体外刺激5h时,L+PIM刺激可促进小鼠B10细胞活化;刺激48h时,LPS可进一步促进B10细胞IL-10的表达,这一作用可能是通过诱导B10前体细胞成熟实现的。