Kupffer细胞与肝脏肿瘤

Kupffer细胞(KCs)是定居于肝血窦内的一种巨噬细胞,约占人体定居巨噬细胞的80%~90%,肝脏非实质细胞数量的25%~40%。它与其它单核吞噬细胞共同起源于相同的骨髓前体,但不同类群的细胞之间具有明显的异质性。作为肝内防御屏障的第一道防线的重要组成部分KCs有着很广泛的功能,包括     

Kupffer细胞在肝脏疾病中的研究进展

目的 总结Kupffer细胞(KCs)与肝脏疾病的关系.方法 收集整理近年来关于KCs与肝脏疾病关系的相关文献并进行综述.结果 KCs是机体单核巨噬细胞系统的重要组成成分,在特定的环境下,活化的KCs通过呈递抗原、分泌细胞因子及趋化因子、吞噬作用等参与多种炎症反应、免疫耐受以及对肝细胞的侵害过程.KCs既可活化为M1型...     

Kupffer细胞与肝脏疾病相互关系的研究进展

肝脏是人体内以代谢功能为主的一个器官,并在人体内起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用.肝脏是由50万-100万个基本结构单位——肝小叶构成,是由20多种细胞类型组成,包括肝细胞,胆管上皮细胞,肝内皮细胞,肝星状细胞,Kupffer细胞(Kupffer cells,KCs),间皮细胞等.随着人们生活水平的提高,...     

RNA干扰Kupffer细胞肿瘤坏死因子-α减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤

目的 观察RNA干扰肝脏Kupffer细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)对大鼠肝脏缺血再灌注损伤的保护作用.方法 构建针对大鼠TNF-α基因的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体.肝脏缺血再灌注损伤前48 h经门静脉注射磷酸盐缓冲液(PBS)、空载体或TNF-α shRNA.实验随机分为4组,假手术组、PBS组、空载体组和shRNA组.阻断大鼠70%入肝血流40 min,再灌注6 h检测血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、肝脏Kupffer细胞TNF-α mRNA、血清TNF-α、肝组织中丙二醛(MDA)以及超氧化物岐化酶(SOD)含量.结果 与PBS组和空载体组比较,shRNA组再灌注6 h后血清ALT和AST水平显著降低(P＜0.05),Kupffer细胞TNF-α mRNA水平、血清TNF-α水平(56.6±6.7 pg/ml比87.8±8.7 pg/ml和96.5±7.3 pg/ml,P＜0.05)、肝组织中MDA含量(93.4±13.3 nmol/mg比133.5±12.4 nmo1/mg和136.7±13.6 nmol/mg,P＜0.05)显著降低,SOD活性显著升高(22.4±4.6 U/mg比12.2±3.1 U/mg和11.4±2.9 U/mg,P＜0.05).结论 RNA干扰Kupffer细胞TNF-α基因的表达可以减轻大鼠肝脏缺血再灌注损伤.     

雷抑素对肝移植大鼠肝Kupffer细胞的影响

利用大鼠原位肝移植模型，观察移植术前应用雷抑素（Ｌｅｆ）对大鼠肝Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞形态及功能的影响，结果显示，对照组肝移植术后３小时血清肿瘤坏死因子（ＴＮＦ），ＡＬＴ活性显著升高，肝组织丙二醛（ＭＤＡ）水平也显著增加，有药组血清ＴＮＦ，ＡＬＴ活性及肝组织ＭＤＡ水平显著下降，电镜检查，对照组肝Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞呈典型“活化”表现，而用药组肝Ｋｕｐｆｆｅｒ则呈非“活化”表现。结果提示，移植术前应用Ｌｅ     

Kupffer细胞激活与肝移植免疫耐受

目前,关于Kupffer细胞(KC)在肝移植后免疫调节的确切作用尚不清楚.肝移植后KC通过各种途径被激活,激活的KC通过吞噬凋亡的T细胞、高表达FasL促进Th1细胞凋亡,同时分泌大量的Th2/Th3类细胞因子(白介素10、转化生长因子β等),促进Th2细胞的增生分化,诱导免疫耐受.然而,激活的KC也能通过表达MHC抗原,分泌黏附分子、共刺激分子发挥抗原递呈功能,并分泌促进Th1增生分化的细胞因子,启动和促进肝移植后供体肝脏的排斥反应.K在肝移植后是诱导免疫耐受减轻排斥反应,还是促进并加重排斥反应,可能与其所受刺激因素的变化进而形成一个复杂的动态的细胞因子调控网络,最终导致Th1/Th2细胞比率变化有关:Th2细胞占优势则诱导免疫耐受,Th1细胞占优势则促进排斥反应.     

抑制Kupffer Cell对大鼠肝脏切除微循环障碍的影响

目的 探讨应用Kupffer cell封闭剂对肝脏微循环障碍的影响.方法 切除大鼠左肝叶建立肝脏切除模型60只健康SPF雄性级大鼠随机分为4组:假手术组(A),缺血再灌注组(B),缺血再灌注+肝叶切除+生理盐水组(C)和缺血再灌注+肝叶切除+三氯化钆组(D).术前1d和2d,向D组注射氯化钆(浓度为0.25％,10 ml/kg),C组注射同等浓度的生理盐水.各组分别于术后1天处死.检测血中丙胺酸氨基转移酶(ALT),天冬氨酸氨基转移酶(AST),内皮素-1(ET-1)及一氧化氮(NO)的水平;病理学检查各组术后肝组织的病理改变.提取肝组织中RNA,应用RT-PCR法检测ET-1,eNOs,iNOs及HO-1mRNA的表达.结果 A组肝细胞无明显异常,C组肝细胞炎症和坏死的程度明显高于B组和D组.B,C,D组大鼠血清中ALT,AST.ET-1的水平明显高于A组(P＜0.05),NO的水平明显低于A组(P＜0.05);肝组织中织ET-1、eNOS、iNOS及HO-1 mRNA表达水平较A组显著升高(P＜0.05);C组大鼠血清中ALT,AST.ET-1的水平明显高于B组和D组(* *P＜0.05,Δ*P＜0.05),NO的水平明显低于其他两组(* *P＜0.05,Δ*P＜0.05)且肝组织中织ET-1、eNOS、iNOS及HO-1 mRNA表达水平较其B组显著升高(* *P＜0.05),其中iNOS及HO-1 mRNA表达水平较D组显著升高(Δ*P＜0.05).结论 术前注射氯化钆能够显著改善肝叶切除术后微循环障碍,减轻肝脏损伤.     

大鼠肝细胞、Kupffer和Ito细胞的分离与培养

我们采用Ｃｏｌｌａｇｅｎａｓｅ体内门静脉灌注结合体外Ｔｒｙｐｓｉｎ皿内消化制备游离肝细胞，进而采用ＰｒｏｎａｓｅＥ和Ｎｙｃｏｃｌｅｎｚ离心处理获单－Ｋｕｐｆｆｅｒ细胞和Ｉｔｏ细胞。三种细胞的产生率分别为１．２×１０８，１．１×１０７和２．３×１０７；其细胞纯度分别为９５％，８１％和８８％；存活率都在９０％以上。作者对三种细胞原代培养过程的形态特征和生物学活性进行了观察与讨论。     

Kupffer细胞抑制肝肿瘤增殖作用的研究

为了研究Kupffer细胞的抗肿瘤作用,通过~(51)Cr—游离实验、~3H—胸腺嘧啶核苷摄取抑制实验和大鼠肝转移癌模型等方法测定了KC的抗肿瘤活性以及在激活和抑制状态下的变化与肝肿瘤增殖的关系。结果表明KC有抗肿瘤活性,激活KC能显著抑制肝肿瘤增殖,抑制KC则促进肝肿瘤的发生。因此,得出结论,KC具有抗肿瘤活性,增强这种活性有助于防止血行性肝转移癌的发生。     

Kupffer细胞在肝移植缺血再灌注损伤中的双重作用

Kupffer细胞足定居于肝内的巨细胞,在月十移植缺血再灌注损伤中发挥着重要的作用,门静脉恢复血流后刺激Kupffer细胞激活,释放活性氧族、多种炎性介质和细胞因子,对肝脏造成损伤.另一方面又可上调HO-1的表达,保护肝脏缺血再灌注损伤,因此,Kupffer细胞在肝移植缺血再灌注损伤中发挥着双重效应.     

肝星状细胞对肝脏微循环调节机制的研究进展

肝脏具有独特的血液供应,接受肝动脉和门静脉的双重血供。肝脏重量占体重的2.5％,却接受了25％的心输出量,所以,其血管系统具有高容量和低灌注压的特点,这个特点被认为与肝窦结构有关。 肝脏微血管结构包括小门静脉、肝小动脉、肝窦、中央静脉和淋巴管等。小门静脉由终末前、终末和输入部分组成。肝小动脉由毛细血管前小动脉、小动脉和小动脉窦支组成。肝内血流由上述每     

Kupffer细胞在肝移植术后免疫耐受调控机制的研究进展

肝移植手术是目前治疗各种终末期肝病,延长患者生存时间的有效手段。Kupffer细胞(Kupffer cells,KCs)位于肝血窦,是机体单核-巨噬细胞系统的重要组成部分,能够有效清除异物、病原体和凋亡细胞。在肝移植术后KCs可向感染灶迁移和聚集,并参与炎症反应及免疫耐受调节。KCs对肝移植术后减轻免疫排斥反应、诱导免疫耐受形成、增加移植成活率具有重要意义,现就KCs在肝移植术后免疫耐受调控机制的研究进展进行综述。     

大鼠肝脏Kupffer细胞的分离、纯化

目的建立简单、有效而稳定的大鼠肝脏Kupffer细胞分离、纯化的实验方法。方法①大鼠肝脏的胶原酶离体灌注；②Percoll液不连续梯度离心分离Kupffer细胞；③选择性贴壁纯化Kupffer细胞；④吞噬墨汁实验、DAB染色，光镜、电镜下观察鉴定Kupffer细胞。结果最终获得的大鼠肝脏Kupffer细胞活性〉90％，纯度为95％，光镜下Kupffer细胞具有较强的贴壁及吞噬碳粒能力，DAB染色呈黄色煎蛋样结构；新分离的Kupffer细胞呈圆形，形态大小一致；2d后，细胞发生伸展，呈多角形或星形。电镜下观察可见典型特点：有伪足及杯口状改变，有丰富的溶酶体和吞噬体。结论本实验建立的大鼠肝脏Kupffer细胞的分离培养方法效果稳定，同时培养的细胞具有良好的生物学性状。     

小鼠肝缺血/再灌注损伤时肝脏Kupffer细胞中TLR2的表达

目的　观察小鼠肝部分缺血 /再灌注损伤时肝脏Kupffer细胞表面TLR2mRNA的表达及蛋白质的合成情况。方法　制作小鼠肝部分缺血 /再灌注损伤模型。采用原位灌注消化法分离并纯化Kupffer细胞 ,用大鼠抗小鼠TLR 2IgG和异硫氰酸荧光素 (FITC )的二抗进行染色 ,流式细胞仪 (FCM )测定阳性细胞数 ;并测定Kupffer细胞的TLR2mRNA含量。结果　缺血 60min ,再灌注 4h时 ,实验组小鼠肝脏Kupffer细胞表面TLR2mRNA表达及蛋白的合成量均明显高于假手术组 ,且缺血叶高于非缺血叶。结论　小鼠肝缺血 /再灌注损伤时 ,肝脏Kupffer细胞表面的TLR2mRNA表达明显增高 ,其蛋白质的水平也明显升高     

Kupffer细胞在肝细胞癌肿瘤免疫中的作用及其机制

作为人体内最大的巨噬细胞群和肝内最重要的免疫细胞,Kupffer细胞在肝脏甚至整个人体的感染、炎症、脂质代谢和移植免疫方面扮演着重要的角色.然而,如此重要的故有免疫细胞,在肝脏肿瘤发生、发展方面的作用机制仍然是学术界的肓点.本文通过搜集和总结为数不多的文献并结合我们的研究成果,从巨噬细胞吞噬、分泌和抗原呈递三个方面,对Kupffer细胞在肝脏肿瘤免疫中发挥的作用及其机制作一简单综述.我们认为,在肝脏病变早期,Kupffer细胞可通过上述三种途径,对于肝细胞癌的发生起到了监视与抑制作用;然而在肝脏炎症长期存在的情况下,Kupffer细胞则可能通过分泌机制,诱导肝细胞癌的发生.     

Kupffer细胞在梗阻性黄疸致肝损害作用中的研究进展

在梗阻性黄疸(obstructive jaundice,OJ)的病理过程中,肝脏是最容易受到损害的器官。梗阻性黄疽致肝损害的机制是复杂多样的。Kupffer细胞作为肝脏内的巨噬细胞,参与了梗阻性黄疸致肝损害的诸多环节。梗阻性黄疸致肝损害的首要病理因素是内毒素血症(Endotoxemia)的形成。当人血的内毒素浓度达到一定程度后就可激活Kupffer细胞,被激活的Kupffer细胞不仅可产生大量的炎性因子导致肝损害,而且还加剧内毒素血症的形成、参与肝脏炎性反应、氧化应激等病理过程来损害肝细胞。     

表达吲哚胺2,3-二氧化酶的Kupffer细胞在体外对同种异体T淋巴细胞的凋亡作用

目的 探讨表达吲哚胺2,3-二氧化酶(IDO)的Kupffer细胞(KC)在体外对小鼠同种异体T淋巴细胞(TC)增殖的抑制作用.方法 用实时荧光定量PCR检测经IFN-γ处理或未处理的KC表达IDOmRNA和FasLmRNA的情况.用高压液相色谱仪分析IDO对色氨酸的分解作用以了解其活性.用3H嵌入增殖试验检测KC对同种异体TC增殖抑制情况.用流式细胞仪分析KC对同种异体TC细胞周期的影响和凋亡作用.结果 实时荧光定量PCR显示:经IFN-γ处理后小鼠KC表达IDO和FasL并且其表达在6 h后均达到高峰.IDO能降低培养基中色氨酸的浓度,提高其代谢产物犬尿氨酸浓度.表达IDO的KC能明显抑制同种异体TC的增殖,但1-甲基色氨酸和抗FasL抗体能部分阻断其增殖抑制作用,且存在剂量依赖关系.表达IDO和FasL的KC能阻滞同种异体TC于G1中期,诱导其凋亡.结论 除了FasL/Fas途径,IDO可能是KC抑制同种异体TC的增殖并诱导其凋亡的另一机制.

Abstract：

Objective To investigate kupffer cells (KCs) expressing indoleamine 2,3-dioxygenase(IDO)in the inhibition of allogeneic T-cell proliferation in vitro. Methods Real-time PCR was used to investigate the expression of IDO mRNA and FasL mRNA in KCs pretreated with or without IFNγ. High performance liquid chromatography was used to analyze the catabolism of tryptophan by IDO from KCs. Allogeneic T-cell response was used to confirm the inhibition of KCs in vitro. The proliferation of lymphocytes was detected using [3 H] thymidine incorporation. Cell cycle and lymphocyte apoptosis were evaluated by flow cytometric assay. Results Real-time PCR revealed IDO mRNA and FasL mRNA expression in KCs pretreated with IFN-γ. IDO catabolic effect was confirmed by a decrease in tryptophan and increase in kynurenine concentration. KCs expressing IDO and FasL from BABL/c mice acquire the ability to suppress the proliferation of T-cells from C57BL/6, which could be blocked by the addition of 1-methyl-tryptophan and anti-FasL antibody. The co-cultured T-cells with KCs expressing IDO and FasL could induce allogeneic T-cell apoptosis and exhibited cell-cycle arrest in G1. Conclusion In addition to the Fas/FasL pathway, IDO may also play an important role in KCs to inhibit allogeneic T-cell proliferation in vitro.     

大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14基因及蛋白的表达

目的研究大鼠肝移植缺血再灌注后Kupffer细胞CD14基因及蛋白的表达,探讨其在再灌注损伤中的作用.方法分离培养大鼠肝移植缺血再灌注后0（对照组）、2、6、12 h（IR组）的Kupffer细胞,用逆转录聚合酶联反应（RT-PCR）检测Kupffer细胞CD14 mRNA的表达,用免疫印迹检测CD14蛋白合成,用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定培养上清TNF-α的分泌量.然后在上述时间点的细胞培养液中加入抗CD14抗体（anti-CD14组）,观察CD14抗体对TNF-α分泌的影响.结果再灌注后Kupffer细胞CD14 mRNA、蛋白以及TNF-α随观察时间点呈逐步上升趋势（与对照组相比,P＜0.01）.应用抗CD14抗体后,TNF-α表达较IR组明显降低（P＜0.01）.结论再灌注后Kupffer细胞CD14基因及蛋白的表达明显升高,TNF-α的合成和分泌也明显增强;抗CD14单抗能明显抑制TNF-α的产生;CD14在介导Kupffer细胞激活和肝移植缺血再灌注损伤中可能起重要作用.