小肠结肠炎耶氏菌毒力检测方法的比较

小肠结肠炎耶氏菌毒力检测方法的比较兰州市城关区卫生防疫站孙殿斌，黄菊梅，王蔷芳甘肃省卫生防疫站张广业小肠结肠炎耶氏菌是近年来国际上引起重视的人兽共患的一种病原菌，被称为８０年代两个尚未研究清楚的致病菌之一。我国自１９８０～１９８１年，于恩庶［１］氏首...     

我国小肠结肠炎耶氏菌毒力株的特征

本文对我国各地分离的小肠结肠炎耶氏菌的毒力特征进行测定,所有毒力株除个别外,均有VW抗原、Vi抗原和毒力因子,它们的检测结果一致。有毒株还有一条40～50MDa的质粒带,即所谓毒力质粒,但有此毒力质粒的菌株并非都是有毒株,视其有否特异性外膜蛋白(约200KDa)而定。自凝性也是检测耶氏菌毒力的一种方法,但其敏感性与特异性均不及VW抗原测定。因此测定菌株毒力,以VW抗原、Vi抗原和毒力因子测定最特异而敏感,特别后两种方法简单、易行、可靠,可在基层单位推广使用。     

小肠结肠炎耶氏菌L型的初步研究

5株小肠结肠炎耶氏菌用人工诱导方法获得二株L型细菌,血清型为O:5,27;O:37。与去氧胆酸钠-抗生素诱导法和溶菌酶诱导法结果一致。二株经抗生素诱导者在改良Kagan培养基上出现典型的L型菌落,涂片染色可见菌体呈长丝体和膨大的巨形体,能通过0.45μm的除菌滤膜,在高盐肉汤内呈颗粒状沉淀生长。L型细菌与抗血清试管凝集滴定比原型和返祖型低2～3个稀释度,生化反应出现对一些糖类的发酵能力减弱,水杨素、七叶灵、肌醇等由原型的阳性反应变为阳性,从而可致耶氏菌生化分型的改变。L型细菌对一些抗生素的敏感性与原型和返祖型有差异。     

O:3型小肠结肠炎耶氏菌外膜蛋白用于布氏菌与O:9型耶氏菌感染的鉴别诊断

0:3型小肠结肠炎耶氏菌质粒编码的外膜蛋白的电泳性质及免疫原性与0:9型耶氏菌相同。利用0:3型耶氏菌外膜蛋白为抗原的免疫斑点试验或免疫印迹试验能够明确区别布氏菌与0:9型耶氏菌感染的血清学交叉反应,较通常用0:9型耶氏菌或布氏菌为抗原,更为明显。     

鉴别布氏菌与0：9型小肠结肠炎耶氏菌两种抗体的研究

作者应用经异种抗体吸收的羊种布氏菌１６Ｍ及０：３型小肠结肠炎耶氏菌菌体抗原做ＥＬＩＳＡ对３个种６株布氏菌及Ｙｅ０：９感染的兔血清检测的结果表明，对同种抗原的抗体显示高滴度而对异种抗原的抗体则为阴性反应。这明显优于用１６Ｍ及Ｙｅ０：３外膜蛋白抗原做ＥＬＩＳＡ的鉴别结果。     

布鲁氏菌与小肠结肠炎耶氏菌血清学鉴别诊断

1969年,芬兰学者Ahvonen等首次报道了布鲁氏菌(简称布氏菌)与0:9型小肠结肠炎耶尔森氏菌(简称耶氏菌)之间存在严重的血清学交叉反应。从而引起了国内外学者极大关注。现已表明,布氏菌与几十种微生物有血清交叉反应,其中以耶氏菌最为严重。目前,我国开展人畜间布氏菌病(简称布病)调查,尤其在布病非流行地区仍采用常规血清学诊断方法,而这些常规方法无法排除布氏菌与其它微生物之间的血清交叉反应。本文自1991年以来,收集我省部分历史布病流行地区家猪、牛、羊和可疑布氏菌感染人群血清,进行布氏菌与耶氏菌血清学鉴别诊断研究,现将结果报道如下。     

福建O：3型小肠结肠炎耶氏菌分子流行病学的研究

本研究应用限制性内切酶酶切图谱分析的方法．以福建小肠结肠炎耶氏菌（Y．e）流行较严重的莆田、建瓯等地的人、猪、鼠、鸡中所分离到的O：3毒力质粒DNA，用限制性内切酶BamHI、EcoRI、HindⅢ进行酶切分析，结果三种酶切图谱各具特征性，但不同菌株间无差异，表明从福建不同地区、不同动物中所分离到的Y．eO：342MDa的毒力质粒DNA具有同源性，它们可能来自共同的起源。本研究进一步阐明了猪、鼠、鸡作为人Y．e病传染源的意义。     

小肠结肠炎耶尔森氏菌主要毒力基因分析

目的了解南京地区从不同来源分离的小肠结肠炎耶尔森氏菌毒力基因的分布情况。方法聚合酶链反应(PCR)技术进行不同血清生物型菌株的毒力基因检测。结果从血清型来看,分离到的9株血清型O:3菌株有7株的基因型分布为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。从生物型来看,共分离到致病生物型(3,4)菌株12株,其中9株毒力基因分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。结论本市小肠结肠炎耶尔森氏菌血清型O:3菌均包含毒力基因,毒力基因主要分布特征为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。所有的致病生物型(3,4)菌株,均包含染色体上的毒力基因ail,毒力基因主要分布特征亦为ail+,ystA+,ystB-,virF+,yadA+。ail与致病生物型之间存在明显关联。     

用Western印迹法鉴别布氏菌和O:9型耶氏菌抗体

本文用Western印迹法证实O:9型耶氏菌外膜蛋白中分子量为36、22、12kda等多肽特异于布氏菌,几乎和所有静脉接种、皮下感染O:9型耶氏菌家兔血清抗体反应。用YOMPs为抗原的Western印迹法,结合布氏菌试管凝集试验(STA),可以应用于布氏菌和O:9型耶氏菌血清学鉴别诊断。该技术具有敏感、可靠的特点。     

从病人标本检出的小肠结肠炎耶氏菌致病力测定

对河南省近年从病人标本中检出的小肠结肠炎耶氏菌进行了致病力测定。体外测毒试验表明,76.9％的O:3和O:9血清型菌株为阳性;体内测毒试验表明,64.7％的O:3、O:9和O:6,30血清型菌株为阳性。实验证明:耶氏菌0:3、0:9和0:6,30为主要致病血清型,个白鼠眼球后注射致死性试验,为耶氏菌体内测毒较好的方法。     

布氏菌和0∶9型小肠结肠炎耶氏菌两种抗体鉴别的研究

本文报告一种布病检测的简便方法,以硝酸纤维素膜为固相栽体的免疫斑点试验,使用两种抗原(牛种布氏菌和O:3型耶氏菌)进行测定,其敏感性和特异性均高于常规的布病试管凝集试验,而且方法简便,快速,适于基层推广使用,可以代替试管凝集试验,作为布病监测的首选方法。     

Acute and chronic liver disease associated with Yersinia enterocolitica infection: a Norwegian 10-year follow-up study of 458 hospitalized patients.

During the period 1974-1983, Yersinia enterocolitica infection was diagnosed in 458 hospitalized patients by antibody response or isolation of the micro-organism. A total of 54 (11.9%) patients had acute liver infection, with significantly elevated serum levels (greater than or equal to 2-fold) of bilirubin and/or enzyme levels. Serious liver disease with cellular necrosis was observed in biopsy specimens from two of 12 patients examined; six had unspecific changes. The patients were followed up for 4-14 years (until 1987). A total of 22 (4.9%) patients were readmitted with chronic liver disease; in one case non-specific microscopic changes developed into granulomatous hepatitis over a period of 3 years. In both the acute and chronic stages of disease, liver involvement was associated with involvement of other organ systems, and some patients developed multi-organ disease. Chronic liver disease was associated with positive tests for antinuclear antibody and rheumatoid factor, and with a high mortality.     

Acute and chronic pancreatic disease associated with Yersinia enterocolitica infection: a Norwegian 10-year follow-up study of 458 hospitalized patients.

During the period 1974-1983, Yersinia enterocolitica infection was diagnosed in 458 hospitalized patients by antibody response or isolation of the micro-organism. Eight (1.75%) patients showed signs of acute pancreatitis with elevated serum or urine levels of amylase; two patients had acute insulin-dependent diabetes. The patients were followed up for 4-14 years (until 1987). Four patients were readmitted with chronic pancreatitis, and one with acute pancreatitis. Diabetes developed in two males and nine females; in seven cases this was associated with chronic conditions of possible autoimmune aetiology. In 1987 a significantly higher than expected prevalence of diabetes was demonstrated among female subjects aged 30-54 years. Yersinia enterocolitica infection constitutes a differential diagnosis in acute pancreatitis, and might be related to the development of chronic pancreatitis and diabetes.     

广东省65株耶氏菌的系统鉴定与鼠疫疫源地性质的探讨

目的鉴定65株耶氏菌,了解菌株的生物学特性,抗原抗体与鼠疫菌的相关性,探讨疫源地的现状和性质。方法65株菌用3种致病性耶氏菌诊断血清,分别做玻片、试管凝集试验、生化试验、生长特性,挑选14株菌做毒力因子、毒力基因、致病性、交叉免疫原性、动物试验和血清学、药敏试验。结果 63株小肠结肠炎耶氏菌血清型42株O∶3、21株O∶9,中间型1株,假结核血清II型1株;VW+2株,VW±10株,VW-2株;14株菌F1Ag、F1Ab全阴;小肠结肠炎5株菌均有2个毒力基因(ail、ystA)阳性,VW+和VW±对小白鼠、家兔有致病性,动物感染一种耶氏菌后有交叉免疫力,抗原、活菌交叉吸收鼠疫抗血清后血清学IHA、RIHA没有交叉性,常用抗菌素敏感。结论目前动物感染小肠结肠炎菌普遍,猪感染最高,局部已爆发流行,假结核菌偏低,鼠疫处于静息期。     

北京市顺义区零售生猪肉中小肠结肠炎耶尔森菌的检测与病原特征分析

目的 获得北京市顺义区零售市场生猪肉中小肠结肠炎耶尔森菌的分布及病原特征。方法 采集样本,应用细菌增菌培养并同时对增菌液进行荧光PCR预筛查的方法检测小肠结肠炎耶尔森菌。对于鉴定阳性菌株应用传统PCR及多重荧光PCR方法分析5种毒力基因的分布特征。应用肉汤稀释法获得分离菌株的耐药特征并应用脉冲场凝胶电泳(PFGE)进行菌株分子分型。结果 70份样本中19份增菌液foxA基因实时荧光PCR筛查阳性,阳性率为27.14%(19/70)。19份foxA筛查阳性标本培养获得小肠结肠炎耶尔森菌。19株菌对头孢唑啉、氨苄西林、头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦耐药率分别为97.74%、84.21%、47.39%和42.11%,其携带毒力基因特征均为ail-/ystA-/ystB+/yadA-/virF-。17株菌完成PFGE检测并被分为15种带型。结论 针对增菌液进行荧光PCR预筛查,可提高食品样本中小肠结肠炎耶尔森菌分离培养的检出率。菌株毒力基因的荧光PCR组合检测可快速获得分离菌株的毒力特征。本次研究中分离自本地区零售生猪肉中的小肠结肠炎耶尔森菌未发现显著遗传聚集性特征。     

大肠杆菌O157∶H7 CVa9株O抗原变异的研究

目的　研究本实验室保藏的大肠杆菌O15 7:H7(E coliO15 7:H7)日本分离株CVa9O抗原的变异。方法　血清凝集试验检测CVa9菌株O和H抗原 ,区分O抗原变异株与非变异株。聚合酶链反应 (PCR)法分别检测O15 7和H7特异性基因。生化试验检测生化特性。观察菌株在麦康凯、山梨醇麦康凯、棉子糖麦康凯及ChromagarO15 7显色培养基上菌落形态 ,菌落计数法计算变异率。结果　抗 -O15 7抗血清与CVa9菌株进行玻片凝集试验出现强凝集 (CVa9- 8)和不凝集 (CVa9- 1、CVa9- 15 )两种菌落 ,试管凝集试验结果相同 ,证实不凝集菌落O抗原发生变异。抗 -HT 抗血清分别与变异株和非变异株H抗原进行试管凝集试验 ,均为强凝集。两种菌株O15 7和H7特异性基因均为阳性。变异株与非变异株生化特性基本相同 ,但变异株不发酵棉子糖。两种菌株在麦康凯及山梨醇麦康凯培养基上菌落形态特征没有区别。在ChromagarO15 7显色培养基上培养 4 8h ,变异株为浅紫红色 ,菌落周边呈毛边状 ,非变异株为紫红色 ,菌落边缘整齐。变异株在用棉子糖代替乳糖制备的棉子糖麦康凯培养基上菌落呈粉红色 ,非变异株呈红色。菌落计数显示变异率为 99 80 %。结论　CVa9菌株在保存过程中O抗原发生变异 ,菌落形态及部分生化特征亦有所改变。变异株和非变异株均携带O15