不同部位三七粉显微特征及质量标准

目的:建立三七主根、剪口、筋条不同部位加工成的三七粉质量标准。方法:采用感官、色度测定、显微、理化、含量测定检验方法。结果:不同药用部位加工成的三七粉在外观颜色、显微特征、灰分、含量测定几个方面有明显区别,感官和显微特征不能区分三七的商品规格。颜色可以区分三七主根、剪口和筋条制成的三七粉,主根加工成的三七粉颜色最浅,呈黄白色,剪口与筋条加工成的三七粉颜色略深,呈现棕黄色和浅棕色,使用色差仪并结果经过SPSS分析结果与观察一致,剪口的颜色最深,筋条次之,主根颜色最浅;显微特征能够区分剪口和主根、筋条加工成的三七粉,剪口加工成的三七粉中可见纤维,主根与筋条加工成的三七粉中均未检出有纤维,剪口可见簇晶,主根中簇晶未检出;主根灰分全部合格,剪口和筋条有部分不合格,酸不溶性灰分全部合格。测定三七不同部位人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1及三七皂苷R1的含量,主根和筋条与剪口成分有明显差异。结论:颜色差异、显微特征区别、灰分数据、人参皂苷Rg1,人参皂苷Rb1及三七皂苷R1的含量为三七粉提供质量依据。     

水提三七叶苷副产物多糖的分离及含量测定

目的:建立水提三七叶苷副产物多糖的提取、分离及含量测定方法。方法:水提三七茎叶总皂苷废弃液经纳滤膜浓缩5倍后,低温加热浓缩至密度为1.25,乙醇多次沉淀提取多糖,用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法以485nm为检测波长测定多糖含量。结果:浓缩液中多糖得率39.46%,含量为15.44%,方法的回收率为100.67%,RSD=2.74%。结论:从水提三七叶苷废弃液中提取多糖有较大开发利用价值;DNS比色法测定多糖含量操作简单,重现性好,可作为三七中多糖含量测定的常规方法。     

三七多糖含量测定方法比较

目的通过比较硫酸苯酚法和硫酸蒽酮法在测定三七多糖时的优劣性,建立更准确的三七多糖含量测定检测方法,为三七、三七剪口的多糖质量评价提供依据。方法依次用80%乙醇和纯水提取三七药材,水提部分得到三七多糖,对所得多糖采用硫酸-苯酚法和硫酸-蒽酮法分别测量三七粗多糖的含量。结果从精密度的角度来看,苯酚硫酸法较蒽酮硫酸法可靠(RSD=0.4193.66)。从回收率的角度来看,使用苯酚硫酸法测定时,回收率更高(98.0697.60)。结论苯酚硫酸法为更准确测定三七粗多糖含量的检测方法,此外,苯酚硫酸法还具有操作更简便、安全、快捷等优点。     

三七不同药用部位聚炔类成分的GC-MS分析研究

目的对三七不同药用部位的聚炔类成分进行气质联用分析。方法采用气质联用技术对三七主根、花、剪口、筋条、茎叶和须根等不同药用部位的环己烷提取溶液进行了聚炔类成分分析,并测定其相对含有量。结果从三七不同药用部位中共鉴定了3个聚炔类成分,包括methyl 5,7-hexadecadiynoate、人参炔醇和人参环氧炔醇。测定结果显示,3个聚炔类成分的总含有量在三七筋条、3年生主根、花、剪口中很高,在茎叶中很低;主根中头数越多,含有量越低;三七花中的人参炔醇含有量很高,但人参环氧炔醇几乎未能检测。结论建立了内标校正相对含有量的三七聚炔类成分气质联用的定量分析方法,使测定具有可比性。     

基于近红外光谱技术快速定性判别市售三七粉末饮片部位来源的研究

目的:采用近红外光谱技术(NIRS)快速定性判别市售三七粉末饮片粉末部位来源。方法:采集三七主根、筋条、剪口各部位的NIRS图,采用主成分分析与马氏距离相结合的判别分类方法,建立三七不同药用部位的判别分析模型,运用模型对市售三七粉末饮片粉末部位来源进行判别。结果:在波段范围为4 400~4 800 cm-1、5 400~6 600 cm-1、7 800~10 000 cm-1三七主根、剪口和筋条能够较好的分类,内部验证准确率均为100%,外部验证三七主根、剪口和筋条准确率分别为100%、75%和66%;25批市售三七粉末饮片粉末部位来源的鉴别中,有22批粉末部位来源判别为剪口,有3批粉末部位来源判别为剪口和筋条的混合物。结论:用近红外光谱技术对市售三七粉末饮片粉末部位来源的快速判别可行,既扩展了近红外在线监测应用功能,又补充了传统性状鉴别的局限性。     

不同净制工艺对三七质量的影响

目的:分析不同净制工艺对三七主根、剪口、筋条质量的影响,为建立该药材合理的净制工艺提供参考。方法:选取超声清洗5 min,超声清洗10 min,流水冲洗,锉刀打磨和清水浸泡5种清洗方式对三七进行净制处理,并参照药典的方法对其外观性状、水分、总灰分、醇溶性浸出物及有效成分含量进行测定,将各参数结合方差分析等多元统计分析进行比较。结果:超声清洗5 min更适合根和筋条有效成分的保留,超声清洗5 min和锉刀打磨2种净制方式均适用于剪口;醇溶性浸出物和人参皂苷Rg1,Rb1和三七皂苷R1含量均为剪口主根筋条。结论:超声清洗作为一种新型的净制方法,适用于三七所有药用部位的清洗。     

三七药材中三七总皂苷的含量比较

目的:对不同规格和部位的三七药材中三七总皂苷的含量进行比较。方法:以人参皂苷Rg1为对照品,采用紫外分光光度法测定三七药材中三七总皂苷的含量,测定波长为560nm。结果:人参皂苷Rg1在0.25~1.25mg范围内,吸收值与含量呈线性关系,r=0.9970,平均回收率为98.86%,RSD=1.76%(n=5)。不同三七药材中三七总皂苷的含量在10.1%~32.7%(g/g)之间,以剪口中三七总皂苷的含量最高。结论:测得不同三七药材中三七总皂苷的含量存在差别的,含量趋势为剪口>60头>筋条>100头>无数头。     

北沙参茎叶多糖的含量测定

目的测定北沙参茎叶的多糖含量,为北沙参茎叶的质量鉴定及开发利用提供依据。方法用蒽酮-硫酸法测定北沙参茎叶中多糖的含量。结果北沙参茎叶中多糖总量丰富,平均为21%。结论北沙参茎叶中多糖较高,极具开发利用价值。     

三七多糖成分的含量测定及其变化

目的 分析不同产地，不同规格，不同采收期三七中的多糖含量，并考察其变化规律，为三七的质量评价提供依据。方法 采用苯酚-硫酸比色法测定了多糖含量。结果 不同产地，不同采收期和不同规格的三七中多糖含量有明显差异。结论 产地，采收期及规格是影响三七多糖含量的重要因素。     

反相离子对色谱法测定三七中三七素含量

建立反相离子对色谱法测定三七中三七素含量。通过超声提取样品中的三七素,并采用四丁基氢氧化铵离子对试剂与反相高效液相色谱法结合直接测定三七素含量。确定超声提取优化条件为物液比为1:20,连续超声提取2次,每次15 min,3500 r·min^-1,离心15 min。三七不同生长年限、产地、部位、以及同属植株中三七素含量均有差异:一年生三七茎叶三七素含量最高;红河州样品三七素含量高于文山州;真空冷冻干燥方式优于其他加工方式;三七高于其他同属植株。该检测方法操作简便,分离度好,稳定性好,适用于三七素含量直接测定,为三七中三七素的质量标准控制提供参考。     

土壤无机元素含量与三七药材品质的关系

目的:三七药材品质可能与种植土壤中无机元素含量有关,研究土壤中无机元素与三七药材品质的相关性,为三七科学种植提供理论依据。方法:采集云南省文山州、红河州、玉溪市和曲靖市4个产地16个样点种植三七的根及根际土壤,通过电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定三七根及根际土壤无机元素含量,通过高效液相色谱法(HPLC)测定三七根中皂苷类成分含量。结果:文山州土壤和药材中人体健康必需微量元素含量较其他3个产地高,4个产地的三七根际土壤和药材中有害元素镉(Cd)含量均较高;三七药材中人体健康必需微量元素,如铝(Al),铁(Fe),硒(Se)多与土壤中镁(Mg),钾(K)呈显著正相关,与土壤中重金属元素砷(As),汞(Hg)呈显著负相关;4个产地的三七皂苷类成分含量无显著性差异,其中,文山州与曲靖市较高,红河州次之,玉溪市最低;三七皂苷类成分含量与药材中无机元素含量有关,与土壤中无机元素含量无显著相关性。结论:土壤无机元素通过影响三七药材中无机元素含量影响三七药材品质,建议三七种植选择Mg,K含量较高的土壤。     

三七总皂苷脂质体微丸的制备

目的:制备三七总皂苷脂质体微丸.方法:以包封率为考察指标,大豆磷脂-胆固醇、水相-有机相,药物质量浓度,脂类用量为考察因素,通过正交设计优选三七总皂苷脂质体冻干粉的处方工艺,采用塑制法制备三七总皂苷脂质体微丸.结果:三七总皂苷脂质体冻干粉的最佳处方工艺为大豆磷脂-胆固醇(6∶1),水相-有机相(1∶4),药物质量浓度20 g·L-1,磷脂用量150 mg.制备的脂质体微丸溶解后脂质体的平均粒径220.5 nm,Zeta电位-71.21 mV,1h内溶出度达81.41％.结论:制备的三七总皂苷脂质体微丸体外溶出度较高,脂质体的粒径分布较好、质量稳定.     

三七药渣中主要多糖成分的分离纯化及其抗氧化活性研究

目的 分离纯化三七药渣中主要多糖组分,分析其单糖组成,并对比研究各组分多糖的抗氧化活性。方法 采用水提醇沉法提取三七药渣粗多糖;经DEAE Fast Flow阴离子交换柱、Sephadex G-50柱色谱法进行分离纯化。采用高效凝胶渗透色谱（HPGPC）法测定其相对分子质量及纯度,通过扫描电子显微镜（ScanningElectronMicroscope,SEM）、傅里叶变换红外光谱仪（Fourier TransformInfraredspectroscopy,FT-IR）、HPLC-衍生化等方法对各组分多糖的单糖组成和初级结构进行分析。分析其抗氧化能力以及对RAW 264.7细胞氧化损伤的保护作用。结果 分离得到3个多糖组分（PNPS-0、PNPS-0.2、PNPS-0.3）,3者的单糖组成和比例存在差异：PNPS-0主要由D-葡萄糖（52.28%）和D-半乳糖（34.14%）组成;PNPS-0.2主要由D-半乳糖（40.89%）、D-阿拉伯糖（19.38%）和D-葡萄糖（12.25%）组成;PNPS-0.3主要由D-葡萄糖醛酸（40.43%）、D-半乳糖（22.61%）和D-葡萄糖（...     

三七花及其易混淆品的微性状鉴别

目的:研究市售五加科植物三七(Panax notoginseng),人参(P.ginseng),西洋参(P.quinquefolius)的干燥花序的微性状特征,为该类药材的微性状鉴别提供科学的理论依据。方法:利用中药微性状鉴定法对市场上销售的3种花序的不同部位运用电子目镜进行拍照,采用Photoshop CS6软件程序合成高清晰度微性状特征图片来对微性状特征进行鉴别研究,并对其表面微性状特征进行描述。最后归纳、总结出各药材的鉴别要点。结果:微性状鉴别较明显的区别点集中在总花梗、小花梗、雌蕊方面,其中三七花总花梗和小花梗表面有非腺毛,小花梗表面白色突起呈不规则排列,雌蕊柱头分开,并且含有棕黄色树脂道;人参花总花梗和小花梗表面无非腺毛,雌蕊柱头常不分开,含不明显的黄色树脂道;西洋参花总花梗和小花梗表面有非腺毛,小花梗表面白色突起呈规则排列,雌蕊柱头不分开,无明显树脂道。结论:通过微性状鉴别法,可以清楚地看出各部位的微性状特征,能有效的对三七花、人参花、西洋参花进行区别,为三七花的真伪鉴别及质量评价提供依据。     

三七中花色苷合成结构基因的克隆及表达分析

目的克隆三七Panax notoginseng的花色苷合成结构基因(anthocyanin biosynthesis structural genes,ABSG),研究ABSG的表达模式及其与相关表型的关联性。方法利用RT-PCR技术克隆三七ABSG,进行生物信息学和表达模式分析;使用pH示差法分析三七紫根的花色苷含量,并通过qRT-PCR技术进行相关结构基因的关联性研究。结果克隆获得6类共8个三七ABSG,其开放阅读框(open reading frame,ORF)长度在600～1500 bp,均含有花色苷生物合成相关的保守结构域。进化树分析显示,8个基因被分为5个分支,且与其他物种有较高的同源性。顺式作用元件分析表明,三七ABSG启动子序列中含有多种元件,其中光响应和转录因子类元件的数量最多。表达模式显示,8个基因主要分为在花发育前期阶段(花蕾期)高丰度表达基因和在根部高量表达基因。此外,对三七紫根的分析发现,相比于普通型黄白根,其花色苷含量提高约3倍,PnF3’H1基因和PnUFGT基因表达显著增强,表明它们可能是参与紫根三七中花色苷形成的关键结构基因。结论克隆获得8个三七ABSG,为该类基因的功能机制研究和三七种质创新利用奠定基础。     

侵染三七的三七Y病毒和中国番茄黄化曲叶病毒PCR同步检测技术

目的 建立一种高效、快速、准确地同步检测侵染三七Panax notoginseng的2种病毒——三七Y病毒（Panax notoginsengvirus Y,PnVY）和中国番茄黄化曲叶病毒（tomato yellow leaf curl China virus,TYLCCNV）的双重PCR技术。方法 分别以单一感染PnVY或TYLCCNV及复合侵染了这2种病毒的染病三七植株为样品,CTAB法提取叶片总核酸作为模板,根据GenBank上已登录的PnVY和TYLCCNV这2种病毒核酸序列设计特异性检测引物。通过单一PCR技术明确染病三七样品PnVY和TYLCCNV的发生情况,筛选出可用于一步法双重PCR检测PnVY和TYLCCNV的引物组合及引物浓度,并对反应条件进行优化。对扩增产物进行克隆测序,验证一步法双重PCR检测的准确性和特异性。结果 建立的一步法双重PCR检测技术能同步有效地检测三七病样中的PnVY和TYLCCNV,检测灵敏度高,最低检测限点为核酸原液的0.01稀释倍数,特异性强。结论 所建立的一步法双重PCR检测技术可以高效、快速、准确、特异地同步检测三七样品中的PnVY、TYLCCNV2种病毒。     

三七的组织培养研究进展

三七是中国传统名贵中药材,在药品、食品和化妆品领域具有广泛的商业应用。从三七愈伤组织诱导、体细胞胚胎诱导及再培养、细胞悬浮培养和不定根诱导4个方面综述了三七组织培养的研究进展,以期为快速获得三七优质苗、提高三七次生代谢产物的含量提供参考,促进三七资源的开发和可持续利用。     

基于粒子群-随机森林算法和气象数据的三七叶面积生长预测模型

目的 基于数据挖掘技术,建立三七叶面积生长预测模型,对于三七整个生长期的精准管理与决策提供参考。方法基于粒子群-随机森林算法,采用2018、2019年4～10月云南省红河自治州泸西县三七种植基地棚内气象因子数据以及三七叶面积生长数据作为训练集和测试集构建生长预测模型。结果 通过特征工程中皮尔森系数分析可知,三七叶生长与土壤温度、上方水蒸气压和下方水蒸气压等气象因子呈正相关,其中土壤温度正相关程度最大,其皮尔森相关系数在0.75～0.90;下方土壤热通量与三七叶生长呈负相关,其皮尔森相关系数为-0.4～-0.3;通过粒子群优化随机森林算法训练的生长预测模型,其均方根误差(root mean square error,RMSE)收敛时值为0.021 82,模型优化后的三七叶生长预测模型决定系数R2达到0.999 97。结论 通过多种算法对比实验结果表明,粒子群-随机森林算法构建的三七叶面积生长预测模型具有较高的预测精度。该方法为三七叶的生长预测提供了新的研究思路。     

三七中总皂苷含量测定的对照品筛选

目的: 考察选用不同皂苷类对照品为指标对样品中三七总皂苷含量测定的影响。 方法: 以人参皂苷Rg₁、人参皂苷Rb₁、三七皂苷R₁、三七总皂苷为对照品,香草醛-高氯酸显色,采用紫外分光光度法测定三七中三七总皂苷的含量。 结果: 以不同对照品为指标测定三七总皂苷含量时,结果存在明显差异。 结论: 紫外分光光度法测定三七及其制剂中总皂苷含量时,可用三七总皂苷作对照品,为含有三七的制剂含量测定提供较为可靠的实验数据。