抗癌新药β-榄香烯衍生物

β-榄香烯具有很好的抗癌活性,但是其在水中的难溶性制约了其在治疗癌症中的应用.为了提高它的生物活性,人们通过引入糖基,氨基酸或其他的杂环结构到榄香烯中对其结构进行改造,从而得到一系列新的b-榄香烯类衍生物,通过系统地生物活性筛选,从中发现有更高活性的抗癌新化合物.     

β-榄香烯诱导神经母细胞瘤细胞凋亡及其机制

目的探讨β-榄香烯对儿童神经母细胞瘤生长的抑制作用及其可能的机制。方法不同质量浓度β-榄香烯体外作用于神经母细胞瘤细胞株SH-SY5Y、IMR-32、SK-N-DZ及胚肾细胞株293T 24 h,用CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测SH-SY5Y及SK-N-DZ细胞的凋亡率,Hoechst 33342染色检测凋亡小体,流式细胞术检测细胞周期和Brd U掺入率,Western blot检测caspase-3、caspase-8及caspase-9蛋白表达。结果β-榄香烯对3株神经母细胞瘤细胞的生长均有抑制作用,且呈剂量依赖性,而对正常细胞抑制作用轻微;β-榄香烯作用于SH-SY5Y及SK-N-DZ细胞24 h后,与对照组相比,药物组细胞早期凋亡率上升(P0.05),凋亡小体明显增加(P0.05);细胞各周期比例无明显差异(P0 05);Brd U掺入率无明显差异(P0.05);与对照组相比,药物组caspase-3及caspase-9蛋白表达明显增多(P0.05),而caspase-8无明显差异(P0.05)。结论β-榄香烯对神经母细胞瘤细胞的生长具有抑制作用,其作用机制是通过激活内源性凋亡通路诱导细胞凋亡,而与细胞周期及细胞增殖无明显关系。     

榄香烯诱导晶状体上皮细胞凋亡及其机制

目的 :探讨天然药物单体榄香烯 (Elemene,Ele)诱导晶状体上皮细胞 (lensepithelialcell,LEC)凋亡及其机制。方法 :通过透射电子显微镜观察Ele对LEC超微结构的影响 ;采用流式细胞术 (flowcytometry ,FCM)研究Ele对LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位 (mitochondrialtransmembranepotential,ΔΨm)的影响。结果 :透射电镜下可观察到Ele组LEC呈现核染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等典型的细胞凋亡形态学改变。Ele组LEC细胞核的DNA含量随药物作用时间的延长而下降 ,与空白对照组有显著差异 (P <0 0 1) ;细胞质线粒体ΔΨm在药物作用早…     

β-榄香烯对卵巢癌细胞凋亡的影响及机制

目的研究β-榄香烯对人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的影响及机制的探索,从而为β-榄香烯在卵巢癌中的应用提供实验基础。方法常规培养人卵巢癌SKOV-3细胞,传代,分组。应用Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒及流式细胞仪以及TUNEL方法检测人卵巢癌SKOV-3细胞凋亡率,并采用Westen blot方法检测caspase 3、caspase 8、caspase 9、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)、Cyto-c及p-Akt蛋白表达。结果与对照组相比,β-榄香烯处理组凋亡细胞数量和相关凋亡蛋白caspase-3、caspase-8、caspase-9及Cyto-c蛋白表达水平明显升高。与对照组相比,P-Akt及HIF-1α蛋白表达水平明显升高,而加入LY294002(PI3K/Akt/m TOR抑制剂),p-Akt及HIF-1α蛋白的表达水平明显降低。结论β-榄香烯抑制宫颈癌细胞增殖和诱导细胞凋亡可能与上调凋亡蛋白及Cyto-c蛋白表达及活化PI-3K信号通路进而诱导HIF-1α高表达相关。     

β-榄香烯对CLP诱导的脓毒症大鼠肝损伤的保护作用

目的：探讨β-榄香烯在盲肠结扎穿孔（CLP）诱导的脓毒症大鼠肝功能和炎症损伤中的保护作用。方法：50只Wistar大鼠分为健康对照组、模型组、模型+β-榄香烯25 mg/kg组、模型+β-榄香烯50 mg/kg组、模型+β-榄香烯100 mg/kg组。ELISA测定各组大鼠血清中天冬氨酸氨基转移酶（AST）、谷氨酸氨基转移酶（ALT）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、三酰甘油（TG）水平;HE染色观察肝脏病理损伤;Western blot检测肝组织中cleaved cas9、cleaved cas3蛋白表达水平,ELISA检测血清和肝组织中iNOS和IL-10含量,Western blot和免疫组化检测NF-κB P65蛋白表达水平。结果：与健康对照组相比,模型组大鼠血清中AST、ALT、LDL、TG水平升高,HDL水平降低（P<0.05）,肝脏病理损伤严重,cleaved cas9、cleaved cas3蛋白表达水平升高,血清和肝组织中iNOS和IL-10含量增多,p-P65/P65水平升高（P<0.05）。与模型组相比,25 mg/kg β-榄香烯给药...     

榄香烯诱导晶状体上皮细胞凋亡及其细胞和分子机制

目的：探讨天然药物单体榄香烯 (Ele) 诱导晶状体上皮细胞 (LEC) 凋亡及其细胞和分子机制。 方法: 通过透射电子显微镜观察Ele对体外培养的牛LEC超微结构的影响；采用流式细胞术观察Ele对LEC的DNA含量及线粒体跨膜电位（ΔΨm）的影响。 结果: 透射电镜下可观察到Ele组LEC呈现核染色质凝集、固缩、边集、核碎裂等典型的细胞凋亡形态学改变。Ele组LEC细胞核的DNA含量显著低于空白对照组，随药物作用时间延长而更低（P<0.01）；Ele组细胞质线粒体ΔΨm低于空白对照组，且在药物作用早期即已明显低于空白对照组（P<0.01）。 结论: ① Ele能显著诱导晶状体上皮细胞凋亡。② Ele通过使LEC细胞核DNA含量下降，诱导细胞凋亡。③ Ele使细胞质内线粒体ΔΨm下降，使细胞进入不可逆性凋亡的过程。线粒体ΔΨm下降是Ele 诱导LEC凋亡的早期事件。④ Ele诱导LEC凋亡是通过细胞核和细胞质两种途径。⑤ Ele诱导LEC凋亡的作用可能是其减轻晶状体后囊混浊发生和发展、防治后发性白内障的细胞和分子生物学机制。     

β-榄香烯通过抑制HIF-1α表达促进人肺癌细胞凋亡

目的探讨β-榄香烯是否通过抑制肺癌细胞中HIF-1α的高表达促进肺癌细胞的凋亡及相关机制。方法常规培养人肺癌A549细胞,实验分为对照组、乏氧组、β-榄香烯组、不同浓度β-榄香烯/乏氧处理组;通过转染含有HIF-1α基因的质粒过表达HIF-1α基因。应用Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒及流式细胞仪、TUNEL检测细胞凋亡。并采用免疫荧光检测HIF-1α蛋白的活化、Westen blot方法检测Bax、caspase-3及Bclx L蛋白表达及转染效率。结果β-榄香烯能够抑制肺癌A549细胞的增殖力,呈时间和浓度依赖性,能够诱导乏氧状态下的肺癌A549细胞凋亡。β-榄香烯可通过上调A549细胞的Bax、caspase-3蛋白表达,降低Bcl-xL表达来诱导乏氧状态下肺癌A549的凋亡。此外,β-榄香烯可有效降低乏氧状态下HIF-1α蛋白的高表达。通过转染过表达HIF-1α基因,大大降低了β-榄香烯的诱导凋亡作用。结论β-榄香烯可以上调乏氧状态下A549细胞凋亡,可能与抑制HIF-1α的高表达相关。     

β-榄香烯抑制恶性黑色素瘤生长和侵袭

目的研究β-榄香烯(β-E)对恶性黑色素瘤细胞B16增殖和侵袭的影响及其相关机制。方法培养B16细胞,建立体外恶性黑色素瘤模型,应用MTT法检测β-E对B16细胞增殖能力的影响,应用Transwell方法检测β-E对B16细胞侵袭能力的影响,应用qRT-PCR和western-blot检测β-E对B16细胞MMP2 mRNA和蛋白表达的影响。结果成功建立体外恶性黑色素瘤模型,β-E显著抑制B16细胞增殖和侵袭能力,抑制B16细胞中MMP2 mRNA和蛋白表达,DDP也显著下调上述指标,且以上指标中与DDP组没有显著性差异。结论β-E显著抑制B16细胞增殖和侵袭能力,降低MMP2表达,提示β-E可能在抑制B16细胞增殖和侵袭能力过程中起重要作用。     

β-榄香烯对EAE小鼠视神经炎治疗作用的研究

目的:研究β-榄香烯(β-elemene)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠视神经炎的治疗作用;明确β-榄香烯如何通过对辅助性T细胞亚群的分化调节及其特异性细胞因子的转录调节实现其治疗作用。方法:通过行为学、组织形态学技术观察β-榄香烯对EAE小鼠脱髓鞘性视神经炎的治疗作用,进一步通过ELISA及定量PCR技术观察β-榄香烯对辅助性T细胞亚群特异性细胞因子及转录因子的蛋白及mRNA表达的影响。结果:β-榄香烯能改善EAE小鼠的神经功能评分(与对照组比较,P<0.05);β-榄香烯能减轻EAE小鼠视神经轴索及髓鞘损伤;免疫后11天,β-榄香烯可减少EAE小鼠视神经细胞因子白细胞介素-17(IL-17)、转录因子孤儿核受体(RORγt)的蛋白及mRNA的表达(与对照组比较,P<0.05);同时增加叉头蛋白3(Foxp3)mRNA的表达(与对照组比较,P<0.05)。免疫后19天,β-榄香烯可减少EAE小鼠视神经细胞因子γ-干扰素(IFN-γ)、转录因子T-bet的蛋白及mRNA的表达(与对照组比较,P<0.05);并维持Foxp3mRNA的较高水平表达(与对照组比较,P<0.05)。结论:β-榄香烯可减轻EAE小鼠视神经的炎症损伤;β-榄香烯可通过调节辅助性T细胞亚群的分化维持机体的免疫平衡。     

β-榄香烯抑制新生血管及在眼科疾病中的应用

β-榄香烯作为一种新型抗癌药,对血管内皮细胞及肿瘤新生血管均存在抑制作用。β-榄香烯应用于眼科疾病的研究逐渐增多,包括研究其神经保护作用、抑制眼部新生血管发展及抑制眼部恶性肿瘤的发生发展等。本文就β-榄香烯抑制新生血管作用及在眼科疾病中的研究现状及其亟待解决问题进行综述。     

β-榄香烯对胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤生长的影响

目的观察中药β-榄香烯对胃癌耐药细胞株SGC-7901/Adr裸鼠成瘤能力的影响,探讨β-榄香烯对胃癌耐药细胞的作用及机制。方法利用MTT实验验证SGC7901/Adr细胞的耐药性及β-榄香烯的毒性作用,利用裸鼠移植瘤模型分析β-榄香烯对胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤生长的影响,利用免疫组织化学方法检测各组移植瘤组织中Caspase-3蛋白的表达水平。结果相对于SGC7901细胞,SGC7901/Adr细胞对ADR具有耐药性;β-榄香烯对SGC7901/Adr细胞具有增殖抑制作用,且具有浓度依赖性。β-榄香烯能够较好地抑制胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤的生长,能够明显缩小肿瘤体积。β-榄香烯处理后,移植瘤组织中Caspase-3蛋白表达有上升趋势。结论β-榄香烯促进肿瘤细胞凋亡、抑制胃癌耐药细胞裸鼠移植瘤的生长与上调Caspase-3蛋白表达水平相关。     

榄香烯诱导免疫原性细胞死亡及SAP62的作用

<正>目的:探讨免疫原性细胞死亡和剪接体相关蛋白62(splicesome-associated protein 62,SAP62)增强榄香烯复合瘤苗免疫原性的作用和机制。方法:(1)取30只健康BALB/c(SPF)小鼠分为瘤苗免疫组、生理盐水对照组和联用细胞因子组,所有小鼠在末次免疫后10 d(记为攻击后第0天)于左腋下接种Hca-F细胞。观察肿瘤生长情况和生存时间。(2)MTT法测细胞增殖。     

β-榄香烯抑制卵巢癌细胞Cavo-3增殖的作用靶点及机制

目的研究β-榄香烯对人卵巢癌细胞Cavo-3增殖的影响及机制探索。方法体外培养卵巢癌Cavo-3细胞,用MTT实验和集落形成实验检测β-榄香烯对卵巢癌Cavo-3细胞增殖的影响,Western blot实验检测β-榄香烯对Cavo-3细胞EGFR及其下游信号通路的影响。结果β-榄香烯以浓度和时间依赖性方式抑制卵巢癌Cavo-3细胞的增殖;Western blot实验发现β-榄香烯能显著抑制EGFR及其下游通路磷酸化水平,而不影响总蛋白水平。结论β-榄香烯通过EGFR信号通路抑制卵巢癌Cavo-3细胞的增殖,揭示了β-榄香烯发挥抗卵巢癌作用的新机制。     

β-榄香烯对宫颈癌细胞PI-3K/Akt信号通路活化和凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究β-榄香烯对人宫颈Hela细胞凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-9表达和PI-3K/Akt信号通路的影响。方法实验分为对照组和β-榄香烯处理组,应用AnnexinV-FITC凋亡检测试剂盒及流式细胞仪检测细胞凋亡率,并采用免疫荧光、Western Blot方法检测Akt、p-Akt、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(caspase-3),天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(caspase-9)、凋亡诱导因子(AIF)、细胞色素C(Cyto c)蛋白表达。结果β-榄香烯以剂量和时间依赖方式抑制宫颈癌细胞增殖和细胞活性。与对照组相比,β-榄香烯处理组凋亡细胞数量和相关凋亡蛋白(caspase-3、caspase-9、AIF、Cyto c)表达水平升高,β-榄香烯作用组p-Akt的表达水平明显升高。结论β-榄香烯抑制宫颈癌细胞增殖和诱导细胞凋亡可能与上调凋亡相关蛋白表达和PI-3K/Akt信号通路相关。     

β-榄香烯对前列腺癌PC-3细胞生物学行为的影响及可能机制

目的 探讨β-榄香烯对前列腺癌PC-3细胞增殖、凋亡、侵袭和迁移的影响及可能机制.方法体外培养PC-3细胞,分别以25、50、100μg/ml β-榄香烯处理后,MTT实验与平板克隆实验检测PC-3细胞增殖能力;Transwell实验检测PC-3细胞迁移和侵袭能力;流式细胞术检测PC-3细胞的凋亡率;Western b...     

hTERT基因反义核酸对化疗药物诱导CEM细胞凋亡的影响

目的：利用人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因的反义寡核苷酸(ASODN)抑制人T淋巴细胞白血病细胞株(CEM)端粒酶活性后，探讨化疗药物(顺铂、柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙)对CEM细胞凋亡的影响。方法： 采用台盼蓝拒染法观察hTERT ASODN与化疗药物(顺铂、柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙)联合作用对CEM细胞系生长的影响；姬姆萨染色法观察凋亡细胞的形态变化；通过流式细胞仪对细胞凋亡峰进行定量分析。结果： hTERT ASODN作用于CEM细胞24 h再加入柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙，对细胞生长的抑制分别与单用柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙及hTERT正义寡核苷酸(SODN)联合柔红霉素、长春新碱、足叶乙甙组相比，统计学上无显著差异(P＞0.05)。hTERT反义核酸作用于CEM细胞24 h加入顺铂，再共同作用48 h，CEM活细胞均数为2.318×108 cells/L，与单用顺铂组(3.250×108 cells/L)及hTERT正义核酸联用顺铂组(3.175×108 cells/L)相比，对细胞抑制明显增强(P＜0.05)。hTERT ASODN作用于CEM细胞24 h再加入顺铂作用48 h，细胞出现典型的凋亡形态学改变。hTERT ASODN与2.5 μmol/L顺铂联合作用于CEM细胞48 h的凋亡细胞百分率(19.47%)分别同SODN与顺铂联合作用组(6.97%)、单用顺铂作用组(6.02%)进行比较有显著差异(P＜0.01)。结论： hTERT基因反义寡核苷酸能促进顺铂诱导CEM细胞凋亡。     

川楝子醇提物通过线粒体途径诱导白血病CEM细胞的凋亡

背景:苦寒中药川楝子具有小毒,对生长环境要求不高,在实体瘤中能显著抑制肿瘤细胞的增殖,但在血液肿瘤中报道较少,基于前期研究结果,并结合中医"以毒攻毒"理论探讨其主要成分川楝素抗急性淋巴细胞白血病的作用机制.目的:探究川楝子醇提物抑制白血病CEM细胞增殖的作用机制.方法:人急性T淋巴细胞白血病CEM细胞培养至对数生长期,...     

β-榄香烯抑制B16恶性黑色素瘤细胞的EPHA2表达和血管生成拟态

目的研究β-E对B16恶性黑色素瘤细胞上皮细胞激酶(epithelial cell kinase,EphA2)表达和血管生成拟态的影响及其相关机制。方法培养B16细胞,建立体外恶性黑色素瘤模型,应用qRT-PCR法和Western-blot法检测β-E对B16细胞EPHA2 mRNA和蛋白表达影响,应用Matrigel诱导血管生成实验检测β-E对B16细胞血管生成拟态生成能力的影响。结果成功建立体外恶性黑色素瘤模型,β-E显著抑制B16细胞EPHA2mRNA和蛋白表达,抑制B16细胞血管生成拟态生成能力。结论β-E可在治疗恶性黑色素瘤中起重要作用。     

4-苯基丁酸抗内质网应激诱导胰岛β细胞凋亡

目的 探讨4-苯基丁酸（4-PBA）对2型糖尿病（T2DM）大鼠胰岛β细胞内质网应激（ERS）诱导的细胞凋亡的保护作用。方法 高脂饮食喂养加小剂量链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立SD大鼠T2DM模型,造模成功后取其中10只给予4-PBA灌胃20d。放射免疫法检测各组大鼠游离脂肪酸（FFA）、血糖及胰岛素的变化。醛品红染色观察胰岛形态改变,RT-PCR检测内质网相关蛋白（Caspase-3、GRP78、CHOP）的mRNA表达变化。结果 高脂对照组（EM> n/EM>＝10）和T2DM组（ EM>n/EM>＝8）大鼠血清FFA比正常对照组（EM>n/EM>＝10）显著增加,4-PBA治疗后显著下降（ EM>n/EM>＝8）。4-PBA治疗升高了T2DM造成的     

硫化氢对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的影响

目的探讨硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)对抗β-淀粉样蛋白(β-amylmoid)诱导PC12细胞凋亡的作用及机制。方法应用硫化氢钠(sodium hydrosulfide,NaHS)作为H2S的供体,甲氮甲唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,碘化丙啶(PI)染色流式细胞技术(FCM)检测细胞凋亡率,Hoechst染色检测细胞凋亡的形态学变化,罗丹明123(Rhodamine123,Rh123)染色FCM检测细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP),双氢罗丹明123染色FCM检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的含量。结果淀粉样多肽β25-35(Aβ25-35)引起PC12细胞的存活率显著降低及凋亡率明显增大,同时引起PC12细胞的MMP明显降低及ROS生成率显著增加。当NaHS与Aβ25-35共同作用于PC12细胞时,NaHS浓度依赖性地阻断20μmol/LAβ25-35引起PC12细胞的存活率降低,100μmol/LNaHS显著地降低20μmol/LAβ25-35引起PC12细胞的凋亡率并阻断Aβ25-35引起的MMP降低及ROS升高。结论H2S的供体NaHS具有细胞保护作用,能对抗Aβ25-35引起的PC12细胞凋亡,此作用可能与其阻断MMP降低及ROS生成增多有关。