RNAi技术在肿瘤研究中的应用

外源性或内源性双链RNA（Double—stranded RNA,dsRNA）在细胞导致与其同源的mRNA分子发生特异性降解,从而干扰相应基因的表达,这种现象被称为RNA干扰（RNA interference,RNAi）．RNAi主要由长dsRNA分子裂解形成的小干扰RNA（Small interfering RNA,siRNA）分子介导,是在RNA水平调节基因表达的一种方式,     

RNAi在胃癌研究中应用的进展

胃癌是严重危害人类健康的恶性肿瘤，其发病率在恶性肿瘤中占第四位，死亡率居第二位，且胃癌发病率在世界不同国家和地区有较大的差异，表现出明显的地域性。RNA干扰技术（RNA interference，RNAi）在哺乳动物细胞中是利用小干扰RNA（small interference RNA，siRNA）诱导特异性基因表达抑制，具有基因抑制效果确切、抑制具有严格的序列特异性、作用迅速等特点，已被广泛用于胃癌相关基因功能、胃癌化疗的多药耐药、胃癌的治疗方面的研究和探索。随着对RNAi机制的深入研究，相信不久的将来RNAi技术能在肿瘤的基因治疗方面发挥越来越重要的作用。     

RNAi技术在乳腺癌基因治疗中的研究进展

乳腺癌是当前发病率较高的女性恶性肿瘤,严重威胁女性的身体健康.传统治疗以手术治疗为主,辅以化疗、放疗.而化疗和放疗对肿瘤非特异性、敏感性差,副作用大.因此乳腺癌的基因治疗受到充分重视.1998年RNA干扰(RNAinter-ference,RNAi)的发现[1],特别是在哺乳动物细胞应用小干扰RNA(small interfering,siRNA)成功介导RNAi,为基因功能的研究提供了强大的武器,也为乳腺癌基因治疗增添了新的活力.现对RNAi在乳腺癌基因治疗中的研究现状与进展方面作一综述.     

RNA干扰(RNAi)的研究进展

RNA干扰（RNA interference,RNAi）是指在多种生物细胞中,外源或内源性双链RNA（dsRNA）可以高效促使胞内同源mRNA降解,进而阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型。作为一种全新的基因治疗的方法,本文将对RNAi的作用机制、研究策略以及应用研究进展等内容进行综述。     

RNAi技术在肿瘤研究中的进展

RNAi是小双链RNA分子诱导同源基因降解的过程。作为一种简单而有效的基因沉默工具,RNAi技术已成为肿瘤研究领域的新方法。本文就RNAi技术在肿瘤研究中的应用进展予以综述。     

RNAi和微小RNA：从动物模型到疾病治疗

RNA干扰（RNA interference，RNAi）首次由Fire在1998年发现并命名，是双链RNA（dsRNA）介导的特异性基因表达沉默现象，主要参与者为小干扰RNA（small interfering RNAs，siRNAs）。RNAi研究是目前基因功能研究和基因治疗研究的热点，它也是抵御感染的一种重要保护机制。在2001年和2002年连续被Science杂志评为自然科学最重要的科技成果之一。     

RNAi技术及在乙型肝炎研究中的应用

RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是近年来发现的一种转录后基因沉默机制,能抑制特定基因的表达,是研究基因功能的有力工具,由于具有高效、特异、操作简单等特点,在乙型肝炎的研究中也得到了广泛的重视和应用。     

RNA干扰(RNAi)技术及其在功能基因组学研究中的应用

近年来的研究表明 ,一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内某些基因致使mRNA降解 ,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型 ,称为RNA干扰 (RNAinterference ,RNAi)。由于可以作为代替基因敲除的遗传工具 ,RNAi技术正在改变着功能基因组学 (functionalgenomics)领域的研究步伐。《科学》杂志和美国科学促进会将RNAi技术评选为2 0 0 2年十大重大科学成就之首。1　RNAi及其作用机制1.1　RNAi回顾首次发现双链RNA (doublestrandRNA ,dsR NA)能够导致基因沉默的现象来源于对线虫Caenorhabditiselegans的研究。1995年 ,康乃尔大学的…     

RNAi技术抑制HepG2细胞中DcR3的表达

目的探讨特异性DcR3-siRNA对人肝细胞癌细胞系HepG2的DcR3基因表达的影响。方法设计并合成带FAM荧光标记的针对DcR3的siRNA4条和非特异性siRNA1条,用脂质体转染HepG2细胞,应用荧光显微镜和流式细胞仪判断转染效果;应用半定量RT-PCR和免疫细胞化学检测特异性DcR3-siRNA的对HepG2细胞中DcR3表达的抑制作用。结果各特异性DcR3-siRNA均能抑制DcR3 mRNA表达(P<0.05),其中以siRNA4的作用更明显,干扰作用达62.9%;将siRNA4转染HepG2细胞,免疫细胞化学结果显示,siRNA4能明显抑制HepG2细胞中DcR3蛋白的表达(P<0.01)。结论特异性DcR3-siRNA在体外实验能抑制目的基因的表达。     

RNAi与肿瘤的研究

RNAi干扰(RNA interference,RNAi)是一种生物进化过程中出现的高度保守现象,表现为转录后的基因沉默,是近年来研究基因功能的新方法[1].肿瘤的发生是基因参与并经多阶段演进而形成的基因疾病,RNAi现象的发现为肿瘤的基因研究治疗提供了一种新的方法,通过RNAi技术抑制基因的表达已成为肿瘤研究及治疗的新策略.     

RNAi沉默survivin基因表达对膀胱癌EJ细胞增殖的影响

目的 通过RNA干扰(RNAi)阻断EJ细胞中survivin基因的表达,研究survivin基因沉默后对细胞生长和细胞凋亡的影响.方法 将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer2.0线性质粒以T4 DNA连接酶连接,重组质粒经酶切、DNA测序鉴定后,用脂质体法转染EJ细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果.MTT法检测细胞生长的影响,流式细胞仪检测转染后EJ细胞的凋亡变化.结果 酶切及测序证实设计合成的DNA片段已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.0-SVV1、pSilencer2.0-SVV2重组载体均能有效地阻断EJ细胞中survivin基因的表达,使survivin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),后者抑制效果更佳.转染后的EJ细胞生长速度明显变慢.转染pSilencer2.0-SVV2实验组细胞的凋亡增加了17.0%.结论 重组真核载体能有效抑制EJ细胞的survivin表达,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.     

RNAi在大肠癌基因治疗中的研究现状

RNA干扰（RNAinterference）即转录后基因沉默,是由外源或内源性的双链RNA（doublestandedRNA）导入细胞而引起同源的mRNA降解,进而抑制其相应的基因表达。作为一项新技术,目前广泛地应用于生物体基因功能研究和多种肿瘤的研究。现针对大肠癌有关基因诊疗进行了积极的探索,并取得了突破性的进展。     

RNAi沉默livin基因表达对胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的:通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)阻断胶质瘤U251细胞中livin基因的表达,研究livin基因沉默后对细胞生长和细胞凋亡的影响.方法:将合成的DNA正义链及反义链变性、退火,形成的双链DNA与pSilencer2.0线性质粒以T4DNA连接酶连接,重组质粒经酶切鉴定后,用脂质体法转染胶质瘤U251细胞,通过RT-PCR、免疫印迹检测干扰效果.MTT法检测细胞生长的影响,流式细胞仪检测转染后胶质瘤U251细胞的凋亡变化.结果:酶切证实设计合成的DNA片段已正确插入载体.RT-PCR、免疫印迹检测实验表明:pSilencer2.0-liv1、pSilencer2.0-liv2重组载体均能有效地阻断胶质瘤U251细胞中livin基因的表达,使livin基因在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调(P<0.01),后者抑制效果更佳.转染后的U251细胞生长速度明显变慢.转染pSilencer2.0-1iv2实验组细胞的凋亡增加了17.0%.结论:重组真核载体能有效抑制U251细胞的livin表达,抑制细胞的增殖,诱导细胞凋亡.     

RNAi在哺乳动物细胞功能基因组学研究中的应用

随着人类基因组测序计划的完成,绘出了人类大约3万到4万个基因的图谱,然而其中大部分基因的功能还不清楚,因此对基因功能的研究成为当前基因学研究的热点。RNAi（RNA interference,RNA干扰）作为一种新的、强有力的研究工具,正在功能基因组学研究中蕴育着巨大潜力,