颞叶癫痫大鼠认知功能与海马区NR2B表达的关系

目的〓〖HTK〗研究颞叶癫痫大鼠在Morris水迷宫(MWM)中学习、记忆能力与大鼠海马区N-甲基-D-天门冬氨酸受体2亚基B（NR2B）表达变化的关系，探讨颞叶癫痫学习、记忆等认知功能障碍的可能机制。〖HTW〗方法〓〖HTK〗随机将60只Wistar大鼠分为癫痫组（48只）和对照组（12只）。癫痫组采用海人酸（K A）右侧海马立体定向注射制作颞叶癫痫大鼠模型，又分为：癫痫迷宫训练组（A组），癫痫迷宫未训练组（B组）；对照组即NS迷宫训练组（C组），注射生理盐水。通过MWM测验观察A、C组大鼠在7、14、28、42d时各亚组的学习、记忆能力。采用免疫组化法检测大鼠在7、14、28、42d时各亚组海马CA1、CA3区NR2B的表达。〖HTW〗结果〓〖HTK〗与C组相比，在28、42d时A组学习、记忆功能明显下降，相应海马CA1、CA3区NR2B表达均明显降低(P＜0.05，P＜0.01) ，B组在28、42d时海马CA1、CA3区NR2B表达均明显降低(P＜0.01)；与B组相比，A、C组在28、42d时海马CA1、CA3区NR2B表达均增高(P＜0.05，P＜0.01)。与A7、A14d亚组相比，A28、A42d亚组学习、记忆功能逐渐下降(P＜0.05，P＜0.01)，NR2B的表达逐渐降低(P＜0.05，P＜0.01) ，且A组28d与A组42d亚组相比差异有统计学意义(P＜0.05，P＜0.01)。B组各亚组NR2B表达与A组一致。〖HTW〗结论〓〖HTK〗颞叶癫痫长期反复发作时海马区NR2B表达减少，可能是导致颞叶癫痫学习、记忆等认知功能障碍的机制之一。     

pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化

目的明确pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化.方法 55只健康成年SD大鼠,分为正常对照组,Y迷宫训练组,假训练组,其中训练组与假训练组再各分为训练后0h、1h、3h、6h、24h亚组,每组动物各5只.训练组动物接受Y-迷宫光电结合训练,假训练组动物接受光电不结合假训练,应用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内各区pERK1/2阳性神经元分布及表达的变化.结果正常对照组pERK1/2免疫阳性神经元分布较少,但在双侧视上核、室旁核表达很丰富,其次在小脑分子层和浦肯野细胞层、杏仁核、纹状皮层表达较多,海马部位偶见2～5个阳性神经元,有较多阳性纤维着色,在纹状体整个区域无阳性神经元表达.在训练后0h纹状体尾壳核和边缘区[(31.2±4.8)个]出现表达,在海马CA2、CA3区出现较多阳性神经元胞体[(44.2±4.2)个],皮层大部、杏仁核的表达也有明显增强,而训练后1h、3h、6h上述各区仍有持续增强,训练后24h表达降至正常,纹状体边缘区阳性神经元消失,海马部位仅有个别阳性神经元[(3.8±3.3)个],P值均小于0.01.假训练组各时间点在海马、纹状体尾壳核、边缘区等部位均无或仅有个别阳性细胞或阳性纤维,与训练组相比差异显著.结论正常状态下pERK1/2在全脑分布较为局限,且表达强度较低.Y迷宫学习可诱导海马、尾壳核、纹状体边缘区等区域的pERK1/2的表达,而且pERK1/2参与了Y迷宫的习得、短期记忆的形成、短期记忆向长期记忆的转换和长期记忆的形成等学习记忆的各个阶段.     

pERK1／2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化

目的明确pERK1/2在大鼠脑内的分布及Y迷宫训练后的时程变化。方法55只健康成年SD大鼠,分为正常对照组,Y迷宫训练组,假训练组,其中训练组与假训练组再各分为训练后0h、1h、3h、6h、24h亚组,每组动物各5只。训练组动物接受Y-迷宫光电结合训练,假训练组动物接受光电不结合假训练,应用免疫组织化学方法检测各组大鼠脑内各区pERK1/2阳性神经元分布及表达的变化。结果正常对照组pERK1/2免疫阳性神经元分布较少,但在双侧视上核、室旁核表达很丰富,其次在小脑分子层和浦肯野细胞层、杏仁核、纹状皮层表达较多,海马部位偶见2~5个阳性神经元,有较多阳性纤维着色,在纹状体整个区域无阳性神经元表达。在训练后0h纹状体尾壳核和边缘区[(31.2±4.8)个]出现表达,在海马CA2、CA3区出现较多阳性神经元胞体[(44.2±4.2)个],皮层大部、杏仁核的表达也有明显增强,而训练后1h、3h、6h上述各区仍有持续增强,训练后24h表达降至正常,纹状体边缘区阳性神经元消失,海马部位仅有个别阳性神经元[(3.8±3.3)个],P值均小于0.01。假训练组各时间点在海马、纹状体尾壳核、边缘区等部位均无或仅有个别阳性细胞或阳性纤维,与训练组相比差异显著。结论正常状态下pERK1/2在全脑分布较为局限,且表达强度较低。Y迷宫学习可诱导海马、尾壳核、纹状体边缘区等区域的pERK1/2的表达,而且pERK1/2参与了Y迷宫的习得、短期记忆的形成、短期记忆向长期记忆的转换和长期记忆的形成等学习记忆的各个阶段。     

电磁辐射对大鼠海马NMDA受体NR1亚单位蛋白及其mRNA表达的影响

目的 探讨2000 μW/cm2电磁辐射对大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸(NMDA)受体NR1亚单位蛋白及其mRNA水平表达的影响,揭示电磁辐射对大鼠学习记忆功能的损伤机制.方法 实验分为空白对照组,假辐射组,1 h/d、2h/d、3 h/d辐射组.将辐射组大鼠固定体位,头部接受功率密度为2000μW/cm2的近场辐射,连续辐射30d.通过Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,采用免疫组化法和Western-Blot法检测大鼠海马组织NR1蛋白表达的变化,RT-PCR法检测大鼠海马组织NR1 mRNA表达的变化.结果 各辐射组大鼠在水迷宫检测第4天寻找安全平台的逃避潜伏期分别为1 h/d[(12.29±1.36)s]、2 h/d[(17.99±2.25)s]、3 h/d[(24.66±5.56)s],均明显长于空白对照组[(8.8±1.66)s](P＜0.05);1 h/d、2 h/d和3 h/d辐射组大鼠海马神经元均排列紊乱,NR1阳性细胞比率明显低于空白对照组,海马组织NR1蛋白[分别为(0.122±0.026)、(0.102±0.023)、(0.060±0.009)]及其mRNA[分别为(0.46±0.07)、(0.35±0.05)、(0.12±0.02)]表达水平较空白对照组[(10.70±0.11)、(0.68±0.11)]均明显降低(P＜0.05).而假辐射组大鼠各项指标与空白对照组相比均无显著差异(P＞0.05).结论 2000μW/cm2电磁辐射可导致大鼠学习记忆功能下降,其机制可能与大鼠海马组织NR1蛋白及其mRNA的表达降低有关.

Abstract：

Objective To evaluate the effects of electromagnetic irradiation of 2000 μW/cm2 exposure on mRNA and protein expression levels of immunoreactive protein and mRNA of NMDAR1 in rats hippocampal,and to explore the impaired mechanism of electromagnetic irradiation on learning and memory.Methods Rats were randomly divided into normal control group, sham-radiated group, and 1 h/d, 2 h/d, and 3 h/d radiation groups.The rats in the radiation groups were fixed and recieved microwave exposure of 2000 μW/cm2, then their learning and memory abilities were tested by Morris water maze experiment, the change of NR1 protein in hippocampal neurons of each group of rats was measured with immunohistochmistry and western blot techniques, and the expression of NR1 mRNA in hippocampus was determined by RT-PCR.Results In the water maze test,compared with the normal control group (8.8 ± 1.66 ), the escape latency of three radiated groups rats ( 1 h/d ( 12.29 ±1.36) s,2 h/d ( 17.99 ±2.25) s,and 3 h/d (24.66 ±5.56) s) were significantly longer (P＜0.05).In the radiation group,the hippocampal neurons of rats showed evident reduction in the ratio of NR1 positive cells,irregular,and arrayed in disorder.Moreover,compared with the normal control group ( (0.70 ±0.11 ), (0.68 ±0.11 ) ) ,the expession of NR1 protein ( 1 h/d (0.122 ±0.026) ,2 h/d (0.102 ±0.023) ,and 3 h/d (0.060 ± 0.009) ) and its mRNA ( 1 h/d (0.46 ±0.07) ,2 h/d (0.35 ±0.05) ,and 3 h/d (0.12 ±0.02) ) in hippocampal neurons was significantly decreased (P＜0.05).Among the indicators, there was no significant difference between sham-radiated group and normal control group.Conclusions Electromagnetic irradiation of 2000 μW/cm2 exposure can impair the learning and memory abilities of rats possibly through a mechanism correlated with the lower expression of NR1 protein and its mRNA in hippocampus.     

CREB和NMDA受体在致痫大鼠学习记忆功能改变中的变化及意义

目的 探讨核转录因子环磷腺苷反应元件结合蛋白(CREB)和兴奋性氨基酸NMDA受体亚型NR1在癫痫后学习记忆功能改变中的变化及意义.方法 制备戊四氮点燃大鼠癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)和慢性癫痫(chronic epilepsy,CEP)模型,采用交替电刺激Y迷宫试验动态观察大鼠癫痫后学习记忆功能变化.RT-PCR方法检测大鼠海马组织CREB和NR1 mRNA的表达,免疫组化染色观察大鼠海马磷酸化的CREB蛋白水平表达变化.结果 SE大鼠致痫成功后24 h交替电刺激Y迷宫试验错误次数增多(P＜0.05),30 d恢复正常.CEP大鼠24 h和30 d错误次数均有所增加(P＜0.05).同时伴有海马组织NR1 mRNA和CREB mRNA表达的下调(P＜0.05)及磷酸化CREB蛋白水平表达量的下降(P＜0.05).结论 海马组织NMDA受体和CREB的表达变化可能参与了癫痫大鼠学习记忆功能改变的病理生理过程.     

2,2’,4,4’-四溴联苯醚染毒对大鼠学习记忆及海马NMDA受体亚基基因NR1和NR2B的影响

目的:观察2,2’,4,4’-四溴联苯醚(2,2’,4,4’-tetrabromo-diphenyl ethers,BDE-47)染毒后大鼠学习记忆及海马NMDA受体亚基NR1和NR2B的变化,探讨BDE-47暴露对学习记忆的影响及其机制。方法:将80只SD雄性大鼠随机分为空白对照组、溶剂对照组、BDE-47(0.1 mg/Kg、0.5 mg/Kg和1.0 mg/Kg)剂量组,每组16只,每天灌胃1次,持续30 d;用Morris水迷宫检测学习记忆,用免疫组化检测大鼠NMDA受体亚基NR1和NR2B的表达,用RT-PCR检测大鼠NMDA受体亚基NR1和NR2B的基因表达。结果:在水迷宫试验中:与溶剂对照组比较,BDE-47染毒各组的平均逃避潜伏期明显增加、穿越平台的次数和在原平台象限停留的时间明显减少(P<0.05),且呈剂量-反应关系(P<0.05)。免疫组化结果:与溶剂对照组比较,各染毒组大鼠海马NMDA受体亚基NR1和NR2B表达明显减少(P<0.05),且呈剂量-反应关系(P<0.05)。RT-PCR结果与溶剂对照组比较,BDE-47染毒各组大鼠海马NMDA受体亚基NR1的基因表达明显减少(P<0.05);各染毒剂量组之间,随着染毒剂量的增加,大鼠海马NMDA受体亚基NR1和NR2B的基因表达减少(P<0.05)。结论:BDE-47染毒后大鼠学习记忆能力降低,可能与大鼠海马NMDA受体亚基NR1和NR2B减少有关。     

补阳还五汤对血管性痴呆大鼠海马NR2B蛋白及其mRNA表达的影响

目的 观察补阳还五汤对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位2B(N-Methyl-D-asparate receptor subunit 2B,NR2B)蛋白及其mRNA表达的影响,探讨补阳还五汤治疗VD的机制.方法 四血管阻断(four vessel occlusion,4VO)法制备VD大鼠模型.设立假手术组、VD模型组、尼莫地平组(20mg·kg-1·d-1,灌胃30d)和补阳还五汤治疗组(50g生药·kg-1·d-1,灌胃30d).Morris水迷宫检测大鼠学习记忆能力的改变,免疫组化和Western-Blot技术检测大鼠海马神经元NR2B蛋白的变化,实时荧光定量PCR技术检测大鼠海马NR2B mRNA表达的变化.结果 与假手术组大鼠逃避潜伏期[(24.18±7.90)s]和平均探索次数[(7.99±1.32)次/min]相比,VD模型组大鼠逃避潜伏期[(51.25±18.28)s]延长和平均探索次数[(5.26±0.74)次/min]减少(P<0.05);补阳还五汤组[(25.91±9.56)s和(7.52±1.27)次/min]明显改善了模型大鼠学习、记忆成绩(P<0.05);假手术组、尼莫地平组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性(P>0.05).VD模型组大鼠的NR2B蛋白(0.33±0.06)及其mRNA(593±53)表达水平较假手术组(0.71 ±0.13)、(5887±501)明显降低(P<0.05);补阳还五汤治疗组大鼠海马的NR2B蛋白(0.66±0.11)及其mRNA(5692±482)表达水平较模型组的表达明显升高(P<0.05);假手术组、尼莫地平组组与补阳还五汤治疗组之间差异无显著性(P>0.05).结论 补阳还五汤可以改善VD大鼠学习记忆能力,其机制可能与减轻脑缺血再灌注对海马CAI区神经元的损伤及促进海马组织NR2B蛋白及其mRNA的表达有关.     

七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M,表达和认知功能的影响

目的 探讨不同剂量七氟烷对老年大鼠海马毒蕈碱受体M.受体亚型(mAChR M1)表达的影响及与认知功能的关系.方法 40只SD大鼠随机分为空白对照组(Con组)、1.5%七氟烷Ⅰ组(1.5%Sev Ⅰ组)、1.5%七氟烷Ⅱ组(1.5%Sev Ⅱ组)、3.0%七氟烷sev Ⅰ组(3.O%Sev Ⅰ组)和3.0%七氟烷Ⅱ组(3.0%SevⅡ组),每组8只.Con组吸入空气2h,1.5%Sev Ⅰ组、1.5%Sev Ⅱ组、3.0%Sev Ⅰ组和3.0%SevⅡ组分别吸入1.5%或者3.0%七氟烷2h.于给药后1 d或7d采用Y型迷宫实验测试学习记忆能力后即刻处死取脑,分离海马,通过RT-PCR法检测mRChR M1 mRNA表达,免疫组化法检测海马神经细胞M1受体的表达.结果 3.0%sev Ⅰ组学习次数,训练时间[分别为(41.83±4.30)次,(48.76±1.24)min]高于对照组[分别为(33.50±4.80)次,(38.24±0.68)min],差异有显著性(P<0.05),海马mAChR M1(42.12±0.66)和mAChR M1mRNA表达低于对照组mAChR M1(70.21±0.45)和mAChR M1 mRNA表达水平,差异有显著性(P<0.05).结论 七氟烷麻醉时,可以引起老年大鼠学习记忆能力一过性降低,可能与大鼠海马mAChR M1下调有关.     

3％七氟烷对老年大鼠认知功能的影响

目的探讨吸入3%七氟烷对老年大鼠认知功能的影响。方法 30只老年SD雄性大鼠随机分为对照组(给予吸入30%氧气6 h)和S1组(给予3%七氟烷,30%氧气吸入6 h,1 d后行实验),S2组(给予3%七氟烷,30%氧气吸入6 h,7 d后行实验),每组各10只。分别在大鼠苏醒后1 d或7 d进行水迷宫实验,观察大鼠行为学变化。将大鼠脑组织切片,记录并比较单位长度海马神经元树突棘个数。通过Western Blot法测定大鼠海马NMDA受体NR2A亚基、NR2B亚基的表达。结果 S1组与对照组比较逃逸潜伏期延长、穿越平台次数减少(P<0.05)。S2组组逃逸潜伏期、穿越平台次数与对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。麻醉组单位长度下海马神经元的树突棘数量与对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。S1组与对照组比较NR2A和NR2B表达明显下调(P<0.05)。结论 3%七氟烷造成麻醉后1 d老年大鼠认知功能障碍,但不造成麻醉后7 d老年大鼠认知功能障碍。     

七氟醚对缺氧无糖损伤大鼠海马 NR1亚基mRNA表达的影响

目的探讨七氟醚对缺氧无糖(oxygen and glucose deprivation，OGD)损伤大鼠海马NMDA受体NR。亚基mRNA表达的影响。方法大鼠海马脑片随机分为3组(n=3)，用RT—PCR方法检测对照组、缺氧组及七氟醚组大鼠离体海马脑片OGD损伤14min恢复氧糖供应孵育1、2、4h后NMDA受体NR1亚基mRNA的表达。结果恢复氧糖供应1、2h后NR1亚基mRNA的表达3组无明显差异，而缺氧组4h后NR1亚基mRNA的表达增高，七氟醚组恢复氧糖供应后4hNR1亚基mRNA的表达明显降低。结论七氟醚可通过下调OGD损伤引起的NR1亚基mRNA的表达发挥脑保护作用。     

东莨菪碱与氯胺酮对幼鼠海马乙酰胆碱酯酶和NMDA受体2B亚基mRNA的相互影响

目的 探讨东莨菪碱与氯胺酮对幼鼠海马乙酰胆碱酯酶(AchE)和NMDA受体2B亚基mR-NA(NR2BmRNA)的相互影响.方法 1月龄筛选合格SD大鼠40只随机分为正常对照组(C组)、东莨菪碱组(S组)、氯胺酮组(K组)、东莨菪碱加氯胺酮组(SK组).S组、SK组腹腔注射东莨菪碱0.8mg/kg;30min后K组、SK组腹腔注射氯胺酮50mg/kg,随后每30 minK组、SK组腹腔注射氯胺酮25mg/kg,共追加2次;C组腹腔注射等体积的生理盐水.采用Y型迷宫进行学习能力测试,测试结束后处死大鼠分离大鼠海马取右侧海马应用比色法测定AchE活性,取左侧海马应用RT-PcR测定NR2BmRNA的表达.结果 东莨菪碱加氯胺酮组大鼠学习障碍加重,训练时间和训练次数分别为(45.3±2.9)min、(39.4±3.2)次,高于东莨菪碱组[(41.3±2.9)min、(35.0±4.5)次]和氯胺酮组[(40.5±2.3)min、(36.0±3.7)次];东莨菪碱加氯胺酮组AchE活性测定和NR2BmRNA的表达分别为2.46±0.30,0.72±0.05,高于东莨菪碱组(1.98±0.25,0.52±0.04)和氯胺酮组(1.91±0.28,0.60±0.04);均差异有显著性(P<0.05).结论 东茛菪碱与氯胺酮合用后对幼鼠海马AchE和NR2BmRNA产生相互作用,抑制学习呈协同作用.     

丁苯酞对酒精依赖大鼠海马硫化氢含量及NMDA受体2B亚基表达的影响

目的 研究丁苯酞(NBP)对洒精依赖大鼠海马硫化氢(H2S)含量及N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体2B亚基(NR2B)表达的影响.方法 84只SD雄性大鼠随机分为6组,除正常组外,各组饮含6%(V/V)酒精水溶液28 d,饮6%(V/V)酒精水溶液14 d后,NBP低、中、高剂量组大鼠灌胃不同剂量NBP,检测戒断症状评分、海马组织H2S含量、胱硫醚β-合酶(CBS)活性以及NR2B的表达.结果 NBP中剂量组大鼠戒断症状评分[(12.27±1.19)分]、H2S含量[(30.25±8.82)nmol/g]、CBS活性[(72.44 ±7.46)nmol·g-1·h-1]及NR2B mRNA的表达(19.47 ±0.86)与实验对照组大鼠戒断症状评分[(14.09±2.21)分]、H2S含量[(44.50±6.65)nmol/g]、CBS活性[(79.06±4.57)nmol·g-1·h-1]及NR2B mRNA的表达(29.13±1.39)相比均降低,差异有显著性(P<0.05).NBP高剂量组大鼠戒断症状评分[(12.18±1.08)分]、H2S含量[(33.00±5.38)nmol/g]、CBS活性[(67.81±9.37)nmol·g-1·h-1]及NR2B mRNA的表达(23.12 ±1.86)与实验对照组大鼠相比均降低,差异有显著性(P<0.05).结论 NBP能够减轻酒精依赖大鼠的戒断症状,可能与NBP抑制H2S/CBS体系表达及抑制NR2B mRNA表达有关.

Abstract：

Objective To investigate the effect of butylphthalide (NBP) on H2S content and the expression of NR2B in the hippocampus of alcohol dependence rats. Methods A total of 84 SD male rats were randomly divided into 6 groups. Except for the normal group, other groups were subjected to alcohol solution with concentration of 6% ( V/V) for 28 d. Drug intervention began at the 14th day,and rats in the low,medium,high dose group were treated with NBP with a different concentration. Erden abstinence scoring was used to evaluate the rats withdrawal symptom. H2S content was measured in one side of hippocampus and CBS activity was tested in the other side of hippocampus. Hippocampus of 3 rats from each group was used to investigate NR2B mRNA level. Results Withdrawal symptom score ( 12.27 ± 1. 19),H2S content(30. 25 ±8.82), CBS activity (72. 44 ±7. 46) and NR2B mRNA expression( 19. 47 ±0. 86) in medium dose NBP group rats were lower than withdrawal symptom score(14.09 ±2.21) ,H2S content(44. 50 ±6. 65) , CBS activity(79. 06 ±4. 57) and NR2B mRNA expression (29. 13 ±1.39) in experimental control group (P<0.05). Withdrawal symptom score(12. 18 ±1.08) ,H2S content(33.00 ±5.38) ,CBS activity(67. 81 ±9. 37) and NR2B mRNA expression(23. 12 ± 1. 86) in high dose NBP group rats were lower than experimental control group (P < 0. 05). Conclusion NBP can reduce withdrawal symptoms of alcohol dependence rats,may be related to decreased expression of H2S/CBS system, and NR2B mRNA expression.     

大鼠颞叶癫痫点燃后海马NR2A mRNA、NR2B mRNA的时空表达变化

目的：探讨海马NMDA受体NR₂A、NR₂B亚单位的时空表达变与颞叶癫痫后脑损伤的关系。方法:将雄性Wistar大鼠随机分为3组，正常对照组5只，假手术组和海人酸(KA）致痫组各30只，采用KA杏仁核微量注射方法建立经典的大鼠颞叶癫痫点燃模型；假手术组和KA致痫组分别按点燃后6、24、72 h和7、14、21 d时间点分为6组，每组5只。采用原位杂交方法检测海马神经元NR₂A mRNA、NR₂B mRNA时程表达变化。结果：癫痫组海马各区NR₂A mRNA阳性细胞表达率均高于假手术组(P<0.05)，于点燃后21 d逐步恢复正常。NR₂B mRNA在癫痫组海马DG和CA₁区阳性细胞表达率总体上高于假手术组(P<0.05)，在CA3区与假手术组比较差异无显著性。回归分析显示NR₂A mRNA和NR₂B mRNA的阳性细胞表达率与颞叶癫痫存在明显的正相关关系（β=0.154，P=0.0001），NR₂B mRNA表达与颠叶癫痫的发生存在正相关关系(β=0.102，P=0.0001)。结论：颞叶癫痫大鼠海马NR₂A mRNA、NR₂B mRNA存在时空差异性表达改变可能与颞叶癫痫及其脑损伤过程有关。     

补肾方药延缓老年大鼠学习记忆减退的分子机制

目的:观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠空间学习记忆能力,氨基酸神经递质以及NMDA受体、Ca2+/CaMKⅣ信号通路相关分子的mRNA表达变化的影响,以探讨老年大鼠学习记忆减退的分子机制以及补肾方药的药理作用。方法:以青年大鼠(5月龄)为对照,以自然衰老大鼠(23月龄)为模型;Morris水迷宫法观察大鼠空间学习记忆能力;HPLC-荧光法检测大鼠杏仁核、海马氨基酸类神经递质含量;RT-PCR法检测大鼠海马NR1、CaMKⅣ、CREB、c-fos mRNA的表达变化;观察补肾方药左归丸、右归丸对老年大鼠上述各项指标的影响。结果:与青年对照组比较,老年大鼠上述指标都有不同程度的异常变化,而左归丸、右归丸可改善老年大鼠退化的空间学习记忆能力;降低老年大鼠杏仁核、海马Glu的含量;显著上调老年大鼠NR1、CaMKⅣmRNA的表达,对CREB及c-fos mRNA的表达也有升高。结论:左归丸、右归丸可以通过降低老年大鼠杏仁核、海马Glu含量,纠正NMDA受体介导的CaMKⅣ信号通路的异常变化,改善老年大鼠空间学习记忆能力,延缓衰老。     

新生大鼠反复惊厥对NMDA受体表达的长期影响

目的：研究反复惊厥对大鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体表达，以及成年期认知功能和惊厥阈的长期影响。方法：生后6d(用P6表示，下同)的Wistar大鼠随机分成两组，每组6只，惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次，每次持续30min，连续6d；对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。两组大鼠于P60-P65行Morris水迷宫实验，检测大鼠的学习记忆功能。于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑(PTZ)测定大鼠的惊厥阈。随即断头处死大鼠，分离大脑皮质和海马，匀浆提取细胞膜蛋白，应用免疫印记法测定NMDA受体亚基l(NRl)和NR2A-2D表达的变化。结果：从P6l至P65，两组大鼠寻找平台时间均逐渐缩短，惊厥组大鼠在P65的平均寻找平台时间较对照组显著延长。惊厥组大鼠注射PTZ后发生惊厥的潜伏期与对照组比较差异无显著性。在大脑皮层，惊厥组大鼠较对照组NRl和NR2B表达水平明显下调，在海马这两种亚基表达水平无明显改变，在大脑皮层和海马区，惊厥组较对照组NR2A表达水平明显下调，NR2C表达水平明显上调。两组在皮层和海马均无NR2D表达。结论；新生大鼠反复惊厥可导致远期认知障碍，同时伴有NMDA受体的数量和结构上的长期改变，NMDA受体表达的这种改变可能在发育期惊厥导致的脑长期认知功能损害中起重要作用。     

七氟醚预先给药对心肌缺血再灌注损伤大鼠海马脑区NMDA受体的影响

 目的 观察七氟醚对心肌缺血再灌注损伤大鼠海马脑区N-甲基-D-天冬氨酸受体（NMDA受体）亚单位NR1和NR2B mRNA表达的影响。方法 32只老年Wistar大鼠随机分为4组：对照组（A组）、假手术组（B组）、急性心肌缺血再灌注组（C组）和七氟醚预先给药组（D组）。用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法定量大鼠海马脑组织NMDA受体亚单位NR1和NR2B的基因表达。结果 与A相比,C、D组NR1亚单位mRNA和NR2B亚单位mRNA基因的表达明显增加,与C相比,D组NR1亚单位 mRAN的表达降低。结论 七氟醚对老年心肌缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用可能与海马脑区NMDA受体NR1基因下调有关。     

NMDA受体亚单位NR1、NR2A和NR2B mRNA在成年大鼠海马的表达

目的 研究NMDA受体亚单位（NR1，NR2A和NR2B）mRNA在正常成年大鼠海马结构各区的表达及形态特点。方法 原位核酸分子杂交组织化学反应和图像处理与分析。结果 NR1，NR2A和NR2BmRNA在正常大鼠海马结构各区锥体细胞和颗粒细胞普遍表达，其中NR1mRNA的表达最强，NR2AmRNA的表达最弱，NR1mRNA在齿状回（DG）的表达水平明显强于CA1区和CA3区；NR2AmRNA在CA1区的表达水平则强于CA3区和DG；NR2BmRNA在海马各区的表达水平基本相同。结论 NR1，NR2A和NR2BmRNA在正常成年大鼠海马各区的表达模式不同，其中NR2AmRNA在海马CA1区以及NR1mRNA在DG高表达的分布特点可能与海马的学习，记忆等生理功能以及选择性易损现象有关。