树鼩实验动物化规划与动物福利的探讨

树鼩在生物学特性、生理生化、新陈代谢和基因组等方面近似于人类,被广泛应用于生理学、病理学、病毒学、免疫学、药理学及遗传学等多个领域。迄今为止用于生物医学研究的树鼩大部分来自野生,实验树鼩尚无国家质量控制标准。为了保证树鼩引种、驯化、饲养、繁殖、质量控制及福利的规范化和科学化,提高树鼩繁殖率和成活率。本文从兽医公共卫生及实验动物科学的角度,对野生树鼩的捕捉、运输、检疫、饲养及繁育等方面的基本原则及技术操作和福利要求作一简述,为从事树鼩工作的有关人员及树鼩实验动物化研究提供参考。     

树鼩在医学实验研究中的新进展

树鼩的许多生物学特性近似于人类,人们利用树鼩成功建立了多种人类病毒感染的动物模型,并在肿瘤、内分泌、神经、视觉等方面有相当广泛和深入的应用和研究。本文概述了树鼩在医学实验研究中的新进展。     

树鼩在医学生物学中的应用

目的树鼩是一种新型实验动物,由于它的许多分子与细胞结构近似于人类,已成功建立了多种人类病毒感染的动物模型,并在神经生物学、生殖生物学、免疫学和社会心理学等方面有相当广泛和深入的应用和研究。     

树鼩下丘脑定位

本实验对55例树鼩颅脑进行测量,其中14例作全脑冰冻连续切片。观察和测量了下丘脑的外形和大小,以及下丘脑距APO额切面、HO水平切面和正中矢状切面的距离,为从体表上测定树鼩下丘脑在颅内的位置提供一些数据。     

树鼩驯养繁殖实验动物标准及丙型肝炎动物模型技术平台建设的探讨

目前用于生物医学研究的树鼩大多数来源于野生捕获,由于个体间的差异较大,其实验结果的均匀性和可重复性较差,亟待解决树鼩人工饲养设施条件、繁殖关键技术、动物质量标准等一系列基础科学问题.许多文献报道了树鼩与其他实验动物比较,在肝病研究中具有巨大的开发应用潜力,在丙型肝炎动物模型研究中,亟待解决丙型肝炎病毒(HCV)细胞培养体系、HCV病毒感染剂量与感染途径、HCV病毒对树鼩体外、体内感染后病毒核酸检测、抗体检测和病理检测等技术方法的建立及动物模型评价标准问题.本文就上述问题系统性地进行初步报道,旨在为树鼩早日实现实验动物化和丙型肝炎疾病研究中应用提供科学依据.     

人工诱导树鼩乳腺肿瘤的病理分析

目的建立树鼩乳腺肿瘤模型。方法用DMBA联合人工合成孕激素MPA的方法,挑选45只雌性树鼩,随机分为3组。(1)DMBA组:连续3次进行DMBA(20 mg/次)灌胃处理,每周1次;(2)DMBA+MPA组:每3周1次,连续3次DMBA灌胃处理之后,于树鼩背部左侧皮下第1次植入MPA缓释片剂(150 mg/片,90 d缓释),间隔3个月,第2次植入MPA片;(3)正常对照组:使用花生油进行灌胃处理,每3周1次,连续3次。实验处理后,每周定期观察肿瘤发生情况,共观察45周。采用HE染色对诱发肿瘤的病理类型进行鉴定。结果 DMBA能单独诱导树鼩特异的产生乳腺肿瘤,诱发率为12%;联合MPA皮下植入可以把DMBA诱导的乳腺肿瘤发病率提高到50%;而对照组没有观察到乳腺肿瘤的发生。诱导的肿瘤主要为导管内乳头状瘤,恶性程度低,仅有一例为恶性程度高的浸润性导管癌。结论所诱导的树鼩导管内乳头状瘤和浸润性导管癌均为人类共有的肿瘤病理类型。诱发肿瘤形态与自发肿瘤相似。     

树鼩丙型肝炎动物模型研究进展

丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球关注的公共健康问题之一。只有建立稳定可靠的HCV感染模型,才能更好地研究HCV感染慢性化和致癌的机制,从而推动丙型肝炎疫苗的研制和抗丙型肝炎药物的筛选。HCV宿主范围特别狭窄,只有人和黑猩猩对其易患。目前有一些体内和体外的实验结果初步显示,树鼩是目前继黑猩猩之后唯一能感染HCV的动物。该文对HCV感染树鼩动物模型的研究进展予以行综述。     

树鼩丘脑颅内定位

本实验对55例树鼩颅脑进行测量,其中14例作全脑冰冻连续切片,观察和测量了丘脑的外形和大个,丘脑距APO额切面,HO_4平面和正中矢状面的距离。为从体表上测定树鼩丘脑在颅内的位置提供了一些数据。     

树鼩感染丁型肝炎病毒的实验研究

作者以树为对象、建立丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）／乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）实验感染动物模型，为丁型肝炎发病机理和药物筛选提供研究基础。对人工饲养的２０只健康成年树　接种ＨＢＶＤＮＡ阳性血清后ＨＢｓＡｇ的转阳率为７５％（１５只）；分别以同时感染（１３只）和重叠感染（９只）两种方式接种ＨＢＶＤＮＡ和ＨＤＶＲＮＡ阳性血清后，各有８只和６只树　的血清乙肝表面抗原（ＨＢｓＡｇ）、丁肝抗原（ＨＤＡｇ）和丁肝抗体（抗ＨＤ）相继转阳，部分血清或肝内检出ＨＤＶＲＮＡ，以ＨＤＶ／ＨＢＶ阳性树　血清在树　间进行传代感染，可见第二代４只中３只、第三代５只中４只树　的血清ＨＢｓＡｇ、ＨＤＡｇ和抗ＨＤＶ相继转阳，２只第三代感染树　血清中检出ＨＤＶＲＮＡ，肝内检出ＨＢｓＡｇ和ＨＤＡｇ阳性；连续观察１６～１９个月，经重叠感染成功的４只树　血清ＨＢｓＡｇ持续阳性，２只ＨＤＡｇ和抗ＨＤ交替出现，１只抗ＨＤ持续阳性，提示可发展成慢性ＨＤＶ感染；感染ＨＤＶ的树　血清ＡＴＬ升高，肝组织有类似肝炎样病理变化，与ＨＤＶ在黑猩猩体内感染结果类似，提示树　可作为ＨＤＶ感染的动物模型。     

树鼩驯养中环境条件初步探讨

目的 通过实验室饲养树鼩,探讨更科学、更符合实际需要的普通级实验树鼩饲养环境条件. 方法 检测环境指数包括温度、光照、噪音、换气次数,落菌数,分析总结最适宜树鼩生长的环境参数. 结果 光照是所有因子中最重要的因子,光照时间12～14h,强度100～220 lx,比较有利于树鼩的四季繁殖. 结论 适宜普通级环境中饲养树鼩控制指标：温度18～29℃,相对湿度40%～66%;光照时间12～14h,强度100～220 lx;噪音50-60 dB;换气次数15～22次/h;落菌数10～40个/皿.     

军用动物福利保障措施探讨

军用动物是一个特殊的动物群体,是世界各国军事装备的重要组成部分.本文分析和借鉴了《美军军犬计划》等文献中对动物福利保障的措施,依据军用动物在实验、训练、执行演习和作战任务的特殊性,探讨了保障其福利的办法.     

实验树鼩主要内分泌腺的组织学观察

目的 了解树鼩主要内分泌腺的组织学结构特征,建立树鼩正常的内分泌腺组织学图谱。方法 选取人工饲养的健康树鼩10只,麻醉后放血处死和病理解剖,对甲状腺、甲状旁腺、肾上腺及脑垂体进行病理大体检查和取材,常规病理制片,采用常规组织HE 染色技术,显微镜下观察组织学结构。结果 （1）甲状腺呈淡黄色,位于气管两侧,在第2~4气管软骨环之间,呈板状,表面包有薄层被膜,被膜伸人甲状腺实质内分成若干小叶。小叶内有滤泡和滤泡旁细胞,滤泡腔内可见红染胶质。（2）甲状旁腺每侧一个,位于甲状腺颅侧或中部外表面,稍被甲状腺覆盖,呈圆形或卵圆形,其实质由主细胞和嗜酸性细胞组成,并可见腺泡样结构。（3）肾上腺呈卵圆形,赭黄色,位于肾门颅侧,与肾相连。肾上腺外包被膜,实质明显区分为皮质和髓质两部分。皮质从外到内可分为球状带、束状带和网状带。球状带最厚,束状带最薄,网状带介于中间。髓质部细胞形成团块或网状,髓质中央有静脉。（4）脑垂体位于蝶鞍内,没有垂体隐窝,垂体有腺垂体和神经垂体两部组成,表面包有结缔组织被膜。腺垂体分为远侧部、中间部和结节部,神经垂体由神经部和漏洞部组成。结论 基本建立了树鼩内分泌腺组织学图谱,其在组织形态学上接近于灵长类动物,可以为研究树鼩内分泌腺的功能和病变,以及建立人类相关疾病的动物模型提供组织学依据。     

树鼩微卫星DNA的多态性研究

目的 探索并建立一种检测树鼩群体遗传多样性的方法.方法 利用聚合酶链反应(PCR)扩增技术对30只树鼩个体的11个微卫星位点进行了遗传检测.结果 所选的11个微卫星DNA位点中,有9个具有高度多态性,2个微卫星DNA位点多态性较差.结论 所研究的树鼩微卫星位点中,有9个符合遗传标记特点,可用于检测树鼩群体的遗传多样性.     

树鼩舌下神经核的研究

用10只成年树鼩,从舌尖左侧半注入CB—HRP6μl,取延髓全长作40μ的横切面及纵切面。舌下神经核长1.3—1.4mm,可分为内侧隆起深面的上2/3部及位于第四脑室闭合部外侧及腹侧面的下1/3部。上2/3部标记细胞又分为标记细胞较多的内侧群和标记细胞较少的外侧群。下1/3部从上向下逐渐变细,多半仅标记了内侧群细胞。     

树鼩独立换气笼具的设计

目的设计研究一种满足于树鼩感染性疾病动物模型实验生物安全要求的独立换气专用隔离笼具。方法根据树鼩的生物学特性、实验生物安全要求及有关实验动物笼具标准进行设计。结果该笼舍完全适用于感染性疾病实验树鼩的饲养和实验操作。结论该笼具能达到维护实验动物福利,保证实验动物质量,保障人身健康,保护环境的要求,对于使用树鼩开展人类重大传染病研究具有广泛的应用价值和市场前景。     

肌注前列腺素提高非繁殖期树鼩的受孕率

为研究前列腺素(PG)对于提高非繁殖期树鼩发情及受孕率的作用,对野外捕获的笼养雌性树鼩肌注PG,并与雄性树鼩交配,结果能明显地提高树鼩的发情和受孕率.这为实验室大规模繁殖树鼩提供了实验依据.     

树鼩的基本实验操作方法

目的 对树鼩抓取和保定、采血、灌胃基本实验技术方法进行探讨,逐步规范树鼩实验技术.方法 选用成年树鼩进行抓取和保定,分徒手法和器具法(自制捕捉保定袋),对130只树鼩采用尾静脉、股动(静)脉两种采血方法;采取人用8号胃管可对树鼦经口灌胃给药.结果 所采用徒手、器具的方法抓取和保定树鼦均能有效地控制动物,不会发生动物死亡或很少逃逸;两种方法都顺利采集到所需血量,股动(静)脉单次最大采血量可达2 mL而不损伤动物;12只树鼩连续灌胃10 d,成功率100%.结论 自制的捕捉保定袋经济实用,摸索的几种树鼩实验技术方法具有操作简便、安全、快捷等优点.     

动物实验中贯彻动物福利的探讨

动物实验是医学教育中的重要环节,也是医学生基本技能培训的重要途径。动物实验的存在必然涉及实验动物伦理问题,如何有效贯彻实验动物福利是目前医学动物实验教学中需要解决的问题之一。文章结合我国实验动物管理政策的发展来探讨在教学过程中贯彻实验动物福利的方法。     

树鼩在眼科学的基础研究进展

树鼩具有发达的视觉系统,视锥细胞数量占感光细胞的96%,具有较好的色觉及立体视觉,且树鼩资源丰富,成本较低,比较医学和基因组学研究证实树鼩是理想的眼科实验动物模型。利用树鼩开展眼科研究主要集中在近视模型的建立、近视对巩膜和脉络膜造成的变化,以及树鼩视网膜、视神经、角膜基础及视皮质的研究。本文对树鼩在眼科学的基础研究进行综述。     

北京地区实验树鼩的饲养管理方法

树鼩作为低等灵长类动物,在生物学研究中的价值日益引起研究者重视,将其作为实验动物的实验需求越来越多。作为南方亚热带动物,树鼩如何适应北方地区的生活是北方地区将其用作实验动物的前提。本实验室探索出适宜树鼩居住的饲养笼具,确定了饲养环境温度、湿度、光照时间、噪音及通风等条件,制定了规范化的卫生管理标准,建立了北京地区长期人工培育树鼩的饲养管理方法,为今后利用树鼩进行中医药病证结合动物模型的研究奠定了基础。