前列腺癌细胞系LNCaP中的新型雄激素调节基因

雄激素调节基因(ARG)在正常前列腺和前列腺肿瘤中起着调节细胞生长的作用。近来,作者报道了在雄激素非依赖性或转移前列腺癌细胞/组织中对先前已知的神经营养因子prosaposin的基因组扩增和/或过表达。正如多效生长因子一样,prosaposin及它的活性分子微生物(如saposin C)的功能更侧重于前列腺癌细胞的恶性表型。另外,在LNCaP细胞中prosaposin或saposin C上调雄激素受体(AR)和AR靶基因的表达和激活(如PSA等)。在该项研究中,作者检测了雄激素调节基因prosaposin,在DHT双氢睾酮干预的LNCaP细胞中,prosaposin的表达上调。另外,研究揭示…     

前列腺癌雄激素非依赖性演进分子机制的研究现状

前列腺上皮细胞的生长需要生理剂量的雄激素来刺激细胞的增殖,并抑制细胞的凋亡。雄激素可与雄激素受体（androgen receptor,AR）结合,继而引起AR与位于雄激素调控基因启动子区的雄激素反应元件（androgen response elements,AREs）结合,这一过程受到其他很多转录共调节因子的影响。AR、AREs和共调节因子之间复杂的相互作用,共同调控着与靶细胞发育、分化及增殖相关基因的激活或抑制。目前已经发现了很多雄激素反应基因,其中包括前列腺特异性抗原（prostate specific antigen,PSA）和人腺体激肽释放酶2（hk2）。     

前列腺组织与LNCaP细胞的雄激素受体亚型研究

目的：研究雄激素受体（AR）亚型在人前列腺良性增生与前列腺癌组织以及LNCaP细胞系中的表达，探讨AR亚型表面组织之间的差异，方法：应用氚标技术与聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳的方法，对相应组织的AR亚型进行分析。结果：41例AR阳性的前列腺增生组织，3例前列腺癌组织和LNCaP细胞中，发现有3个AR亚型的表达，其等电点（pI)分别为6．5、6．0和5．3，在前列腺增生标本中，15例（36．5％），表达pI6.5,6.0,5.3亚型，10例（24．4％）表达pI6.5,5.3亚型，5例（12.2%)表达Pi6.5,6.0亚型，4例（9．8％），表达PI6.0,5.3亚型，2例（4．9％）表达pI6.5亚型，2例（4．9％）表达pI6.0亚型，3例（7．3％） 表达pI5.3亚型，在3例前列腺癌细胞组织中，1例表达pI6.5,6.0,5.3亚型，1例表达pI6.5,6.0亚型，I例3种亚型均不表达，LNCaP细胞表达pI6.5,6.0,5.3亚型，氚标的双氢睾酮（DHT）与3种受体亚型的结合，可以被非氚标的DHT，睾酮（T）竞争抑制，而孕酮，雌二醇和己烯雌酚对却无竞争抑制作用。结论：AR亚型的表达，在不同的病人与疾病的LNCaP前列腺癌细胞系之间存在差异，提示不同病人对前列腺癌的内分泌疗法有不同的反应性。     

HER-2/neu与雄激素非依赖性前列腺癌

前列腺癌开始时属于雄激素依赖性，在接受药物或手术睾丸去势治疗后肿瘤退缩，但最终还是会转变为雄激素非依赖性而继续生长。研究发现多数雄激素非依赖性前列腺癌持续表达雄激素受体(AR)和雄激素依赖性基因前列腺特异性抗原(PSA)，这说明尽管已处于睾酮去势水平，这些细胞中仍保持着AR信号通路。现有的解释是，AR激素结合区的扩增或突变改变了AR的结合功能，     

锤头型核酶特异性阻断雄激素受体表达对前列腺癌细胞生长的影响

目的：探讨核酶阻断雄激素受体（AR）基因表达治疗前列腺癌的可能性。方法：在脂质体介导下，锤头型抗雄激素受体核酶表达载体转染前列腺癌细胞，采用逆转录－聚合酶链反应（RT－PCR）检测ARmRNA，四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞增殖活性，流式细胞仪（FCM）检测细胞周期时相，原位末端转移酶标记法检测细胞凋亡。结果：核酶表达载体转染1－5d后，前列腺癌细胞AR mRNA水平降低32．6％－40．7％（P＜0．05），细胞生长抑制率18．28％－35．34％（P＜0．05），细胞周期阻滞于G2／M期，诱导细胞凋亡，细胞凋亡比率增加20．70％（P＜0．01）。结论：应用核酶特异性切割ARmRNA，能有效阻断AR基因的表达，诱导前列腺癌细胞凋亡，有可能成为前列腺癌基因治疗的有效方法之一。     

雄激素共激活物DDC在氟他胺对前列腺癌细胞LNCaP作用中的表达变化

目的 观察雄激素受体（AR）共激活物DDC在氟他胺对前列腺癌雄激素敏感细胞系LNCaP的作用的表达变化。方法 噻唑蓝比色法（MTT），流式细胞术等技术，研究氟他胺对LNCaP细胞的作用，并使用基因芯片对其DDC在其中的作用作了初步探讨。结果 LNCaP细胞在7d内受到氟他胺的刺激而加速生长，但5代后细胞增殖受到抑制。此种效应与剂量相关。细胞增殖主要被阻断于G1／S期。其相关机制主要是AR共激活物DDC的表达受到抑制。结论 氟他胺对LNCaP的作用为双向，即在低浓度和较短作用时间内为增殖，在高浓度和较长作用时间后为抑制。此种抑制效应可能是通过抑制DDC的表达，影响下游细胞周期相关基因的表达，从而阻断细胞周期于G1／S调控点。     

睾酮对前列腺癌LNCaP细胞雄激素反应性基因表达的影响

目的检测睾酮作用下雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP中雄激素反应性基因（ARGs)的表达情况。方法检测不同浓度的睾酮对雄激素依赖性前列腺癌细胞LNCaP增殖的影响，采用基因芯片确定LNCaP细胞中受睾酮调控的基因。结果低浓度的睾酮促进LNCaP细胞的生长，并呈剂量依赖性，相反较高浓度的睾酮能够抑制LNCaP的增殖。在96个与前列腺癌有关的基因中，受睾酮刺激有19个基因表达上调，8个基因表达下调。结论睾酮诱导的雄激素反应性基因在前列腺癌的发展中起非常重要的作用，基因芯片有助于高通量分析基因表达水平的变化，为前列腺癌的研究提供了非常理想的工具。     

前列腺组织与LNCaP细胞的雄激素受体亚型研究

目的 :研究雄激素受体 (AR)亚型在人前列腺良性增生与前列腺癌组织以及LNCaP细胞系中的表达 ,探讨AR亚型表达组织之间的差异。　方法 :应用氚标技术与聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳的方法 ,对相应组织的AR亚型进行分析。　结果 :4 1例AR阳性的前列腺增生组织、3例前列腺癌组织和LNCaP细胞中 ,发现有 3个AR亚型的表达 ,其等电点 (pI)分别在6 .5、6 .0和 5 .3。在前列腺增生标本中 ,15例 (36 .5 % )表达 pI6 .5、6 .0、5 .3亚型 ,10例 (2 4 .4 % )表达 pI6 .5、5 .3亚型 ,5例 (12 .2 % )表达 pI6 .5、6 .0亚型 ,4例 (9.8% )表达 pI6 .0、5 .3亚型 ,2例(4.9% )表达 pI6 .5亚型 ,2例 (4.9% )表达 pI6 .0亚型 ,3例 (7.3% )表达 pI5 .3亚型。在 3例前列腺癌组织中 ,1例表达pI 6 .5、6 .0、5 .3亚型 ,1例表达pI 6 .5、6 .0亚型 ,1例 3种亚型均不表达。LNCaP细胞表达pI 6 .5、6 .0、5 .3亚型。氚标的双氢睾酮 (DHT)与 3种受体亚型的结合 ,可以被非氚标的DHT、睾酮 (T)竞争抑制 ,而孕酮、雌二醇和己烯雌酚对此却无竞争抑制作用。　结论 :AR亚型的表达 ,在不同的病人与疾病和LNCaP前列腺癌细胞系之间存在差异 ,提示不同病人对前列腺癌的内分泌疗法有不同的反应性     

雌激素受体（ER）、雄激素受体（AR）与前列腺癌

近年研究显示，雌激素受体（ER）和雄激素受体（AR）在前列腺癌的发生发展中具有十分重要的作用。本文综述前列腺癌中雌激素受体，雌激素受体的表达活化，基因多态性及基因突变等研究进展。     

前列腺癌向激素非依赖型转化时激素受体基因甲基化的作用

目的探讨晚期前列腺癌转为雄激素非依赖型时,雄激素受体(AR)基因启动子区域甲基化的作用。方法采用Southern杂交、PCR特异的甲基化反应、甲基化敏感的单链结构分析等技术检测大鼠激素非依赖型前列腺癌和细胞株(PLS10、20和30)的AR基因启动子区域甲基化状态。结果Northern杂交技术检测的大鼠激素非依赖型前列腺癌和细胞株中均无ARmRNA表达。RT-PCR结果显示,PLS10和30细胞株中有ARmRNA表达,而PLS20细胞株中无ARmRNA表达。Southern杂交分析AR基因启动子区域甲基化状态,PLS10细胞株中EcoRI/HpaⅡ消化的DNA出现1.0和0.7kb条带;PLS20细胞株出现1.5、l.2和0.7kb条带;PLS30出现1.3、1.2、1.0和0.7kbDNA条带,PLS20细胞株CpGs甲基化状态明显高于细胞株PLS10和30。用去甲基化剂5-aza-2-脱氧胞苷(5AC)处理后PLS20细胞恢复ARmRNA表达。CpGs位于转录起始位点上游-1和-9核苷酸。大鼠前列腺和精囊癌中均检测到CpG位点甲基化状态。结论雄激素非依赖型前列腺癌中,AR基因启动子区域异常高甲基化在AR表...     

雄激素非依赖性前列腺癌和雄激素受体的研究进展

晚期前列腺癌可发生雄激素依赖性改变,对抗雄激素治疗不再有效.前列腺癌对雄激素依赖性发生转变的分子机制目前尚未完全阐明,近年来的大量研究显示前列腺癌雄激素非依赖性与雄激素受体(androgen receptor,AR)的反常激活有关,与雄激素受体(AR)表达增加和突变、AR调节因子表达改变、AR信号途径改变有关,但AR在雄激素非依赖性前列腺癌中的作用仍不清楚,本文就这些方面的研究进展作一综述.     

雄激素受体在前列腺癌中的抗凋亡效应研究进展

前列腺癌（PCa）是中老年男性多发癌症之一，目前针对晚期转移性患者的主要治疗手段是去雄激素治疗，但是绝大部分患者最终都进展为侵袭性更强的激素非依赖型PCa，而对此类患者尚无有效治疗方法。雄激素受体（AR）是前列腺上皮细胞分化与增生的基本调节因子，在调控PCa细胞存活机制方面具有非常重要作用。目前的研究结果已经表明在激素非依赖型PCa进展过程中，AR的非正常激活是关键性因素。现简要综述AR调控的PCa细胞存活机制以及针对它而设计的RNA干扰技术对PCa的治疗运用方面的进展。     

前列腺癌细胞中雄激素调节蛋白激酶Cδ的转录及调节其凋亡功能

蛋白激酶C家族的新成员蛋白激酶Cδ的激活，可导致若干型细胞的凋亡。尽管基于蛋白激酶Cδ激活的分子基础仍不明了，所知的调控表达机制的信息仍十分有限。该项研究显示，在前列腺肿瘤细胞中蛋白激酶Cδ在转录水平上受雄激素的调节。培养基中缺失类固醇可导致雄激素敏感性前列腺癌细胞系LNCaP的蛋白激酶Cδ蛋白和mRNA的显著下调，其机制通过雄激素受体依赖的方式实现。分析蛋白激酶Cδ的启动子显示，假定的雄激素反应元件（ARE）位于转录起始点上游4．7kb处。荧光素酶报告实验显示，这个元件对雄激素高度敏感，雄激素受体结合域的关键核苷酸的突变导致其报告能力丧失。另外，利用染色质免疫共沉淀分析，研究得出在体内雄激素受体结合于蛋白激酶Cδ的雄激素反应元件以应答雄激素刺激。值得注意的是，功能研究发现，     

雄激素受体与激素非依赖性前列腺癌

晚期前列腺癌可发生激素非依赖，对抗雄激素治疗不再有效。前列腺癌对雄激素依赖性发生变化的机制目前尚未阐明，近年来的研究显示前列腺癌雄激素非依赖性与雄激素受体(AR)的反常激活有关，与雄激素受体(AR)表达增加和突变、AR调节因子表达改变有关，细胞因子IL-6、IL-4，糖原合成激酶-3β参与激素非依赖性前列腺癌的AR激活。本文就这方面的研究进展作一综述。     

雄激素受体在前列腺癌细胞系中作用的研究进展

前列腺癌是男性高发的恶性肿瘤之一,目前广泛运用的雄激素阻断治疗能抑制早期前列腺细胞生长,但最终多数肿瘤会复发并转变为侵袭能力更强的激素非依赖性前列腺癌.雄激素受体(AR)是前列腺上皮分化的调节因子,在调控前列腺癌进展的过程中发挥着重要作用.本文总结并比较了不同分化度的三种前列腺癌细胞LNcaP、PC3、DU145中AR...     

前列腺癌雄激素依赖转化后细胞内雄激素受体表达变化的研究

目的：探讨雄激素受体（AR）在前列腺癌雄激素依赖特性转化过程中的作用。方法：对33例晚期前列腺癌患者进行雄激素阻断治疗并作长时间随访,其间有18例发生了雄激素依赖转化．15例未发生雄激素依赖转化。采用免疫组织化学及RT—PCR法测定18例患者雄激素依赖转化前后及15例患者雄激素阻断治疗前后癌细胞内AR蛋白及AR基因的表达情况。结果：18例患者雄激素依赖转化前后AR蛋白及AR基因的表达分别为（1．33±0．97VS3．11±0．76）和（28．41±3．38Ct vs 36．73±1．81Ct）,两者之间差异有统计学意义（P〈0．01）;15例患者雄激素阻断治疗前后AR蛋白及AR基因的表达分别为（1．47±0．83 vs 1．40±0．99）和（29．50±3．08Ct vs29．14±3．23Ct）,两者之间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：AR基因及AR蛋白表达增强是前列腺癌雄激素依赖转化的原因之一。     

性激素受体及相关生长因子在前列腺基质细胞中的表达

目的：探讨前列腺基质增生的发病机制与性激素以及相关生长因子的关系。方法：应用RT－PCR的方法研究了在人前列腺不同细胞类型中Smoothelin的表达，研究了雄、雌激素受体及相关生长因子在前列腺基质细胞中的表达，以及它们在前列腺基质细胞分化中表达的变化。结果：Smoothelin是前列腺平滑肌细胞特异性的标记蛋白；雄激素受体（AR）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF)、角化细胞生长因子（KGF）主要在前列腺成纤维细胞中表达，而雌激素受体（ER）、转移生长因子β1（TGFβ1）主要在平滑肌细胞中表达。结论：前列腺基质增生与雌激素受体和转移生长因子β1的过度表达密切相关。     

阻断雄激素受体信号后波形蛋白在前列腺癌侵袭中的表达增强

雄激素信号通路在前列腺癌生长及进展过程中发挥了重要作用。雄激素受体（AR）在绝大多数雄激素非依赖型前列腺癌中仍然表达并具有转录活性。细胞粘附与运动在多种细胞活动如细胞的分化、肿瘤的进展中起着关键作用。中间纤维波形蛋白（Vimentin）与细胞运动和侵袭相关。作者前期研究已发现利用微注射AR抗体阻断AR表达，可抑制细胞增殖并明显改变细胞形态。本文作者报道了利用雄激素敏感型的前列腺癌LNCaP细胞株、雄激素抵抗型的LNCaP—RF、     

神经内分泌分化对前列腺癌细胞生长及雄激素受体表达影响的实验研究

目的探讨神经内分泌分化对前列腺癌细胞生长的作用及对雄激素受体表达的影响。方法建立神经内分泌分化的前列腺癌细胞模型PC3MNE和LNCaPNE;采用甲基噻唑基四唑(MTT)试验观察其调节前列腺癌细胞生长的作用[以吸光度值(A)表示];采用逆转录聚合酶链反应和Western杂交方法检测LNCaPNE对LNCaP细胞雄激素受体表达的影响。结果PC3MNE的培养上清液可促进PC3M细胞的生长(A值在培养24h为034±018与050±009,48h为038±016与057±009,72h为038±015与055±005,P均<005);在有雄激素时,LNCaPNE的培养上清液不促进LNCaP细胞的生长,对其雄激素受体的表达也没有显著影响;去除雄激素后,LNCaPNE的培养上清液可促进LNCaP细胞的生长,并能下调其雄激素受体的表达(P均<005)。结论在雄激素阻断后,神经内分泌分化的前列腺癌细胞能以旁分泌的方式支持其他前列腺癌细胞生长,降低其雄激素受体的表达。     

雄激素受体信号通路研究进展

雄激素在男性的一生中都具有非常重要的生理作用。雄激素的作用由雄激素受体（AR）介导。研究表明，AR信号通路的异常与前列腺癌（PCa）、良性前列腺增生（BPH）、肯尼迪病（Kennedy disease）、男性不孕、雄激素不敏感综合征（AIS）以及男性乳癌等疾病的发生、发展有密切关系，因此，AR信号通路的分子组成、数量、结构、功能以及与其它信号通路的联系一直是泌尿外科领域的研究热点。