ICAM-1和VCAM-1单抗影响活化淋巴细胞粘附HUVEC的机理研究

目的研究细胞粘着分子-1(ICAM-1)和血管细胞粘着分子-1(VCAM-1)单抗对rIL-2活化的脐血淋巴细胞粘附人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的机理。方法①利用24孔板培养HUVEC,在相应孔中分别加入ICAM-1和VCAM-1单抗,30min后测定活化的脐血淋巴细胞和未活化的淋巴细胞粘附百分率;②采用桥联酶标法(APAAP)测定粘附细胞的表型。结果①ICAM-1和VCAM-1单抗(20mg／L)均可明显降低rIL-2活化的淋巴细胞的粘附,前者使粘附率由56．54％降至41．60％(P<0．05);后者使粘附率降至30．30％(P<0．05);②粘附细胞的表型分析结果表明,ICAM-1单抗可降低CD8     

粘附分子CD44v6在口腔鳞癌组织中的表达

目的 观察分析ＣＤ４４ｖ６在口腔鳞癌原发组织和转移组织中的表达，以期明确ＣＤ４４ｖ６在口腔鳞癌淋巴道转移中的作用。方法：免疫组织化学染色、半定量评估染色强度和测算阳性染色细胞后统计分析。结果：ＣＤ４４ｖ６分子在正常口腔粘上皮基底层、基底上层、棘层细胞胞膜表达；不同部位口腔粘膜上皮的阳性表达模式基本一致。在口腔鳞癌原发组织中，ＣＤ４４ｖ６表达减弱，表现为阳性反应产物形态的改变和ＣＤ４４ｖ６阳性细胞数     

实验性自身反应性脑脊髓炎动物脑内皮细胞VCAM—1的表达及其对淋巴细胞与内皮细胞粘附性的影响

目的：探讨血管细胞粘附分子－1（VCAM－1）在实验性自身反应性脑脊髓炎（EAE）致病中的作用。方法：采用免疫组化方法检测VCAM－1的表达,采用细胞粘附实验研究VCAM－1对淋巴细胞与EAE脑内皮细胞的粘附性的影响,结果：EAE脑内皮细胞有特异的VCAM－1的表达,VCAM－1单抗可抑制淋巴细胞与EAE脑内皮细胞的粘附,结论：VCAM－1是诱导EAE发病的重要粘附因子。     

血管细胞粘附分子调控造血的研究进展

本文简述了血管细胞粘附分子 (Vascularcelladhesionmolecule 1,VCAM 1)的结构和生物学功能 ,总结了VCAM 1在恶性血液病骨髓基质中的表达和意义 ,探讨了VCAM 1在造血干细胞动员和归巢中的作用 ,指出VCAM 1作用机制的深入研究将对恶性血液病的治疗提供更为有效的方法。     

鼻咽癌组织表达VCAM-1与局部淋巴细胞浸润的关系

目的:观察鼻咽癌组织表达血管粘附分子-1(VCAM-1)与局部浸润淋巴细胞的关系。方法:收集51例鼻咽癌和22例慢性鼻咽炎石蜡标本和临床资料,观察癌巢间淋巴细胞浸润程度,计数癌巢内淋巴细胞数量;用VCAM-1、CD3、CD4、CD8单克隆抗体进行免疫组化染色,并判断鼻咽癌表达VCAM-1程度,计数CD3+和CD4+、CD8+T细胞。结果:(1)癌细胞表达VCAM-1的鼻咽癌病例达92.16%。(2)鼻咽癌细胞表达VCAM-1与淋巴结转移与否、分化程度和临床分期均无关(P>0.05)。(3)鼻咽癌细胞表达VCAM-1与巢间淋巴细胞浸润程度、巢内淋巴细胞数量、CD4+、CD8+T细胞数量均无关(P>0.05)。(4)鼻咽癌细胞轻度表达VCAM-1时组织中CD3+T淋巴细胞明显增多(P=0.009),但不显示强度依赖性作用。结论:(1)VCAM-1在鼻咽癌细胞表达率很高,其表达强度与转移和临床分期无关。(2)鼻咽癌细胞表达VCAM-1与正常细胞表达VCAM-1的生理作用有所不同,不显示明确地吸引淋巴细胞的作用。     

实验性自身反应性脑脊髓炎动物脑内皮细胞VCAM-1的表达及其对淋巴细胞与内皮细胞粘附性的影响

目的 :探讨血管细胞粘附分子 - 1(VCAM- 1)在实验性自身反应性脑脊髓炎 (EAE)致病中的作用。方法 :采用免疫组化方法检测 VCAM- 1的表达 ,采用细胞粘附实验研究 VCAM- 1对淋巴细胞与EAE脑内皮细胞的粘附性的影响。结果 :EAE脑内皮细胞有特异的 VCAM- 1的表达 ,VCAM- 1单抗可抑制淋巴细胞与 EAE脑内皮细胞的粘附。结论 :VCAM- 1是诱导 EAE发病的重要粘附因子     

体外检测近交系小鼠HBsAg特异性细胞毒T淋巴细胞方法的建立

通过磷酸钙法用含ＨＢＶＳ基因的质粒ｐＲｃ／ＣＭＶＳ与含筛选标记基因—ｎｅｏｒ基因的质粒ｐＳＶ２ｎｅｏ对ＢＡＬＢ／Ｃ近交系小鼠肥大细胞瘤细胞株—Ｐ８１５细胞进行了质粒共转染，并经Ｇ４１８筛选得到了Ｇ４１８抗性细胞，即Ｐ８１５Ｓ细胞。斑点杂交和免疫组化实验分别证实Ｐ８１５Ｓ细胞内有ＨＢＶＳ基因的存在；Ｐ８１５Ｓ细胞浆内和膜上有ＨＢｓＡｇ的表达。表明了Ｐ８１５Ｓ细胞可作为体外检测ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠ＨＢｓＡｇ特异性ＣＴＬ的靶细胞。进一步对Ｐ８１５Ｓ细胞成功地进行５１Ｃｒ标记，以及标记靶细胞５１Ｃｒ最大释放值和自然释放值的测定表明：利用５１Ｃｒ释放法体外检测近交系小鼠（ＢＡＬＢ／Ｃ）ＨＢｓＡｇ特异性ＣＴＬ功能的方法被建立。     

树突状细胞激活的肿瘤浸润淋巴细胞体外抗小鼠乳腺癌活性的研究

目的:探讨致敏的树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)体外抗小鼠乳腺癌活性.方法:从小鼠四肢长骨骨髓中获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)和肿瘤全细胞性抗原致敏DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对小鼠C127乳腺癌细胞、小鼠MA782乳腺癌细胞和小鼠B16黑色素瘤细胞的杀伤活性.结果:经C127细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL具有很强的对C127细胞的杀伤活性[杀伤活性为(70.21±2.86)%],明显高于其对MA782和B16细胞的杀伤活性[杀伤活性分别为(51.31±3.25)%,(31.41±2.65)%],也明显高于未经DC激活的TIL、C127-DC-小鼠脾淋巴细胞和未经DC激活的小鼠脾淋巴细胞对C127细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(48.30±2.97)%,(47.76±3.43)%和(17.23±2.56)%]和对MA782细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(38.52±2.87)%,(36.62±2.75)%和(18.07±2.40)%]以及对B16细胞杀伤活性[杀伤活性分别为(25.38±2.63)%,(24.82±2.81)%和(17.34±2.81)%],同时B16细胞全细胞性抗原致敏的DC激活的TIL(TIL来源于C127瘤体)也可诱导相对较低的对B16细胞的特异性细胞杀伤活性.结论:经C127细胞全细胞性抗原致敏的DC能诱导TIL产生高效而特异的体外抗小鼠乳腺癌免疫.     

天然及氧化型低密度和极低密度脂蛋白诱导培养的内皮细胞表达巨噬细胞炎性蛋白1 α和血管细胞粘附分子

为探讨天然及氧化修饰脂蛋白对培养的内皮细胞MIP-1α及VCAM-1mRNA表达的作用，取正常人新鲜血液，用超速梯度离心法分离出LDL和VLDL后，加Cu2+使之氧化，成为OX-LDL和OX-VLDL。培养人脐静脉内皮细胞(EC)，待其汇合后分别加入LDL、OX-LDL、VLDL、OX-VLDL，使其终浓度为25μg／m1，对照组不加脂蛋白。培养24h后，收集EC，用异硫氰酸胍法提取其总RNA，用地高辛标记的MIP-1α和VCAM-1cDNA探针进行斑点杂交。结果显示，培养的EC能表达MIP-1α和VCAM-1mRNA，当其暴露于LDL和VLDL后，其MIP-1α和VCAM-1mRNA表达轻度增加，而当EC暴露于OX-LDL和OX-VLDL后，其MIP-1αmRNA表达水平明显增高，分别为对照组的3．2倍和2．5倍；VCAM-1mRNA的表达分别为对照组的2．6倍和2．17倍。提示脂蛋白，特别是氧化修饰的脂蛋白，可促进EC表达MIP-1α和VCAM-1mRNA，在动脉内膜单核细胞的募集中起重要作用。     

血管粘附因子-1在乳腺癌中的表达及其与乳腺癌转移的关系

为探讨血管粘附因子-1(VCAM-1)在乳腺组织中的表达及其与乳腺癌转移的关系,采用免疫组化的方法(SABC法)检测50例乳腺癌标本VCAM-1的表达情况.结果显示VCAM-1的表达与乳腺癌转移及术后早期复发有关.乳腺癌淋巴结转移组和无淋巴结转移组VCAM-1的阳性表达率分别为70.∞%和31.75%,2组间差异有极显著性(P＜0.01).提示检测VcAM-1的表达可作为乳腺癌的预后指标,有助于对术后患者选择放、化疗提供依据.     

细胞粘附分子与子宫内膜异位症的发病原因

子宫内膜异位症是一种常见妇科疾病，它引起痛经，下腹痛，性交痛等症状，是不孕的主要原因之一，其治疗上仍无特效方法，究其原因主要是发病机理仍不清楚，越来越多证据表明：离开子宫腔的子宫内膜要具有活性就需要粘附并刺激周期组织产生新生血管，而这些过程需要粘附分子的参与，现将细胞粘附分子与子宫内膜异位症的发病发系作一综述。     

人卵巢癌多细胞团簇在细胞外基质中的黏附性和扩散性

目的研究人卵巢癌多细胞团簇(MCAs)在细胞外基质(ECM)中的黏附性和扩散性。方法液体重叠培养获得MCAs。将MCAs悬液以及加入不同的细胞黏附分子(CD44、CD29、CD54、E-cad)单克隆抗体(mAb)和m IgG(作为对照)的MCAs悬液,接种至覆以ECM或牛血清蛋白(BSA)(作为对照)的96孔板,培养6 h,记录每孔0 h团簇和6 h的黏附团簇数,并计算黏附率;分别测定团簇0 h和24 h的面积,以其面积变化倍数确定团簇的扩散性。结果MCAs对ECM黏附率为38%,明显高于BSA对照组的8%(P=0.001);CD29 mAb和CD44 mAb对团簇黏附的抑制率分别为60%和29%;MCAs在ECM上24 h几乎完全扩散,面积扩大倍数明显高于BSA对照组(5.96±0.92vs1.34±0.9)(P<0.01);CD29 mAb和CD44 mAb对团簇扩散的抑制率分别为74%和33%。结论MCAs具有的黏附性和扩散性可能是卵巢癌难治的重要原因。CD29 mAb和CD44 mAb可抑制MCAs的黏附和扩散,为抗黏附治疗卵巢癌提供了新策略。     

高浓度葡萄糖对培养血管内皮细胞活力和黏附分子表达的影响

目的探讨高浓度葡萄糖作用于脐静脉内皮细胞后,对脐静脉血管内皮细胞系的活力和白细胞黏附分子〔血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)〕表达的影响,为阐明高血糖在糖尿病血管病变的早期发病中作用与机制提供依据。方法采用胎盘蓝染色法及流式细胞仪检测细胞活力和黏附分子表达。结果高浓度葡萄糖可使内皮细胞的死亡率增加,ICAM-1表达显著上调,但VCAM-1表达无明显变化。结论减少高糖诱导的ICAM-1、VCAM-1表达增加,对减少糖尿病患者慢性并发症的发生概率是一条有益的途径。     

急性期脑梗死病人外周血中性粒细胞与低氧-复氧内皮细胞的黏附性

①目的探讨急性期脑梗死病人外周血中性粒细胞（PMN）与低氧-复氧（H／R）血管内皮细胞黏附性，以及抗ICAM-1单抗对其的影响。②方法培养的人类脐静脉内皮细胞株ECV-304经（或不经）H／R和抗ICAM-1单抗处理后，分别加入脑梗死病人外周血PMN并检测黏附率。⑧结果ECV-304经H／R处理后与脑梗死病人外周血PMN黏附率明显增高；抗ICAM-1单抗可显著抑制脑梗死病人外周血PMN与H／RECV-304黏附。④结论脑梗死病人外周血PMN活化，H／R使血管内皮细胞与PMN黏附性进一步增强；ICAM-1参与介导脑梗死后PMN与血管内皮细胞黏附，抗ICAM一1单抗可起部分阻断作用。     

体外循环期间瓣膜替换手术患者白细胞β2粘合素及血浆sICAM-1、sE-selectin的表达

为了解体外循环期间瓣膜替换手术患者白细胞、内皮细胞表面粘附分子的表达及这些粘附分子表达水平之间的关系,测定了１２例患者体外循环前后外周血白细胞β２粘合素（β２－ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ）、血浆可溶性细胞间粘附分子－１（ｓｏｌｕｂｅｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎｍｏｌｅｃｕｌｅ－１,ｓＩＣＡＭ－１）,和可溶性Ｅ－选择素（ｓｏｌｕｂｌｅＥ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ,ｓＥ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ）。结果：体外循环后β２－ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ（ＣＤ１１ａ、ＣＤ１８、ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８,ＣＤ１１ｂ,ＣＤ１１ｂ／ＣＤ１８）,ｓＩＣＡＭ－１和ｓＥ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ表达上调（Ｐ＜０．０５）;β２－ｉｎｔｅｇｒｉｎｓ和ｓＩＣＡＭ－１、ｓＥ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ表达水平之间存在明显的相关关系（Ｐ＜０．００５）。结果显示：①体外循环伴随着明显的白细胞－内皮细胞粘附反应;②体外循环期间有关的粘附分子以受体－配体形式表达;③血浆可溶性内皮细胞粘附分子ｓＩＣＡＭ－１、ｓＥ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ可间接估计内皮细胞表面ＩＣＡＭ－１、Ｅ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ表达情况     

联胺对培养的人脐静脉内皮细胞表达细胞间粘附分子-1的影响

人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)暴露于 1、 5和 10 μmol/L 联胺作用 8h,或 5 μmol/L 联胺作用 4和 2 4 h,观察其细胞间粘附分子 - 1(ICAM- 1)蛋白表达。免疫细胞化学法 :实验组平均吸光度值分别是对照组的 1.4 9、 1.80、 2 .2 4、1.5 3和 2 .4 4倍 (F=16 0 .2 7,P<0 .0 1)。流式细胞仪分析 :实验组荧光抗体阳性细胞百分率分别是 32 .9%、 4 3.0 %、5 0 .9%、 36 .0 %和 5 2 .4 % ,高于对照组 (2 1.4 % )。不同浓度组间进行 χ2检验 ,有统计学意义 (χ2 =2 0 98.2 3,P<0 .0 0 1;R=- 0 .2 2 8,P<0 .0 0 1) ,或不同时间组间 (χ2 =2 16 7.76 ,P<0 .0 0 1;R=- 0 .192 ,P<0 .0 0 1)。 Western Blot检测 ,实验组积分吸光度值分别是对照组的 1.2 3、 1.75、 1.92、 1.5 6和 1.82倍。结果提示 :联胺诱导 HUVEC表达 ICAM-1蛋白增加并呈时间和剂量依赖性     

血小板激活因子和维甲酸对中性粒细胞功能和ICAM－1，ELAM－1表达的影响

目的：探讨血小板激活因子（ＰＡＦ）和维甲酸（ＲＡ）对多形核中性粒细胞（ＰＭＮ）功能和肺微血管内皮细胞（ＰＭＶＥＣ）ＩＣＡＭ－１和Ｅ－选择素（ＥＬＡＭ－１）表达的影响。方法：采用作者创建的无创性分离法分离培养ＰＭＶＥＣ；将ＰＡＦ和ＲＡ分别加入培养有ＰＭＶＥＣ的９６孔板中，观察二者对ＰＭＮ－ＰＭＶＥＣ粘附的影响；ＥＬＩＳＡ法测定ＰＭＶＥＣ上ＥＬＡＭ－１和ＩＣＡＭ－１的表达；测定ＰＡＦ和ＲＡ对ＰＭＮ的趋化性、聚集和酸性磷酸酶的释放的影响。结果：（ｌ）ＰＭＶＥＣ用ＰＡＦ处理３．５ｈ后，它与ＰＭＮ的粘附率从５７．３％增加到７２．８％（Ｐ＜０．０１）。而用ＰＡＦ处理ＰＭＮ同样可增加ＰＭＮ－ＰＭＶＥＣ的粘附率。（２）ＲＡ可阻断未刺激ＰＭＮ与ＰＡＦ刺激的ＰＭＶＥＣ之间的粘附，但对ＰＡＦ刺激的ＰＭＮ与未刺激的ＰＭＶＥＣ之间的粘附却无作用。（３）ＰＡＦ可增加ＰＭＶＥＣ上ＩＣＡＭ－ｌ和ＥＬＡＭ－ｌ的表达、增加酵母多糖激活血清和组胺对ＰＭＮ的趋化性、增加ＰＭＮ的聚集和ＰＭＮ酸性磷酸酶的释放。（４）ＲＡ则可抑制ＰＡＦ诱导的ＰＭＮ聚集、酸性磷酸酶的释放及ＰＭＮ对酵母多糖刺激血清和组胺的趋化性，而ＩＣＡＭ－１和ＥＬＡＭ－１的表达却未改变     

影响淋巴细胞共刺激作用的体外实验研究

目的　观察CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射对淋巴细胞增殖的影响 ,探讨影响T淋巴细胞信号转导的因素。方法　分别以CD3单抗、CD2 8单抗、PHA和低剂量辐射作为作用因素 ,用3H TdR掺入法观察在这些因素作用下 ,淋巴细胞增殖反应情况。结果　CD3单抗和CD2 8单抗联合刺激、PHA和低剂量辐射单独或联合处理 ,均可使淋巴细胞明显增殖。但CD3单抗和CD2 8单抗单独刺激 ,淋巴细胞增殖不明显。结论　CD3单抗和CD2 8单抗联合作用可使淋巴细胞有效增殖 ,PHA和低剂量辐射具有相似作用 ,对细胞免疫调节有重要意义