电针对足三里穴位局部细胞外电离子浓度的影响

目的 观察生理状态下电针对穴位局部细胞外电离子浓度的影响,为探索电针穴位的作用机制提供依据。方法 选取雄性SD大鼠20只,电针大鼠足三里穴60 min(1 m A,0.2 ms,2 Hz),同时采用微透析仪于足三里穴位局部以及非穴位部位收集组织液。分子探针膜部分采样共收集4 h,电针前生理状态60 min、电针时60 min、电针后60 min以及电针后120 min。对所得样品采用电解质分析方法进行即时分析,观察足三里局部Ca~(﹢﹢)、K~﹢、Na~﹢以及Cl~﹣离子的浓度变化。结果 足三里穴位局部Ca~(﹢﹢)离子浓度在电针时出现显著升高(P=0.003 vs电针前),此后逐步上升,至电针后60 min时穴位局部Ca~(﹢﹢)浓度到达高峰(P=0.75 vs电针时)。至电针后120 min Ca~(﹢﹢)离子浓度出现下降,与电针时比较差异有统计学意义(P=0.04)。穴位局部细胞外Na~﹢及Cl~﹣离子浓度在电针时亦出现显著升高(P0.001,P=0.007 vs电针前)。电针后即逐步下降,至电针后60 min下降至(71.81±15.09)mmol/L与(57.42±14.30)mmol/L(P=0.09,P=0.07 vs电针时)。所测穴位处细胞外K~﹢浓度水平表现出与Na~﹢、Cl~﹣类似的趋势,但差异不具有统计学意义。电针刺激可使非穴部位细胞外Ca~(﹢﹢)、Na~﹢、K~﹢以及Cl~﹣离子浓度出现轻度升高,但是同电针前相比未见显著性差异(P0.05 vs电针前)。结论 电针刺激大鼠足三里可诱导穴位局部细胞外Ca~(﹢﹢)、K~﹢、Na~﹢以及Cl~﹣离子浓度出现明显升高,电离子浓度在电针后不同时程出现下降。这为研究电针治疗生理机制提供了实验基础。     

艾灸对功能性消化不良大鼠SCF、Cx43表达的影响

目的探讨艾灸对功能性消化不良大鼠SCF、足三里穴局部Cx43蛋白表达的影响。方法建立功能性消化不良大鼠模型,进行艾灸足三里穴和足三里穴旁开对照点,采用免疫印迹法(Western blot)分别检测各组大鼠胃窦SCF及穴位、穴位旁开对照点局部Cx43蛋白的表达水平。结果与空白组相比,模型组大鼠胃窦SCF及穴区局部Cx43蛋白水平显著降低(P0.01);与模型组比较,艾灸穴位组SCF及Cx43蛋白表达量高于模型组(P0.05),艾灸非穴组SCF及Cx43蛋白表达量无显著差异(P0.05);与艾灸非穴组相比,艾灸穴位组SCF及Cx43蛋白表达量显著升高(P0.05)。结论艾灸干预能够显著升高FD大鼠胃窦SCF及足三里局部Cx43蛋白表达水平,改善胃动力,调节胃肠道活动。     

艾灸对瞬时受体电位香草酸亚型1基因敲除小鼠局部皮肤中肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:以肿瘤坏死因子-α(TNF-α)为指标,观察瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV 1)是否参与了艾灸启动穴位局部免疫炎性反应的过程。方法:将C 57BL/6J和TRPV1~(-/-)小鼠分别随机分为空白组、30min艾灸组、72h艾灸组,每组5只。各艾灸组均艾灸"足三里",艾灸温度控制在(46±1)℃,通过HE染色观察局部皮肤的形态结构变化,免疫荧光法观察局部皮肤TNF-α阳性细胞的数量。结果:与C 57BL/6J空白组小鼠比较,30min艾灸组表皮TNF-α阳性细胞数明显增多(P0.05),30min艾灸组、72h艾灸组真皮TNF-α阳性细胞数明显增多(P0.01);30 min艾灸组真皮TNF-α阳性细胞数明显多于72h艾灸组(P0.01)。与TRPV1~(-/-)空白组小鼠比较,30min艾灸组表皮TNF-α阳性细胞数明显增多(P0.01),30min艾灸组、72h艾灸组真皮TNF-α阳性细胞数明显增高(P0.01);30 min艾灸组小鼠表皮、真皮TNF-α阳性细胞数明显高于72h艾灸组(P0.01)。结论:艾灸启动穴位局部免疫炎性反应可能不依赖于TRPV 1通道。     

艾灸对大鼠应激性胃黏膜损伤修复及p-ERK1/2蛋白表达的影响

目的:探讨艾灸促进大鼠应激性胃黏膜损伤修复作用及细胞机制。方法:SD大鼠48只随机分为空白组、模型组、艾灸穴位组、艾灸非穴组,每组12只。束缚冷应激法制作应激性胃黏膜损伤大鼠模型,在造模之前,艾灸穴位组选取足三里、中脘、脾俞、胃俞等穴位行艾灸预处理8d。按Guth法计算胃黏膜损伤指数(UI),免疫组化、蛋白质印迹法(Western Blot)检测胃黏膜磷酸化细胞外信号调节激酶1/2(phosphorylating extracellularsignal-regulated kinase1/2,p-ERK1/2)蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠UI值显著增高(P0.01)、胃黏膜细胞p-ERK1/2蛋白表达加强(P0.05,P0.01);与模型组、艾灸非穴组比较,艾灸穴位组大鼠UI值明显下降(P0.01)、胃黏膜细胞p-ERK1/2蛋白表达增强(P0.01)。结论:艾灸足三里、中脘等穴位预处理可促进束缚水浸应激所造成大鼠胃黏膜损伤的修复,其作用机制可能与上调胃黏膜p-ERK1/2蛋白表达有关。     

艾灸足三里对衰老模型豚鼠血清SOD及肝肾组织基因表达的影响

目的观察艾灸足三里对衰老模型豚鼠血清超氧化物歧化酶(SOD)含量及肝肾组织SOD基因表达的影响。方法将40只健康豚鼠随机分为空白组、模型组、足三里预防组、足三里治疗组,每组10只。除空白组外,其余三组均予腹腔注射D-半乳糖复制豚鼠衰老模型,每天1次,共30天。足三里预防组在造模的同时施行足三里艾炷灸,每日治疗1次;足三里治疗组在造模结束第二天开始施行足三里艾炷灸治疗。以血清SOD及肝肾组织SOD基因表达为客观指标,从预防及治疗两方面观察艾灸足三里对衰老模型豚鼠自由基代谢的影响。结果造模结束后,空白组未出现衰老症状,足三里预防组出现些许衰老症状,模型组、足三里治疗组出现明显衰老症状;模型组血清SOD与空白组相比,差异有统计学意义(P0.01);足三里预防组血清SOD与模型组相比,差异有统计学意义(P0.01),与空白组相比,差异无统计学意义(P0.05);足三里治疗组血清SOD与模型组相比,差异无统计学意义(P0.05),与空白组相比,差异有统计学意义(P0.01)。治疗结束后,足三里治疗组的衰老症状积分降低,与模型组比较有统计学意义(P0.01);足三里治疗组血清SOD与治疗前(造模结束后)差异有统计学意义(P0.01),与空白组、足三里预防组相比无差异(P0.05);在肝肾组织SOD基因表达量方面,空白组、足三里预防组、足三里治疗组和模型组比较,差异均有统计学意义(P0.01),而足三里预防组、足三里治疗组与空白组相比,无统计学差异(P0.05)。结论艾灸足三里延缓衰老的机制可能与通过艾炷灸调节自由基代谢水平,提高自由基清除能力有关。     

艾灸对肾阳虚大鼠下丘脑-脑垂体-肾上腺轴影响随机平行对照研究

[目的]观察艾灸不同配穴对肾阳虚大鼠模型下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)影响差异。[方法]建立肾阳虚大鼠模型。将40只健康SD大鼠按随机数字表法分为五组(8只/组):空白对照组、模型组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组。空白对照组不予处理,其余4组按25mg/Kg·d予氢化可的松肌注造模。第15d开始,艾灸1组温和灸"肾俞"、"关元",艾灸2组温和灸"肾俞"、"足三里",艾灸3组温和灸"足三里"、"关元"。艾灸1次/d,连续14d。第29d,所有大鼠行腹主动脉取血,用ELISA法检测大鼠血清促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮含量。[结果]ACTH与空白对照组比较,模型组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组ACTH含量明显降低(P0.05),艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组大鼠的ACTH含量相对于模型组有较大提高(P0.05),艾灸1组相对于艾灸2组、艾灸3组提高幅度最大(P0.05),艾灸2组与艾灸3组ACTH的含量相差不大(P0.05)。皮质酮模型组、艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组皮质酮含量明显降低(P0.05),艾灸1组、艾灸2组、艾灸3组大鼠的皮质酮含量相对于模型组有较大提高(P0.05),艾灸1组相对于艾灸2组、艾灸3组提高幅度最大(P0.05),艾灸2组与艾灸3组皮质酮的含量相差不多(P0.05)。[结论]艾灸能够有效的改善肾阳虚大鼠HPA轴抑制状态。"肾俞"、"关元"组治疗效果强于"肾俞"、"足三里"组和"足三里"、"关元"组。     

穴位局部外泌体参与针刺镇痛效应启动的研究（英文）

目的:探讨穴位局部外泌体(exosome)在针刺镇痛效应起效过程中的穴位局部启动作用。方法:将32只佐剂性关节炎(RA)大鼠随机分为模型组(CFA组)、模型+电针组(EA组),模型+拮抗剂+电针组(GW4869+EA组),模型+二甲基亚砜+电针组(DMSO+EA组),每组8只。大鼠右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂0.1 mL致炎,制备佐剂性关节炎动物模型。其中模型组不予干预,其他三组电针针刺大鼠双侧"足三里""环跳"穴,电针参数疏密波,频率2/10 Hz,强度5/10/15(0.76/1.53/2.3 mA),持续时间30 min,每隔10 min增加强度。其中DMSO+EA组电针针刺前1小时,于模型大鼠双侧"足三里"穴给予DMSO(浓度为0.2%,50μL/穴)穴位注射;GW4869+EA组电针针刺前1小时,于模型大鼠双侧"足三里"穴给予GW4869(浓度为3mg/mL, 50μL/穴)穴位注射。以热辐射缩足痛阈(paw withdrawal latency,PWL)为疗效指标。结果:造模后24小时,各组大鼠热辐射缩足痛阈较造模前均明显降低,提示造模成功。电针治疗后,各组大鼠热辐射缩足痛阈均呈现上升趋势,注射第1天GW4869+EA组大鼠热辐射缩足痛阈(6.74±1.09)s较EA组(7.72±1.54)s低,但差异无统计学意义(P0.05):注射第2、3天GW4869+EA组大鼠热辐射缩足痛阈(7.72±0.70)s、(7.87±0.58)s较EA组(9.96±0.94)s、(9.66±0.96)s显著降低(均P0.05),差异存在统计学意义。结论:初步发现阻断穴位局部外泌体后针刺镇痛效应显著减弱,说明穴位局部外泌体可能参与了针刺穴位效应启动过程。     

温和灸对动脉粥样硬化家兔CD40-CD40L轴的影响

目的:探索温和灸调脂、抗动脉粥样硬化的作用及其机制。方法:将41只雄性日本大耳白兔随机分为4组,空白组(10只)、模型组(10只)、艾灸组(10只)和药物组(11只)。空白组予普通饲料喂养,其余各组采用高脂饲料喂养联合注射牛血清白蛋白法建立家兔动脉粥样硬化模型。造模后模型组不予治疗干预;艾灸组行温和灸治疗,取双侧"足三里""神阙"穴,每日每穴灸治10min,连续治疗4周;药物组用洛伐他汀胶囊按3.6mg/kg的剂量行灌胃治疗,连续治疗4周。4周后测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)等血脂水平及CD40配体(CD40L)、可溶性CD40L(sCD40L)含量、核因子κB(NF-κB)的表达。结果:与模型组比较,艾灸组、药物组均能有效减少总胆固醇、低密度脂蛋白含量(均P0.05);降低sCD40L水平[模型组(8.310±1.221)ng/mL,艾灸组(7.097±0.846)ng/mL,药物组(7.354±0.631)ng/mL)],降低CD40L的表达[模型组(0.235±0.179)mm2,艾灸组(0.072±0.079)mm2,药物组(0.039±0.015)mm2];NF-κB的表达亦明显减少[模型组(0.145±0.052)mm2,艾灸组(0.052±0.012)mm2,药物组(0.036±0.013)mm2],差异均有统计学意义(P0.05,P0.001),艾灸组和药物组比较差异无统计学意义(均P0.05)。结论:温和灸具有良好的调脂、抗动脉粥样硬化作用,下调CD40-CD40L的表达是艾灸发挥抗动脉粥样硬化作用的可能机制之一。     

DAJ-4多功能艾灸仪与传统艾灸热效应差异研究

目的:比较传统艾灸疗法和DAJ-4多功能艾灸仪艾灸的热力学特性和艾灸后热效应.方法:选择3名健康人,重复3次用传统和艾灸仪两种灸法分别在内关穴、足三里穴位施灸,用红外成像设备每隔5 min拍摄艾灸前后不同时点人体热像图,测量灸点局部温度和远端肢体穴位(劳宫、阴陵泉)温度.结果:传统灸法艾灸15 min,灸点产生烧灼感,最高温度达(41.43±0.13)℃,艾灸仪艾灸15 min时灸点最高温度为(36.97±0.13)℃.远端肢体艾灸前后温度比较,传统灸法灸后20 min远端温度较灸前有所下降,多功能艾灸仪灸后20 min远端温度仍保持在一定高度.结论:多功能灸疗仪远端升温效果优于传统艾灸,且持续时间较长.     

艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体、磷酸化细胞外信号调节激酶的影响

目的:观察艾灸对脾虚胃溃疡模型大鼠胃组织表皮生长因子受体(EGFR)和磷酸化细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)蛋白表达的影响,初步探讨其作用机制。方法:SD大鼠随机分为空白组、模型组、四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组,每组10只。采用大黄浓缩液灌胃法建立大鼠脾虚模型,在此基础上运用无水乙醇灌胃法制备脾虚胃溃疡大鼠模型。四君子汤组予以四君子汤灌胃,艾灸组大鼠隔日交替灸"足三里""中脘"或"脾俞""胃俞",艾灸非穴位组灸艾灸组穴位的对照点,每日1次,共治疗8d。按脾虚动物模型标准观察大鼠脾虚症状,按Guth法计算胃黏膜损伤指数,光镜下观察胃黏膜组织形态学变化,免疫组织化学法检测胃组织EGFR的表达和蛋白质印迹法检测p-ERK1/2蛋白的水平。结果:与空白组比较,其余各组造模大鼠脾虚症状明显,模型组大鼠胃黏膜损伤指数显著增加(P0.01),光镜下胃黏膜损伤严重,胃组织EGFR、p-ERK1/2蛋白表达升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,四君子汤组、艾灸非穴位组和艾灸组胃黏膜损伤指数显著降低(P0.01,P0.05),光镜下胃黏膜损伤改善,且胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01);与艾灸非穴位组相比,四君子汤组和艾灸组胃黏膜损伤指数呈降低趋势,但差异无统计学意义(P0.05),而光镜下胃黏膜损伤恢复较艾灸非穴位组好,胃组织EGFR和p-ERK1/2蛋白表达显著升高(P0.01,P0.05)。结论:激活EGFR/ERK信号转导通路是艾灸启动机体的内源性保护机制之一,艾灸治疗脾虚胃溃疡可能是通过提高胃组织表皮生长因子、转化生长因子的表达,两者均结合并激活EGFR,激活后的EGFR介导ERK磷酸化从而激活EGFR/ERK信号转导通路,因而起到保护胃黏膜、促进胃黏膜增殖修复的作用。     

艾灸预处理对急性胃黏膜损伤大鼠胃组织中TGF-α、PCNA含量的影响

目的:观察艾灸预处理对无水乙醇灌胃所致急性胃黏膜损伤大鼠胃组织中转化生长因子-α(TGF-α)、增殖细胞核抗原(PCNA)含量的影响。方法:将48只SD大鼠随机分成4组(空白组、模型组、艾灸穴位组、艾灸对照点组),艾灸穴位组选取足三里穴、中脘穴,艾灸对照点组则选取足三里穴、中脘穴旁开1cm处的对照点,预处理8d后,空白组予0.9%氯化钠注射液灌胃,其余3组予无水乙醇灌胃,1h后取材,光镜下观察各组胃黏膜组织形态学变化,免疫组化法检测胃黏膜TGF-α及PCNA的含量。结果:与空白组比较,模型组大鼠胃黏膜中TGF-α、PCNA的含量明显增高(P0.01或P0.05);与模型组比较,艾灸穴位组大鼠胃黏膜中TGF-α、PCNA的含量较高(P0.01或P0.05);与艾灸穴位组比较,艾灸对照点组大鼠胃黏膜TGF-α、PCNA的含量较低(P0.01或P0.05)。结论:艾灸预处理通过增强急性胃黏膜损伤大鼠胃黏膜中TGF-α、PCNA的表达,促进胃黏膜的增殖修复,且这一过程具有一定的穴位特异性。     

艾灸血浆对离体人胃黏膜上皮细胞损伤的保护作用及其线粒体细胞凋亡通路机制

目的:探讨艾灸血浆对胃黏膜细胞凋亡的影响,揭示艾灸对胃黏膜细胞的保护作用及其信号转导机制。方法:24名健康人随机等分为艾灸穴位组和艾灸非穴位组,分别艾灸中脘、关元和足三里穴及非穴位对照点各10 d。将人体胃黏膜上皮(GES-1)细胞分为空白组、模型组、艾灸穴位血浆组、艾灸非穴位血浆组,采用含8%乙醇的培养液造成GES-1细胞损伤模型,分别加以预先提取的灸前人体血浆、艾灸穴位和非穴位血浆。流式细胞技术检测细胞凋亡率;Western-blot法检测细胞内热休克蛋白70(HSP70)、第二个线粒体来源的胱氨酸酶激活物(Smac)、凋亡诱导因子(AIF)的表达;细胞免疫化学法检测半胱氨酸天冬酸蛋白酶-3、9(Caspase-3、9)的表达。结果:模型组与空白组比较,细胞凋亡率明显增加,HSP70、Smac、AIF、Caspase-3、Caspase-9表达均上调(均P<0.01);艾灸穴位血浆组与模型组比较,凋亡率明显下降(P<0.01),HSP70表达进一步提高(P<0.01),Smac、AIF、Caspase-3、Caspase-9表达下调(均P<0.01);艾灸非穴位血浆组与模型组比较,凋亡率、Smac表达下降,Caspase-3、Caspase-9表达也下调(均P<0.01),但高于艾灸穴位血浆组(P<0.05,P<0.01)。结论:艾灸中脘、关元和足三里穴位后提取的人体血浆能抑制GES-1细胞凋亡,其信号转导通路可能是:促进细胞内HSP70合成,通过线粒体凋亡通路,抑制Smac、AIF表达,同时阻断其与Caspase-9的结合,减少Caspase-3含量,抑制细胞凋亡。     

隔花椒饼灸对类风湿关节炎大鼠穴位局部温度的影响

目的:观察隔花椒饼灸对类风湿性关节炎(RA)型大鼠穴位局部温度的影响,从温度角度探讨隔花椒饼灸对温热效应的影响意义。方法:用随机法将SD大鼠分为空白组、模型组、实验组(隔花椒饼组)、对照组(隔附子饼灸组),用温度记录仪分别记录在隔花椒饼灸、隔附子饼灸刺激下,模型大鼠肾俞、足三里穴位局部的温度变化,并比较在同一穴位两种不同隔物灸法下穴位局部温度变化差异;同一种灸法下两个穴位间局部温度变化差异。观察3个疗程后4组大鼠的右足跖围。结果:隔花椒饼灸组的肾俞和足三里穴位表面温度上升最大幅值及升温幅度均显著高于隔附子饼灸(P<0.05);无论隔花椒饼灸组还是隔附子饼灸组肾俞穴位局部温度基础值和施灸后终末温度均显著高于足三里(P<0.05);隔花椒饼灸的抗炎效应强于隔附子饼灸(P<0.05)。结论:隔花椒饼灸的穴位局部温热效应显著高于隔附子饼灸组;同一灸法不同穴位的温热效应不同;温热效应与抗炎效应成正相关。     

艾灸血浆对GES-1热休克蛋白70及细胞凋亡细胞周期的影响

目的：探讨艾灸血浆对乙醇损伤的人胃粘膜上皮细胞（GES-1）热休克蛋白70（HSP70）及细胞凋亡、细胞周期的影响。方法：24名健康人（男女各半）随机分为艾灸穴位组12名、艾灸非穴位组12名。两组分别于艾灸前和艾灸后采取静脉血提取灸前血浆和灸后血浆。将GES-1细胞分为A空白组、B模型组、C艾灸穴位血浆组、D艾灸非穴位血浆组,采用含8%乙醇的培养液造成GES-1细胞损伤模型,观察艾灸血浆对GES-1 HSP 70及细胞凋亡、细胞周期的影响。结果：与模型组和艾灸非穴位血浆组比较,艾灸穴位血浆组GES-1中HSP70含量明显上调（1.1084±0.0771 vs 0.6387±0.0322,0.7220±0.0708,P〈0.01）、细胞凋亡率下降（1.238±0.084 vs7.418±0.156,1.565±0.186,P〈0.01）;细胞周期中G1期下降：49.18±1.72 vs 57.9±1.42,52.5±2.83,P〈0.01）;S期上升（25.93±1.18 vs 21.5±0.35,23.55±1.54,P〈0.01）;G2/M期升高（24.88±1.17 vs 20.53±1.24,23.95±1.58,P〈0.01）。结论：艾灸血浆可诱导GES-1中HSP70含量升高,以达到对抗细胞凋亡,促进细胞增殖的作用。     

不同穴位艾灸对原发性痛经大鼠模型NK细胞活性的影响

目的:从免疫学角度探讨不同穴位艾灸对原发性痛经大鼠模型NK细胞活性的影响,以期为临床治疗原发性痛经筛选出更好的穴位。方法:利用苯甲酸雌二醇注射液和缩宫素制备大鼠痛经模型,选择治疗痛经的常用腧穴神阙穴和关元穴分别对痛经大鼠进行艾灸治疗,通过观察各组大鼠脾脏重量、扭体次数、脾脏NK细胞活性含量及光镜下脾脏病理切片的变化,比较灸神阙与灸关元治疗原发性痛经的疗效,并从免疫学角度探讨艾灸治疗原发性痛经的机制。结果:(1)与空白组比较,模型组大鼠脾脏重量明显减轻(P0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠脾脏重量均显著增加(P0.01)。(2)与空白组比较,模型组大鼠扭体次数明显增加(P0.01);经治疗后,灸神阙组、灸关元组及西药组大鼠扭体次数均明显减少,与模型组比较,差异均有显著统计学意义(P0.01)。(3)与空白组比较,模型组大鼠脾脏NK细胞活性明显降低(P0.01);与模型组大鼠脾脏NK细胞活性比较,西药组有统计学意义(P0.05),灸神阙组与灸关元组均有显著统计学意义(P0.01)。镜下观察到各治疗组大鼠的脾脏结构均存在,与模型组比较,西药组大鼠脾脏淋巴小结数目及面积稍增多增大,而灸神阙组与灸关元组大鼠脾脏淋巴小结数目及面积均明显增多增大,且灸关元组大鼠脾脏淋巴小结数目稍多于灸神阙组。结论:灸关元穴与灸神阙穴均可通过升高原发性痛经大鼠脾脏NK细胞活性而发挥镇痛作用,但灸关元穴比灸神阙穴对原发性痛经大鼠的免疫影响更明显。     

不同灸温对高脂血症小鼠胆固醇及“神阙”穴皮肤的影响

目的:通过观察不同温度艾灸对急性高脂血症模型小鼠胆固醇及"神阙"穴皮肤的影响,探讨艾灸效应与瞬时感受器电位香草酸受体1(transient receptor potential vanilloid 1,TRPV1)的相关性。方法:32只C57BL/6J野生型(WT)小鼠选取8只作为空白组,余24只采用注蛋黄乳法制备急性高脂血症模型,造模成功后随机分为模型组、38℃艾灸组、46℃艾灸组,每组8只。38℃艾灸组施灸温度控制在(38±1)℃,46℃艾灸组施灸温度控制在(46±1)℃,两组均取"神阙"和双"足三里",每穴每次艾灸10min,每日1次,共治疗2次。空白组和模型组以同样方法抓取固定,不予艾灸治疗。治疗结束后,采用氧化酶法检测血清胆固醇含量;HE染色观察各组小鼠"神阙"穴皮肤组织形态;免疫组化法检测皮肤组织内TRPV1的表达。结果:1与空白组比较,模型组血清胆固醇含量升高(P0.001);46℃艾灸组血清胆固醇含量较模型组降低(P0.001);46℃艾灸组血清胆固醇含量较38℃艾灸组降低(P0.01)。238℃艾灸组皮肤组织形态结构有轻微的改变;46℃艾灸组皮肤组织形态结构改变明显,出现了特异性的变化。346℃艾灸组"神阙"穴皮肤组织内TRPV1表达与空白组、模型组比较差异均有统计学意义(均P0.01),与38℃艾灸组比较差异亦有统计学意义(P0.05)。结论:温度是影响小鼠胆固醇和穴位皮肤的重要因素,艾灸效应与TRPV1有相关性。     

艾灸关元、足三里穴对戊四氮致痫大鼠血清中IL-6的影响

目的:通过研究艾灸关元、足三里穴对戊四氮致痫大鼠血清中IL-6含量的影响,探讨其抗癫痫的可能机制.方法:取27只雌性Wistar大鼠,体重(200±15)g,分为4组:空白组(3只)、模型组(8只)、药物组(8只)和艾灸组(8只).腹腔注射戊四氮35.0 mg/kg诱发大鼠点燃致痫模型,艾灸组大鼠艾灸关元、足三里穴进行治疗,每天1次,每次15 min.药物组给予丙戊酸钠15.75 mg/100 g灌胃,每日1次.模型组、空白组不给予任何治疗.治疗20天后利用酶联免疫法测大鼠血清中IL-6的含量.结果:空白组和模型组、模型组和艾灸组相比有明显差异(P＜0.01),艾灸组和空白组、药物组和空白组比较无统计学意义(P＞0.05).结论:艾灸关元和足三里穴治疗癫痫大鼠有效,其机制可能与降低血清中IL-6相关.     

基于核磁共振氢谱技术研究艾灸对胃热证、胃寒证大鼠胃组织代谢的影响

目的:采用核磁共振氢谱(~1H-NMR)技术研究艾灸对胃热证、胃寒证大鼠胃组织代谢物的影响,阐述艾灸对胃热证、胃寒证代谢调节机制,并验证"热证可灸"的科学性。方法:将SD雄性大鼠随机分为空白组、胃热模型组、胃寒模型组、艾灸胃热组、艾灸胃寒组,每组6只。采用辣椒液加乙醇灌胃法复制胃热证大鼠模型,冰水加NaOH灌胃法复制胃寒证大鼠模型。艾灸组温和灸"足三里""梁门"穴,20 min/次,1次/d,连续干预7 d。观察大鼠一般状态并记录体质量,采用HE染色法观察大鼠胃组织病理形态,采用~1H-NMR技术对胃组织进行代谢组学检测,用模式识别方法筛选出差异代谢物,通过在线分析网站MetPA筛选相关代谢通路。结果:两模型组大鼠体质量逐渐下降,从第4天开始明显低于空白组(P0.05,P0.01);两艾灸组大鼠体质量逐渐增加,从第10天开始明显高于各自的模型组(P0.05,P0.01)。空白组胃黏膜皱襞完整,结构清晰;胃热模型组可见胃黏膜柱状上皮结构破坏严重,炎性细胞浸润,颜色晦暗;胃寒模型组可见炎性细胞浸润;艾灸组胃组织炎性细胞浸润程度较模型组有明显改善。经~1H-NMR技术共筛选出16种与胃热证胃黏膜损伤相关的代谢物,14种与胃寒证相关的代谢物。艾灸对胃热证大鼠胃黏膜中13个代谢物产生调节作用:上调异亮氨酸、肌酸酐、胆碱、乳酸盐(P0.05),下调胆碱磷酸、甘氨酸、丙氨酸、尿嘧啶、酪氨酸、苯丙氨酸、次黄嘌呤、腺苷、烟酰胺(P0.05);可对胃寒证大鼠胃黏膜中8个代谢物产生调节作用:上调肌酸酐、乙醇胺、胆碱、腺苷、烟酰胺(P0.05),下降甘氨酸、磷酸肌酸、酪氨酸(P0.05)。MetPA显示艾灸能调节胃热证大鼠胃黏膜中10条代谢通路、胃寒证大鼠胃黏膜中7条代谢通路,这些代谢物和代谢通路主要涉及氨基酸代谢、能量代谢和炎性反应。结论:"热证可灸"具有代谢物变化基础;艾灸对胃黏膜损伤修复涉及其对氨基酸代谢、能量平衡和炎性反应的调节作用;艾灸对不同证型大鼠胃黏膜的代谢调节具有共性和特异性。     

温和灸对动脉粥样硬化兔Th1/Th2比例失衡的影响及其调节规律

目的:观察温和灸法及药物洛伐他汀对慢性高脂血症并动脉粥样硬化家兔模型免疫功能的影响,初步阐明温和灸对免疫功能的调节规律。方法:将32只日本雄性大耳白兔随机分出8只作为空白组,其余24只均采用内皮损伤并高脂饲料饲养家兔方法制备动脉粥样硬化模型。空白组普通饲料喂养,自由饮水;另24只造模10周后再随机分为模型组、艾灸组、药物组,每组8只。艾灸组于"神阙""后三里"穴给予每天每穴10min艾灸治疗;药物组采用洛伐他汀胶囊以每天3.6mg/kg灌胃给药。治疗结束取血清,用生化比色法测定血清总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C),评价动脉粥样硬化指数(AI);用酶联免疫吸附法测定γ干扰素(IFN-γ)、白细胞介素4(IL-4)。结果:①模型组血清胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)均高于空白组、艾灸组与药物组,且差异均有统计学意义(均P0.01),艾灸组AI(1.683±0.486)远低于模型组(20.301±4.022,P0.01);②艾灸组、药物组Th1/Th2比值均显著低于模型组(0.569±0.143vs 0.917±0.255,0.445±0.079vs 0.917±0.255,均P0.01),而艾灸组与药物组相比,差异无统计学意义(P0.05)。结论:艾灸干预动脉粥样硬化能够通过降低动脉粥样硬化指数,影响辅助性T细胞的漂移偏向,调整机体体液免疫与细胞免疫的平衡,使人体恢复到相对免疫平衡的状态,从而减缓了动脉粥样硬化发生发展以及血栓破裂进程。     

基于代谢组学技术研究艾灸“足三里”对慢性萎缩性胃炎大鼠胃组织代谢物的影响

目的:采用代谢组学的方法观察正常及疾病状态下,艾灸"足三里"对胃组织代谢产物的影响,从代谢组学角度探讨阳明经穴位与胃之间相对特异性联系的基础。方法:将56只SD大鼠分为正常组、正常+艾灸组、模型组、模型+艾灸组,每组14只。通过N-甲基-N′-硝基-N-亚硝基胍联合乙醇灌胃、饥饱失常法复制慢性萎缩性胃炎(CAG)大鼠模型。正常组和模型组不予以治疗,正常组+艾灸组和模型组+艾灸组予以艾灸"足三里""中脘"穴治疗,每次15min,每日1次,共2周。HE染色观察大鼠胃组织病理变化,核磁共振氢谱(1 H NMR)技术检测胃组织代谢物并用Chenomx NMR Suite软件分析所得数据。结果:模型组大鼠胃组织病理改变符合CAG病理诊断标准,模型+艾灸组大鼠胃组织病理改变较模型组有一定程度的改善。与正常组比较,模型组大鼠胃组织中的乳酸、谷胱甘肽、N-乙酰天门冬氨酸、尿苷二磷酸葡萄糖、肌糖升高(P0.05),亮氨酸、甜菜碱、磷酸胆碱、尿嘧啶降低(P0.05);艾灸"足三里"后浓度发生逆转的代谢物有谷胱甘肽、N-乙酰天门冬氨酸、磷酸胆碱、尿嘧啶(和模型组比较,P0.05)。与正常组比较,正常+艾灸组胃组织中的肌醇升高(P0.05),而3-羟基丁酸、丝氨酸、尿苷二磷酸葡萄糖降低(P0.05)。结论:从代谢组学角度证明了胃经穴位与胃之间存在一定的相对特异性联系,谷胱甘肽、N-乙酰天门冬氨酸、磷酸胆碱、尿嘧啶等差异性代谢物可能是介导艾灸胃经穴位产生效应的代谢物质基础。