FN及其受体整合素α5在小鼠肾小体发育过程中的表达

目的 观察细胞外基质的重要成分纤维粘连蛋白(FN)及其受体整合素α5在小鼠肾小体发育过程中的表达,探讨它们在肾小体发育过程中的作用和相互之间的关系.方法 选取胚龄(E)12、14、16、18d和生后日龄(P)1、3、7d共7组小鼠,每组8只.E12d组小鼠取全胚,其余各组小鼠取左侧肾脏经固定、脱水、定向包埋等步骤后制备石蜡切片,行免疫组织化学染色和体视学分析.取各组小鼠右侧肾脏液氮速冻后,-80℃保存,用免疫印迹方法 检测FN和整合素α5的含量.结果 免疫组织化学染色结果 显示,FN表达于除逗号小体以外的各期肾小体基膜.整合素α5在不同胚日龄小鼠肾小体的上皮细胞和内皮细胞都有一定程度表达.体视学测量结果 显示FN表达的面密度值和整合索α5表达的体密度值都随着肾脏的发育逐渐增大.免疫印迹结果 显示,FN和整合素α5蛋白的含量都随肾脏的发育而逐渐增加.结论 FN和整合素α5在小鼠肾小体的发育和成熟过程中具有一定的时空性表达,对肾小体基膜的发育起一定作用.     

小鼠肾小管发育中AQP-7表达的研究

目的：观察水通道蛋白7（aquaporin-7,AQP-7）在小鼠肾小管发育过程中的表达,探讨其与肾小管发生发育的关系。方法选取胚龄（E）12、14、17、18 d 胎鼠及生后（P）1、3、7、14、24、40、70 d 仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术观察 AQP-7在肾小管中的表达;体视学方法测量 AQP-7阳性表达的面密度值;应用免疫印迹技术检测 AQP-7在各发育阶段肾组织中的含量变化。结果免疫组化结果显示 AQP-7在 E14 d 表达于发育中的肾小管,随后表达在近端小管,P14 d 后主要定位在皮质和外髓部近直小管的刷状缘,生肾区与内髓则无阳性表达;体视学测量结果显示随着胚（日）龄的增加,AQP-7在肾小管管腔面的面密度值逐渐增加,P24 d 达最大值,后趋于稳定;免疫印迹结果证实,AQP-7在肾的表达量逐渐增加,P24 d 达峰值后趋于稳定。结论AQP-7在小鼠肾小管发育过程中存在时空性的表达,对发育后期小鼠肾的水和甘油平衡起重要调节作用。     

成纤维细胞生长因子受体1和受体2在小鼠肾发育中的表达

目的 观察成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)及受体2(FGFR2)在小鼠肾发育过程中的时空表达,探讨其与肾发育的关系. 方法 选取胚龄E12、14、16、18d的胎鼠和生后N1、7、14、21、40d的仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定位观察;应用图像分析技术、体视学方法及免疫印迹技术对肾组织中FGFR1和FGFR2的表达进行定性分析及定量检测.结果 免疫组化结果显示,胚龄E12d时FGFR1和FGFR2即开始表达.FGFR1在发育各期的肾小体(即逗号小体、S小体、毛细血管襻期肾小体、未成熟期肾小体及成熟期肾小体)、远端小管和集合管均有表达,而在近端小管未见表达.FGFR2主要在远端小管表达,在各期发育肾小体、近端小管和集合管未见表达.图像分析结果显示,随着肾脏的发育,FGFR1、FGFR2表达逐渐增高.体视学及免疫印迹检测结果显示,FGFR1和FGFR2的含量都随着肾脏的发育逐渐增加.结论 FGFR1和FGFR2对小鼠肾发育所起的作用不同,FGFR1与肾小体、远端小管和集合管发育相关,而FGFR2主要与远端小管发育相关.     

成纤维细胞生长因子7、10及其受体2Ⅲb在小鼠肾脏发育中的表达

目的观察成纤维细胞生长因子7、10(FGF7、FGF10)及其受体2Ⅲb(FGFR2Ⅲb)在不同发育阶段的小鼠肾脏的表达变化情况,探讨其与肾脏发育的关系。方法选取胚龄E12、14、16、18d胎鼠和生后N1、3、7、14、21和42d仔鼠肾脏,应用免疫组织化学技术对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定位观察;应用体视学方法及Western blotting法对小鼠肾组织中FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb表达进行定性分析和定量检测。结果免疫组织化学法显示,E12d时,FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb开始在输尿管芽微弱表达;随着肾脏发育成熟,三者主要表达于远端小管和集合管。FGF10在近曲小管表达,近直小管无表达;FGF7和FGFR2Ⅲb在近端小管无表达。生后肾组织及发育各阶段肾小体未见FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb的表达。体视学和Western blotting结果显示,从E14d至N7d,三者在肾脏的表达量明显增加,N7d至N42d表达量逐渐减少。结论 FGF7、FGF10和FGFR2Ⅲb在肾脏发生和发育过程中可能起着重要作用。FGF10主要作用于近曲小管、远端小管和集合管,而FGF7和FGFR2Ⅲb主要作用于远端小管和集合管。     

纤维连接蛋白与TGF-βⅡ型受体在小鼠肾小体发育中的表达

目的 观察纤维连接蛋白(Fn)及转化生长因子βⅡ型受体(TGF-βⅡ)在小鼠肾小体发育中的时空性表达.方法 采用免疫组织化学技术结合体视学方法测定不同胚龄(E,12、14、16和18d)及生后日龄(P,1、3、7、14、21、28和42d)小鼠肾小体Fn和僻TBF-βⅡ的表达及其含量变化.结果 Fn在除逗号小体以外的各期肾小体基底膜处均有表达,TGF-βRⅡ在各期肾小体内均有表达,且两者的表达量均随着肾小体的发育逐渐增加.结论 Fh和TGF-βRⅡ在小鼠肾小体发育中的表达具有一定的时空性,推测两者在小鼠肾小体发育中起一定作用.     

过表达细胞间黏附分子1的间充质干细胞治疗小鼠1型糖尿病性肾病的实验研究

目的 探讨过表达细胞间黏附分子1(intercellular cell adhesion molecule-1,ICAM-1)的间充质干细胞对小鼠1型糖尿病性肾病(DN)的疗效.方法 小鼠随机分为正常对照组(NC组)、DN组、C3治疗组、C3-MIG R1治疗组和C3-MIGR1-ICAM-1治疗组.链脲佐菌素(STZ)腹腔注射小鼠建立DN动物模型,Masson染色检测小鼠肾脏病理改变.分别经尾静脉按1×105/只输注小鼠MSC细胞系(C3H10T1/2)、转染空载体的小鼠MSC(C3H10T1/2-MIGR1/MSC)和过表达ICAM-1的小鼠MSC(C3H10T1/2-ICAM-1/MSC),Masson染色检测模型小鼠肾纤维化改变,荧光显微镜观察MSC向肾脏归巢情况.用实时荧光定量PCR (Q-PCR)检测相关信号分子转化生长因子β1(TGF-β1)、SMAD2、胶原蛋白1(collagen1)的表达.结果 Masson染色结果显示,C3-MIGR1-ICAM-1治疗组中纤维化成分较DN组显著减少,提示过表达ICAM-1的MSC可显著降低小鼠肾纤维化程度.MSC移植治疗后的第3天和第7天,冰冻切片结果均可见MSC归巢至肾脏,但归巢细胞数均无统计学意义.Q-PCR检测相关信号分子的表达,结果显示,与正常对照组相比,DN小鼠肾内胶原蛋白1、TGF-β1、SMAD2表达量均显著升高(P<0.01),而过表达ICAM-1-MSC组的胶原蛋白1、TGF-β1、SMAD2的表达均显著低于DN组(P<0.01).结论 过表达ICAM-1间充质干细胞对DN肾具有一定保护作用.     

维甲酸改善单侧输尿管梗阻大鼠肾脏损害的研究

目的:探讨维甲酸对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质损害的保护作用.方法:成年清洁级雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组(S组)、UUO组(U组)和治疗组(T组),每组15只.假手术组行左输尿管游离,不结扎;UUO组和治疗组行左输尿管结扎.治疗组术后每天给予5 mg/kg全反式维甲酸(ATRA)皮下注射,假手术组和UUO组注射同体积溶剂.于术后第3、7、14 d观察肾小管损害、肾间质炎性细胞浸润程度,免疫组化法观察病变肾组织趋化因子RANTES和TGF-β1表达.结果:与UUO组相比,治疗组肾间质炎性细胞浸润和肾小管损害程度显著减轻(P＜0.01),肾组织RANTES和TGF-β1表达显著降低(P＜0.01～0.05).结论:维甲酸能减少UUO大鼠肾间质炎性细胞浸润,减轻肾小管损害,抑制RANTES和TGF-β1表达,从而减轻肾脏炎症反应和纤维化.     

灯盏花素对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的 观察灯盏花素对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏间质纤维化的保护作用及机制.方法 将72只Wistar大鼠随机均分为假手术组、UUO组和灯盏花素组.后两组大鼠结扎并剪断左侧输尿管制作UUO模型,假手术组仅游离左侧输尿管后缝合.灯盏花素组于手术前1d至处死当天给予灯盏花素注射液[100mg/(kg·d)]腹腔注射(2.5ml/次,2次/d).假手术组及UUO组用同体积生理盐水腹腔注射.采用HE染色观察术后4、7、14d肾脏组织的病理改变,免疫组化及Western blotting检测转化生长因子β1(TGF-β1,)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)在肾脏的表达.结果 假手术组的各时间点肾组织未见病理改变.UUO组术后4、7d,肾间质相对面积增加,且有炎性细胞浸润;术后14d可见肾小管明显扩张,肾间质明显纤维化.与同时间点的UUO组相比,灯盏花素组肾间质相对面积明显下降.与假手术组比较,UUO组和灯盏花素组的TGF-β1和α-SMA蛋白表达水平均有明显增加(P<0.01),但灯盏花素组的表达低于UUO组(P<0.05).结论 灯盏花素可以通过下调TGF-β1及α-SMA的表达减轻UUO术后肾脏间质纤维化.     

缬沙坦对肾单位不同节段衰老相关基因表达的影响

目的：观察长期抑制肾素-血管紧张素系统(RAS)对老龄大鼠肾单位不同节段细胞外基质代谢相关调控基因表达的影响。方法：应用自动激光微分离方法分离大鼠肾脏的肾小球及肾小管,观察转化生长因子(TGF-β1)和纤维连接蛋白(FN)的基因表达变化。15月龄大鼠口服缬沙坦(25mg／kg)治疗至24月龄,与3月龄及24月龄正常大鼠对比观察TGF-β1及FN基因表达的变化。结果:24月龄大鼠肾小球及肾小管的TGF-β1及FN基因表达较3月龄大鼠明显增加。缬沙坦治疗对老龄大鼠肾小球的TGF-β1 mRNA表达无明显影响,但明显下调了肾小管的TGF-β1、肾小球及肾小管的FN mRNA表达。结论:TGF-β1及FN基因表达变化涉及大鼠肾脏肾小球、肾小管的衰老相关性改变,肾脏局部RAS激活在肾单位的不同节段对上述基因表达的调控可能存在着不同作用。     

锁骨病变的X线诊断

锁骨的发生和发育 人胚第3周出现4个突起.第四周发育成肢芽.肢芽的间充质原基软骨骨化而形成软骨雏形。它包括肩带骨(上肢带骨)、盆带骨(下肢     

Quantitative analysis of the nephron during human fetal kidney development

BACKGROUND: The development of human kidney is a complex process. The number, shape, size, and distribution of nephrons as functional units in a kidney, provide some important information about the organization of the kidney. The aim of this study was to extend the knowledge of the developing human kidney by studying nephrons in the kidney's cortex during gestation. METHODS: Kidney tissue specimens of 32 human fetuses, the gestational age from IV lunar month (LM IV) to LM X, were analysed. Specimens were divided in ten groups based on gestational age. Stereological methods were used at the light microscopic level to estimate the volume densities of the corpuscular and tubular components of the nephron in the cortex of the developing human kidney. RESULTS: Nephron polymorphism was the main characteristic of the human fetal kidney during development. In younger fetuses, just below the renal capsule, there was a wide nephrogenic zone. It contained the condensed mesenchyme and terminal ends of the ureteric bud. Nephrons, in the different stages of development, were located around the ureteric bud which branched in the cortical nephrogenic zone and induced nephrogenesis. More mature nephrons were located in the deeper part of the cortex, close to the juxta-medullary junction. During gestation, nephrogenesis continually advanced, and the number of nephrons increased. Glomeruli changed their size and shape, while the tubules changed their length and convolution. Renal cortex became wider and contained the more mature glomeruli and the more convoluted tubules. The volume density of the tubular component of the nephron increased continually from 10.53% (LM IVa) to 27.7% (LM X). Renal corpuscles changed their volume density irregularly during gestation, increasing from 13% (LM IVa) to 15.5% (LM IVb). During the increase of gestational age, the volume density of corpuscular component of the nephron decreased to 11.7% (LM VIII), then went on increasing until the end of the intrauterine development (LM X) when corpuscles occupied 16.73% of the cortical volume. The volume density of the developing nephrons (corpuscular and tubular portion) showed the significant positive correlation (r = 0.85; p<0.01) with gestational age. CONCLUSION: The present study was one of few quantitative studies of the human developing nephron. Knowledge about the normal development of the human kidney should be important for the future medical practice.     

Renal agenesis: report of an interesting case

Renal agenesis is generally thought to result from a lack of induction of the metanephric blastema by the ureteral bud, which may be secondary to ureteral bud maldevelopment and/or to a problem with the formation of the mesonephric duct. Uncommonly, post-natal involution of multicystic dysplastic kidneys results in solitary kidney. Unilateral renal agenesis may be associated with ipsilateral genitourinary anomalies and VATER abnormalities. The interest of this case lies in the association of unilateral renal agenesis with the presence of an ipsilateral pelvic dilated ureter, ipsilateral seminal vesicle hypoplasia and absence of the vas deferens.     

Slit-Robo信号在涎腺腺样囊性癌嗜神经侵袭中的表达和意义

目的：了解涎腺腺样囊性癌（SACC）中Slit蛋白和其受体Robo的表达并探讨其在肿瘤嗜神经侵袭中的意义。方法：对34例SACC进行组织分型、嗜神经性分组，同时应用免疫组化方法，对SACC中Slit／Robo的表达进行检测。结果：有嗜神经现象、临床复发的SACC病例中Slit／Robo的表达较无嗜神经现象、临床无复发的病例显著升高（P〈0．05）。结论：Slit／Robo在不同分组SACC中均存在不同程度的阳性表达。Slit／Robo与SACC的嗜神经性、临床复发具有密切关系。     

Cystic dilatations of the upper urinary tract: a radiologist''s developmental model

The ureteral bud in the embryonic kidney grows and branches dichotomously for 15 generations. This branching tree is modified by a series of narrowings and expansions and becomes the ureter, the renal pelvis, the calyces, and the collecting tubules. Simultaneously, the ureteral bud induces the formation of nephrons. If many of the renal cystic diseases and congenital dilatations of the renal pelvis and ureter are viewed as a series of growth disturbances along the branching ureteral bud, their morphology and pathophysiology become clarified even though their etiology is often not known.     

后肾腺瘤MSCT诊断

目的 探讨后肾腺瘤MSCT表现.方法 收集本院经手术病理证实的5例后肾腺瘤影像资料,结合国内外文献,对病变部位、大小、形态、密度及强化特征进行回顾性分析.结果 5例后肾腺瘤,男1例,女4例,均为单侧发病,其中右肾2例,左肾3例,肾上极2例,极间区2例,肾下极1例.直径2.9~8.4 cm,平均4.8 cm.圆形3例,卵圆形2例.平扫为稍低密度2例,等密度2例,稍高密度1例.1例病灶边缘出现少许沙砾样钙化.1例并发肾乳头状癌.4例行平扫及增强扫描,1例仅为平扫,增强后轻度强化3例,中度强化1例,较为均匀强化3例,不均匀强化1例,4例均出现延迟强化特征.结论 后肾腺瘤的MSCT表现具有一定特征性,术前正确认识有利于指导手术方案制订.     

肝细胞肝癌组织及细胞株中PTPeta的表达及意义研究

目的 检测人肝细胞肝癌组织及细胞株SMMC7721中蛋白酪氨酸磷酸酶eta(PTPeta)的表达,观察肿瘤细胞生长密度对其表达的影响.方法 采用免疫组化方法检测肝细胞肝癌组织及SMMC7721细胞中PTPeta蛋白的表达;采用RT-PCR法检测不同生长密度(1×103、5×103、l×104、5×104/cm2)SMMC7721细胞中PTPeta的表达变化情况.结果 免疫组化检测结果表明肝细胞肝癌组织中PTPeta表达呈阳性,SMMC7721细胞中存在PTPeta表达,且定位于细胞膜;RT-PCR检测结果显示,当细胞密度为l×103、5×103、l×104、5×104/cm2时,PTPeta mRNA的表达量分别为0.425±0.031、0.659±0.041、0.771±0.043、0.885±0.045,PTPeta表达随着肿瘤细胞生长密度的增高而增加,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论 PTPeta在肝细胞肝癌组织及细胞中表达,且随肿瘤细胞生长密度增高而表达增加.PTPeta 可能通过增加肝癌细胞黏附、维持恶性肿瘤细胞内环境稳定等,在恶性肿瘤细胞增殖及播散转移的过程中起重要作用.     

存活素蛋白Survivin在SD大鼠牙胚发育中的表达

目的观察存活素蛋白在SD大鼠牙胚发育过程中的表达,探讨其在牙胚发育过程中的作用。方法建立SD大鼠牙胚发育模型,用免疫组化方法检测存活素蛋白在SD大鼠牙胚不同发育时期中的表达情况。结果图像分析显示存活素蛋白的表达在胎鼠牙胚的蕾状期增强,帽状期、钟状早期减弱,出生后再增强以后随着发育的进行逐渐减弱,呈双波形变化趋势,经统计学检验出生后3.5d与出生后5.5d之间的差异无显著性,其他各组之间均存在显著性差异。结论存活素蛋白可能参与了牙胚发育过程。     

人肾尿酸转运蛋白1基因克隆、抗体制备及其在肾小管上皮细胞中的定位

目的 制备人尿酸转运蛋白1(hURAT1)多克隆抗体并利用该抗体检测hURAT1在肾组织中的表达及亚细胞定位。方法 用RT-PCR方法从人肾组织中扩增出hURAT1基因全长及其抗原表位区，分别构建绿色荧光蛋白hURAT1-pEGFP融合表达载体和GST融合表达载体pGEX-5X-1。诱导表达并纯化GST融合蛋白，利用改良的蛋白免疫法制备多克隆抗体；Western blot及免疫组化方法观察人肾组织的hUART1基因产物的表达。将hUPAT1-pEGFP重组质粒转染细胞，激光共聚焦显微镜动态观察hURAT1-pEGFP在肾小管上皮细胞LLC-PK1细胞膜的定位及表达。结果 成功获得高效特异的hURAT1抗体，利用该抗体证实hURAT1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘，Western blot证实hURAIT1蛋白在肾组织中表达。激光共聚焦显微镜动态观察显示hURAT1-pEGFP定位于LLC-PK1细胞膜。结论 制备的hURAT1抗体及其全长基因可用于hURAT1基因的生理功能及病理研究，hUPAT1基因编码产物分布于人肾组织近端肾小管刷状缘。     

Multi-modality imaging review of congenital abnormalities of kidney and upper urinary tract

Congenital abnormalities of the kidney and urinary tract (CAKUT) include a wide range of abnormalities ranging from asymptomatic ectopic kidneys to life threatening renal agenesis (bilateral). Many of them are detected in the antenatal or immediate postnatal with a significant proportion identified in the adult population with varying degree of severity. CAKUT can be classified on embryological basis in to abnormalities in the renal parenchymal development, aberrant embryonic migration and abnormalities of the collecting system. Renal parenchymal abnormalities include multi cystic dysplastic kidneys, renal hypoplasia, number (agenesis or supernumerary), shape and cystic renal diseases. Aberrant embryonic migration encompasses abnormal location and fusion anomalies. Collecting system abnormalities include duplex kidneys and Pelvi ureteric junction obstruction. Ultrasonography (US) is typically the first imaging performed as it is easily available, non-invasive and radiation free used both antenatally and postnatally. Computed tomography (CT) and magnetic resonance imaging (MRI) are useful to confirm the ultrasound detected abnormality, detection of complex malformations, demonstration of collecting system and vascular anatomy and more importantly for early detection of complications like renal calculi, infection and malignancies. As CAKUT are one of the leading causes of end stage renal disease, it is important for the radiologists to be familiar with the varying imaging appearances of CAKUT on US, CT and MRI, thereby helping in prompt diagnosis and optimal management.