不同产地西洋参种质遗传多样性的RAPD和ISSR分析

目的采用RAPD和ISSR分子标记技术对我国10个产地的西洋参Panax quinquefolium的遗传多样性进行分析。方法以人参及加拿大西洋参为对照,采用CTAB法提取基因组DNA,选取13个RAPD随机引物及12个ISSR引物对样品进行PCR扩增,根据条带数目,应用NTSYS-pc2.10e软件采用UPGMA方法进行聚类分析。结果 13条RAPD引物共扩增出97条清晰条带,多态性条带81,多态性百分率为85.51%;12条ISSR引物共扩增出99条清晰条带,多态性条带64,多态性百分率为64.65%;通过聚类分析,RAPD及RAPD+ISSR综合将样品聚为4大类;ISSR将样品聚为2大类。结论 RAPD和ISSR标记构建的样品聚类树状图在分类上稍有差异,但总体趋势一致。人参与西洋参被明显区分开来;在ISSR上,吉林兴参镇与北岗镇西洋参与人参聚为一大类;在生长环境及种植条件影响下,东北部分产地西洋参与加拿大西洋参相比在遗传多样性上有所改变。     

不同栽培模式对人参根际土壤微生物多样性的影响研究

目的以不同栽培模式下的人参根际土壤为研究对象,分析红松下种植人参、农田土壤种植下的人参根际土壤微生物菌群落多样性及群落功能特征的变化,探讨环境土壤微生物对林下人参、大棚人参生长的影响。方法采用第三代测序技术,对不同种植模式人参根际土壤中的优势菌群和差异微生物进行分析。结果在林下参根际土壤中检测到α-变形杆菌-13-2-20CM-2-64-7、慢生根瘤菌属的erythrophlei、SP-URHD0069、Lablabi、硝化螺旋菌SCGC-AG-212-E16、放线菌-13-1-2CM-4-69-9为优势菌种,这些固氮菌在加强了林下人参的养分吸收,在增加森林碳汇方面起到积极作用,同时增强了林下人参的抗逆性。相同年限的大棚人参根际土壤中检测出单胞菌、荧光假单胞菌、诺卡氏菌-SP-lS0805N、诺卡氏菌terrae、γ-变形杆菌-13-2-20CM-66-19显著增多,其中氨化细菌,纤维素分解菌、硝化菌丰度较高,这与种植方式比如施肥,翻耕、农药使用有密切联系。结论不同的栽培模式影响着人参根际土壤微生物菌群落多样性,及菌群功能特征。为后期人参绿色种植提供理论依据,为人参农林复合经营的可持续发展提供参考。     

桔梗栽培及野生种质遗传多样性的RAPD分析

为了解桔梗栽培种质、野生种质的遗传背景,为桔梗育种及道地药材研究提供依据,采用RAPD方法分析了桔梗20份栽培种质、3份野生种种质及5份遗传材料共92个样品的遗传多样性。从264个随机引物中筛选出多态性较好的6个引物进行全部样品PCR扩增,得到多态性条带58条。所有种质的多态性位点比率(P)为66.67%,Nei's基因多样性指数Ht为0.2099,栽培种质的Ht和P值AT＞AB＞NC＞SZ,野生和遗传材料中各份种质的Ht和P值很低,但总体值仍高;UPGMA聚类和SPSS聚类可以将各种不同来源的种质很好地区分开来。结论：桔梗栽培种质在遗传背景来上为混杂群体,纯系材料遗传背景均一,不同栽培产区桔梗种质已出现明显遗传分化。     

药用黄芪的遗传多样性RAPD分析

目的：对药用黄芪的遗传多样性进行研究,为黄芪的保护利用提供参考。方法：采用随机扩增多态DNA（RAPD）方法对15份黄芪基因组进行扩增,所获数据通过NTSYS-pc v2.1和POPGENE v1.3进行分析。结果：从47条引物中筛选出12条条带清晰且重复性好的引物用于实验和统计分析,共扩增出85个位点,多态性位点占78.16%。聚类分析显示,所有供试黄芪可明显聚为三类。结论：本研究中来自四个省份的黄芪具有较高的遗传多样性;材料间遗传距离的远近与其地理来源有一定相关性,其中四川理塘的野生黄芪与其他材料遗传距离较大,推测与其独特的生境有关。说明保护黄芪多样性应尽可能广泛收集不同来源地的种质资源。     

不同地块人参根区土壤微生物群落组成及其多样性分析

目的:分析土壤微生物群落组成及其多样性与土壤理化性质的相关性,揭示不同地块人参锈腐病发病率与土壤微生态差异的关系。方法:以人参根区土壤为研究对象,采用高通量测序技术,对农田健康、农田病重、林地健康、林地病重等4组人参根区土壤细菌的16S r RNA基因序列和真菌ITS序列进行测序。结果:人参根区土壤微生物细菌OTU数量大于真菌,说明细菌群落占主导地位;影响土壤微生物群落组成的重要因素是土壤p H和交换性铝;细菌中黄单胞菌属Xanthomonadaceae可能是导致本研究中病重组发病较重的原因之一;无论农田还是林地,真菌中的土赤壳属Ilyonectria的病原菌在病害组的相对丰度均显著高于健康组,其可能是导致土壤微生态失衡、土壤质量下降,进而引起人参锈腐病发生的主要原因。结论:揭示了健康和病害人参根区土壤微生物群落组成多样性的差异,阐明了土壤质量与土壤微生物差异之间的关系,为人参种植中科学合理选地奠定理论基础。     

药用金荞麦遗传多样性的RAPD分析

目的:对野生金荞麦进行遗传多样性研究.方法:通过RAPD技术对7个野生金荞麦居群共87个个体进行遗传多样性分析.结果:用12个随机引物共扩增出85条清晰条带,其中75条具多态性,平均多态性位点比率为88.24%,Nei's基因多样性指数H=0.310 3,Shannon多样性指数I=0.563 2,遗传分化指数G_(st)=0.192 4.结论:金荞麦种内具有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于居群内部,遗传多样性与地理关系表现出明显的相关性.RAPD可以作为研究遗传多样性及遗传分化的有效标记.     

药用菊花遗传多样性的RAPD分析

目的:分析不同药用菊花栽培类型的遗传差异。方法:采用2%CTAB法进行药用菊花的DNA提取,并用RAPD技术对22个类型药用菊花种质资源的DNA进行检测,采用NTSYS软件对扩增结果进行统计和聚类。结果:筛选得到的26个引物共得到了233条扩增DNA片断,其中89.7%的扩增条带表现出多态性,每个引物平均可扩增得到8.04条多态性片断。聚类分析结果表明利用RAPD技术可将全部供试材料区分开。结论:药用菊花种质资源在分子水平上确实存在较大差异;药用菊花栽培类型间的差异与环境因素有关,但更大程度上由其遗传因素决定。     

巴戟天遗传多样性的RAPD研究

目的应用随机扩增多态性DNA(random amplified polymorphic DNA,RAPD)标记技术对广东产5个类群的栽培巴戟天进行遗传多样性研究。方法应用15种引物对64个个体进行检测,应用Popgen32软件分析群体的遗传多样性。结果共得到224条带,其中多态位点112个,多态百分率为50.00%。种群内多态位点百分率在37.05%～53.13%,平均为45.86%。Shannon指数和Nei指数均反映出巴戟天各类群遗传多样性有一定的变化。Shannon指数为0.287 6,各类群的Shannon指数在0.103 3～0.236 2,Nei指数为0.175 6,各类群的Nei指数在0.074 5～0.154 0。结论目前栽培巴戟天居群间有一定的分化,并产生了多种农家类型,其中小叶巴戟天(POP2)遗传多样性明显高于其他类型,这些可能是导致目前栽培巴戟天质量产生变异的主要原因。     

栀子遗传多样性及遗传分化的RAPD分析

 目的应用随机扩增多态性DNA(random amplifed polymorphic DNA,RAPD)标记技术对栀子8个种群遗传多样性和遗传分化进行研究。方法18种随机引物对92个个体进行检测,应用POPGENE软件和AMOVA软件对结果进行处理。结果共得到120个可重复的位点,其中多态位点75个,多态百分率为62.5%。各种群内多态位点百分率在39.17%～68.83%之间,平均为56.98%。河南南阳(POP1)种群最高,其次是江西新干县野生种群(POP7),最低是江西抚州水栀子种群(POP3)。Shannon指数和Nei指数均反映出栀子各种群具有较高的遗传多样性。Shannon指数为0.431 3,各种群Shannon指数在0.2256～0.380 6之间,Nei指数为0.289 2,各种群Nei指数在0.148 2～0.263 0之间。AMOVA揭示种群内遗传多样性占总遗传多样性的76.05%,而种群间遗传多样性只占23.95%。运用POPGENE也得出种群内遗传变异(69.34%)大于种群间(30.66%)的结论。种群间的遗传分化系数为0.306 6。栀子种群间的基因流为1.130 6,遗传相似度平均为0.129 09,遗传距离平均为0.880 72。根据遗传距离聚类分析,河南南阳种群(POP1)与江西樟树新干种群(POP4,POP5,POP6,POP7)聚为一类,湖南种群(POP8)与江西抚州栀子种群(POP2)聚为一类,江西抚州水栀子种群(POP3)与其他各种群间的遗传关系较远。结论目前,虽然野生资源逐年减少以及多年栽培中的品种选育,栀子遗传多样性仍较丰富,且种群内大于种群间,种群间存在较少的遗传分化。     

西洋参根际土壤微生物群落组成与多样性研究

目的:分析不同年限西洋参根际及对照土壤样品中土壤微生物功能和组成的变化,揭示西洋参根际土壤微生物生态的变化规律。方法:应用微生物对不同碳源利用的差异,在Biolog生态培养盘上培养西洋参根际土壤微生物检测土壤微生物在群落水平的生理剖面(community level physiological profiles,CLPP);应用土壤微生物PLFA(磷脂脂肪酸)法分析西洋参根际土壤微生物组成变化。同时分析了不同年限西洋参根际土壤酸碱度、有机质等土壤肥力属性。结论:本研究所选的2种西洋参种植地的土壤基本性质有较大的差别,吉林地块的pH偏酸性(5.82),北京地块土壤偏碱性(8.27),而且吉林地块土壤的有机质、速效N、速效P和全氮显著高于北京地块土壤。土壤微生物生态分析的结果在2种地块显示相似的结果,AWCD具有相似的曲线,而主成分分析可以很明显的将二至四年生西洋参根际土与对照和一年生区别开,这也就说明西洋参种植后根际土壤微生物代谢功能降低,并且微生物结构组成发生明显的变化,这些可能是造成西洋参田间病害发生的主要原因。     

用RAPD技术对人参栽培群体的遗传分析

目的 :通过对栽培人参不同品系之间的遗传多样性进行研究 ,为人参品种选育提供参考。方法 :采用SPSS 10.0软件计算Dice遗传相似性系数 ,Between-groups linkage方法聚类 ,构建亲缘关系系统图。结果 :共筛选出18个 10碱基随机引物用于PCR扩增 ,17个供试样品共获得 14 5条扩增片段 ,其中有 53条是多态的 ,占 36.5 %。聚类分析结果表明 :大马牙类型内各品系间的亲缘关系近于与二马牙类型各品系样品间的亲缘关系 ,从分子水平证明了根据表征性状对栽培类群进行划分是可行的。结论 :RAPD对人参新品种培育进行辅助选择是一种良好的分子标记。     

人参年龄的研究进展

人参的生长年龄被认为是影响人参品质的重要因素。总结近40年来与人参年龄相关的研究成果,着重于人参年龄与根的生物量、皂苷、多糖、微量元素等的相关性,并得出以下结论:大部分研究集中于7年以下的栽培参,对高年龄人参(>7年)的研究较少;1~7年人参根的生物量、总皂苷量、还原型糖量等都随着其生长年龄的增加而呈非线性增长,但增长模式受生长环境的显著影响;人参地下茎的不同部位各种单体皂苷和微量元素的量差异大于不同年龄个体间的差异,不同地区的人参其单体皂苷和微量元素量变化也较大,没有发现存在一致的年龄-含量变化模式;高年龄的野山参其总皂苷的量以及锶、钡、铝等微量元素明显高于6~7年栽培参,但其他成分未见显示差异;7年以上人参的有效成分的变化规律应该是未来人参年龄研究的重点。     

不同供水条件对人参生育和生理特性的影响

发现金生育期土壤相对含水量为80%时,人参生育缝壮,光合速率高,干物质积累快,人参产量高,质量好;给出的人参不同生育阶段日需水量和需水模系数,为满足人参生理生态需水,实行合理灌溉提供了科学依据。     

人参果中一个新的天然化合物的分离

目的研究人参浆果的化学成分。方法采用溶剂提取和柱色谱分离等方法进行分离和纯化,根据化合物的理化常数和波谱数据鉴定其结构。结果从人参浆果分离得到12个化合物,分别鉴定为:苯甲酸(Ⅰ)、异人参皂苷-Rh3(Ⅱ)、人参皂苷-Rh2(Ⅲ)、人参皂苷-Rh1(Ⅳ)、人参皂苷-Rg1(Ⅴ)、人参皂苷-Re(Ⅵ)、人参皂苷-Rd(Ⅶ)、人参皂苷-Rc(Ⅷ)、人参皂苷-Rb2(Ⅸ)、人参皂苷-Rb1(Ⅹ)、β-谷甾醇(Ⅺ)和20-O-β-D-吡喃葡萄糖基-20(S)-原人参二醇,命名为化合物K(ⅩⅡ)。结论化合物K是一个新的天然产物。     

海拔高度对人参多糖量的影响

目的了解不同海拔与生长时间对人参多糖量的影响。方法采集我国人参主产地长白山地区不同生长时间、不同海拔的人参,水煮法提取人参根中的多糖,并用苯酚-硫酸法测定人参多糖的量,比较其量随海拔的变化规律。结果人参多糖的量随生长时间的增加而增加;海拔100～800 m,人参多糖的量随海拔的升高而增加;海拔950～1 450 m人参多糖的量随海拔的升高而减少;同海拔的抚松地区人参多糖量高于集安地区。结论人参多糖的量与种植海拔和生长时间有密接关系,应根据实际需要合理种植。     

正交试验优化超高压提取人参中人参皂苷的工艺研究

目的　研究超高压提取人参中人参皂苷的最佳工艺。方法　采用超高压技术常温提取,正交试验优化,分光光度法检测人参总皂苷的含量。结果　超高压提取人参皂苷的最佳提取工艺参数为:提取溶剂为5 0 %乙醇,固液比为1∶75 ,提取压力为5 0 0 MPa,提取时间2 m in,人参皂苷的得率高达7.76 %。结论　超高压提取工艺具有提取效率高、时间短、能耗低、杂质含量少等优点。     

人参超声逆流提取工艺研究

目的优化人参超声逆流提取工艺。方法以人参皂苷Rb1、Rg1和Re的总提取率为考察指标,采用正交试验设计对人参超声逆流提取工艺参数进行考察。结果人参超声逆流提取工艺最佳条件是药材粉碎过30目筛,用70%乙醇,溶媒逆流体积流量与进料质量流量之比为8。结论优选的提取工艺科学合理,适于大规模生产。     

超临界CO2反相微乳萃取人参中人参皂苷的研究

目的提高超临界CO2萃取人参中人参皂苷的萃取率。方法采用二-(2-乙基己基)磺基琥珀酸钠(AOT)/乙醇/水/超临界CO2反相微乳对人参皂苷的萃取进行研究。结果在萃取压力25MPa、温度45℃、时间4h、CO2流量为2L/h条件下,超临界CO2反相微乳萃取的人参皂苷萃取率是乙醇/水/超临界CO2萃取的3.2倍。人参皂苷的萃取率随加入的水量、萃取压力的增大而增大,随AOT浓度、萃取温度的升高先增大后减小。萃取人参皂苷时,采用适量水先浸泡物料与萃取过程中加入水相比,人参皂苷的萃取率要提高30%。结论结合实验结果与理论探讨,超临界CO2反相微乳萃取人参皂苷的机制主要是其形成的极性水池增大了对人参皂苷的溶解度。     

Effects of Raphani Semen on anti-fatigue and pharmacokinetics of Panax ginseng

Objective: To explain the phenomenon that Panax ginseng is not compatible with Raphani Semen based on pharmacodynamics and pharmacokinetics.Methods: The forced swimming time and biochemical parameters such as blood lactate(BLA), serum urea nitrogen(SUN), and hepatic glycogen(GLU) were determined for anti-fatigue experiment. The UPLCMS/MS was used to analyze the pharmacokinetics of Rg1, Re, Rb1, and Rd after orally administration of P. ginseng and P. ginseng combined with Raphani Semen to rats. Pharmacokinetic differences of four ginsenosides between single uses of P. ginseng and combined with Raphani Semen were investigated.Results: The results showed that Raphani Semen tended to significantly reduce the anti-fatigue activity of P. ginseng. Co-administration of P. ginseng and Raphani Semen had significant effects on the pharmacokinetics of the four ginsenosides in rats compared to that observed with P. ginseng extract alone. The AUC0–12 hvalues of the four ginsenosides in PG group were higher than the corresponding values in the PR group. It can be inferred that Raphani Semen decreased the blood exposure of the four ginsenosides in rats when it combined with P. ginseng.Conclusion: The anti-fatigue activity and pharmacokinetic results showed that Raphani Semen may reduce the pharmacological actions of P. ginseng.