外源性碱性成纤维细胞生长因子对缺血大鼠脑内源性碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的 研究外源性碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)缩小局灶性脑缺血梗死灶的机制。方法 用免疫组化ABC法检测在局灶性脑缺血模型上给予生理盐水或bFGF后早期生长反应蛋白-1(Egr-1)，bFGF，碱性成纤维细胞生长因子受体(bFGFR)的动态表达。结果 给药组在3h～3d各时间段梗死灶均有不同程度的缩小。对照组和给药组Egr-1表达均表现为3～6h的增强过程，但给药组更强于对照组。对照组12h见有bFGF表达增强，而bFGFR表达3h到达高峰，6h起下降，12h时bFGFR的表达已恢复至正常水平(出现了配体和受体表达时相上不匹配)。给药组bFGF表达提前且增强，3h即见有bFGF表达增强，6h时出现第一峰，从而与bFGFR 3～6h的表达增强过程相吻合。结论 外源性bFGF能缩小梗死灶，该神经保护作用是通过Egr-1蛋白高表达使内源性bFGF的表达增高且提前，从而与bFGFR的表达增强过程重叠而实现的。     

Astrocytic basic fibroblast growth factor expression in dopaminergic regions after perinatal anoxia.

BACKGROUND: Perinatal anoxia leads to persistent behavioral and neurochemical alterations suggestive of sensitized dopaminergic function. Because astrocytic basic fibroblast growth factor (bFGF) activity in the midbrain dopaminergic cell body region is required for the development of enduring changes in dopaminergic function induced by stimulant drugs, we investigated the effects of intrauterine anoxia on astrocytic bFGF expression in dopaminergic regions at 2 weeks of age and after a stress manipulation in adults. METHODS: We examined bFGF immunoreactivity in dopaminergic regions of young and adult rats born by cesarean section, cesarean section + 15 min of intrauterine anoxia, or vaginally. bFGF immunoreactivity was also assessed before and after tail-pinch stress in adult animals exposed to the same perinatal interventions. RESULTS: Perinatal anoxia produced persistent decreases in basal bFGF immunoreactivity in the ventral tegmental area (VTA), but enhanced the effect of stress on VTA bFGF immunoreactivity. CONCLUSIONS: Perinatal anoxia has enduring effects on VTA bFGF immunoreactivity and influences adult neuroadaptations to stress. The mechanisms whereby perinatal anoxia alters dopaminergic function may be similar to those responsible for the development of sensitization to stimulant drugs and may involve bFGF.     

Interleukin-2 but not basic fibroblast growth factor is elevated in parkinsonian brain

Summary The contents of interleukin (IL)-2 and basic fibroblast growth factor (bFGF) were measured in the brain (caudate nucleus, putamen, and cerebral cortex) from control and parkinsonian patients by highly sensitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). The concentrations of IL-2 in the brain were in the order of pg/mg protein, and the values were significantly higher in the caudate and putamen from parkinsonian patients than those from control patients. However, the levels of IL-2 in the cerebral cortex showed no significant difference between parkinsonian and control patients. In contrast to IL-2, the bFGF levels in the brain were high and in the order of ng/mg protein, and there was no significant difference in the caudate and putamen between parkinsonian and control patients. Although both IL-2 and bFGF may play important roles in dopaminergic neurons as neurotrophic factors, IL-2 but not bFGF may relate to the compensatory response in the nigrostriatal dopaminergic regions in parkinsonian brain during progress of neurodegeneration.     

Identification of basic fibroblast growth factor as a cholinergic growth factor from human muscle

Dissociated embryonic chick ciliary ganglion cells in culture were used as a bioassay to isolate a cholinergic growth-promoting protein from extracts of autopsied adult human muscle. An active protein was purified after acid and salt precipitation of extract, cation exchange, molecular sieving, heparin affinity chromatography, and in some cases, SDS-PAGE. This protein increased levels of choline acetyltransferase activity and ACh synthesis with time in culture. The protein was identified as basic FGF by several criteria. It shared the high affinity for heparin and was the same approximate molecular weight, 18 kD, as basic FGF. Activity was removed from solution by antibodies specific for basic FGF. Recombinant human basic FGF was equally effective in stimulating CAT activity, but was not additive with our purified protein at saturating concentrations. Basic FGF was also found in extracellular matrix and conditioned medium from cultured embryonic chick muscle. The activity could be released from extracellular matrix by treatment with heparinase or high salt extraction. Basic FGF stimulates neurite outgrowth as well as the capacity for transmitter synthesis. Thus, basic FGF is present in embryonic and adult muscle and capable of acting as a growth regulator for cholinergic neurons.     

托吡酯对慢性癫(癎)大鼠海马碱性成纤维细胞生长因子表达的影响

目的研究托吡酯（TPM）对慢性癫痫大鼠海马碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）表达的影响。方法制作戊四氮（PTZ）慢性癫痫点燃大鼠模型，分为PTZ组、TPM组及正常对照组，每组又以5d、10d、15d3个时间点各分为3小组。免疫组化法观察各组海马CAl、CA3区及齿状回bFGF表达，HE染色观察病理形态学改变。结果（1）行为学观察：PTZ组和TPM组在癫痫发作上无明显差别。（2）bFGF表达：①各组齿状回区bFGF表达：PTZ组和TPM组各时点表达不断增高，与正常对照组比较差异有统计学意义（均P〈0．01），尤以10d及15d时增高更明显，与5d时比较差异有统计学意义（均P〈0．05）。②各组CAl区bFGF表达：PTZ组各时点均有明显表达，且随时间延长而表达不断增高，各时点比较差异有统计学意义（均P〈0．01），与正常对照组比较差异有统计学意义（均P〈0．01）；TPM组在5d时与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），而10d、15d时逐渐下降，接近正常对照组水平。③各组CA3区bFGF表达：5d时3组比较差异无统计学意义。但PTZ组和TPM组在10d时与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．01），PTZ组在15d时和TPM组及正常对照组比较差异有统计学意义（均P〈0．01）。（3）病理形态学改变：PTZ组和TPM组的海马CAl、CA3区尤其是CAl区可见较多神经元发生变性和坏死，PTZ组更显著。结论PTZ点燃过程中海马bF-GF表达增高，尤其在CAl区，且随时间延长有表达不断增高的趋势。TPM可能通过减少海马神经元损伤而明显下调海马CAl、CA3区bFGF的表达。     

碱性成纤维细胞生长因子和银杏叶提取物对实验性脑梗死的作用

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和银杏叶提取物(GbE)对实验性脑梗死的作用.方法 健康家猫40只,随机分为生理盐水对照(A)组、bFGF治疗(B)组、CbE治疗(C)组和bFGF GbE联合治疗(D)组;采用左侧眼眶入路制作猫大脑中动脉缺血再灌注模型;制模后即刻、24 h、48 h分别给予相应的药物干预;制模后1 d、7 d分别进行神经功能缺损评分;制模后7 d对脑组织切片进行光镜和电镜下病理及超微结构观察.结果 D组神经功能缺损评分(41.50±8.18)明显低于A组(82.20±8.08)、B组(63.60±6.22)和C组(61.00±6.58)(均P<0.01);光镜下D组神经细胞核轻度皱缩,细胞周围间隙大致正常,神经纤维网疏程度不严重;电镜下D组神经元轻度变性,细胞核无皱缩,核膜完整,线粒体轻度肿胀;脑组织病理损害程度较B组和C组明显减轻.结论 bFGF和GbE联合治疗实验性脑梗死疗效优于二种药物的单一用药,两药合用具有脑保护的协同作用.     

骨保护素和碱性成纤维细胞生长因子在牙周组织再生中的应用*

背景：利用组织工程和基因治疗技术,联合应用骨保护素和碱性成纤维细胞生长因子可以促进牙周组织修复再生,是治疗重症牙周病的新方法。 目的：探讨联合应用骨保护素和碱性成纤维细胞生长因子以促进牙周组织修复再生的理论依据。 方法：应用计算机检索PubMed数据库(1996/2009)和中国知网数据库(1999/2009),分别以“osteoprotegerin,basic fibroblast growth factor,tissue engineering, gene therapy,periodontal regeneration”和“骨保护素、碱性成纤维细胞生长因子、组织工程、基因治疗、牙周组织修复再生”为检索词,通过阅读标题和摘要进行初筛,排除较陈旧和重复研究文献,保留符合纳入标准的文献29篇。 结果与结论：使牙槽骨、牙周膜和牙骨质获得再生,形成牙周新附着一直是口腔医学研究的热点。骨保护素是一种能阻止破骨细胞分化、促进骨形成的关键因子。碱性成纤维细胞生长因子在胚胎发育,血管生成,骨的形成和修复,促进细胞增生等有广泛的作用。2者都可促进牙周组织的修复和再生。组织工程技术和基因治疗技术的出现显著促进了牙周组织修复再生研究的发展,有选择地复合这2种生长因子促进牙周支持组织的再生和修复可成为治疗牙周病的一种新方法。     

碱性成纤维细胞生长因子在自体脂肪颗粒填充面部凹陷中的作用*

背景：碱性成纤维细胞生长因子具有明显的促进细胞增殖、加速移植物血管化的作用,而且可以促进人前脂肪细胞向成熟脂肪细胞分化。目的：观察成纤维细胞生长因子在自体脂肪颗粒移植治疗面部凹陷中的作用,评价其治疗效果。方法：纳入武警医学院附属医院应用自体脂肪颗粒注射移植治疗面部凹陷的患者52例,患者按治疗的先后时间顺序分为对照组和碱性成纤维细胞生长因子组。对照组患者只注射自体脂肪颗粒进行治疗,碱性成纤维细胞生长因子组在注射自体脂肪颗粒的基础上加入碱性成纤维细胞生长因子。两组患者术后6个月随访,通过照相对比凹陷填充效果。结果与结论：52例患者面部凹陷均得到不同程度的改善。对照组19例患者充填效果,优4例,良6例,优良率53%,有12例患者进行了2次注射,比例为63%。成纤维细胞生长因子组33例患者充填效果,优14例,良12例,优良率79%,有11例患者进行了2次脂肪注射,比例为33%。两组优良率和二次注射率比较,有显著性差异(P < 0.05)。可见碱性成纤维细胞生长因子局部应用可以明显提高面部凹陷的填充效果,安全有效。关键词：自体脂肪;脂肪移植;碱性成纤维细胞生长因子;面部凹陷;治疗效果     

碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子对脑缺血大鼠内源性神经干细胞增殖的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)对大鼠局灶性脑缺血模型内源性神经干细胞增殖的影响。方法通过大脑中动脉阻塞法建立大鼠的局灶性脑缺血模型,随机分组后分别皮下注射生理盐水、bFGF、EGF以及bFGF EGF;每日1次,共3d,此后每3d1次。采用免疫组化法,以5溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)标记神经干细胞,观察并比较各组大鼠制模后第7d、14d、21d侧脑室室管膜下区(SVZ)和海马齿状回Brdu阳性细胞的表达。结果制模后,各组大鼠双侧SVZ和海马齿状回均出现Brdu阳性细胞,且阳性细胞数随时间递减;与对照组相比,药物干预组Brdu阳性细胞数显著增加(P<0.05～0.01);与单药组相比,bFGF EGF组(联合组)Brdu阳性细胞数增加更明显(P<0.05～0.01);各药物干预组在制模第7dBrdu阳性细胞数最多(P<0.05～0.01)。结论皮下注射bFGF、EGF可促进脑缺血大鼠模型内源性神经干细胞的增殖;bFGF和EGF联合应用对脑缺血大鼠神经干细胞的增殖效应有协同作用。     

碱性成纤维生长因子和神经生长因子联合应用培养成年大鼠海马神经干细胞向神经元样细胞的分化

背景：影响神经干细胞向神经元分化的因素很多,各种营养因子可以不同程度地刺激神经干细胞向神经元分化,如何使神经干细胞大量分化为神经元是研究的热点问题。 目的：观察联合应用碱性成纤维生长因子和神经生长因子对成年大鼠海马神经干细胞为神经元的影响。 方法：无菌条件下分离大鼠脑海马组织,传至第4代克隆球直径约为200 μm时,滴加DMEM/F12+2% B27+20 μg/L表皮生长因子+20 μg/L碱性成纤维细胞生长因子,进行单细胞克隆培养,传代的神经干细胞分成空白对照组、碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子+神经生长因子组。观察传代后的克隆球进行神经干细胞免疫细胞化学染色鉴定,计数神经元特异性烯醇化酶阳性细胞率,检测神经干细胞向神经元的分化情况。 结果与结论：①单细胞克隆培养后,克隆球细胞表达巢蛋白,诱导分化后神经元特异性烯醇化酶、胶质纤维酸性蛋白均呈阳性表达。②与空白对照组神经干细胞分化为神经元的比例比较,碱性成纤维细胞生长因子组、神经生长因子组、碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组均明显提高(P < 0.05),且碱性成纤维细胞生长因子组+神经生长因子组神经元的比例最高(P < 0.05)。提示,碱性成纤维细胞生长因子可以提高神经生长因子诱和神经生长因子均可促进神经干细胞向神经元分化,且二者联合应用效果更佳。     

引导骨组织再生技术结合碱性成纤维细胞生长因子和骨保护素修复犬牙槽骨缺损

背景：多种生长因子能有效促进牙周组织再生。目的：观察骨保护素和碱性成纤维细胞生长因子对牙槽骨骨缺损的修复作用。方法：在4只杂种犬下颌两侧的第3,4前磨牙根分叉区造牙槽骨缺损,每只犬的一侧为实验组,另一侧为对照组。实验组置胶原膜并于缺损部位牙龈注射携带骨保护素和碱性成纤维细胞生长因子基因的重组腺病毒,对照组仅注射重组腺病毒或不做处理。 结果与结论：缺损修复4周后,实验组和对照组在X射线和组织学等方面差异不显著。12周后,实验组X射线可见骨缺损区新生骨量明显增加,组织学见新生牙槽骨已充满根分叉区,骨小梁致密;对照组X射线可见骨缺损区新生骨量增加,但未达到根分叉顶,组织学见骨缺损区有大量新生牙槽骨但未充满根分叉区。说明引导骨组织再生技术结合骨保护素和碱性成纤维细胞生长因子可促进犬牙槽骨缺损的修复。     

Heparan sulfate modifies the effects of basic fibroblast growth factor on glial reactivity

Our previous studies have shown that injection of basic fibroblast growth factor (bFGF) into a brain wound enhances astrocyte hypertrophy and macrophage-microglia proliferation in areas adjacent to the lesion. In the present study, designed to test the effects of co-administration of bFGF and heparan sulfate (HS), rats received injections of 200 ng bFGF, 200 ng bFGF with 50 μg HS, or 50 μg HS into a brain wound. Glial proliferation and astrocyte hypertrophy were evaluated in seven non-overlapping subfields in the mid-cortex including the wound edge. Our results show that bFGF-HS, compared to bFGF or HS alone, enhanced the total area of GFAP staining in all subfields except the one nearest to the wound edge. The combination of bFGF and HS did not increase total glial or astrocyte proliferation. We propose that the observed effects resulted from a greater diffusion of bFGF-HS complex into the brain parenchyma, where it bypassed low-affinity binding sites that would otherwise sequester free bFGF. Our results suggest that bFGF-HS complex, compared to bFGF alone, may gain entry into the brain more readily, reach higher concentrations and be more effective as a neurotrophic agent.     

纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗烧伤残余创面

目的：观测纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶治疗烧伤残余创面的疗效。 方法：选取临床深Ⅱ度及Ⅲ度烧伤所致残余创面患者40例,随机分为两组,每组20例。治疗组应用纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶进行换药;对照组应用生理盐水和无菌石蜡油纱布换药。观测记录各组病例的愈合时间、创面感染例数、不同时相点创面愈合率、各组治疗前和治疗7 d时创面细菌培养情况、药物不良反应。 结果：治疗组的愈合时间明显短于对照组(P < 0.01);治疗组不同时相点创面愈合率明显高于对照组(P < 0.01);治疗组创面感染例数明显少于对照组(P < 0.01);治疗7 d后,治疗组致病细菌检出率明显低于对照组(P < 0.01)。 结论：将纳米银敷料结合重组牛碱性成纤维细胞生长因子凝胶应用于可以非手术治疗的烧伤残余创面,有较好的抗菌作用及促进创面修复作用,能有效缩短烧伤残余创面的愈合时间。 关键词：纳米银敷料;重组牛碱性成纤维细胞生长因子;烧伤;残余创面 doi:10.3969/j.issn.1673-8225.2009.47.036     

碱性成纤维细胞生长因子-慢病毒真核表达载体的构建及转染

背景：以往研究多采用质粒载体,由于其转染效率不高,且转染时需借助脂质体转染剂进行转染,转染具有细胞毒性,操作复杂等难以应用于临床。 目的：构建携带人碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)基因的慢病毒载体,转染成骨方向诱导的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),鉴定bFGF基因表达。 方法：实验组：设计人bFGF基因引物,用Trizol法提取胎盘组织RNA,用RT-PCR的方法扩增出bFGF基因,连接至pLenti6/V5-D-TOPO® 表达质粒,经Xho-Ⅰ、BamH-Ⅰ双酶切和DNA测序证实质粒正确构建。在脂质体转染剂Lipofectamine 2000的介导下,将bFGF-pLenti6/V5-D-TOPO表达质粒同包装质粒pLP1、pLP2、 包膜质粒pLP/VSVG 共转染293FT细胞株,收集bFGF-慢病毒上清转染诱导后第2代的兔BMSCs。对照组：设计GFP基因引物,以GFP- PMSLV-Plazmid为模板,PCR的方法扩增出GFP基因,连接至pLenti6/V5-D-TOPO® 表达质粒,构建GFP-慢病毒载体,并转染BMSCs。RT-PCR和Wetern-blot方法检测bFGF、GFP基因的表达。 结果与结论：转染48 h后,对照组BMSCs可见绿色荧光蛋白表达;实验组BMSCs在转染15 d后,RT-PCR方法扩增出bFGF基因,Western-blot检测出目的蛋白表达。提示成功构建携带人bFGF和GFP基因的真核表达载体,建立转染兔BMSCs的方法。     

碱性成纤维细胞生长因子预诱导对骨髓基质干细胞向多巴胺能神经元分化的影响

目的探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）预诱导对骨髓基质干细胞（MSCs）向多巴胺（DA）能神经元分化的影响。方法取雄性Wistar大鼠股骨和胫骨骨髓,进行MSCs的体外培养、传代扩增及纯化。bFGF预诱导24h后,依据加入的神经营养因子不同分为单唾液酸四己糖神经节苷脂（GMl）组、胶质源性神经营养因子（GDNF）组和GDNF＋GMl组,以及对照组。倒置显微镜下观察细胞形态变化,分别在预诱导第3d、7d进行神经元特异性烯醇化酶（NSE）、神经胶质酸性蛋白（GFAP）、酪氨酸羟化酶（TH）免疫细胞化学检测。计数NSE和TH阳性细胞数,并计算阳性细胞百分比。结果对照组见少量NSE阳性细胞。实验组于诱导第3d、7d见较多数量的NSE、TH阳性细胞,GFAP阴性。bFGF预诱导各组中GDNF＋GMl组NSE、TH阳性细胞率最高,GDNF组次之,GMl组最低,组间比较差异有统计学意义（均P〈0．01）。结论bF—GF预诱导不仅可明显促进GDNF、GMl诱导MSCs向神经元样细胞分化,表达神经元细胞标志物——NSE;还可促进MSCs向DA能神经元分化,表达DA能神经元标志物——TH。     

Increased levels of serum basic fibroblast growth factor in schizophrenia

Basic fibroblast growth factor (bFGF) is a multifunctional growth factor that has been implicated in a variety of neurodevelopmental processes. The aim of the present study was to examine whether bFGF contributes to the pathophysiology of schizophrenia. Serum bFGF levels in 40 patients with schizophrenia (15 drug-naive and 25 medicated patients) and in 40 age- and sex-matched healthy normal controls were measured. Serum bFGF levels were significantly higher in the medicated patients than in the normal controls. Analysis of partial correlation coefficients showed that the increased bFGF levels might not be attributable to antipsychotic medication. Although there was no significant overall difference in bFGF levels between drug-naive patients and normal controls, the bFGF levels in these patients significantly correlated with the severity of negative symptoms. Furthermore, we found a significant negative correlation between serum bFGF levels and the age of onset in the entire patient group. Our finding of elevated bFGF levels in the serum of patients with schizophrenia, especially in earlier age-of-onset cases considered to have more neurodevelopmental insults, suggests that bFGF abnormalities may be involved in the pathophysiology of schizophrenia.     

生骨注射液对骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响

背景：在促进骨折修复研究中,应用外源性生长因子极不稳定,且造价高不适宜广泛推广,如何有效地促进内源性生长因子的表达将是值得深入研究的课题。 目的：观察生骨注射液对骨折愈合过程中内源性碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子表达的影响。 设计、时间及地点：完全随机分组设计,对照实验,于2007-07/2008-08在华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科实验室完成。 材料：清洁级3月龄雄性SD大鼠60只。生骨注射液由当归、土鳖虫、淫羊藿等药物组成,由湖北省中医院提供,质量浓度为1 g/L。 方法：建立SD大鼠胫骨干骨折愈合模型,分成实验组和对照组各30只,分别在骨折断端等量注射生骨注射液和生理盐水,每两日1次,0.2 mL/次。两组分别于术后第1,2,3,4,5,6周时各处死5只大鼠,取材。 主要观察指标：采用免疫组织化学方法,检测两组大鼠骨折愈合过程中不同阶段骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子蛋白的表达及差异情况。 结果：免疫组织化学染色显示,各时间点实验组骨痂组织中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子表达量及阳性定位均明显强于对照组。 结论：生骨注射液能够增加骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子在骨痂组织中的表达,这可能是生骨注射液促进骨折愈合的机制之一。     

脑室内注射碱性成纤维细胞生长因子治疗大鼠创伤生脑外伤的实验研究

目的 探讨脑室内注射碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对创伤性脑外伤大鼠是否具有治疗作用. 方法 24只成年SD大鼠按随机数字表法分为治疗组和对照组,采用改良的Feeney氏自由落体撞击方法建立大鼠创伤性脑外伤模型,致伤后24 h分别给予脑室内注射bFGF和等量的生理盐水;采用行为测试试验(前肢放置试验、平衡试验)评分观察肢体功能恢复情况;采用免疫组化法,以5溴脱氧嘧啶尿苷(Brdu)标记神经干细胞,观察并比较两组大鼠致伤后第3、7、14天侧脑室室管膜下区(SVZ)、海马齿状回及损伤区域Brdu阳性细胞的表达. 结果 治疗组前肢放置试验评分在第3～12天、平衡试验在第3～11天的评分低于对照组,比较差异有统汁学意义(P<0.05).治疗组双侧SVZ、海马齿状回和损伤区域出现的Brdu阳性细胞数较对照组明显增多,差异有统计学意义(P<0.05).两组损伤侧Brdu阳性细胞数均高于损伤对侧,比较差异有统计学意义(P<0.05).行为学评分与Brdu阳性细胞数之间呈负相关关系. 结论 脑室内注射bFGF有助于创伤性脑外伤大鼠模型内源性神经干细胞的增殖,并能促进其肢体功能的恢复.