小剂量豚鼠脊髓匀浆诱导Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎模型的建立

目的探索以小剂量豚鼠脊髓匀浆为抗原,建立Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型,并观察其病理改变。方法按脊髓湿重与冰盐水体积为1:10的比例制备豚鼠脊髓匀浆抗原,免疫Wistar大鼠,建立EAE模型;留取脑和脊髓进行HE染色及三色染色,光镜下观察病理改变。结果Wistar大鼠免疫后第17.20±6.48天第一次发病,发病形式多样,除表现EAE常见症状外,尚出现痉挛状态、斜颈等特殊症状。HE染色发现神经组织内炎细胞浸润,血管"袖套"样病灶形成;三色染色可见轴突肿胀,呈串珠状,且不连续,着色不均匀;髓鞘结构层次紊乱,疏松,崩解。结论小剂量脊髓匀浆诱导的EAE模型,病程及发病表现更接近于人类多发性硬化的表现,且经济实用,是研究多发性硬化的理想动物模型。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎的视神经病理改变

目的 研究实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的视神经病理改变.方法 足垫皮下注射豚鼠脊髓匀浆和完全弗氏佐剂(CFA)混合物制作Wismr大鼠EAE模型,于发病后第6d将大鼠处死,取视神经、脑和脊髓,行HE和LFB染色,光镜和电镜下观察其病理改变.结果 病理检查发现EAE模型组大鼠脑、脊髓有不同程度的炎症反应和脱髓鞘改变;均有视神经病变,光镜主要表现为炎症反应和脱髓鞘,视神经髓鞘脱失重于炎症反应;电镜主要表现为髓鞘稀疏,少突胶质细胞数量减少、胞核固缩,其周围包裹的髓鞘板层松解,轴突髓鞘分离.结论 EAE大鼠存在明显的视神经病变,主要为视神经炎症反应和脱髓鞘改变.     

大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型研究

目的 用豚鼠脊髓匀浆诱发实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型.方法 应用豚鼠脊髓匀浆加完全弗氏佐剂和百日咳杆菌免疫Wistar大鼠.结果 免疫后8～14d大鼠发病,发病率为67%,光镜下病理学证实发病大鼠脑和脊髓内具有典型的脱髓鞘改变和炎性细胞浸润.电镜下也可见到髓鞘结构破坏和神经元轻微改变.结论 以豚鼠脊髓匀浆为抗原免疫Wistar大鼠可诱发EAE,具有发病率较高、费用低廉、模型稳定的特点,可以作为研究多发性硬化的动物模型.     

多病程Wistar大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎的病理研究

目的:在建立wistar大鼠多病程实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)的动物模型的基础上,进行病理学研究,探讨不同发病类型EAE的基本病理改变如炎细胞浸润、脱髓鞘和轴索损伤等方面的差别,为多发性硬化(MS)的研究提供实验依据。方法:以豚鼠全脊髓匀浆(GPSCH)为抗原免疫Wistar大鼠建立EAE的动物模型,进行常规HE染色、Weil髓鞘染色和改良的Bielschowsky,并行GFAP免疫组化染色,观察不同发病类型EAE的病理政变。结果:根据病理和临床表现可将Wistar大鼠EAE模型分为5种发病形式:急性型、缓解-复发型、持续进展型、良性型和隐匿型。光镜下可见不同发病时期的EAE的病理改变有所不同,急性型EAE炎症浸润明显,尤脱髓鞘改变,缓解-复发型和持续进展型EAE髓鞘脱失和轴索损伤更明显,且有陈旧病灶周围的星型胶质细胞增生,而新发病灶无此表现,良性型EAE则改变接近正常。结论:首次建立了Wistar大鼠多病程EAE,且病理证实不同类型EAE的炎细胞分布、髓鞘脱失及轴索损伤等基本病理改变是不同的,它具有人类MS的许多发病特点,其中多病程的发病形式和主要病理特点与MS极其相似,是理想的MS动物模型。     

大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎模型研究

目的 用豚鼠脊髓匀浆诱发实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠模型。方法 应用豚鼠脊髓匀浆加完全弗氏佐剂和百日咳杆菌免疫Wistar大鼠。结果 免疫后8-14d大鼠发病，发病率为67％，光镜下病理学证实发病大鼠脑和脊髓内具有典型的脱髓鞘改变和炎性细胞浸润。电镜下也可见到髓鞘结构破坏和神经元轻微改变。结论 以豚鼠脊髓匀浆为抗原免疫Wist—ar大鼠可诱发EAE，具有发病率较高、费用低廉、模型稳定的特点，可以作为研究多发性硬化的动物模型。     

实验性变态反应性脑脊髓炎的病理学研究

目的用豚鼠脊髓匀浆诱发实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠模型。方法应用豚鼠脊髓匀浆加完全弗(氏)佐剂和百日咳杆菌免疫Wistar大鼠。结果免疫后8～14d大鼠发病,发病率为67%,病理学证实发病大鼠脑和脊髓内具有典型的脱髓鞘改变和炎性细胞浸润。结论以豚鼠脊髓匀浆为抗原免疫Wistar大鼠可诱发EAE,具有发病率较高,费用低廉,模型稳定的特点,可作为研究多发性硬化的动物模型。     

实验性变态反应性脑脊髓炎的病理学研究

目的用豚鼠脊髓匀浆诱发实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）大鼠模型。方法应用豚鼠脊髓匀浆加完全弗（氏）佐剂和百日咳杆菌免疫Wistar大鼠。结果免疫后8～14d大鼠发病，发病率为67％，病理学证实发病大鼠脑和脊髓审具有典型的脱髓鞘改变和炎性细胞浸润。结论以豚鼠脊髓匀浆为抗原免疫Wistar大鼠可诱发EAE，具有发病率较高，费用低廉，模型稳定的特点，可作为研究多发性硬化的动物模型。     

左旋咪唑对实验性变态反应性脑脊髓炎中枢神经病理的影响

目的:观察左旋咪唑(LMS)对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis,EAE)中枢神经系统病理变化的影响。方法:制作豚鼠脊髓匀浆和LMS等Wistar-EAE大鼠模型,比较各组模型的行为学、组织病理学和髓鞘变化。结果:①与豚鼠脊髓匀浆组相比,LMS对EAE具有明显的促发作用,表现在潜伏期明显缩短,发病率明显升高(P<0.05);而且LMS能够代替豚鼠脊髓匀浆直接激发EAE;②组织病理学观察:发病大鼠以脊髓、小脑、脑干为主的中枢神经系统内可见不同程度血管套的形成,室管膜下炎性细胞浸润,神经细胞的肿胀、变性、坏死等;广泛的神经髓鞘脱失,断裂;但轴突相对完整。结论:LMS引起EAE。     

F-VEP在监测EAE大鼠视神经病变中的作用

目的研究闪光视觉诱发电位(F-VEP)在监测实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)视神经病变中的作用。方法制作Wistar大鼠EAE模型,以对照组大鼠F-VEP检测值确定正常参考值范围。模型组大鼠于豚鼠脊髓匀浆乳化剂免疫后不同时间点进行F-VEP检测,发病大鼠于发病后第6天行电生理检查后取视神经、脑、脊髓等通过伊红(HE)染色和LFB-焦油紫染色法进行病理检查。结果发病大鼠均出现不同程度F-VEP异常和视神经病理表现异常:F-VEP异常主要表现为P波和/或N1波潜伏期延长,最长延长分别为59.58%和35.33%;视神经病理改变主要表现为髓鞘脱失和炎性反应。F-VEP检测大鼠视神经病变的灵敏度达到100%,特异度为50%。结论 F-VEP可用于评价视觉系统损伤。     

黏附分子CD44在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用

目的探讨黏附分子CD44在实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)发病中的作用。方法将20只大鼠随机分为正常对照组及EAE组,EAE组采用粗制髓鞘碱性蛋白(MBP)抗原注入大鼠后足掌皮下(0. 2 ml/100 g)制作EAE模型,观察大鼠的发病情况及病理表现;并采用免疫组织化学法检测两组大鼠脑组织CD44的含量。结果正常对照组大鼠未发病,EAE组大鼠均有不同程度的发病。HE染色后,光镜下观察,正常对照组大鼠脑和脊髓无异常; EAE组大鼠可见脑及脊髓实质内小血管充血,小静脉周围有大量炎性细胞浸润,血管周围白质脱髓鞘改变。免疫组化显示,正常对照组大鼠脑和脊髓组织未发现CD44阳性细胞; EAE组大鼠中枢神经系统(CNS)白质及灰白质交界处可见大量CD44阳性细胞。结论 EAE模型中存在黏附分子CD44的高表达,其对EAE的发病可能起到促进作用。     

牛脊髓髓鞘碱性蛋白的提取及初步鉴定

目的探索一条从牛脊髓中提取牛髓鞘碱性蛋白(M BP)的行之有效的方法,为实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)动物模型的建立及研究工作奠定基础。方法组织匀浆器将新鲜的牛脊髓捣碎,用London法抽提,考马司亮蓝法鉴定粗提品的含量,SDS-PAGE观测其分子量,M BP免疫W istar大鼠,以鉴定其抗原性。结果粗提品蛋白含量达10m g/m l,粗提品诱导EAE症状典型,发病率高。结论采用London法可从牛脊髓中获取大量的M BP,与其它方法比较产量高,诱导EAE效果好,且本法简便,所以有一定的推广价值。     

实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠脑组织中NF-kBp65，TNF-a表达及雷公藤多甙的干预研究

目的观察Wistar大鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）脑组织中核转录因子-KBp65（NF-KBp65）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a）的表达情况,用雷公藤多甙（TWP）进行干预,探讨TWP对EAE的防治效果及作用机制。方法建立Wistar大鼠EAE模型,并选用TWP、泼尼松（PRD）干预治疗。65只Wistar大鼠随机分成5组：对照组5只,EAE组、TWPI组（EAE＋TWP10mg·kg-1·d-1）、TWPII组（EAE＋TWP30mg·kg-1·d-1）和PRD组（EAE＋PRD5mg·kg-1·d-1）各15只。观察各组大鼠发病情况并进行神经功能评分。大鼠脑和脊髓腰膨大段组织切片：苏木素一伊红（HE）染色＋罗克沙尔坚牢蓝（LFB）髓鞘染色,光镜下进行炎性病灶计数,并免疫组化方法检测大鼠脑组织内NF—KBp65、TNF-a的表达。结果EAE组及干预组大鼠脑组织内NF—KBp65、TNF—a表达水平随病情加重而升高,随病情缓解而降低。与EAE组比较,干预组大鼠发病率减低,潜伏期延长,神经功能评分及体重损失明显降低,脑组织炎性病灶数明显减少;同时脑组织NF—xBp65和TNF—a阳性细胞数量明显减少。TWP大剂量组与PRD治疗效果相当,且优于TWP小剂量组。结论NF—KBp65、TNF—a过表达可能参与EAE发生及进展;TWP有明显防治大鼠EAE作用,在一定程度上呈剂量相关性,其机制可能与下调NF—KBp65、TNF—a表达有关。     

基质金属蛋白酶9在实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠发病过程中的动态表达

目的通过检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)在EAE大鼠发病过程中不同阶段外周血和中枢神经系统中的表达水平及动态变化,以探讨其在多发性硬化发病过程中的作用及机制。方法 Wistar雌性大鼠80只,分为模型组(EAE组)、完全福氏佐剂组(CFA组),分别于免疫后6天、8天、10天、12天、14天、16天、18天及20天取视交叉处脑组织和脊髓腰膨大段行HE染色观察炎性细胞的浸润状况;免疫组化法检测脑和脊髓组织中MMP-9的表达,酶联免疫吸附实验测定血清中MMP-9的含量。结果 EAE组大鼠脊髓和脑组织中MMP-9阳性细胞数及血清中MMP-9水平均显著高于同期CFA组(P<0.05);EAE 10天组与EAE 6天、14天、18天及20天组比较,大鼠脊髓腰膨大处MMP-9阳性细胞数较多(P<0.05);EAE 12天组与EAE 6天组、8天组、14天组、16天组、18天组及20天组比较,大鼠脑组织视交叉处MMP-9阳性细胞数较多(P<0.05);EAE 12天组与EAE 6天组、8天组、10天组、14天组、16天组、18天组及20天组相比较,大鼠血清中MMP-9含量较高(P<0.05)。结论在EAE大鼠发病前期即有中枢组织内MMP-9的高表达,且EAE大鼠脊髓中MMP-9的高表达要早于脑组织和外周血,但MMP-9表达的高峰在第12天与病理变化和疾病进展是同步的。     

Experimental autoimmune encephalomyelitis: Antigen-induced inhibition of biochemical and immunohistological alterations

A comprehensive biochemical, immunological, and histological study was undertaken during suppression of experimental autoimmune encephalomyelitis (EAE) induced by antigen-specific inhibition of the immune response. Pretreatment of Wistar rats by intraperitoneal administration of low doses of saline-soluble bovine myelin or myelin basic protein (MBP) but not with ovalbumin suppresses the appearance of the clinical symptoms of EAE induced by sensitization with bovine myelin in complete Freund's adjuvant. Analysis of the central nervous system (CNS) of animals pretreated with MBP or whole myelin shows inhibition of the diminution of MBP and 2′,3′-cyclic nucleotide 3′-phosphohydrolase (CNPase) activity observed in the EAE animals or in rats pretreated with ovalbumin. With respect to the CNS lipid content, these suppressive treatments abolish the increase in esterified cholesterol and partially revert the diminution in the content of cerebrosides and total cholesterol characteristic of the acute stage of the disease. Concomitantly, meningeal and parenchymal infiltration with mononuclear cells and deposits of immunoglobulins in the infiltrated regions as well as in spinal cord motor neurons were reduced. Analysis of the humoral response to myelin antigens shows that all EAE as well as treated animals developed antibodies to MBP and other myelin proteins. However, a higher incidence and level of these antibodies was observed in nontreated EAE animals and MBP- and ovalbumin-treated rats, while rats treated with total bovine myelin showed a highly reduced humoral response. The present results indicate that intraperitoneal treatment with soluble forms of myelin antigens, concomitant with the suppression of the clinical symptoms of the disease, markedly reduces the biochemical and histological alterations occurring in EAE animals and produces changes in the autoimmune humoral response. © 1996 Wiley-Liss, Inc.     

雷公藤多甙对EAE大鼠脊髓β-APP和IL-17表达的影响

目的观察雷公藤多甙对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)大鼠脊髓中β-APP和IL-17表达的影响。方法将30只大鼠随机分为空白对照组(CON组)、模型组(EAE组)、治疗组(TWP组),建模后分别行神经功能评分,大鼠脊髓组织行HE染色,免疫组化检测脊髓中β-APP和IL-17表达水平。结果与EAE组比较,TWP组大鼠发病率下降,平均神经功能评分降低,炎性细胞浸润减少,在神经功能评分和病理学改变方面差异明显(P<0.05);免疫组化示TWP组较EAE组β-APP和IL-17表达水平降低(P<0.05)。结论雷公藤多甙对EAE大鼠有一定保护作用,可能与抑制β-APP、IL-17表达有关。     

木犀草素对实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠SPH/SPHK1/S1P1通路及神经元凋亡的影响

目的 探讨木犀草素(Luteolin)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune en-cephalomyelitis,EAE)大鼠神经酰胺-鞘氨醇(Sphingosine,SPH)/鞘氨醇激酶1(Sphingosine kinase 1,SPHK1)/1-磷酸鞘氨醇受体1(Sphing...     

实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠神经损害与脑组织中丝裂原活化蛋白激酶表达的关系

目的观察实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)模型小鼠脑组织中丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)表达变化及其与神经损害的关系。方法 C57BL/6小鼠随机分为:EAE组(n=12),采用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55多肽(MOG35-55)制备成抗原乳剂免疫小鼠;对照组(n=10),用生理盐水处理小鼠。每日观察两组小鼠的行为学变化,并进行神经功能障碍评分。于高峰期处死小鼠,冰冻处理脑与脊髓,行苏木精-伊红染色观察脊髓组织的炎症细胞浸润,LFB染色观察脊髓组织的髓鞘脱失,蛋白印迹法检测小鼠脑组织中MAPKs表达。分析EAE小鼠神经功能障碍改变与中枢神经组织MAPKs表达量的相关性。结果 EAE组与对照组比较:日均神经行为学评分增加(P0.01);脊髓炎症细胞浸润增多(P0.001),髓鞘脱失增多(P0.001)。P-ERK(42)、P-ERK(44)、P-JNK(54)表达量均增多(P0.01、P0.05、P0.05)。神经功能障碍与P-ERK(42)、P-ERK(44)、P-JNK(54)表达呈正相关。结论 EAE高峰期神经损伤程度与中枢神经组织中的P-ERK(42)、P-ERK(44)、P-JNK(54)表达增加相平行,提示MOG35-55诱导的EAE中枢神经损伤可能与MAPKs所激活的信号通路有关。