人肾透明细胞癌组织中细胞增殖与凋亡及凋亡相关因子的表达

目的:本课题旨在通过检测人肾透明细胞癌组织中细胞增殖(PCNA)与凋亡(TUNEL法)及凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-9表达的变化,研究这些因子的表达与肾癌的关系.方法:标本离体后分成三组,(Ⅰ)肾透明细胞癌组;(2)癌旁组织组;(3)证常肾组织组,应用HE染色法、TUNEL法及免疫组织化学方法进行观察研究.结果:(1)HE染色结粜:肾透明细胞癌组织镜下可见肿瘤细胞体积较大,圆形或多边形,胞质染色浅,透明或颗粒状,核同缩,间质富有毛细血管和血窦.(2)TUNEL检测结果:在肾癌组织、癌旁组织及正常肾组织组均有凋亡发生.凋亡肾组织细胞表现为染色质凝集、边集,核固缩.正常肾组织组细胞核有弱的阳性表达,癌旁组织表达明显增多,肾癌组织阳性表达最少.(3)PCNA免疫组化染色结果:正常肾组织内的细胞核有弱的阳性表达,癌旁阳性表达增加,肾癌组织阳性表达明显增多.(4)Caspase-3、Caspase-9免疫组化结果:Caspase_3 Caspase-9在难常肾组织中可见少量弱的阳性反应,癌旁组织阳性表达增加,肾癌组织表达明显减少.结论:癌旁细胞组织Caspase-3和Caspase-9的蛋白表达明显高于正常肾组织及癌组织,癌组织表达最少;而PCNA则相反,癌组织高于癌旁组织和正常肾组织,正常肾组织表达最少.癌组织中Caspase-3和Caspase-9表达下降,PCNA表达升高说明细胞凋亡减少,癌组织细胞增殖旺盛,是肿瘤形成的重要机制.Caspase-3、Caspase-9、PCNA于肾透明细胞癌的表达在肿瘤分期间无明显差异性.     

细胞凋亡相关因子Caspase-3、Caspase-9和增殖细胞核抗原在人肾透明细胞癌中的表达

目的 检测人肾透明细胞癌组织中细胞凋亡相关重要因子Caspase-3、Caspase-9和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表达的变化,研究这些因子的表达与肾癌的关系.方法 标本离体后分成3组,①肾癌细胞组;②癌旁组织组;③正常肾组织组.均用10%福尔马林固定48 h,常规石蜡包埋、切片5 μm,应用免疫组织化学方法进行观察.结果 PCNA免疫组织化学染色结果,正常肾组织内的细胞核有弱的阳性表达,癌旁组织阳性表达增加,高于正常肾组织;肾癌组织阳性表达明显增强, 明显高于癌旁组织.Caspase-3与 Caspase-9均在正常肾组织中有弱的阳性反应,癌旁组织阳性表达增加,肾癌组织表达明显减少.3组之间两两比较差异均有统计学意义(P<0.01).肾癌4个期之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 癌旁组织Caspase-3和Caspase-9蛋白表达明显高于正常肾组织及癌组织,癌组织表达最少;癌组织中Caspase-3和Caspase-9表达下降,说明细胞凋亡减少;PCNA在正常肾组织组、癌旁组织组、肾癌组织组的表达呈明显加强趋势,癌组织细胞增殖旺盛,是肿瘤形成的重要机制.Caspase-3、Caspase-9和PCNA于肾透明细胞癌的表达在肿瘤分期间差异无统计学意义.Caspase-3与Caspase-9蛋白表达呈正相关.     

黏蛋白在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的: 探讨黏蛋白1(MUC1)在人肾透明细胞癌中的表达及意义.方法: 采用免疫组织化学SP法检测57例肾透明细胞癌(RCCC组)和21例肾癌旁组织(对照组)中MUC1的表达.应用Image-Pro Plus 6.0型图像分析软件定量测定阳性染色区的平均吸光度值.结果: MUC1定位表达于细胞质中,肾癌细胞和癌旁组织中均有表达,RCCC组平均吸光度值为0.4295±0.0939,对照组为0.3371±0.0822,差异有统计学意义(P<0.01).MUC1表达与肾癌的临床分期及有无转移均有一定关系(P<0.01和P<0.05).结论: MUC1 在人肾透明细胞癌中表达增强,可能在人肾透明细胞癌的发生、发展、浸润及转移中起重要作用,可能成为肾癌免疫治疗的靶抗原.     

存活素和PTEN在肾透明细胞癌中的表达及意义

目的 检测存活素和张力蛋白同源第10染色体丢失的磷酸酶基因(PTEN)在肾透明细胞癌中的表达,并探讨存活素与PTEN的相互关系.方法 采用免疫组化PV-9000法检测50例肾透明细胞癌标本和10例癌旁正常肾组织标本中存活素和PTEN的表达情况.结果 50例肾透明细胞癌组织中存活素阳性表达率为86%,正常肾组织中存活素阳性表达率为0.存活素的表达与病理分级和临床分期均密切相关,PTEN的表达与病理分级和临床分期亦密切相关.存活素和PTEN在肾透明细胞癌组织中的表达存在显著负相关性(r=-0.610,P<0.01).结论 存活素在肾透明细胞癌中过表达,PTEN在肾透明细胞癌中表达减低,存活素和PTEN的表达呈显著负相关;存活素在肾癌发展中起促癌作用,PTEN起抑癌作用,两者在肾癌的发生、发展中具有拮抗作用.     

SATB1在肾透明细胞癌中的表达及临床意义

目的 检测肾透明细胞癌中特异AT序列结合蛋白1(SATB1)的表达,分析SATB1的表达与肾透明细胞癌的发生、进展及转移的关系及意义.方法 以RT-PCR法检测30例成对肾癌组织及癌旁正常组织、5例非癌肾组织、肾透明细胞癌786-O细胞株中SATB1 mRNA的表达,分析SATB1表达与临床病理参数的相关性.结果 SATB1在肾透明细胞癌癌组织及癌旁组织中均有表达,癌组织中SATB1 mRNA表达量显著高于癌旁组织(P＜0.05),SATB1在非癌肾组织中有微弱表达,SATB1 mRNA的表达随临床分期的升高而增加,并且在淋巴结转移组高于未转移组(P＜0.05).结论 SATB1 mRNA的表达水平增高与肾透明细胞癌的发生、发展及转移有关.     

BNIP3在肾透明细胞癌中的表达及其与HIF-1α、VEGF的相关性研究

目的探讨促凋亡蛋白BNIP3在原发性肾透明细胞癌中的表达及其与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的相关性。方法联合应用组织芯片技术和Envision二步免疫组化技术检测104例肾透明细胞癌及48例癌旁正常肾组织中BNIP3、HIF-1α、VEGF的蛋白表达水平,并分析肾癌中BNIP3表达与HIF-1α、VEGF的相关性。结果 BNIP3、HIF-1α及VEGF在肾透明细胞癌中的阳性表达率分别为36.5%、61.5%和69.2%,在癌旁正常肾组织中的阳性表达率分别为12.5%、8.3%和12.5%。在BNIP3阳性和阴性表达组中,HIF-1α、VEGF的阳性率之间差异无统计学意义(P>0.05),VEGF阳性组与阴性组中HIF-1α的阳性表达率差异有统计学意义(P<0.05),且两者之间的表达有相关性。结论 BNIP3在透明细胞癌中有所表达,但多数为低表达,且与HIF-1α和VEGF的表达无相关性。     

EZH2和PTEN蛋白联合检测与肾透明细胞癌的相关性研究

目的 研究EZH2和PTEN蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其相关性,并探讨与肾透明细胞癌临床分期及病理分级的关系.方法 采用免疫组织化学SABC法对58例肾透明细胞癌标本和8例正常肾脏组织标本中EZH2和PTEN的表达进行检测.结果 正常肾脏组织与肾透明细胞癌标本EZH2蛋白表达率分别为12.5%(1/8)和74.1%(43/58)(P<0.05).且EZH2的表达随肾癌的临床分期升高而增加,但EZH2的表达与肾癌的病理分级无明显统计学意义;正常肾脏组织与肾透明细胞癌标本PTEN蛋白表达率分别为100%(8/8)和43.1%(25/58)(P<0.05),且PTEN的表达随肾癌的病理分级及临床分期升高而降低;EZH2和PTEN在肾癌中的表达存在负相关(rs=-0.775,P<0.05).结论 PTEN和EZH2有负相关性,可能在肾透明细胞癌的发生发展过程中起关键作用,并可作为判定肾透明细胞癌恶性程度及进程参考的指标.     

肾细胞癌患者外周血及癌组织中G250 mRNA的表达

目的:探讨肾细胞癌(RCC)患者外周血及癌组织中肾癌相关蛋白G250 mRNA的表达.方法:应用RT-PCR技术检测34例RCC患者(包括31例肾透明细胞癌和3例非透明细胞癌)外周血及癌组织中G250 mRNA的表达情况,并选择20例健康人外周血及7例正常肾组织作对照.结果:RCC组外周血及癌组织中G250 mRNA的阳性表达率分别为67.6%(23/34)和85.3%(29/34), 对照组均为阴性表达,2者相比,差异有统计学意义(P<0.01).肾透明细胞癌组外周血及癌组织中G250 mRNA的阳性表达率分别为74.2%(23/31),93.5%(29/31),高于非透明细胞癌组(0%(0/3),0%(0/3),P<0.05).RCC组织中Ⅲ～Ⅳ期患者外周血及癌组织中G250 mRNA阳性表达率均高于Ⅰ～Ⅱ期患者(P<0.05).结论:G250 mRNA的表达对肾癌,尤其是对肾透明细胞癌有较好的特异性,且与RCC的恶性程度相关.     

CD70在肾透明细胞癌组织中的表达及意义

目的探讨肾细胞癌（简称肾癌）中淋巴细胞活化抗原CD70的表达状况及其临床意义,为肾癌干细胞研究筛选适当的表面标志物。方法采用免疫组织化学法检测20例正常肾组织、62例肾癌组织及癌旁组织中CD70蛋白表达状况。结果 CD70在正常肾组织、癌旁组织、透明细胞癌、乳头状细胞癌、嫌色细胞癌中的阳性表达率分别为0.00%（0/20）、6.82%（3/44）、90.91%（40/44）、27.27%（3/11）、14.29%（1/7）。在肾癌组织中CD70表达水平高于正常肾组织和癌旁组织（P〈0.01）,CD70表达水平在肾透明细胞癌中随其分化程度降低而增强,但与临床分期无相关性。结论 CD70的表达与肾透明细胞癌的恶性程度有相关性,可作为肾透明细胞癌的新型特异性肿瘤标志物,用于对尚未确定组织学分类的肾肿瘤进行鉴别诊断,并有望成为肾透明细胞癌预后判断的指标及治疗的靶标。     

肾透明细胞癌组织中BNIP3的表达及意义

目的 研究肾透明细胞癌中BNIP3表达及意义。 方法 收集肾癌手术切除的肾癌组织和对应癌旁正常肾组织新鲜标本,共30例。运用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹法（Western blot）检测各组BNIP3、von Hippel-Lindan(VHL)、缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）、血管内皮生长因子（VEGF）的表达情况。并分析BNIP3与VHL、HIF-1α、VEGF表达相关性,及各个基因表达与临床病理参数间关系。 结果 实时荧光定量PCR检测结果示:在RNA水平,BNIP3、VHL在肾癌组织中表达水平低于癌旁正常肾组织(P<0.05), HIF-1α和VEGF在肾癌组织中表达水平高于癌旁正常肾组织(P<0.05),BNIP3表达与VHL、HIF-1α、VEGF无相关性,肾癌组织中BNIP3低表达与各个临床病理学特征无相关性。Western blot检测结果示:在蛋白水平,BNIP3、VHL在肾癌组织中表达水平低于癌旁正常肾组织(P<0.05), HIF-1α和VEGF在肾癌组织中表达水平高于癌旁正常肾组织(P<0.05)。BNIP3蛋白表达与VHL、HIF-1α、VEGF蛋白亦无相关性（P>0.05)。 结论 可能存在某种调控机制使BNIP3在肾透明细胞癌表达下调,且BNIP3低表达与VHL、HIF-1α、VEGF表达无相关性。