枸杞多糖对HepG2肝癌细胞自噬与细胞凋亡的影响

目的探讨枸杞多糖(Lycium barbarum polysaccharides,LBP)对HepG2细胞自噬与凋亡的影响。方法体外培养HepG2肝癌细胞株,CCK-8法检测0、200、400、800 mg/L的LBP分别培养24、48、72 h后对细胞增殖的影响。将实验对象分为:对照组、LBP组、3-MA(3-甲基腺嘌呤)组和LBP+3-MA 4组。GFP-LC3腺病毒感染HepG2细胞,荧光显微镜观察各组自噬小体的绿色荧光颗粒的变化;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率的变化。结果 LBP对HepG2细胞生长具有明显抑制作用;LBP组GFP-LC3荧光颗粒数目明显高于对照组(P0.01);3-MA+LBP组荧光颗粒数目比LBP组明显减少(P0.05);3-MA组和对照组相比较数目无明显变化(P0.05)。流式细胞仪检测细胞凋亡率,LBP组的凋亡率明显高于对照组(P0.05),明显低于3-MA+LBP组(P0.05),二者具有统计学差异;3-MA组与对照组凋亡率比,二者无统计学差异(P0.05)。结论枸杞多糖抑制HepG2细胞的增殖,并诱导细胞发生自噬和凋亡。LBP诱导的自噬作用对肝癌细胞的凋亡起保护作用,促进肝癌细胞的增殖。     

肝复康胶囊对人肝癌细胞系HepG2的影响

目的:探讨肝复康胶囊抑制人肝癌细胞系HepG2增殖的作用机制。方法:采用MTT比色法测定肝复康胶囊对人肝癌细胞系HepG2细胞增殖的影响;用流式细胞仪分析细胞周期、细胞凋亡,分析各时期细胞周期的变化;用免疫细胞化学方法检测药物作用后诱导凋亡蛋白Omi/HtrA2和casepase-3的表达。结果:肝复康胶囊具有较好的抑制HepG2细胞增生的作用,呈现出时间-剂量依赖性;应用肝复康胶囊后HepG2细胞G2期比例升高,G1期和S期细胞比例降低,并使细胞凋亡率升高。结论:肝复康胶囊能够抑制人肝癌细胞系HepG2增殖,促进其凋亡。     

枸杞多糖对人肝癌细胞Bel-7402的抑制作用及凋亡的研究

目的 研究枸杞多糖诱导人肝癌细胞Bel-7402的凋亡作用及其作用机制.方法 体外培养的人肝癌细胞Bel-7402,细胞经不同剂量枸杞多糖(LBP)处理后,采用MTT法测定细胞的增殖情况,流式细胞仪分析LBP对Bel-7402细胞周期和凋亡的影响,用RT-PCR技术检测Bel-7402细胞SurvivinmRNA的表达.结果 LBP可明显抑制人肝癌细胞Bel-7402的生长,并能诱导Bel-7402细胞凋亡,凋亡率(%)分别为(6.20±0.62),(12.80±0.47)和(18.10±0.70),与对照组比较,差异有非常显著性(P<0.01);各剂量药物处理组的肿瘤细胞Survivin mRNA表达水平均明显降低(P<0.01).结论 枸杞多糖可抑制Bel-7402细胞增殖,诱导细胞凋亡,该作用可能与下调细胞Survivin 表达有关.     

红花多糖对肝癌细胞增殖阻滞的机制探讨

目的： 通过研究红花多糖（safflower polysaccharide,SPS）对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响,探讨SPS抗肿瘤作用的分子机制。 方法： 体外培养人肝癌SMMC-7721细胞,加入含不同质量浓度SPS（0,0.02,0.04,0.08,0.16,0.32,0.64,1.28 g·L^-1）的培养液,分别培养24,48 h,用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测SPS对细胞增殖的影响;用免疫组化法检测0.16,0.32,0.64 g·L^-1SPS作用肝癌细胞48 h,细胞的细胞周期素B₁（cyclin B₁）蛋白表达;采用实时荧光定量PCR技术（realtime PCR,RT-PCR）和蛋白免疫印迹（Western blot）法检测细胞分裂周期25B（Cdc25B）基因的表达。 结果： 肝癌细胞的生存率随SPS浓度和作用时间的增加而降低,而1.28 g·L^-1SPS组除外。SPS作用48 h后SMMC-7721细胞的cyclin B₁蛋白、Cdc25B蛋白和mRNA表达降低,并具有剂量依赖性。 结论： SPS可能通过抑制细胞周期相关基因的表达,诱导肝癌细胞增殖阻滞,进而起到抗肿瘤作用。     

何首乌不同分离部位对人正常肝L02细胞和 肝癌HepG2细胞的杀伤作用

目的:考察何首乌不同分离部位对入正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞的杀伤作用,寻找能明显杀伤肝癌细胞但对正常肝细胞生长影响较小的分离部位,并初步探讨其对2种细胞不同作用的机制.方法:何首乌70％乙醇提取物经AB-8型大孔树脂吸附,依次用水、50％乙醇和95％乙醇洗脱得到何首乌乙醇提取物的水洗脱部位(RW)、50％乙醇洗脱部位(R50)和95％乙醇洗脱部位(R95);体外培养人正常肝L02细胞及肝癌HepG2细胞,用含何首乌各分离部位的细胞培养液与细胞共同孵育一定时间后,MTT检测及倒置镜下观察约物对L02及HepG2细胞生长的影响,筛选具有区别杀伤作用的部位,考察其剂量和时间作用效应.进一步通过Giemsa染色观察药物作用后细胞核的变化,流式细胞术检测L02细胞周期和凋亡情况.结果:MTT和倒置镜下镜检结果均表明,R50对L02细胞和HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用.Giemsa染色和流式细胞术结果表明,R50诱导2种细胞凋亡的程度不同:试验的各个时相下HepG2中凋亡细胞的比例均明显高于L02细胞(HepG2细胞中凋亡细胞的比例在24,48,72 h分别为83.62％,60.52％,74.49％,L02细胞中凋亡细胞的比例则分别为31.02％,20.57％,25.32％,2种细胞阴性对照组中凋亡细胞的比例在各个时相均小于5％),但对2种细胞的细胞周期没有明显影响.结论:何首乌提取物的R50部位对人正常肝L02细胞和肝癌HepG2细胞具有明显的区别杀伤作用,区别杀伤作用的本质是药物诱导2种细胞凋亡的程度不同.     

枸杞多糖对人树突状细胞成熟的影响

目的：研究枸杞多糖对人树突状细胞（DC）表面标志及功能成熟的影响。方法：通过密度离心法分离人外周血单核细胞,采用细胞因子体外培养7d后,实验组加入枸杞多糖（100ug／m1）,空白对照组加等量RPMI1640,两组分别同时作用48h,观察细胞的形态变化及用免疫细胞化学法检测其表面标志的表达。通过混合淋巴细胞反应检测细胞提呈抗原的能力。结果：用枸杞多糖刺激的人DC表达MHC-Ⅱ、CD83、CD86和促进T细胞的增殖的能力比空白对照组增加。结论：枸杞多糖可以促进体外培养的人DC的成熟,促进DC诱导的免疫应答启动。     

八角莽草酸诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡及其机制研究

目的：研究八角莽草酸诱导人肝癌细胞HepG-2凋亡的作用和机制。方法：取对数生长期人肝癌HepG-2细胞,随机分为药物组和对照组,用0.125,0.5,1 g·L^-1不同浓度八角莽草酸作用人肝癌HepG-2细胞,采用MTT法测定莽草酸对HepG-2细胞增殖的影响;通过流式细胞仪检测在以上浓度的莽草酸对肝癌HepG-2细胞周期的影响;通过免疫细胞化学检测凋亡相关基因B细胞淋巴瘤白血病2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax蛋白）表达的改变。结果：MTT实验结果表明,各质量浓度0.125,0.5,1 g·L^-1的莽草酸对人肝癌HepG-2的生长具有显著的抑制作用（P<0.05）,呈现时间依赖性和剂量依赖性;流式结果表明莽草酸将人肝癌HepG-2细胞阻滞在G₁期,使细胞不能顺利地进入细胞DNA合成期S期,从而抑制了该细胞的增殖。免疫细胞化学检测凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达明显减少、Bax表达明显增加;Bcl-2/Bax比例明显降低。结论：八角莽草酸在体外诱导人肝癌HepG-2细胞大量阻滞在G₁期,进入S期细胞减少,抑制细胞增殖,其作用可能通过降低Bcl-2/Bax比例来诱导细胞凋亡而实现的。     

田基黄对人肝癌细胞HepG2增殖的影响

目的:探讨田基黄对人肝癌细胞增殖的影响。方法:体外培养人肝癌细胞株HepG2,用MTT法和流式细胞术(FCM)检测田基黄提取物及其含药血清作用于HepG2 24h后的细胞增殖情况。结果:MTT法结果表明,田基黄对HepG2增殖有抑制作用;FCM检测表明,田基黄阻止增殖中的HepG2进入S期。结论:田基黄能有效地抑制HepG2细胞增殖,提示阻滞细胞周期、抑制细胞增殖可能是田基黄治疗肝癌的一个机制。     

黄芪多糖对人胃癌细胞系MKN45的生长抑制作用及细胞周期的影响

目的:研究黄芪多糖对胃癌细胞MKN45的生长抑制作用及细胞周期的影响。方法:用RPMI 1640培养液对人胃癌细胞MKN45进行传代培养,采用MTT法检测黄芪多糖对MKN45的生长抑制作用,采用流式细胞术检测黄芪多糖对MKN45细胞周期的影响。结果:MTT法实验显示黄芪多糖可抑制MKN45细胞增殖;细胞周期分析提示黄芪多糖可将细胞MKN45阻滞于G0/G1期,效应均呈浓度和时间依赖性。结论:黄芪多糖能抑制胃癌细胞增殖,其机制之一是影响细胞周期使之阻滞于G0/G1期。     

通关藤提取物对HepG2肝癌细胞增殖抑制的影响

目的 研究通关藤提取物(Marsdenia tenacissima extract,MTE)对HepG2肝癌细胞的抑制作用及其机制.方法 用MTT法及克隆形成实验检测不同浓度的MTE对HepG2肝癌细胞的增殖抑制作用,并运用流式细胞仪检测不同浓度组24 h后细胞周期的影响.结果 不同浓度的MTE对HepG2肝癌细胞均有...     

枸杞多糖诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡的实验研究

目的 研究枸杞多糖诱导人食管癌细胞Eca-109凋亡作用及其作用机制.方法 利用MTT染色在普通光镜下观察细胞凋亡形态学变化并观测枸杞多糖对肿瘤细胞的抑制率;通过流式细胞仪分析人食管癌细胞Eca-109凋亡率、细胞周期变化; DNA 琼脂糖凝胶电泳方法检测肿瘤细胞凋亡的DNA水平变化;激光扫描共聚焦显微镜(LSCM) 检测细胞内钙离子浓度变化.结果 经枸杞多糖作用后的人食管癌细胞Eca-109 出现核固缩、凋亡小体、新月状浓染区等细胞凋亡形态学改变,各剂量LBP 组的肿瘤细胞均表现生长抑制,且具有剂量依赖性, 1 000μg/ml LBP处理组的抑制率达96.02%.DNA 琼脂糖凝胶电泳呈现典型的梯形电泳条带.药物处理组的肿瘤细胞更多地被阻止于G2/M期,各剂量组均出现明显的凋亡变化,最大凋亡率可达21.3%.各剂量药物处理组的肿瘤细胞内的Ca2+浓度明显高于对照组( P<0.01).结论 枸杞多糖可明显抑制人食管癌细胞Eca-109的生长增殖,诱导细胞凋亡,并能改变该肿瘤细胞周期分布, 阻止细胞周期于G2/M期.     

野西瓜多糖诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的实验研究

目的观察野西瓜多糖诱导人肺癌HepG2细胞凋亡作用。方法通过MTT法测定野西瓜多糖对HepG2细胞的细胞毒作用;倒置显微镜观察野西瓜多糖对HepG2细胞形态的影响;AO/EB双染,激光共聚焦扫描显微镜观察野西瓜多糖对HepG2细胞形态的影响;PI染色法,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果MTT结果显示野西瓜多糖对HepG2细胞有抑制作用,IC50为471.53mg/L;倒置显微镜、激光共聚焦扫描显微镜下观察细胞形态,表现为细胞皱缩、碎裂、甚至出现凋亡小体;流式细胞术检测到野西瓜高剂量组凋亡率为74.926%。结论野西瓜多糖具有诱导HepG2细胞凋亡的作用。     

复方苦参注射液对人肝癌细胞SMMC-7721增殖与细胞周期的影响

目的：观察复方苦参注射液对人肝癌SMMC．7721细胞增殖与细胞周期的影响。方法：采用MTF法观察复方苦参注射液对SMMC．7721细胞增殖的影响;应用流式细胞术分析对SMMC-7721细胞周期的影响。结果：复方苦参注射液对SMMC-7721细胞有明显的抑制增殖的作用（P〈0．05）,该作用具有时间、剂量依赖性;流式细胞术分析显示,复方苦参注射液可使G0／G1期细胞比例升高,S期细胞比例下降,即细胞被阻滞于G0／G1期。结论：复方苦参注射液能抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,并且将细胞阻滞于G0／G1期。     

番茄红素对人肝癌HepG2细胞生长的影响及其机制

目的:研究番茄红素(Lycopene,LP)对人肝癌Hep G2细胞生长的抑制作用及其机制。方法:体外培养并取对数生长期人肝癌Hep G2细胞,分别给予不同质量浓度LP(5、10、20μg·m L~(-1))和顺铂(40μg·mL~(-1))进行干预,48 h后通过MTT比色法测定细胞增殖抑制率,通过流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡状况,采用Western blotting技术检测Bax、bcl-2、Cleaved Caspase-3蛋白表达。结果:经LP或顺铂干预48 h能够有效提高人肝癌Hep G2细胞增殖抑制率,延长细胞周期G_0/G_1期并缩短G_2/M期,提高细胞凋亡率(Apoptosis Index,AI),上调Bax表达、下调bcl-2表达、提高Bax/bcl-2比值,上调Cleaved Caspase-3蛋白表达,LP上述作用均具有一定的剂量依赖性。结论:LP能够通过抑制细胞增殖并促进其凋亡而对人肝癌Hep G2细胞生长具有一定的抑制作用,其机制可能与LP能够影响细胞周期进程并调节凋亡相关基因蛋白表达有关。     

枸杞多糖对大鼠睾丸支持细胞体外增殖的影响

目的观察枸杞多糖对体外培养的大鼠睾丸支持细胞的增殖作用。方法选8~9 d龄的大鼠,采用两步酶消化法获取原代大鼠睾丸支持细胞,加入不同质量浓度的枸杞多糖,采用MTT比色法、直接细胞计数及CFSE荧光标记,检测不同质量浓度枸杞多糖对体外培养别的睾丸支持细胞增殖的影响。结果与对照组相比,经枸杞多糖处理后的睾丸支持细胞数量明显增多,并呈剂量依赖性。结论枸杞多糖能够促进大鼠睾丸支持细胞体外增殖。     

川芎嗪对人肝癌HepG2细胞的影响及与突变型p53蛋白表达的影响

目的观察川芎嗪对人肝癌HepG2细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用及其与突变型p53蛋白表达变化的关系。方法应用不同浓度的川芎嗪作用于人肝癌HepG2细胞24h、48h和72h,MTT法检测细胞活力;Hoechst染色法检测细胞凋亡;免疫细胞化学法检测川芎嗪对突变型p53蛋白表达的影响。结果不同浓度的川芎嗪呈时间、剂量依赖性地抑制人肝癌HepG2细胞的增殖并促进其凋亡（均P〈0.01）,800mg/L川芎嗪作用细胞72h后,其抑制率及凋亡率分别为49.59%和31.31%。免疫细胞化学法显示,不同浓度的川芎嗪作用人肝癌HepG2细胞48h后,突变型p53表达呈显著降低（均P〈0.01）。结论川芎嗪可抑制人肝癌HepG2细胞的增殖,促进细胞凋亡,其机制可能与其抑制突变型p53蛋白的表达有关。     

长春新碱对人胃癌BGC细胞增殖与凋亡的影响及其机制

目的通过体内外水平研究长春新碱对人胃癌BGC细胞增殖与凋亡的影响及其机制。方法采用MTS法检测人胃癌BGC细胞的增殖情况;采用Hoechst荧光染色法、流式细胞技术检测细胞凋亡和细胞周期的情况;通过Western blotting法检测BGC细胞内增殖、周期和凋亡相关蛋白表达情况;荷瘤裸鼠实验检测长春新碱抑制胃癌生长情况。结果长春新碱明显抑制BGC细胞的生长,其抑制率与药物浓度呈剂量和时间相关性,将细胞周期阻滞于G1期,并促进其凋亡,下调了细胞增殖和周期相关蛋白p-FAK、FAK、E2F1、Cylin E2、Cyclin D2、CDK2、CDK6的表达,并激活了凋亡相关蛋白Caspase-3。荷瘤裸鼠实验显示长春新碱能明显抑制胃癌生长。结论长春新碱通过下调细胞增殖与周期相关蛋白的表达,使细胞周期在G1期阻滞,同时激活Caspase-3诱导细胞的凋亡。     

枸杞多糖对小鼠生精细胞的影响

枸杞多糖对小鼠生精细胞的影响南京医科大学组织胚胎学教研室（２１００２９）周亚东宁夏医学院组织胚胎学教研室（７５０００４）王燕蓉关键词枸杞多糖，生精细胞，实验研究从Ａ型精原干细胞形成高度分化和特异的精子是一个极其复杂的细胞分化过程，由精原干细胞的增殖分...     

红花多糖对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的抑制作用

目的:观察红花多糖(Safflower polysaccharide,SPS)对SMMC-7721肝癌细胞增殖的抑制作用。方法:不同浓度SPS处理体外培养的SMMC-7721细胞株,采用MTT法测定SPS对SMMC-7721细胞增殖的影响;倒置显微镜观察细胞形态学变化;吖啶橙(AO)染色荧光显微镜观测以及Annexin-V/PI双染流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况。结果:MTT法检测结果显示SPS对人肝癌SMMC-7721细胞体外增殖具有明显的抑制作用,该抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)。光镜下可见SPS组贴壁细胞数明显减少,细胞变小、变圆,折光性差,贴壁不牢,悬浮细胞增多。AO染色荧光显微镜下观察,24h部分细胞出现胞质浓缩,体积缩小,核固缩,染色增强,荧光更为明亮,形成致密浓缩的绿色荧光等;48h和72h部分细胞可见细胞核固缩为新月状。流式细胞术结果显示细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势。结论:SPS能显著抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长且呈明显的量效和时效关系。SPS可诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡,具有一定的剂量依赖性。