DD3 mRNA在前列腺癌组织中定量表达分析

目的:探讨DD3基因在前列腺组织中表达的临床意义。方法:用荧光定量RT-PCR方法对21例前列腺癌(PCa)组织、27例非前列腺部位的肿瘤组织、39例良性前列腺增生(BPH)组织和15例正常前列腺组织中的DD3的表达进行了定量分析,用ROC曲线对DD3 mRNA诊断PCa的性能进行了分析。结果:27例非前列腺组织中均未检测到DD3基因的表达。DD3在PCa组、BPH组和正常前列腺组表达量的中位数分别为7.2×106、2.5×104、1.5×104拷贝/mg组织。PCa组较BPH组和正常前列腺组DD3的表达量显著增高(P<0.01),而BPH组和正常前列腺组间则差异无显著性(P>0.05)。DD3表达量与临床分期和分化程度之间均无明显相关性。DD3 mRNA曲线下面积(AUC-ROC)为0.937(95%CI:0.879～0.995)。当临界值为1.4×105拷贝/mg组织时,灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值(PPV)、阴性预测值(NPV)、阳性拟然比(+LR)、阴性拟然比(-LR)分别为90.5%、85.0%、86.7%、76.0%、94.3%、6.03和0.11。结论:DD3 mRNA的表达仅限于前列腺组织,具有良好的组织特异性。DD3 mRNA表达在PCa组织中显著升高,在正常前列腺和BPH组织中差异无显著性。DD3 mRNA可作为PCa诊断的良好标志物,在PCa早期诊断、微转移诊断、预后判断、指导治疗等方面也具有潜在的应用价值。     

DD3基因在前列腺癌中的研究进展

前列腺癌是男性泌尿系统常发且严重威胁男性健康的恶性肿瘤,且预后较差。由于其临床上缺乏明显的症状且影像学也缺乏特殊表现,等到发现时多已进展到晚期,唯一能避免此结果的方法就是通过有效、准确的检测从而早期诊断,并进行相应治疗。目前,关于以DD3作为前列腺癌的肿瘤标记物进行检测是为研究热点,研究者对样本的选取以及相关检测方法均进行了探索,本文将对这一最新研究探索进行综述。     

PSA值增高患者前列腺按摩后尿液中DD3mRNA定量检测无侵入性诊断前列腺癌的意义

目的:探讨PSA值增高患者前列腺按摩后尿液沉渣中DD3mRNA检测在前列腺癌诊断中的应用价值.方法:在前列腺穿刺活检前或术前麻醉后收集患者前列腺按摩后患者的尿液,离心取细胞沉淀物,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法和荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应(Real time RT-PCR)方法检测DD3mRNA和PSAmRNA含量,以PSAmRNA作为管家基因校正沉渣中的前列腺细胞,以DD3mRNA/PSAmRNA比值表示DD3mRNA含量.SPSS13.0分析相关数据,以穿刺活检或术后病理检查结果为金标准,同时探讨了前列腺按摩后尿液中DD3Mrna含量与前列腺癌病理分级之间的关系.结果:PSA值增高患者中前列腺癌患者前列腺液DD3mRNA表达量明显高于BPH,差异具有统计学意义.不同病理分级之间DD3mRNA的含量差异无统计学意义(P>0.05).结论:PSA值增高的患者行前列腺按摩后尿液沉渣中DD3mRNA含量检测,较前列腺活检的损伤更小,作为前列腺癌的一种非损伤性诊断方法具有良好的应用前景.     

E2F3在前列腺癌中的表达及意义

目的探讨E2F3在前列腺癌中的表达及临床意义。方法采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）和免疫组化技术检测26例前列腺癌、20例良性前列腺增生和10例正常前列腺组织中E2F3 mRNA及蛋白的表达。结果E2F3 mRNA及蛋白的表达与临床分期有关,晚期（C＋D期）E2F3 mRNA及蛋白的表达水平明显高于早期（A＋B期,P〈0．05）,低分化癌E2F3 mRNA及蛋白的表达明显高于高中分化癌（P〈0．05）。前列腺癌中E2F3表达水平明显高于良性前列腺增生（P〈0．05）及正常前列腺组织（P〈0．05）。结论E2F3表达可能与前列腺癌的恶性程度有关,E2F3在前列腺癌的发生发展中起到促进作用。     

DD3基因在前列腺癌诊断中的研究进展

近年来,有关前列腺癌(Prostate cancer,Pca)诊断方法的研究成为了研究的热点,研究发现DD3是一种非编码RNA的基因,仅在Pca细胞中表达,而在其他正常组织和癌组织以及细胞系中均不表达,为Pca特异性基因之一,DD3的发现极大提高了Pca诊断的特异性与灵敏度.本文就DD3最新研究进展作一综述.     

前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达的意义

目的探讨前列腺癌特异性基因DD3在前列腺癌患者外周血中表达及临床意义.方法采集44例中晚期前列腺癌（PCa）患者、20例良性前列腺增生（BPH）患者及18例健康男子外周血,分离单个核细胞,提取总RNA.RT-PCR琼脂糖电泳法检测DD3 mRNA,以β-actin为内参照,以出现311-bp和184 bP片段为DD3 mRNA阳性,仅出现184 bp片段为DD3 mRNA阴性. 结果 20例BPH患者和18例健康青年男子外周血标本中均无DD3 mRNA表达,44例PCa血标本中DD3mRNA表达13例（29.5%）.B期、C期及D期患者DD3 mRNA阳性率分别为0%（0/3）、18%（2/11）及37%（11/30）,各期之间差异无统计学意义（P＞0.05）.PCa伴骨转移患者外周血中DD3 mRNA阳性率为44%（10/22）,而无骨转移者其阳性率为14%（3/22）,组间差异有统计学意义（P＜0.05）.PCa未治疗组、去势治疗组的DD3 mRNA阳性率分别为64%（7/11）、18%（6/33）,组间差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 PCa患者外周血中可检测到DD3 mRNA表达,DD3 mRNA可望作为诊断PCa血行转移和治疗监测的良好标志物.     

PSA在诊断早期前列腺癌中的价值

前列腺特异性抗原作为前列腺癌的重要肿瘤标志得到广泛研究和临床应用，本文就ＰＳＡ能否成为早期诊断和筛选前列腺癌的手段及其近年来有关研究资料进行综述。     

带PSA启动子的hytk基因在前列腺癌细胞中的表达

目的　构建人前列腺组织特异性的hytk基因治疗载体并探讨其临床意义。 　方法　将PSA启动子序列替代含hytk基因的真核表达载体tgCMV/hytk中的CMV启动子序列 ,应用Fu GENETM6系统转染前列腺癌细胞株并检测hytk基因的表达情况 ,MTT法检测GCV(丙氧鸟苷 )的毒性作用。　结果　成功获得带PSA启动子的真核表达载体tgPSA/hytk ,PCR、RNADotBlotting及WesternBlotting检测显示hytk基因仅在PSA阳性前列腺癌细胞株LNCaP细胞中表达 ,且转染hytk基因的LNCaP细胞对GCV敏感。　结论　含有PSA启动子的hytk真核表达载体是前列腺癌基因治疗的新型、理想候选载体     

DD3基因与前列腺癌的诊断、治疗进展

DD3 mRNA仅高度表达于前列腺癌细胞中。是新近发现的前列腺癌特异性、敏感性很高的基因。这使DD3 mRNA成为一个早期诊断或／和提示前列腺癌预后的有前途的标志物。     

前列腺癌患者前列腺液中DD3 mRNA检测及临床意义

目的检测前列腺癌（PCa）患者前列腺液中DD3基因的表达,讨论其临床意义。方法收集31例PCa患者、59例前列腺增生（BPH）患者前列腺液,离心取细胞沉淀物,提取总RNA,采用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）琼脂糖电泳法方法检测其中DD3 mRNA的水平。同时用2χ检验分析比较不同Gleason分级的PCa患者DD3 mRNA阳性率是否存在差异。结果 PCa患者前列腺液中DD3 mRNA阳性率（77.42%）明显高于BPH患者（5.08%）,两者具有显著性差异（P〈0.01）。DD3 mRNA表达阳性率诊断PCa的灵敏度为77.42%,特异度为94.91%,不同Gleason分级的PCa患者DD3 mRNA表达阳性率无显著统计学差异（P〉0.05）。结论检测前列腺液中DD3 mRNA诊断PCa是一种有效的无侵入性的良好方法。     

实时荧光RT-PCR定量检测前列腺癌组织中AMACR基因表达

目的 建立实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)检测AMACR mRNA的方法学并检测其在前列腺癌(PCa)组织中的表达.方法 在AMACR基因的2、3外显子之间设计一对引物及MGB探针,将PCR扩增产物与pMD18-T载体连接,构建重组质粒作为定量检测的标准品,建立实时荧光定量RT-PCR方法,然后对32例PCa、60例良性前列腺增生(BPH)及34例其它肿瘤组织进行AMACR mRNA的定量检测.结果 重组质粒经PCR扩增及序列测定,表明克隆成功,该方法灵敏度高,线性范围为5～5×108copies/reaction.AMACR mRNA在PCa组织中表达量显著高于BPH组织(P<0.01)及其他类型肿瘤组(P<0.01).ROC曲线分析结果显示,曲线下面积(AUC-ROC)为0.890,AMACR mRNA诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为81.3%和86.7%.PCa组织中AMACR mRNA表达量及检测阳性率与不同临床分期和病理分级之间的差异尚不具有统计学意义(P值均>0.05).结论 实时荧光定量RT-PCR检测AMACR mRNA的方法具有敏感、特异、准确、重复性好等特点.AMACR mRNA在前列腺组织中的表达对PCa的诊断具有一定的临床应用价值.     

前列腺癌患者尿液中DD3 mRNA检测及临床意义

目的:观察PCa患者尿液中DD3 mRNA的表达,并讨论其临床意义。方法:从48例PCa患者、23例BPH患者和9例健康男性志愿者(对照组)前列腺按摩后初始尿液中分离细胞,采用RT-PCR方法检测其中DD3mRNA的表达情况。结果:BPH和对照组未见DD3 mRNA阳性表达,而PCa患者DD3 mRNA阳性率为81.3%(39/48),两者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:尿液中DD3 mRNA的检测有望成为早期诊断PCa的一种无创、简单、敏感的方法,也有望成为PCa治疗后监测的一种方法。     

年龄≤50岁非前列腺癌男性初始PSA及PSA速度的分布特点分析

目的 探讨年龄≤50岁非前列腺癌男性初始PSA及PSA速度的分布特点.方法回顾性分析2001年1月至2009年11月初始PSA检测年龄≤50岁的非前列腺癌患者的PSA值,计算PSA检测≥2次者的PSA速度.研究不同年龄段初始PSA及PSA速度的分布范围,分析初始PSA、初始PSA年龄及PSA速度之间的相关性.用生存分析和log-rank检验比较初始PSA高于和低于中位数2组患者将来PSA≥2.5 ng/ml风险的差异.结果 4206例非前列腺癌者,初始PSA中位数为0.6 ng/ml,其中≥1.0、≥2.5和≥4.0 ng/ml者分别1026例(24.4%)、177例(4.2%)和90例(2.1%).417例PSA检测≥2次者PSA速度的中位数为0.03 ng·ml-1·y-1,其中≥0.35、≥0.75和≥2.00 ng·ml-1·y-1者分别为25例(6.0%)、13例(3.1%)和8例(1.9%).年龄与PSA、年龄与PSA速度、PSA与PSA速度之间均无明显相关性(r值分别为0.019、-0.015和-0.006,P值分别为0.218、0.754和0.897).395例PSA检测≥2次且初始PSA＜2.5 ng/ml者随访3个月～7.1年,中位时间2.0年,初始PSA高于和低于中位数2组患者将来PSA超过2.5 ng/ml的风险差异有统计学意义(P＜0.01).结论年龄≤50岁非前列腺癌男性的中位初始PSA和PSA速度分别为0.6 ng/ml 和0.03 ng·ml-1·y-1.初始PSA高于中位数的患者将来PSA超过2.5 ng/ml的风险明显增高.

Abstract：

Objective To explore the distribution and characteristics of initial PSA and PSA velocity in men younger than years without prostate cancer. Methods PSA in men younger than 50 years without prostate cancer from January 2001 to November 2009 were retrieved retrospectively from our computer center. PSA velocity was calculated if their PSA was measured twice or more. The distributions of initial PSA and PSA velocity were analyzed. The correlations between initial PSA, initial PSA age, and PSA velo-city were also analyzed. Kaplan-meier and log-rank tests were used to estimate the significant difference at the risk of PSA≥ 2.5 ng/ml after initial PSA measurement, stratified by median initial PSA (0.6 ng/ml). Results A total of 4206 men without prostate cancer were included. The median initial PSA value in these men was 0.6 ng/ml. Of these men, 1026 (24.4%), 177 (4.2%), and 90 (2.1%) had an initial PSA≥1.0, ≥2.5, and ≥4.0 ng/ml, respectively. A total of 417 men had their PSA measured these men, 25 (6.0%), 13 (3.1%), and 8 (1.9%) had a PSA velocity≥0.35, ≥0.75, initial PSA age and initial PSA, initial PSA age and PSA velocity, and initial PSA and PSA velocity (correlation coefficient r=0.019, -0.015, and -0.006, respectively; P=0.218, 0.754, and 0.897, respectively). After a follow-up of up to 7.1 years from baseline PSA measurement, the risk of PSA≥2.5 ng/ml, stratified by median initial PSA (0.6 ng/ml) was significantly different (log-rank test, P＜0.001). Conclusions The median baseline PSA and PSA velocity in men younger than 50 years old without prostate cancer are 0.6 ng/ml and 0.03 cancer with an initial PSA higher than median (0.6 ng/ml) have a subsequently higher risk of PSA value ≥2.5 ng/ml.     

实时荧光定量RT-PCR检测良性前列腺增生与前列腺癌相关基因表达的临床意义

目的应用实时荧光定量RT-PCR检测良性前列腺增生（BPH）与前列腺癌相关基因表达。方法通过实时荧光定量RT-PCR对9个前列腺癌相关基因（KLK3、KLK2、KLK11，pim-1，hepsin，PSMA，AR，p27，IGF-1）在前列腺正常组织、BPH组织和癌组织（PCa）定量表达，分析其特异性的差异。结果检测9个选定相关基因中发现KLK2，pim-1，AR和IGF-1在这3种组织中的表达差异有统计学意义（P＜0．01）。结论KLK2，pim-1，AR和IGF-1作为前列腺癌组织特异性的分子标记物组合，有望提高前列腺癌早期诊断的准确性。     

胃癌中人端粒酶逆转录酶mRNA的实时定量检测

目的　建立一种实时荧光定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法 ,检测胃癌组织中hTERTmRNA的表达 ,探讨hTERT的表达水平与胃癌的关系及其在胃癌诊断中的价值。方法采用Taqman技术与LightCycler荧光定量PCR仪对 3 5例胃癌及其相应切缘组织中hTERTmR NA的表达进行实时定量检测。将hTERT与GAPDH拷贝数之比的 10 0倍作为标准化hTERT(NhTERT)。结果　 (1)胃癌及其相应切缘组织中NhTERT分别为 6.2 7± 0 .89、0 .93± 0 .18,两者之间差异有统计学意义 (t =12 .76,P <0 .0 1)。(2 )胃癌组织中hTERTmRNA的表达水平与组织的分化程度密切相关 (P <0 .0 1) ,而与患者的年龄、性别、肿瘤的大小、定位以及 pTNM分期无相关性。结论　实时荧光定量RT PCR方法能对hTERTmRNA进行准确、高效的定量。hTERTmR NA的实时定量检测可能有助于胃癌的早期诊断。