BEMF对卵巢切除骨质疏松大鼠治疗作用的骨形态计量学研究

目的观察BEMF对OVX—OP大鼠骨形态计量学指标的影响，探讨BEMF对卵巢切除致骨质疏松大鼠的治疗作用及机制。方法6个月龄雌性未孕Wistar大鼠40只，按体质量随机分为卵巢切除组（OVX）、假手术组（Sham）、仿生电磁场治疗组（EM）、雌激素治疗组（E）。术后8周，E组苯甲酸雌二醇肌肉注射，0．5mg／kg，1次，2周。EM组大鼠暴露于仿生电磁场治疗，1h·次^-1·d^-1，OVX、Sham组不予以任何处理，作为对照组。治疗10周后处死各组大鼠，取左侧胫骨进行骨形态计量学测定。结果治疗10周后，EM组大鼠％Tb．Ar、Tb．Th、Tb．N较OVX组显著增加（P〈0．01），Tb．sp显著降低（P〈0．01），与E组变化相似。E组、EM组大鼠成骨细胞数（％L．Pm）低于OVX组（P〈0．01）；EM组、E组仍高于Sham组（P〈0．01）；EM组高于E组（P〈0．01）。E组、EM组破骨细胞数（N．Oc）低于OVX组（P〈0．01）；EM组、E组仍高于Sham组，（P〈0．01）；EM组高于E组，差异非常显著（P〈0．01）。结论BEMF具有增加骨量、改善骨结构的作用；与雌激素的治疗作用存在不同机制。     

运动配合左归丸对去卵巢大鼠骨质疏松的偶联信号IL-1、IL-6及COX-2传递的影响

目的通过观察运动配合左归丸对去卵巢大鼠骨质疏松的偶联信号因子骨髓基质细胞IL-1,成骨细胞IL-6、COX-2的影响,探讨该方法治疗骨质疏松症的作用机理。方法随机分为正常对照组、假手术组、模型组、己烯雌酚组、运动组、左归丸组、运动配合服用左归丸组。采用免疫组化的方法观察胫骨中白细胞介素1(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)和环加氧酶2(COX-2)3种细胞因子的蛋白表达,并运用ELISA技术测定血清中雌二醇(E2)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP)、甲状旁腺激素(PTH)含量。结果大鼠造模后,胫骨IL-1、IL-6、COX-2蛋白表达显著增高,血清中CT、E2显著性降低,BGP、PTH显著性升高。运动配合服用左归丸可以对升高的IL-1、IL-6、COX-2产生明显的抑制作用,且运动配合服用左归丸组与运动组相比IL-1β、IL-6有显著性差异,与左归丸组相比IL-1β、COX-2有显著性差异。与模型组相比,运动配合左归丸组CT、E2升高,BGP、PTH均降低,且运动配合左归丸组血清E2较左归丸组及运动组有显著性升高。结论运动配合左归丸可使去卵巢大鼠体内雌激素分泌增加,进而抑制骨质疏松偶联信号因子IL-1β、IL-6、COX-2分泌,间接地抑制骨吸收,调节骨吸收与骨形成的动态平衡,达到治疗绝经后骨质疏松症的目的。     

复合脉冲电磁场对去卵巢大鼠骨质疏松预防作用的研究

目的 观察复合脉冲电磁场（PEMFs)对去卵巢大鼠骨质疏松（OP）的预防作用,以寻求防治OP的新途径。方法 3月龄SD大鼠随机分为正常对照组（N）、去卵巢组（O）、去卵巢加苯甲酸雌二醇处理组（E）及去卵巢加PEMFs处理组（EM）,治疗8周后测定骨生物力学、骨密度、骨形态学。结果 生物力学性能测定显示,经PEMFs治疗后股骨最大抗拉强度和椎骨最大抗压强度明显提高,较O组分别增加39．2％、37．9％（P＜0．01）,并超过N组和E组（P＜0．01）;EM组骨密度（BMD）尽管未恢复至正常（P＜0．05）,但与0组相比仍有明显改善（P＜0．01）,且已基本达到E组水平;骨形态学分析发现EM组骨小梁增宽、致密,分布有序,结构优于O组和E组。结论 PEMFs能够增加骱密度,改善骨生物力学性能和骨结构。鉴于其对OP的预防作用主要是通过提高骨质量来实现的,我们认为在PEMFs一定程度上优于苯甲酸雌二醇,是颇具潜力的预防骨质疏松的方法。     

补肾法对卵巢切除大鼠骨组织白细胞介素-6mRNA表达的影响

目的探讨补肾法治疗绝经后骨质疏松症的分子作用环节.方法以卵巢切除大鼠作为骨质疏松实验模型,通过斑点杂交技术,在mRNA水平分析模型组、密骨片组及假手术组白细胞介素-6(IL-6)表达.通过原位杂交技术,研究了IL-6 mRNA在骨组织细胞的分布.结果模型组大鼠IL-6 mRNA表达较假手术组明显升高(P＜0.01);而密骨片组治疗后IL-6 mRNA表达明显下降(P＜0.01).IL-6 mRNA主要在成骨细胞、骨衬里细胞和骨细胞胞浆内表达.结论 IL-6在骨质疏松骨丢失过程中起重要作用;补肾法抗骨质疏松疗效部分是通过降低IL-6产生而介导的.     

去卵巢骨质疏松大鼠骨组织肥大细胞增生及其病理学意义

目的观察肥大细胞在去卵巢骨质疏松大鼠骨组织中的分布,探讨肥大细胞增生与绝经后骨质疏松症之间的关系。方法 3月龄健康雌性SD大鼠20只,随机分为假手术组(Sham组)和去卵巢组(OVX组),卵巢去除后3个月,采集和分离血清样品测定血清雌二醇、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of NF-κB ligand,RANKL),收集股骨近端干骺端、胫骨近端干骺端组织样品进行常规组织切片制作和肥大细胞的甲苯胺蓝染色,并计数单位面积肥大细胞的数量。结果 OVX组大鼠血清雌二醇、OPG含量较Sham组显著降低(P0.01),血清ALP、RANKL含量较Sham组显著增高(P0.01);组织化学染色结果显示肥大细胞主要分布于大鼠胫骨、股骨骨髓腔中,OVX大鼠胫骨、股骨骨髓腔肥大细胞数量较Sham组显著增多(P0.01)。结论 3月龄大鼠卵巢去除后3个月呈现骨质疏松症状,骨髓腔肥大细胞数量与骨质疏松呈正相关,可作为绝经后骨质疏松症诊断和治疗的依据。     

补肾健脾活血方对去卵巢大鼠骨组织TNF-α表达的影响

目的观察复方中药补肾健脾活血方对绝经后骨质疏松症大鼠模型骨组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达的影响.方法将84只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、中药对照组、西药对照组、补肾健脾活血方大、小剂量组共7组,采用卵巢切除的方法建造绝经后骨质疏松症动物模型,灌药90 d后取腰椎骨用免疫组化的方法检测TNF-α的表达.结果补肾健脾活血方能明显减少TNF-α表达的阳性细胞数,其作用强于单纯补肾中药和西药治疗,并且与剂量呈正相关.结论补肾健脾活血方通过影响细胞因子TNF-α的表达来减少骨吸收.     

健骨冲剂对去卵巢大鼠股骨及腰椎的生物力学作用

目的 研究不同剂量健骨冲剂预防去卵巢1月后SD大鼠生物力学特性降低的疗效。方法 77只6月龄雄性SD大鼠随机分为7组：假手术（Sham)组、卵巢切除（OVX）组、尼尔雌醇（E）组、仙灵骨葆（X）组、健骨冲剂低剂量（JL）组、健骨冲剂高剂量（JH）组、健骨冲剂中剂量（JM）组,每组11只,除Sham组外,其余各组行卵巢摘除术诱导绝经后骨质松症模型,术后除OVX组各治疗组分别给药,1月后测定生物力学指标。结果 JH组股骨抗弯程度显著高于OVX组,股骨中段直径显著小于后者;JM组腰椎抗压强度显著高于OVX组;3种剂量组股骨弹性模量和椎体直径显著高于E组,腰椎抗压强度均显著低于后者。结论 低、中剂量健骨冲剂短期应用能够预防OVX术大鼠骨折危险性增加的趋势。     

川芎嗪对成纤维细胞增殖及TGF-β1和bFGF表达的影响

目的:研究川芎嗪对体外培养大鼠成纤维细胞增殖及碱性成纤维细胞因子(Basic fibroblast growth factor,bFGF)、转化生长因子β1(Transforming growth factorβ1,TGF-β1)表达的影响,从而探讨川芎嗪抑制瘢痕形成的作用机制.方法:体外分离培养大鼠皮肤成纤维细胞,采...     

应用原子力显微镜观察脉冲电磁场对大鼠骨质疏松的治疗后骨组织表面超微结构的变化

目的观察实验性大鼠骨质疏松模型股骨颈超微结构的变化特点,并探讨利用原子力显微镜观察的可行性。方法清洁级雌性SD大鼠(鼠龄3个月)60只,体重(200±20)g。随机将其分成对照组(Sham组)、去卵巢组(OVX组)、阿伦膦酸钠治疗组(ALN组)、PEMFs治疗组(PEMFs组),每组大鼠15只。除Sham组外,对其他各组行双侧卵巢切除术,造模后第30天开始分组干预。ALN组给予阿伦膦酸钠灌胃,PEMFs组给予脉冲电磁场治疗。Sham组和OVX组手术后正常喂养,不予任何处理。治疗后30d取大鼠股骨头切片,通过AFM观察大鼠股骨颈的表面超微结构。结果 Sham组原子力显微镜扫描可显示骨组织的骨陷窝、骨小管及其表面的钙磷晶体沉积,骨组织表面粗糙度为(2.59±0.645)μm。OVX组可见骨陷窝的大小变化及其钙磷晶体的排列紊乱,模型组骨组织表面粗糙度明显高于对照组(P0.01),提示造模成功;ALN组表面粗糙度明显低于OVX组(P0.05),PEMFs组的表面粗糙度与OVX组相比,有明显降低,差异具有统计学意义(P0.05);而PEMFs组与ALN组比较,其表面粗糙度无明显差异(P0.05)。结论通过原子力显微镜能清晰观察到脉冲电磁场对大鼠骨质疏松治疗后的骨组织表面超微结构的变化,其疗效与阿仑膦酸钠相当,为脉冲电磁场治疗骨质疏松提供了一定的理论依据。     

跑台运动对去卵巢大鼠骨组织中OPG、RANKL和RUNX2 mRNA表达的影响

目的：观察去卵巢大鼠经跑台运动后其骨组织中OPG、RANKL和RUNX2mRNA表达变化,探讨力学刺激防治绝经后骨质疏松的作用机制。方法：健康3月龄雌性SD大鼠30只,体重（270±10）g,按随机方法平均分为假手术组、去卵巢组和跑台运动组,每组10只。假手术组仅在术中牵动卵巢并不行卵巢切除,其余两组均行卵巢切除术。假手术组和去卵巢组大鼠正常饲养;跑台运动组大鼠在术后1周开始在动物跑台上运动,跑速为18m／min,每次45min,1次／d,6d／周,共训练11周。12周后处死所有动物,取左侧股骨头,脱钙后石腊切片,用倒置相差显微镜观察其组织学变化;取右股骨头提总RNA,实时PCR法检测OPG、RANKL和RUNX2的mRNA表达情况。结果：去卵巢组骨小梁稀疏,骨细胞少,跑台运动组骨小梁粗壮增厚。去卵巢组骨组织中OPG的mRNA表达为（0．131±0．080）,RNAKL的mRNA表达为（8．013±3．550）,RUNX2的mRNA表达为（3．245±5．090）。跑台运动组其骨组织中OPG的mRNA表达为（0．566±0．260）,RANKL的mRNA表达为（5．232±3．670）,RUNX2的mRNA表达为（2．753±3．680）。和去卵巢组比较,跑台运动组的OPG的mRNA表达升高,差异有统计学意义;而RANKL和RUNX2的表达下降,差异无统计学意义。结论：力学刺激能通过促进去卵巢大鼠骨组织中OPG的表达而发挥其抗绝经后骨质疏松的效果,这对今后研究绝经后骨质疏松症的治疗提供了新的思路。     

仿生脉冲电磁场对0VX-0P大鼠骨密度与生物力学相关关系的影响

目的骨密度与骨的生物力学性能存在相关性，但某些治疗方法对骨密度及骨折发生率的影响并不一致，表明不同治疗方法可能对骨密度与骨的生物力学性能间的相关关系存在不同的影响。为此，本研究观察了仿生脉冲电磁场对去卵巢骨质疏松大鼠骨密度与生物力学关系的影响，并与雌激素进行了比较。方法6月龄雌性未孕Wistar大鼠160只，按体质量随机抽取分为以下4组：去卵巢组（OVX），去卵巢＋苯甲酸雌二醇组（E），假手术组（Sham），电磁场治疗组（EM）。OVX、EM、E组行双侧卵巢切除术，Sham组行假手术。术后第9W开始治疗：E组苯甲酸雌二醇肌肉注射，0．5mg／kg，1次，2W。EM组大鼠暴露于仿生脉冲电磁场治疗，1h／1次／d，OVX、Sham组不予以任何处理，作为对照组。开始治疗后6W、8W、10W、12W等时间点分别在麻醉下处死实验动物，腰6椎体、右侧股骨应用DEXA测定骨密度，并进行腰6椎体、右侧股骨生物力学指标的测定。结果股骨BMD（bone mineral densityBMD）与最大载荷、腰6椎体BMD与最大载荷之间均存在一种正向的线性关系。在股骨中，OVX较组相关曲线较Sham组相关曲线向右下方平移，E组则平移不明显，EM组则有左上方平移。在腰6椎体中，OVX、E组相关曲线向右下方平移不明显，EM组有左上方平移。结论仿生脉冲电磁场不但具有提高OVX-OP大鼠的BMD，同时改善了骨密度与生物力学性能的相关关系。     

低频脉冲电磁场对去势骨质疏松大鼠腰椎骨形态计量学的影响

目的观察低频脉冲电磁场(pulsed electromagnetic fields,PEMFs)对去势骨质疏松(osteoporosis,OP)大鼠腰椎骨组织形态计量学的影响,探讨PEMFs治疗OP的作用机制。方法将66只3月龄雌性SD大鼠随机分为假手术组(A组,n=12)、PEMFs实验组(B组,n=12)、雌激素对照组(C组,n=12)、卵巢切除对照组(D组,n=30)。A组大鼠仅切除卵巢周围部分脂肪组织,不切除卵巢;其余各组大鼠均切除双侧卵巢,制备去势OP大鼠模型。术后12周,B组采用低频PEMFs(8 Hz、3.8 mT、40 min/d)干预治疗30 d;C组采用倍美力0.065 mg/(kg.d)灌胃30 d;A、D组正常饲养。观察各组大鼠一般情况,术后12周检测血清雌二醇水平;干预治疗30 d后处死大鼠,取L4椎体作组织学切片,行静态骨形态计量学分析。结果术后D组大鼠毛发逐渐稀疏,活动迟缓,精神不振,反应较迟钝;A、B、C组大鼠毛发均光洁,精神及活动正常。术后12周,A组和D组大鼠血清雌二醇水平分别为(54.93±23.52)pg/mL和(31.99±23.45)pg/mL,比较差异有统计学意义(t=2.345,P=0.029)。干预治疗30 d后HE染色观察示,D组骨质变薄,骨髓扩大,骨小梁分布稀疏并变细,见断裂现象;A、B、C组骨小梁粗细一致,分布均匀,无断裂现象。B组大鼠L4椎体骨小梁面积百分比显著高于D组(P<0.05),也高于A、C组,但差异无统计学意义(P>0.05);骨小梁厚度显著高于D组(P<0.05),低于A、C组,但差异无统计学意义(P>0.05);骨小梁数量显著低于D组(P<0.05),高于A、C组,但差异无统计学意义(P>0.05);骨小梁分离度高于D组,低于A、C组,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 8 Hz、3.8 mT的PEMFs干预30 d可有效改善去势OP大鼠骨显微结构,增加骨小梁面积百分比、骨小梁厚度,降低骨小梁数量,对大鼠OP有良好的防治作用。     

脉冲电磁场对接骨板性骨质疏松的影响

我们对钢板固定家兔胫骨用ＰＥＭＦｓ进行治疗 ,观察固定骨段的骨孔隙率 ,骨矿含量和矿化沉积率的变化 ,以期为临床应用ＰＥＭＦｓ防治接骨板性骨质疏松提供依据。1　材料与方法1 1　动物　健康成年大耳白家兔 18只 ,雌雄不限 ,体重在 2 5～ 3 0ｋｇ(河南医科大学实验动物中心提供 )。标准全价营养饲料分笼喂养。1 2　接骨板　采用天津产 4孔 316Ｌ不锈钢掌骨接骨板。1 3　仪器　ＴＦ ＶＩ型中医多功能治疗仪由郑州市颈肩腰腿痛医院研究所提供 (专利号 :992 385 4 2 3)。1 4　分组与处理　动物随机分为Ａ、Ｂ、Ｃ三组 ,每组各 6只。Ａ组为…     

低强度脉冲电磁场对去卵巢大鼠不同部位骨密度的影响

目的 探讨低强度脉冲电磁场(PEMFs)对去势雌性大鼠不同部位骨密度的影响.方法 30只10月龄雌性SD大鼠随机分为3组:一组去势造模(造模组),另一组行假手术(空白组),第三组去势造模后暴露于50 Hz、0.16 mT的磁场环境下60 min/d,共90天(磁疗组).实验期间动态观察大鼠全身及颅骨骨密度,期满处死后测定血清雌二醇水平及骨密度.结果 ①空白组雌激素水平和子宫系数均显著高于其他两组(P<0.01);②至60天时,空白组、磁疗组的颅骨骨密度显著高于造模组(P<0.05),全身骨密度在90天时才出现统计学意义(P<0.05);③与空白组和磁疗组相比,造模组椎体骨密度(P<0.01)比腰椎骨密度(P<0.05)差异更显著,磁疗组股骨骨密度虽较造模组有所上升但差异未达到统计学意义.结论 全身骨密度与颅骨骨密度结合可有效评估大鼠活体骨密度动态变化;PEMFs对因去势造成的骨密度下降有明显抑制作用,且对不同部位骨密度影响程度不同;采用去椎弓的单一椎体为骨密度衡量点能更为敏感的反映治疗效果.     

Modulation of bone loss during disuse by pulsed electromagnetic fields

The effect of pulsed electromagnetic fields (PEMFs) on bone loss associated with disuse was investigated by applying 1.5 Hz repetitions of 30 ms bursts of asymmetric pulses, varying from +2.5 to -135 mV, to bones deprived of their normal functional loading. The proximal portion of one fibula in each of a group of ovariectomised adult female beagle dogs was isolated from functional loading in vivo by proximal and distal osteotomies. Comparison of these prepared bones with their intact contralateral controls after 12 weeks, showed a 23% reduction in cross-sectional area. In similarly prepared bones exposed to PEMFs for 1 h per day, 5 days per week, this bone loss was substantially and significantly reduced to 9% (p = 0.029). There was no evidence of any new bone formation on the periosteal surface of prepared fibulae in treated or untreated situations. PEMF treatment was not associated with any significant change in number of osteons per mm2 formed within the cortex of the bones, their radial closure rate, or their degree of closure. The modulation in loss of bone area associated with exposure to PEMFs can, therefore, be inferred to be due to a reduction in resorption on the bone surface.     

仿生脉冲磁场联合同种异体骨髓间充质干细胞移植治疗股骨头坏死的实验研究

目的研究仿生脉冲磁场（BEMF）联合同种异体骨髓间充质干细胞（BMSCs）对兔早期股骨头坏死（ONFH）模型的促血管再生、骨再生的修复作用。方法取成功造模的液氮型ONFH模型24只,并随机分为4组,A组为制作模型而不填充任何材料,B组为单纯明胶海绵和PBS液填充,C组为填充复合骨髓间充质干细胞的明胶海绵,D组为填充复合骨髓间充质干细胞的明胶海绵,并予仿生脉冲磁场照射4周（2h/d）。于治疗后2、4、8周对各组股骨头进行解剖学、X线片、CT、组织切片观察及免疫组化血管染色,并进行血管计数。结果 （1）股骨头大体及CT观察：A组2周时可见典型的骨坏死;B组2周时可见明胶海绵吸收,4、8周骨坏死缺损清晰可见;C、D组：2周可见明胶海绵吸收,4周有新骨形成伴髓腔再通,8周新生骨与宿主骨界限模糊;（2）血管计数：术后4、8周C、D组新生血管计数大于A、B组（P〈0.05）,C、D两组比较,D组新生血管计数大于C组（P〈0.05）。结论 BEMF联合同种异体骨髓间充质干细胞移植可促进坏死股骨头内血管再生和骨修复作用。     

脉冲电磁场治疗骨质疏松症的临床研究进展

脉冲电磁场（pulsed electromagnetic field,PEMF）作为一种无创、安全、有效的物理治疗手段,早期在临床上用于治疗骨折延迟愈合和不愈合的患者,目前已用于骨质疏松症的临床辅助治疗。体外及动物模型研究已经证实PEMF能够刺激成骨细胞的骨形成而抑制破骨细胞的骨吸收,最终实现骨结构的完整及骨量和骨强度的维持。大量临床研究也表明PEMF在增加骨质疏松症患者骨密度、缓解疼痛及改善患者生活质量方面具有很好的治疗效果,但是PEMF对骨质疏松症积极作用的确定性仍需进一步研究。本文对国内外有关PEMF治疗骨质疏松症的相关临床文献进行了总结,并对可能机制进行了探讨,旨在为日后的临床研究提供一定的参考。     

脉冲电磁场对去势大鼠骨髓源细胞体外培养破骨细胞变化的影响

目的：观察脉冲电磁场对去势大鼠骨髓源性破骨细胞样细胞（OLC）形成变化及凋亡的影响。方法：30只健康3月龄雌性Wistar大鼠,随机分为A组（双侧卵巢切除＋磁场治疗组、18只）、B组（双侧卵巢切除组、6只）和C组（伪去势组、6只）。A组又随机均分3组：A1、A2、A3组,电磁场频率分别为1.5、2、75Hz。术后单纯喂养3个月后对各组大鼠骨髓细胞进行培养,培养2d后,A1、A2、A3组置脉冲电磁场治疗,1次/d,每次30min,共治疗2周。之后各组培养细胞作瑞氏-吉姆萨、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）和Hoechst 33258染色,观察破骨细胞变化并计数。结果：大鼠骨髓体外培养细胞TRAP染色结果显示,C组的破骨细胞形成数量最少,其次为A2、A3、A1、B组。B组的破骨细胞形成数量与C组和A2组比较显著增多（P〈0.01）,B组的破骨细胞形成数量与A1、A3组比较明显增多（P〈0.05）。Hoechst 33258染色结果显示,C组破骨样细胞凋亡出现数量较多,C、A2组凋亡数明显多于B组（P〈0.05）。结论：脉冲电磁场能使大鼠骨髓体外培养破骨细胞形成数量减少、凋亡数增加,频率为2Hz的效果最佳,表明脉冲电磁场可能将是骨质疏松症治疗的新方法。