卵泡发生过程中能量代谢需求及调控机制的研究进展

卵泡的生长和发育均受到来自颗粒细胞、卵泡膜细胞和卵母细胞自分泌或者旁分泌的基因、激素以及生长因子的作用和调控。其中,颗粒细胞糖酵解过程所产生的丙酮酸、乳酸等代谢产物是卵泡发生最主要的能量来源之一,在卵泡发生和卵母细胞成熟过程中发挥重要作用。开展卵泡颗粒细胞糖酵解代谢产物及限速酶变化的研究有助于更好地阐明卵泡发生过程中能量需求的分子机制,为临床女性因卵泡发育异常导致的不孕症提供积极的治疗手段奠定基础。本文总结了不同状态下卵泡发生过程中的能量需求及调控机制。     

磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/骨形态发生蛋白-15通路与哺乳动物卵巢卵泡发育

哺乳动物卵巢卵泡是由卵母细胞与其周围的颗粒细胞和卵泡膜细胞共同组成的,其生长发育过程是一个高度协调的程序化过程,确保了正常卵母细胞成熟并使其具有受精能力。卵母细胞和颗粒细胞之间的旁分泌和自分泌功能在卵巢卵泡发育过程中具有重要作用,可以为卵泡的发育提供适宜的微环境。磷脂酰肌醇-3激酶/骨形态发生蛋白-15信号通路是其中一个重要的调控通路。骨形态发生蛋白-15是卵巢卵母细胞特异性分泌的信号分子,可以通过旁分泌作用调节卵巢卵泡的发育过程。本文主要概述磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B信号通路在卵巢卵泡发育过程中的作用及骨形态发生蛋白-15作为蛋白激酶B/叉头转录因子家族-3a下游信号分子对这一过程的调控,有助于进一步理解卵巢卵泡发育的分子调控以及治疗不孕不育等卵巢疾病。     

中医药促卵泡发育成熟的研究思路

分析了卵泡发育成熟的重要因素是颗粒细胞(GC)的增殖和分化,从GC增殖分化及信号转导通路角度,探讨中药补肾复方及其有效部位促卵泡发育的可能机制及作用靶点,阐明中药补肾复方作用的物质基础,揭示其促卵泡发育的细胞和分子机制,并有助于阐明中医"调经种子"的科学内涵.     

小RNA调控卵泡发育的研究进展

人们已在卵泡发育的不同阶段和不同细胞中均检测到小RNA(miRNAs)的存在,并在成熟卵泡的卵泡液中也发现外泌体miRNAs。miRNAs不仅参与调控正常的卵泡发育过程,其异常调控也可导致一些卵巢疾病的发生。为进一步系统阐明miRNAs对卵泡发育的调控机制,寻找可以预测卵母细胞发育质量的外泌体miRNAs,本文从颗粒细胞发育、卵母细胞发育和激素合成等方面总结了miRNAs对卵泡发育的调控作用。     

类固醇激素在卵泡生长发育过程中的作用

激素和卵巢内局部因子控制卵泡发育。在生殖器官生长、分化以及维持生育能力的过程中,性激素发挥着重要作用。胆固醇、孕激素、雄激素、雌激素在卵巢中进行有序合成。卵泡膜细胞和颗粒细胞的共同作用对于雌激素的产生至关重要。卵泡膜细胞在黄体生成激素（LH）作用下将胆固醇转变成孕烯醇酮，并通过一系列代谢作用产生雄激素，并转运到颗粒细胞中，通过芳香化酶作用生成雌激素。     

卵泡液微环境对卵母细胞发育的影响

卵泡液由血浆渗出物和卵巢局部分泌物组成,由于卵巢血管未穿过卵泡基膜,卵泡液直接提供了颗粒细胞和卵子的生存环境,在卵泡发育、成熟、排卵、闭锁过程中起重要的调控作用.随着辅助生殖技术(ART)的迅速发展,卵泡液微环境中调节卵子发育的激素和相关细胞因子的作用受到生殖医学界的广泛关注.     

缝隙连接与卵泡发育

卵巢中的卵泡处于无血管的微环境中,卵母细胞发育所需营养以及调控信号都要通过卵母细胞与颗粒细胞之间的缝隙连接以及颗粒细胞与膜细胞之间的缝隙连接来实现。缝隙连接在胞间通讯方面起着重要的作用。缝隙连接由连接蛋白(Cx)组成,已发现Cx家族有20多个成员,其中Cx26、Cx32、Cx37、Cx43和Cx45参与卵泡的发育,Cx37、Cx43在卵泡发育过程中起着非常重要的调节作用。     

补肾中药调节卵泡发育应用研究

卵泡发育障碍是导致卵巢早衰(POF)、多囊卵巢综合征(PCOS)、闭经、功血等女性内分泌方面疾病的重要发病环节。颗粒细胞作为卵泡的功能单位,参与了卵泡生长、发育及闭锁的全过程,对卵泡的发育至关重要。从颗粒细胞增殖分化的角度,探讨补肾中药调节卵泡发育的细胞及分子机制,了解其在调节卵泡微环境过程所起的作用,对于中医药的临床应用及实验研究具有重要意义。     

多囊卵巢综合征大鼠卵巢颗粒细胞中DR5、DcR2的表达变化

目的观察DR5、DcR2在多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)大鼠卵巢颗粒细胞中的表达变化,探讨PCOS大鼠卵泡发育障碍的可能发生机制。方法大鼠皮下注射硫酸普拉睾酮钠,以构建PCOS模型,分别用免疫组织化学法、RT-q PCR分析观察并比较DR5、DcR2在PCOS组和对照组大鼠卵巢颗粒细胞的表达情况。结果免疫组织化学结果显示,在PCOS组大鼠卵巢各级卵泡颗粒细胞中,DR5的表达较对照组均显著增强(P0.05),在PCOS组大鼠卵巢窦前卵泡和窦状卵泡颗粒细胞中,DcR2的表达较对照组同级别卵泡显著增强(P0.05),在始基卵泡颗粒细胞的表达差异无显著性(P0.05)。RT-q PCR分析显示,DR5 mRNA和DcR2 mRNA在两组中都有表达,且二者在PCOS组大鼠卵巢颗粒细胞中的表达较正常对照组均明显增强(P0.05)。结论DR5和DcR2在颗粒细胞中的异常表达可能对PCOS大鼠卵泡的异常发育起到了一定作用,它们可能是通过参与颗粒细胞凋亡过程而对卵泡的发育造成了一定影响。     

GDF-9/BMP-15对卵泡发育机制研究进展

生长分化因子-9(GDF-9)和骨形态发生蛋白-15(BMP-15)均由卵母细胞产生,特定表达于卵巢,属于卵源性生长因子。它们是哺乳动物卵泡发育过程中的重要的调节因子,它们主要以旁分泌或自分泌的方式作用于颗粒细胞,促进卵泡发生和发育。本文主要从GDF-9/BMP-15的概述、功能及作用机制、相关协同性等几个方面进行了综述。     

鼠尾胶原三维诱导E14小鼠胚胎干细胞分化为甲状腺类似细胞的初步研究

目的 在体外贴壁诱导E14小鼠胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的基础上,不改变诱导因子,探索鼠尾胶原三维结构体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞的可行性。方法 E14小鼠胚胎干细胞半固体培养基悬浮培养6d生成拟胚体,随后在鼠尾胶原三维结构中继续诱导分化11d,全程添加诱导因子促甲状腺素及胰岛素,第14天时开始添加碘化钾。结果 拟胚体在鼠尾胶原上生长状态良好,分化细胞贴壁后逐渐陷入鼠尾胶原;电镜下诱导细胞高尔基体、内质网丰富,部分诱导细胞胞质内见不典型分泌颗粒,与人成体甲状腺细胞超微结构类似。结论 胚胎干细胞在鼠尾胶原三维结构中可以分化为甲状腺类似细胞,并具备合成、分泌的功能;三维结构为体外诱导胚胎干细胞分化为甲状腺细胞提供了新的方法。 [关键词] 胶原; 胚胎; 干细胞 ;细胞分化; 甲状腺     

人卵母细胞成熟过程中卵丘细胞与卵母细胞关系的研究进展

人卵母细胞和卵丘细胞（cumulus cell, CC）之间存在双向通讯,在卵泡内,卵母细胞的发育高度依赖于与卵丘细胞的联系。卵母细胞通过分泌有效的生长因子（oocyte-secreted factors, OSFs）介导卵丘细胞分化,卵丘细胞则通过缝隙连接传递信号并在卵泡发育的后期阶段支持卵母细胞的生长,进一步促进卵母细胞成熟和受精。本文将综述人卵母细胞成熟中卵丘细胞与卵母细胞之间的重要关系及有关作用机制,为提高体外成熟（IVM）技术中卵母细胞的质量提供新的帮助。     

Roles of RAS and BRAF mutations in thyroid carcinogenesis

Papillary carcinoma and follicular carcinoma are types of differentiated thyroid carcinomas, develop from the same thyroid follicular epithelial cells and show distinct biological behavior. Although several studies have demonstrated differences in the biological characteristics of these carcinomas, little is known about the genetic backgrounds that underlie these differences. The clarification of the genetic background can lead to the understanding of thyroid carcinogenesis, proper therapeutic strategies, and development of the molecular targeting drugs. Recently, aberrant activation of RAS-RAF-MEK-MAP kinase signaling pathway is frequently found in thyroid carcinoma. The pathway transmits a mitogenic signal to the nucleus, and constitutive activation of the pathway is thought to promote uncontrolled cell division. In our series, BRAF mutation was detected exclusively in papillary carcinoma (54%), and was exclusively V599E (a single nucleotide change of A-T at nucleotide 1796). NRAS mutation was observed in follicular carcinoma (50%) and in anaplastic carcinoma (28%), and was exclusively Q61R (a single nucleotide change of A-G at nucleotide 182). No mutations were found in KRAS or HRAS. In this chapter, we explain the role of RAS-RAF-MEK-MAP kinase pathway in carcinogenesis of the thyroid and its clinical implication based on our study. In addition, we review the current knowledge in this field.     

小鼠卵巢组织的深低温保存和移植研究

①目的 采用深低温保存方法冷冻保存小鼠的卵巢组织，观察移植后卵巢功能和组织学的恢复情况。②方法 36只昆明种小鼠随机分为3组：假手术组、对照组(新鲜移植组)和深低温保存组。假手术组不切除卵巢，对照组切除卵巢后即行自体原位移植，深低温保存组则将双侧卵巢完全摘除后，行二期手术自体原位移植深低温保存的卵巢。观察所有小鼠的动情周期的变化，并对卵巢的卵泡发育情况进行组织学检查。③结果 假手术组小鼠的动情周期没有任何变化，对照组小鼠的动情周期也在手术后的不同时间内恢复正常，深低温保存组小鼠在完全切除卵巢后，完全失去了动情周期的变化；冷冻复温卵巢自体移植后，多数小鼠的动情周期恢复正常。组织学分析显示，深低温保存卵巢在自体移植后，卵巢可以存活，并有各级卵泡发育。④结论 采用深低温保存方法保存后的小鼠卵巢复温后保持组织活性，自体移植后小鼠的动情周期恢复，卵巢中有正常卵泡发育。     

塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖及血管新生的影响

目的探讨塞来昔布对急性白血病原代细胞增殖的影响。方法采用MTT法检测塞来昔布对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用,采用免疫组化法检测塞来昔布作用急性白血病原代细胞后血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、转化生长因子-β(TGF-β)的表达情况。结果塞来昔布能显著抑制急性白血病原代细胞的增殖,免疫组化结果可见实验组VEGF、bFGF的阳性率较对照组均显著降低;但TGF-β阳性率与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论塞来昔布能有效抑制急性白血病原代细胞分泌VEGF、bFGF,抑制白血病原代细胞的生长和增殖,其机制可能与抑制白血病血管新生有关。     

Localization of cystathionine β synthase in mice ovaries and its expression profile during follicular development

Background In vitro fertilization (IVF) researches have suggested that cystathionine β synthase (CBS) is involved in oocyte development. However, little is known about the regional and cellular expression patterns of CBS in the ovary. The purpose of this study was to analyze the localization of CBS in mice ovaries and to investigate the expression profile during follicular development. Methods We used in situ hybridization and immunohistochemical analysis to determine CBS expression in the ovaries of female Balb/c mice. Then the follicles were collected from F1 (C57BL×Balb/c) mice and cultured in vitro. With the method of semi-quantitative RT-PCR, we also investigated the expression profile of CBS during follicular development. Results CBS was absent in the oocytes, although it was ubiquitously expressed in the ovary with the strongest expression in follicular cells at all stages. In late antral follicles, CBS expression was markedly higher in granulosa cells located close to the antrum and in cumulus cells around the oocyte. The semi-quantitative RT-PCR showed that CBS mRNA was detected in follicles at all stages in vitro. In cumulus-oocyte complexes superovulated, CBS expression also increased rapidly. Conclusions CBS was located mainly in the follicular cells in the ovaries. The level of CBS expression is high in follicles during folliculogenesis in mice. Differences in the CBS expression profile between oocyte and follicular cells suggest a role for CBS as a mediator in interactions between oocyte and granulosa cells.     

Metastasis in differentiated thyroid carcinoma

Seventy patients of differentiated thyroid carcinoma (DTC) irrespective of age and sex were selected in ENT Department of Bangabandhu Sheikh Mujib Medical University, Dhaka Medical College Hospital and Rangpur Medical College Hospital who were admitted from March 2003 to March 2005. Female were more commonly affected (2.6:1) Papillary carcinoma was more common in 31-50 years of age and follicular carcinoma (ca) common in 41-50 years of age. Among the differentiated thyroid carcinoma papillary carcinoma found 77.15% and follicular ca. found 22.85%. Lymph node metastasis was more common in papillary (35%) than follicular carcinoma (12.5%). But distant metastasis was more common in follicular (12.5%) than papillary carcinoma (3.70). Maximum lymph node metastasis was found in level 3(55%), level 2(45%).     

小窝蛋白-1对人甲状腺上皮细胞增殖、凋亡及胞内活性氧水平的影响

目的: 探讨小窝蛋白-1（Caveolin-1）对人甲状腺上皮细胞系Nthy-ori 3-1增殖、凋亡和胞内活性氧产生的影响。方法: 将正常人甲状腺上皮细胞（Nthy-ori 3-1）分为实验组和阴性对照组,分别转染 Caveolin-1敲减病毒上清液以及阴性对照病毒上清液,以未转染的Nthy-ori 3-1细胞为空白对照组,应用嘌呤霉素筛选出阳性细胞,qRT-PCR和蛋白质印迹检测3组细胞Caveolin-1的mRNA和蛋白表达;MTT 法检测Caveolin-1敲减后细胞增殖能力变化;流式细胞术检测Caveolin 1敲减后细胞的凋亡率;荧光探针DCFH-DA法检测Caveolin-1敲减后细胞内活性氧水平。结果： Caveolin 1抑制性慢病毒感染后,Nthy-ori 3-1细胞Caveolin 1 mRNA和蛋白水平均显著降低（P均<0.01）。抑制Caveolin-1表达后,Nthy-ori 3-1细胞增殖能力较阴性对照组明显降低,凋亡率明显增加,细胞内活性氧水平明显升高（P 均<0.01）。结论： Caveolin-1表达降低通过增加胞内活性氧水平和细胞凋亡,抑制细胞增殖,介导甲状腺上皮细胞损伤。     

消炎痛对人卵泡发育及排卵的影响

本实验采用实时超声仪对20名育龄妇女48个月经周期进行了连续观察,监测消炎痛对卵泡的生长和排卵的影响。实验组:10名,26个周期,口服消炎痛。对照组:10名,22个周期,自然排卵。实验结果:用药组排卵率为38.5％(P<0.01),且卵泡生长速度明显减慢于对照组(P<0.01)。指出:消炎痛可有效地抑制人卵泡的生长和排卵过程。