应用单克隆抗体作酶联免疫吸附试验测定粪便中溶组织内阿米巴

采用培养的溶组织内阿米巴HK-9株制备高度免疫的兔血清,从加尼福利亚获取针对HK-9株分泌的单克隆抗体,贮于-70℃。将6株溶组织内阿米巴滋养体置入含维生素和牛血清的Diamond's TYI-S-33培养基生长48小时,粪内寄生物以pH7.4 PBS洗涤2次,450g离心5分钟2次,沉淀微粒悬浮于2ml PBS中,实验前置于-70℃ 5分钟。分别收集粪检溶组织内阿米巴阳性和阴性的大便标本,测定前先置于冰上或4℃,渐至-20～-70℃,最长达7个月,用于ELISA试验。结果:6株溶组织内,阿米巴滋养体以PBS连续10倍稀释,每种稀释度取25μl作     

圆点酶联免疫吸附试验检测抗溶组织内阿米巴的抗体

应用微量圆点的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗溶组织内阿米巴的抗体,并与常用的塑板ELISA和间接血凝试验(IHA)进行比较。取纯培养的溶组织内阿米巴滋养体,用生理盐水清洗3遍,超声处理5分钟,再在4℃条件下850g离心15分钟,收取上清液,用Lowry等方法测定其蛋白质含量,然后将这种制备的抗原置-20℃冰冻保存备用。检测时,将抗原液点滴在硝化纤维素薄板上,以三羟甲基氨基甲烷缓冲液(TBS)清洗,于室温中待干,再用牛血清白蛋白中和未     

用间接血凝试验及酶联免疫吸附试验检测田鼠肝脏接种溶组织内阿米巴后的血清学反应

按照 Diamond 氏法纯种培养溶组织内阿米巴 HK9及 HMI-1MSS 株制备抗原。试管培养的阿米巴用盐水洗出后计数,混悬于少量水中,-20℃保存,收集至足够量后取出,经超声粉碎并离心。上清液(抗原)用水稀释至相当于每毫升含4×10~6阿米巴的浓度。冻干抗原粉分装保存于-20℃。使用前     

酶联免疫吸附试验检测粪便中的肠贾第虫抗原

本试验采用从人体中分离的肠贾第虫培养物,经免疫作用,制备羊和兔的免疫血清、抗血清在临用前混合。用棋盘滴定法定出试剂最适浓度。将免疫和非免疫的羊血清(用0.1M碳酸盐缓冲液1:50,000稀释)0.1ml包被于圆底凹井塑料板中,置4℃冰箱内至少14小时,冲洗后在4个井内(2个井用免疫血清包被。另2个用非免疫血清包被)加入25μl抗原悬液和75μl含5%明胶,1%正常羊血清的PBS-Tween(PBS-T-G-NGS)。每板至少做3个阴性对照和1个阳性对照,置37℃孵箱1小时或4℃过夜,取出     

酶联免疫吸附试验检测粪便中贾第虫

酶联免疫吸附试验(ELISA)步骤:双抗体法是采用以前描述检测旋转病毒的改进方法。用棋盘滴定法测定试剂的最适宜浓度。所有洗涤步骤共进行5次。用0.1M pH9.6的碳酸缓冲液稀释1:50,000的免疫或未免疫的山羊血清0.1ml包被两排交错的圆底的聚苯乙烯微量滴定板井穴。用前储藏在     

酶靶试验:用溶组织素的免疫酶显色检测肠道的溶组织内阿米巴感染

探索一种高度敏感和特异的检测肠道溶组织内阿米巴感染的方法——酶靶(ENZYMEBA)试验。该法是以溶组织素的免疫酶显色为基础的。首先制备抗溶组织素抗体,即以纯化的溶组织素(主要是半胱氨酸蛋白酶)对新西兰白兔进行免疫,50μg酶加入0.5ml PBS,加福氏完全佐剂使其乳化,作     

3种方法检测粪便中溶组织内阿米巴的结果比较

目的比较生理盐水直接涂片法、醛醚沉淀法及ELISA 3种方法检测粪便中溶组织内阿米巴的优缺点。方法采集受检者粪便标本278份.分别采用3种方法进行阿米巴原虫感染检测,检测结果进行统计学处理,分析3种方法的阳性检出率、准确率、敏感性、特异性及费用。结果生理盐水直接涂片法、醛醚沉淀法和ELISA法的阳性率分别为9.71%、10.79%和12.23%,差异无统计学意义(P>0.05);阳性标本经PCR确证,3种方法的阳性符合率分别为48.71%、51.11%和77.36%,差异有统计学意义(P<0.05)。生理盐水直接涂片法费用低(1元/份),耗时少(0.1 h～0.2 h)。结论粪便溶组织内阿米巴检测推荐使用ELISA法,其次是醛醚沉淀法,如果用生理盐水涂片法,至少要重复检测3次。     

酶联免疫吸附试验检测蓝氏贾第鞭毛虫抗原

作者对Green(1985)报道应用酶联免疫吸附试验检测粪便中的蓝氏贾第鞭毛虫抗原,有不需设免疫试剂对照以排除假阳性反应这一提示,认为欠妥。根据作者的经验,粪便中有几种能产生非特异反应的物质,如类风湿因子,结合免疫球蛋白的细菌,溶菌酶以及一     

用一种快速肉眼观察的酶联免疫吸附试验检测粪便中的贾第鞭毛虫抗原

本文报道一种快速肉眼判读酶联免疫吸附试验(ELISA)结果,检测人粪便中贾第鞭     

溶组织内阿米巴抗原(溶组织素)的皮内反应试验

无菌培养的溶组织内阿米巴的冰冻干粉,以无热精的0.15M氯化钠制成抗原(溶组织素histolyticin),每毫升含阿米巴7×10~6个,含氮量为1.85毫克,在4℃内可保存4～5周,用作皮内试验的抗原液未超过3周。皮试时,在受试者前臂屈面皮内注入抗原液0.1毫升,所用溶组织素的稀释度含有蛋白质11和22微克的两种。注射后15分钟     

用酶联免疫吸附试验检测寄生线虫体表抗原的特异抗体

本文报道用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测巴西钩虫体表抗体的结果。巴西钩虫成虫取自感染大鼠的小肠,并用过量的0.85％盐水洗涤4次。超免疫血清取自感染该虫的大鼠的心脏,在56℃灭活30分钟,并在15000rpm(4℃)离心30分钟,除去脂肪,经玻璃     

溶组织内阿米巴抗原组分的免疫原性

到目前为止,对阿米巴病免疫反应的确切机理还不十分清楚,已有的资料仅仅提出溶组织内阿米巴水溶性抗原大约由7种免疫活性的组分所构成。近来发现其性质属于糖蛋白,而且含有酸和弱硷性蛋白质2种不同的分子混合物,但至今它的精确组分和各种成分的免疫原性还未完全阐明。本文介绍了溶组织内阿米巴抗原多型性的实验证据。     

溶组织内阿米巴5例的粪便鉴定

目的探讨溶组织内阿米巴的粪便鉴定,并就溶组织内阿米巴包囊及滋养体的镜检要点及常见漏检原因进行讨论。方法用显微镜法对5例外院漏诊的肠阿米巴病患者粪便标本进行检验,分别用生理盐水涂片法、碘染色和苏木素染色法,在显微镜下进行观察鉴定。结果溶组织内阿米巴包囊及滋养体在生理盐水涂片、碘染色涂片和苏木素染色涂片中有典型的形态学特点。结论对于可疑肠阿米巴病患者,应多次及时送标本进行检验,采用几种不同方法进行鉴定,并注意将溶组织内阿米巴与吞噬细胞及迪斯帕内阿米巴相鉴别。     

用单克隆抗体酶联免疫吸附试验双抗体夹心法检测红内期恶性疟原虫抗原

本文介绍了以兔抗恶性疟原虫（p、f）多克隆抗体包被,用混合的二种单克隆抗体进行反应酶联免疫吸附试验（ELISA）双抗体夹心法检测人体红细胞内的恶性疟原虫抗原。恶性疟（镜检确诊）和非疟疾患者的滤纸血样本测定符合率分别为91.5％（43/47）和96％（24/25）。检测敏感度为5个疟原虫/10~6红细胞,对恶性疟原虫的海南和江苏地理株的测定结果显示,两者的符合率无显著差异。但对间日疟样本测定结果不理想。     

单克隆抗体酶联免疫吸附试验检测脑脊液结核菌抗原和抗体

<正> 结核性脑膜炎(下称结脑)为常见的疾病,由于本病预后与治疗早晚关系密切,因此早期诊断至关重要。本研究用单克隆抗体酶联免疫吸附试验检测脑脊     

酶联免疫吸附试验检测鼠疫F_1抗原的研究

1971年Engvall和Van Weemen等发表酶联免疫吸附试验(ELISA)以来,许多学者作了深入的研究。目前已广泛应用于医学基础理论和临床,流行病学实用的研究,但用于     

用虫体抗原进行斑点酶联免疫吸附试验检测弓形虫抗体的研究

应用完整弓形虫速殖子为抗原,以HRP-SPA代替酶标第二抗体进行Dot ELISA检测58例兔血清中弓形虫抗体,同时用速殖子可溶性抗原检测比较。两种抗原检测结果一致。阳性反应最高稀释度为1:25600。本法检测阿米巴阳性兔血清、感染球虫的兔血清,血吸虫阳性兔血清无交叉反应。阻抑试验显示高抗体滴度的阳性兔血清经抗原吸收后,反应明显抑制。实验表明本法特异性强、敏感性高、重复性好抗原制备简单不需特殊设备。为人畜弓形虫病临床诊断、流行病学现场调查、单克隆抗体杂交瘤细胞的筛选提供了一种较理想的简易可行的方法。