急性心肌梗死介入治疗患者糖原合成酶激酶-3β和心钠素前体肽的水平变化及舒血宁的干预作用

目的观察急性心肌梗死(AMI)经皮冠状动脉内介入治疗(PCI)患者血液糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)及心钠素前体肽(ProANF)的水平变化及舒血宁注射液的干预作用。方法将45例AMI介入治疗患者随机分为治疗组(23例,在PCI治疗基础上加用舒血宁注射液40mL静脉注射,每天1次,共7d)和对照组(22例,PCI治疗),另取20例健康人血为正常对照。分别应用PCR法、WB法和放射免疫法检测患者入院时及术后1、3、7d的血液GSK-3β、ProANF1-30、ProANF31-67和ProANF79-98水平。结果治疗组和对照组患者入院、术后1dGSK-3β mRNA及蛋白水平较正常值明显升高,ProANF1-30、ProANF31-67和ProANF79-98水平显著升高,术后3d和7d治疗组各项指标均显著低于对照组。结论AMI介入治疗患者血液GSK-3β及ProANF水平呈先上升后下降的趋势,舒血宁注射液具有心肌保护作用,能减轻再灌注损伤。     

舒血宁注射液干预急性心肌梗死介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3β水平的变化

目的:观察急性心肌梗死经皮冠脉内介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3β及脂质过氧化反应水平变化及舒血宁注射液的干预作用。方法:选取2004-11/2005-09在解放军总医院行急诊经皮冠脉内介入治疗的急性心肌梗死患者45例。随机数字表法分为舒血宁组23例,男15例,女8例,平均年龄(56.8±10.3)岁。在经皮冠脉内介入治疗基础上加用舒血宁注射液40mL静脉注射,1次/d,共7d。对照组22例,男13例,女9例;平均年龄(55.3±11.5)岁。行经皮冠脉内介入治疗,另取15例健康人血浆为正常对照,平均年龄(52.3±8.3)岁。分别应用ELISA法、分光光度计法、聚合酶链反应法和western blotting法,检测患者入院时及术后第1,3,7天的血浆糖原合成酶激酶3β、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、超氧化物歧化酶、丙二醛水平。结果:45例患者、15名正常人全部进入结果分析。①血浆糖原合成酶激酶3βmRNA及糖原合成酶激酶3β蛋白含量:舒血宁组和对照组患者入院时、术后1d较正常组升高;术后3d和7d舒血宁组低于对照组(3d:0.224±0.023比0.321±0.036,0.401±0.044比0.524±0.054;7d:0.186±0.021比0.245±0.033,0.154±0.025比0.215±0.022,P<0.01)。②血浆超氧化物歧化酶、丙二醛及肿瘤坏死因子α、白细胞介素6水平:舒血宁组和对照组患者入院时、术后1d血浆白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、丙二醛水平均高于正常组;术后3d和7d患者血浆白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、丙二醛水平显著降低,舒血宁组低于对照组,超氧化物歧化酶活性高于对照组。结论:心肌梗死经皮冠脉内介入治疗患者血浆糖原合成酶激酶3βmRNA及蛋白水平呈先上升后下降的趋势,舒血宁注射液能减轻再灌注损伤,具有心肌保护作用,该作用可能与血浆糖原合成酶激酶3βmRNA及蛋白调节有关。     

2型糖尿病患者糖原合成酶激酶3β的表达及活性

目的 探讨糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)在2型糖尿病患者和健康者外周血单个核细胞中的蛋白表达及活性水平。方法 运用酶联免疫吸附法(ELISA)检测30例2型糖尿病血糖未控制患者(实验1组)、30例2型糖尿病血糖控制患者(实验2组)和30例健康者(健康对照组)外周血单个有核细胞GSK-3β蛋白表达及活性水平,并分析其结果。结果2型糖尿病患者GSK-3β蛋白水平比健康对照组升高(P0.05),实验1组GSK-3β活性水平比健康对照组和实验2组升高(P0.05);实验2组GSK-3β蛋白水平比健康对照组升高(P0.05)。实验1组男性GSK-3β活性水平比健康对照组男性升高(P0.05)。结论 2型糖尿病患者GSK-3β蛋白高表达。经药物治疗后血糖控制者GSK-3β蛋白仍高表达,但活性水平明显下降。2型糖尿病血糖未控制男性患者GSK-3β活性水平明显增高。     

糖原合酶激酶-3β在阿尔茨海默病发病机制及治疗中作用的研究概况

阿尔茨海默病(AD)是最常见的,与年龄相关的老年性痴呆症,其主要病理组织学标志是老年斑和神经元纤维缠结。糖原合成激酶-3β(GSK-3β)是糖原合成的限速酶,其功能失调会影响神经元的多种生理活动,尤其与老年斑和神经元纤维缠结形成密切相关。笔者总结了GSK-3β在AD发生和发展过程中所发挥的作用及GSK-3β抑制剂治疗AD的研究现状。     

轻度认知功能障碍及老年性痴呆患者外周淋巴细胞糖原合成酶激酶-3的变化

目的探讨轻度认知功能障碍（MCI）及阿尔茨海默病（AD）患者外周淋巴细胞糖原合成酶激酶-3（GSK-3）的变化。 方法用放射性配体结合试验检测正常老年人（对照组）、MCI患者（MCI组）及AD患者（AD组）外周淋巴细胞GSK-3的活性,并用Western blot法检测GSK-3β Ser9位点的磷酸化水平及总GSK-3β表达。 结果AD组及MCI组GSK-3活性分别为（1.32±0.09）和（1.22±0.10）,明显高于对照组的（1.00±0.06）,差异有统计学意义（均P<0.01）;AD组及MCI组GSK-3β Ser9位点的磷酸化水平分别为（0.82±0.07）和（0.87±0.08）,明显低于对照组的（1.01±0.07）,差异有统计学意义（P <0.05或0.01）;AD组及MCI组总GSK-3β表达水平与对照组比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。 结论MCI及AD患者外周淋巴细胞GSK-3的活性升高,可能对此类疾病的早期诊断有潜在的价值。     

糖原合成酶激酶-3β介导心肌营养素-1对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的作用

目的 研究心肌营养素-1(CT-1)对心肌细胞急性缺氧复氧损伤的作用及信号通路.方法 本研究在江西省分子医学重点实验室完成.用改良的方法培养出生1～3 d的Sprague-Dawley(SD)乳鼠心肌细胞,根据实验要求分为5组:(1)对照组;(2)缺氧复氧组;(3)缺氧复氧组+CT-1组;(4)缺氧复氧组+CT-1+LY294002组(PIK3/Akt阻断剂);(5)缺氧复氧组+CT-1+助溶剂DMSO组.CT-1的质量浓度为10ng/mL,缺氧3 h,复氧3 h.MTS法测定心肌细胞的存活率,四氯四乙基苯丙咪唑基羰化青碘化物(JC1)检测心肌细胞线粒体膜电位(△ψm),二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH CA)检测细胞活性氧(ROS),流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率.心肌细胞磷酸化糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和PI3K蛋白检测用western blotting.以方差分析及q检验进行统计学分析.结果 缺氧复氧培养后心肌细胞凋亡率及细胞内ROS较对照组明显增加,而心肌细胞存活率显著降低,线粒体膜电位(△ψm)下降[(40.55±4.25)vs.(86.28±7.15),P<0.01];磷酸化的GSK-3β和PI3K蛋白稍有增加.而CT-1处理的心肌细胞,较缺氧复氧组心肌细胞存活率明显上升(87%),心肌细胞凋亡率及细胞内ROS显著减少,△ψm水平增加,磷酸化GSK-3β及PI3K蛋白水平明显增加.CT-1的作用能被PIK3/Akt阻断剂LY294002抑制,而助溶剂组则未观察到类似作用.结论 CT-1能保护缺氧复氧损伤的心肌细胞,且其作用依赖PI3K/GSK-3β信号通路的激活.     

运动对胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3β表达的影响

目的 探讨运动对高脂饮食诱导的胰岛素抵抗大鼠脂肪组织中糖原合成酶激酶3B（GSK-3β）表达的影响。方法 将30只SPF级雄性Wistar大鼠随机分为2组，其中正常对照组10只，给予常规饲料喂养，模型组20只，给予高脂饲料喂养。模型组大鼠经喂养4周后制成胰岛素抵抗模型，将其随机分为2个亚组（即胰岛素抵抗组和运动干预组），2个亚组继续给予高脂饲料喂养，同时运动干预组大鼠每周进行5d游泳运动，持续6周。采用Western—blot方法检测各组大鼠附睾脂肪组织中GSK-3β的表达；定期检测大鼠体重（BW）、空腹血糖（FPG）、血浆胰岛素（FINS）、血甘油三酯（TG）及胆固醇（TC）水平，并计算胰岛素敏感指数（ISI）。结果 各组大鼠经高脂饲料喂养4周后，与正常对照组比较，模型组大鼠BW、FPG、FINS、TC、TG均显著升高（P〈0．05或0．01），ISI则明显降低（P〈0．01），提示胰岛素抵抗模型诱导成功。经6周运动干预后，与胰岛素抵抗组比较，运动干预组大鼠脂肪组织GSK-3β表达显著下降（P〈0．05），与正常对照组比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。结论 运动可下调胰岛素抵抗大鼠脂肪组织GSK-3β的表达，促进葡萄糖的摄取及糖原合成，具有改善胰岛素抵抗功能。     

运动对胰岛素抵抗大鼠骨骼肌中糖原合成酶激酶-3表达的影响

目的 观察运动训练对高脂高糖饮食诱导的胰岛素抵抗模型大鼠骨骼肌中糖原合成酶激酶-3（GSK-3）表达的影响。方法 将30只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和运动组，每组10只。模型组和运动组均喂以高糖高脂饲料，4周后运动组在继续高糖高脂饲料的基础上加以每周游泳5d，连续6周。实验结束后采用Western blot法检测各组大鼠骨骼肌中GSK-3的含量，定期检测其体重、血甘油三脂和胆固醇、空腹血糖和胰岛素水平，并计算胰岛素敏感指数。结果 模型组大鼠骨骼肌中GSK-3的含量较正常组增高70．20％（P〈0．01），游泳训练6周后大鼠骨骼肌中GSK-3的含量较模型组减少27．24％（P〈0．01），较正常组增高23．83％（P〈0．05）。结论 运动训练可降低胰岛素抵抗大鼠骨骼肌细胞GSK-3蛋白表达水平，从而加强葡萄糖的摄取和利用，改善胰岛素抵抗。     

抑制糖原合成酶激酶-3β对小鼠卒中后抑郁的作用及其机制研究

目的建立小鼠卒中后抑郁(PSD)模型,探究糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)抑制剂6-溴代靛玉红-3'-肟(BIO)对PSD的作用。方法将8～10周龄C57BL/6雄性小鼠54只用随机数表法分为正常对照组、束缚组、卒中组、PSD组、PSD+二甲基亚砜(DMSO)组和PSD+BIO组,每组9只。其中束缚组和PSD组通过束缚应激进行抑郁造模,卒中组以及PSD组进行脑卒中造模,PSD+BIO组和PSD+DMSO组在PSD组处理的基础上分别给予BIO和DMSO。通过强迫游泳实验和悬尾实验评估小鼠抑郁样行为的改变,通过实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测脑源性神经营养因子(Bdnf)以及抑炎因子甘露糖受体1(Mrc1)、促炎因子诱导型一氧化氮合酶(Inos)和白细胞介素-1β(IL-1β)等基因在脑内海马、前额叶、杏仁核中的表达水平变化。结果 PSD组相较束缚组、卒中组以及正常对照组出现明显抑郁倾向,并伴有脑内Bdnf表达量降低,说明造模成功,炎症因子IL-1β的表达量明显增高。给予GSK-3β抑制剂BIO后抑郁样行为有所改善,Bdnf脑内表达量升高,脑内IL-1β的表达量也有所降低。结论通过卒中联合束缚应激的方法成功构建PSD小鼠模型,而应用GSK-3β抑制剂BIO后有利于PSD的恢复,这种作用很有可能是通过改善脑内的炎症反应来实现的。     

2型糖尿病患者外周血有核细胞糖原合成酶激酶3β(GSK-3β)基因表达研究

目的探讨糖原合成酶激酶3β（GSK-3β）基因在2型糖尿病患者和健康人外周血有核细胞中表达水平的差异性及其对2型糖尿病发生机制的研究价值。方法设计GSK-3β基因引物,实时荧光RT—PCR相对定量法检测40例2型糖尿病患者和40例健康人PBMC内基因表达水平并分析其差异。结果2型糖尿病患者组GSK-3β的mRNA相对表达量为0．94&#177;0．34,健康组为0．92&#177;0．19,两者比较差异无明显统计学意义（P〉o．05）。结论在2型糖尿病患者外周血有核细胞中GSK-3β的基因相对表达量与健康人相比无明显差异。该结果尚待进一步通过联合检测和扩大样本量来确认。     

大肠癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂和糖原合成酶激酶-3β磷酸化的表达及意义

目的检测大肠癌组织中尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）和糖原合成酶激酶-3β磷酸化（P-GSK313）的表达并探讨其意义。方法选取2006年1月-2010年12月大肠癌手术切除标本78例,采用微波EliVision免疫组织化学法检测78例大肠癌、30例大肠腺瘤和20例正常大肠黏膜中uPA和P-GSK3β的表达。结果大肠癌组织中uPA和P．GSK3[]阳性表达定位于细胞质,其表达明显高于正常大肠黏膜组织和大肠腺瘤组织（P〈0．05）。UPA和P-GSK3J3阳性表达与组织分化程度、淋巴结转移、临床病理分期有关（P〈0．05）;两者间表达呈正相关（P〈0．05）。结论uPA和P—GSK3[3在大肠癌中呈高表达,且与大肠癌的发生、发展和转移密切相关。     

不同时间窗冠状动脉介入治疗对急性心肌梗死患者血浆N-末端利钠肽前体水平的影响

目的探讨不同时间窗内行经皮冠状动脉介入治疗（PCI）对急性心肌梗死患者（AMI）血浆N-末端利钠肽前体（NT-proBNP）水平、左室射血分数（LVEF）和预后的影响。方法65例AMI患者按发病后至急诊PCI时间分组：A组（≤12h）29例,B组（12～24h）36例。分别比较两组患者术后心力衰竭发生情况及病死率、血浆NT-proBNP水平的动态变化情况和超声心动图测定的LVEF。结果A组患者的心力衰竭发生率和病死率均较B组明显降低,但经χ2检验,差异均无统计学意义（P均〉0．05）。两组患者入院即刻的血浆NT-proBNP水平比较,差异无统计学意义（P〉0．05）。而经过急诊PCI治疗后,入院后24h和7d两个时间点,A组患者的血浆NT-proBNP水平均明显低于B组患者,差异均具有统计学意义（P均〈0．05）。同时,AM／发生后30d时的超声心动图检查也显示,A组患者的LVEF明显高于B组患者,差异具有统计学意义（P〈0．05）。结论急诊PCI是AMI最有效的治疗手段,接受PCI的治疗时间越早,AMI患者术后心肌受损程度越轻,心肌收缩功能改善也越明显。     

糖尿病肾病患者血清糖原合酶激酶-3β水平与尿微量白蛋白的相关性分析

目的分析糖尿病肾病患者血清糖原合酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)水平与尿微量白蛋白的相关性,以探究GSK-3β与糖尿病肾病发生发展的关系。方法选取2016年2月至2019年11月新乡医学院第一附属医院收治的117例2型糖尿病患者,根据24h尿白蛋白排泄量(urinary albumin excretion,UAE),将其分为尿白蛋白正常组(UAE<30mg/24h)46例、微量白蛋白尿组(30mg/24h≤UAE≤300mg/24h)39例及大量白蛋白尿组(UAE>300mg/24h)32例,另将同期在本院体检的42例健康志愿者作为对照组。收集各组的临床资料,采用免疫比浊法测定尿液中白蛋白含量,采用酶联免疫吸附法检测血清中GSK-3β水平。结果与对照组相比,尿白蛋白正常组、微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组血清GSK-3β水平显著升高(P<0.05);与尿白蛋白正常组相比,微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组血清GSK-3β水平显著升高(P<0.05);与微量白蛋白尿组相比,大量白蛋白尿组血清GSK-3β水平显著升高(P<0.05)。在2型糖尿病患者中,血清GSK-3β水平与糖化血红蛋白、总胆固醇、低密度脂蛋白、甘油三酯、血肌酐、血尿酸、UAE、病程呈正相关(P<0.05),与高密度脂蛋白呈负相关(P<0.05)。多元逐步线性回归分析结果显示,糖化血红蛋白、血肌酐、血尿酸、UAE影响GSK-3β水平的独立危险因素(P<0.05)。结论血清GSK-3β水平与2型糖尿病患者尿微量白蛋白呈正相关,并随糖尿病肾病的发生及疾病严重程度的加重而逐渐升高,临床监测血清GSK-3β水平变化对于早期发现糖尿病肾病具有重要意义。     

跑台运动对D-半乳糖阿尔茨海默病大鼠海马β-淀粉样前体蛋白和Tau蛋白基因表达的影响

目的:探讨8周的有氧跑台运动对D-半乳糖模型阿尔茨海默病(AD)大鼠海马β-淀粉样前体蛋白(APP)和Tau蛋白及其激酶糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)mRNA表达的影响.方法:选用健康雄性8周龄SD大鼠16只,随机分为对照组(C组,n=8),运动组(T组,n=8).两组大鼠连续8周经腹腔按120mg/kg·d的浓度注射D-半乳糖造模AD大鼠,同时对T组大鼠进行连续8周,每周5次的有氧跑台运动.运用实时荧光定量RT-PCR的方法检测两组大鼠海马APP、Tau蛋白和GSK-3β的mRNA表达水平.结果:8周的有氧跑台运动显著下调了T组大鼠海马APP、Tau蛋白和GSK-3β的mRNA表达水平;其中,APP的下调幅度为42％(P＜ 0.05),Tau蛋白的下调幅度为45％(P＜ 0.01),GSK-3β的下调幅度为38％(P＜ 0.05).结论:8周的有氧跑台运动有效抑制了APP和Tau蛋白的基因表达水平,其机制可能是与运动抑制了GSK-3β的基因表达水平有关.     

急性心肌梗死患者血浆N端脑钠肽前体测定及其意义

脑利钠肽（BNP）是一种心脏神经激素，当心室壁张力增加时，心室肌细胞受到牵拉刺激，就会以激素原的形式爆发式合成，最后裂解为由32个氨基酸组成的BNP分子与76个氨基酸组成的N端脑钠肽前体（NT-proBNP）片段，并将2者同时释放人血循环，发挥生物活性。在血浆中NT—proBNP分子与BNP分子以1：1的比例存在于血循环中，[第一段]     

糖原合酶激酶3β抑制剂对前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用

目的研究糖原合酶激酶3β（glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β）抑制剂抗前列腺癌细胞裸鼠移植瘤生长的效用。方法建立前列腺癌PC-3和LNCaP／Bcl-xl细胞株裸鼠移植瘤模型,观测GSK-3β抑制剂氯化锂（LiCl）及SB216763腹腔内给药后移植瘤重量及体积的变化。同时通过BrdU掺入的免疫组化染色探讨移植瘤的增殖状态,TUNEL染色比较对移植瘤细胞凋亡的影响。结果LiCl及SB216763均可明显抑制移植瘤生长（P〈0．05）。与对照组相比,LiCl给药组细胞BrdU标记明显降低（P〈0．05）,TUNEL染色差异无统计学意义。结论抑制GSK-3β活性可抑制前列腺癌裸鼠移植瘤细胞在体内的生长,其中LiCl可能通过干扰癌细胞DNA复制发挥作用。     

急诊冠状动脉介入治疗对急性心肌梗死患者脑钠素N端前体肽的影响及临床意义

目的 观察急性心肌梗死(AMI)患者急诊PCI术后脑钠素N端前体肽(NT-proBNP)水平和心电图ST段的变化、心功能及与预后的关系.方法 106 例AMI患者行PCI治疗,并测定术中、术后72 h及6个月随访时NT-proBNP水平,观察术后心电图ST段下降程度,心肌灌注TMP分级,超声心动图测定心脏射血分数,记录6个月心脏主要不良事件(MACE).结果 AMI患者PCI术后NT-proBNP水平显著降低(P<0.05);随访6个月时NT-proBNP水平持续降低,与术中和术后比较差异均有统计学意义(P<0.01,P<0.05).术后ST段明显降低及术后心肌灌注TMP分2 ～3级者术后72 h和6个月随访时NT-proBNP水平均显著降低(P<0.05).6个月发生MACE事件组NT-proBNP水平术后72 h及6个月随访时均高于非MACE事件组.结论 AMI患者PCI术后NT-proBNP 水平显著降低,NT-proBNP水平与心肌灌注及心功能状态有关,可判断AMI患者的临床预后.     

急诊冠状动脉介入治疗对急性心肌梗死患者脑钠肽水平的影响

目的 观察急诊冠状动脉介入治疗(PCI)对急性心肌梗死患者血浆脑钠肽(BNP)水平的影响,并进一步探讨其对左室重构的影响.方法 急性心肌梗死患者118例,其中PCI组52例,在发病后6～12 h内成功行急诊PCI;保守治疗组66例,为同期拒绝急诊PCI或急诊PCI失败者.两组均于入院即刻,12、24、48和72 h以及7、14和28 d测定血浆BNP浓度;采用多普勒超声诊断仪测量两组患者人院3～5 d和28 d的左室射血分数(LVEF).以同期20例健康体检者的检测值作为正常参考值.结果 两组患者入院即刻血浆BNP水平均高于正常健康者,同组不同时间点BNP浓度比较差异亦有统计学意义(P均＜0.01).保守治疗组血浆BNP水平呈双峰曲线,12～24 h达高峰,7 d时出现第二次峰值.PCI组血浆BNP水平呈单峰曲线,于12～24 h达到峰值.PCI组各时间点BNP水平均显著低于保守治疗组(P均＜0.01).两组患者3～5 d的LVEF值比较差异无统计学意义;28 d时PCI组LVEF值明显高于保守治疗组(P＜0.01).结论 急诊PCI能够降低急性心肌梗死患者血浆BNP水平,提高LVEF值,从而减轻左室重构.     

急性心肌梗死患者血浆N端脑钠肽前体测定及其意义

脑利钠肽(BNP)是一种心脏神经激素,当心室壁张力增加时,心室肌细胞受到牵拉刺激,就会以激素原的形式爆发式合成,最后裂解为由32个氨基酸组成的BNP分子与76个氨基酸组成的N端脑钠肽前体(NT-proBNP)片段,并将2者同时释放入血循环,发挥生物活性[1].……