HPLC同时测定卷柏药材中炔多酚和双黄酮的含量

目的:采用HPLC-DAD,同时测定不同产地的10批卷柏和12批垫状卷柏中2种炔多酚(selaginellin,selaginellinB)和4种双黄酮(穗花杉双黄酮,穗花杉双黄酮-7-甲醚,扁柏双黄酮,异柳杉双黄酮)的含量。方法:采用Agilent 1100高效液相色谱系统,Waters Cosmosil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长280,337 nm,柱温30℃。结果:所测样品中6种活性成分的量差异较大,穗花杉双黄酮在卷柏中的质量分数(5.628～9.184 mg.g-1)普遍高于垫状卷柏(0.823～7.131 mg.g-1),而selaginellin在垫状卷柏中的质量分数(0.123～0.593 mg.g-1)普遍高于卷柏(0.067～0.133 mg.g-1)。此方法加样回收率和线性范围均符合要求。结论:该方法简便快速、分离效果好、灵敏度高、重现性好,可为全面控制卷柏药材的质量提供参考。     

HPLC法同时测定江南卷柏中3种双黄酮成分

目的建立江南卷柏中3种双黄酮成分的含量测定方法。方法色谱柱为Shim-pack VP-ODS C_(18)柱;流动相为2%冰醋酸(A)乙腈(B),梯度洗脱;检测波长为337 nm。结果穗花杉双黄酮、2,3-二氢穗花杉双黄酮、银杏双黄酮的线性范围分别为0.019 72~0.788 8、0.012 44~0.497 6、0.003 16~0.126 4μg;平均加样回收率分别为101.74%、101.86%、102.87%。结论该方法简便准确、重复性好,可用于江南卷柏的质量控制。     

穗花杉双黄酮在大鼠体内的药动学研究

目的建立测定大鼠血清中穗花杉双黄酮含有量的方法,并计算其药动学参数。方法血清样品甲醇液HPLC分析采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相为乙腈-水(含0.1%三氟乙酸),梯度洗脱;体积流量1.0m L/min;检测波长330 nm;柱温30℃;进样量20μL。大鼠灌胃给予穗花杉双黄酮(60 mg/kg)后,在不同时间点取血,测定血清中该成分的含有量,并计算其药动学参数。结果穗花杉双黄酮在0.010 04~0.803 2μg/m L范围内的线性关系良好(r2=0.999 1),血清中该成分在各质量浓度下的回收率均大于80%,Tmax为90 min,Cmax为(0.469±0.046)μg/m L,AUC0-t为(27.731±1.128)mg/(L·min),AUC0-∞为(24.944±1.093)mg/(L·min),t1/2为(57.008±2.765)min,V/F为(198.36±17.422)L/kg,CL/F为(2.408±0.103)L/(min·kg)。结论该方法准确、可靠,可用于大鼠血清中穗花杉双黄酮的测定及药动学研究。     

银杏叶中双黄酮成分的提取与测定

目的分离纯化银杏Ginkgo biloba叶中的双黄酮类成分,考察银杏叶变黄前后黄酮类成分质量分数的变化。方法从自然脱落的银杏叶中提取分离双黄酮类成分,对其乙醇提取物的二氯甲烷部位进行了分离,通过硅胶柱色谱和半制备液相方法对目标成分进行制备,采用HPLC法对银杏叶中的双黄酮进行了测定。结果分离的4个化合物分别为去甲银杏双黄酮、银杏双黄酮、异银杏双黄酮和金松双黄酮。对变黄前后银杏叶中4种双黄酮进行测定,结果表明,自然黄叶前3周内,银杏叶中双黄酮量逐渐降低,质量分数差别达30%左右。结论 HPLC法可用作银杏叶中双黄酮的测定,方法简便、可靠,能用于银杏叶的质量控制。同时,制备条件可对快速制备双黄酮对照品提供依据。     

HPLC法同时测定侧柏叶、侧柏炭中的7种成分

目的建立HPLC法同时测定侧柏叶、侧柏炭中杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的含有量。方法侧柏叶、侧柏炭提取液的分析采用Welch Ultimate LP-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为甲醇-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;检测波长330 nm;体积流量1 m L/min。结果杨梅苷、槲皮苷、杨梅素、槲皮素、山柰酚、穗花杉双黄酮、扁柏双黄酮的标准曲线均呈良好的线性关系(r0.999 5),平均回收率为97.6%~101.1%,RSD1.14%(n=6)。结论该方法简便易行,可用于侧柏叶、侧柏炭的含有量测定。     

旱生卷柏化学成分的研究(Ⅰ)

目的研究旱生卷柏的化学成分.方法旱生卷柏的乙醇提取物,经水混悬后的不溶物的醋酸乙酯提取部位,用硅胶柱色谱、薄层色谱制备以及Sephadex LH-20柱色谱分离纯化,得到4种化学成分.结果经理化测试和光谱分析确定了化学结构,分别是:大黄素、银杏双黄酮、扁柏双黄酮、穗花杉双黄酮.结论这些化合物均为首次从该植物中分得,大黄素系首次从卷柏科中分离得到.     

五灵脂中两个黄酮成分的提取分离与薄层色谱鉴别

目的:建立五灵脂的薄层色谱鉴别方法,为五灵脂的质量控制提供依据.方法:以从五灵脂中分离得到的指标性成分扁柏双黄酮和穗花杉双黄酮为对照品,五灵脂对照药材为对照,聚酰胺薄膜为吸附剂,二氯甲烷-甲醇-冰醋酸(5: 2: 0.1)为展开剂,进行薄层色谱鉴别.结果:首次从五灵脂中分离得到扁柏双黄酮和穗花杉双黄酮,建立的五灵脂薄层鉴别方法准确、快速,能有效应用于五灵脂的鉴别.结论:该结果可为五灵脂药材的质量控制提供依据.     

深绿卷柏中的穗花杉双黄酮和橡胶树双黄酮的反相高效液相色谱法同时测定

目的测定深绿卷柏中穗花杉双黄酮和橡胶树双黄酮的含量。方法采用梯度洗脱的反相高效液相色谱法,选用Agilent ZORBAX-SB C18(5μm,4.6 mm×250 mm)色谱柱,以乙腈-0.1%冰醋酸为流动相,在25℃柱温,检测波长为254nm时检测,建立了深绿卷柏药材的质量评价标准。结果穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮分别在0.33～3.3μg/ml和0.27～2.7μg/ml浓度范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为r=0.993和r=0.990;回收率分别为:95.36%(n=6,CV=1.79%)和95.49%(n=6,CV=2.61%)。结论 RP-HPLC法同时测定深绿卷柏中穗花杉双黄酮和橡胶树双黄酮的含量,方法灵敏、简便、准确;可用于评价深绿卷柏药材的品质。     

五灵脂炮制前后指纹图谱及含量测定比较

目的:建立五灵脂及其炮制品指纹图谱,并对主要指标成分穗花杉双黄酮和扁柏双黄酮进行定量测定。方法:采用HPLC色谱法,Agilent extend-C18柱(4. 6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0. 1%甲酸,梯度洗脱,柱温30℃,检测波长335 nm,建立五灵脂及其炮制品指纹图谱,采用指纹相似度软件进行分析,并对2个主要色谱峰进行含量分析。结果:醋五灵脂、酒五灵脂、清炒五灵脂与五灵脂生品指纹图谱和含量测定结果基本一致,炭炒五灵脂较五灵脂生品新增2个峰,且穗花杉双黄酮和扁柏双黄酮含量相对减少。结论:所建立的指纹图谱精密度、重复性、稳定性良好,含量测定方法准确率达到要求,对五灵脂及其炮制品的质量评价和炮制原理研究有提供依据。     

香附的化学成分研究

 目的 研究香附的化学成分。方法 利用色谱技术进行分离纯化,并根据化合物的理化性质和光谱数据进行结构鉴定。结果 从该植物乙醇提取物的乙酸乙酯部分分离得到9个黄酮类化合物,其中包括4个单黄酮和5个双黄酮,分别鉴定为：山柰酚 (kaempferol,1),木犀草素 (luteolin,2),槲皮素 (quercetin,3),西黄松黄酮(pinoquercetin,4),穗花杉双黄酮 (amentoflavone,5),去甲基银杏双黄酮(bilobetin,6),银杏双黄酮 (ginkgetin,7),异银杏双黄酮 (isoginkgetin,8),金松双黄酮 (sciadopitysin,9)。 结论 化合物4~9为首次从该属植物中分离得到。
     

旱生卷柏化学成分的研究(Ⅰ)

目的 研究早生卷柏的化学成分。方法 早生卷柏的乙醇提取物，经水混悬后的不溶物的醋酸乙酯提取部位，用硅胶枝色谱、薄层色谱制备以及Sephadex LH—20枝色谱分离纯化，得到4种化学成分。结果 经理化测试和光谱分析确定了化学结构，分别是：大黄素、银杏双黄酮、扁柏双黄酮、穗花杉双黄酮。结论 这些化合物均为首次从该植物中分得，大黄素系首次从卷柏科中分离得到。     

基于UPLC-TQ-MS考察不同树龄银杏叶双黄酮含量变化规律

目的:建立超高效液相色谱串联三重四级杆质谱法同时测定银杏叶中5个双黄酮成分的含量。方法:采用UPLC BEH C_(18)色谱柱(2. 1 mm×100 mm,1. 7μm),流动相0. 10%甲酸溶液(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0～3 min,60%A; 3～4 min,60%～50%A; 4～6 min,50%A; 6～8 min,50%～0A),流速0. 3 m L·min~(-1),柱温35℃,进样量1μL。结果:穗花杉双黄酮、白果黄素、银杏素、异银杏素、金松双黄酮分别在0. 02～13. 20 mg·L~(-1)(r=0. 996 3),0. 05～23. 60 mg·L~(-1)(r=0. 995 5),0. 09～18. 60 mg·L~(-1)(r=0. 992 7),0. 10～21. 00 mg·L~(-1)(r=0. 998 8)和0. 06～16. 00 mg·L~(-1)(r=0. 996 7)线性关系良好。5个双黄酮加样回收率分别为101. 50%,98. 78%,97. 59%,97. 24%,101. 09%,RSD分别为2. 7%,2. 7%,3. 1%,2. 8%,1. 3%。银杏叶中双黄酮含量差异性较大,穗花杉双黄酮、白果黄素、银杏素、异银杏素、金松双黄酮的质量分数分别为121. 30～434. 74,268. 39～847. 14,251. 80～1 297. 10,195. 87～691. 10,477. 48～3 003. 90μg·g~(-1),总双黄酮质量分数1 474. 45～5 635. 40μg·g~(-1),但显示具有一定的规律性,即低树龄银杏叶含总双黄酮较高,随着树龄的增长,总双黄酮含量逐渐降低。结论:该方法专属性强,为银杏叶双黄酮类化合物的质量控制提供了一定的参考。     

不同产地石上柏指纹图谱及主要双黄酮含量测定

目的:建立不同产地石上柏双黄酮的HPLC指纹图谱,并进行聚类分析和主成分分析,用于石上柏药材质量的评价。方法:采用Dikma Diamons C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸水溶液作为流动相,梯度洗脱,柱温25℃,流速0.6 m L·min-1,检测波长330 nm,进样量10μL。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)对10批样品进行共有峰确认及相似度评价。运用SPSS 17.0统计学软件对HPLC指纹图谱进行聚类分析和主成分分析。结果:方法学考察指标的RSD均2.0%,表明在该色谱条件下,仪器精密度良好,样品在24 h内稳定性良好,方法准确度良好;根据10批药材测定结果表明,各共有峰较稳定,具有指纹图谱特征性,可初步确定为石上柏双黄酮的指目标成分群。在对照指纹图谱上共标定出9个色谱峰作为指纹图谱共有峰,指认了其中的3个化学成分,分别为穗花杉双黄酮、银杏双黄酮、扁柏双黄酮。10批样品的相似度计算结果均0.850,说明各产地的药材有较好的一致性;通过聚类分析可将10批样品可分为3类,第一类是重庆和四川产地的石上柏,第二类是贵州产地的石上柏,第三类是广西产地的石上柏,并且2个主成分的累计方差贡献率为98.096%。结论:该方法精密度高,重复性好,操作简便,可为石上柏药材的质量评价提供参考。     

江南卷柏中双黄酮类化合物的研究

 目的研究江南卷柏(Selaginella moellendorfii Hieron.)中双黄酮类化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20柱色谱分离江南卷柏全草中的乙酸乙酯提取部位的双黄酮类化学成分,应用理化鉴别和¹H-NMR、¹³C-NMR等方法确定化学结构。结果从江南卷柏乙酸乙酯部位分离得到6个双黄酮类化合物,分别鉴定为鸡毛松双黄酮A(7,4',7'-tri-O-methylrobustaflavone,Ⅰ),鸡毛松双黄酮B(7,7'-di-O-methylrobustaflavone,Ⅱ),罗波斯塔黄酮-4'-甲醚(4'-O-methyl robustaflavone,Ⅲ),罗波斯塔黄酮(robustaflavone,Ⅳ),扁柏双黄酮(hinokiflavone,Ⅴ)和穗花杉双黄酮(amentoflavone,Ⅵ)。结论化合物Ⅰ～Ⅴ为首次从江南卷柏中得到,化合物Ⅰ和Ⅱ为首次从该属植物中分离得到。     

翠云草中双黄酮类成分研究

 目的研究翠云草中的双黄酮类成分。方法利用Sephadex LH-20、硅胶等色谱技术进行分离纯化,用UV,IR,NMR,MS等方法确定结构。结果分离得到5个双黄酮化合物,分别鉴定为穗花杉双黄酮(Amentoflavone,Ⅰ)、罗波斯塔双黄酮(Robustaflav-dimethyl ether,Ⅲ)、2″,3″-二氢-4′-甲氧基穗花杉双黄酮(2″,3″-dihydro-4′-O-methyl Amentoflavone,Ⅳ)、7″-甲氧基-2,3,2″,3″-四氢扁柏双黄酮(7″-O-methyl-2,3,2″,3″-tetrahydrohinokiflavone,Ⅴ)。结论化合物Ⅱ,Ⅲ为首次从该植物中分离得到,化合物Ⅳ,Ⅴ为新化合物。     

深绿卷柏和江南卷柏HPLC指纹特征及3种成分的含量测定研究

目的:建立深绿卷柏和江南卷柏的HPLC特征图谱及其中穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮、7,4',7″,4-四-O-甲基穗花杉双黄酮3种成分的含量测定方法,对两药材进行质量比较分析。方法:采用HPLC法研究两种药材的特征图谱和含量测定方法,并对样品进行分析。结果:深绿卷柏与江南卷柏的HPLC特征图谱中分别有12个和11个共有峰,但两者的共有峰仅有3个,说明化学成分差异显著。深绿卷柏中穗花杉双黄酮、橡胶树双黄酮及7,4',7″,4-四-O-甲基穗花杉双黄酮的含量分别为1.12~1.79 mg/g、0.38~0.60 mg/g、0.14~0.27 mg/g,而江南卷柏中没有检测到橡胶树双黄酮,且7,4',7″,4-四-O-甲基穗花杉双黄酮含量极低。结论:深绿卷柏和江南卷柏的HPLC指纹图谱中化学成分种类及共有成分含量具有显著差异。研究结果为两类药材的鉴别及质量控制提供了参考依据。     

曼地亚红豆杉双黄酮结构表征和Taxol定量

目的:对曼地亚红豆杉黄酮类成分进行研究,对其不同药用部位紫杉醇含量进行测定。方法:采用反复硅胶柱层析进行分离纯化,根据理化性质、光谱特征鉴定其结构。采用HPLC法测定曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根三种药用部位中紫杉醇的含量,色谱柱为C18ODS(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水(3∶1),流速0.8 ml/min,检测波长228 nm。结果:从曼地亚红豆杉中分离得到三个双黄酮类化合物并进行结构鉴定为金松双黄酮(Ⅰ)、银杏黄素(Ⅱ)、7,7″,4′-Tri-O-Methylamentoflavone(Ⅲ)。曼地亚红豆杉枝叶、主根、须根中紫杉醇含量依次为:0.0308、0.02191、0.01983 mg/g。结论:化合物Ⅰ~Ⅲ为首次从该种植物中得到;曼地亚红豆杉中除树皮外的药用部位枝叶的含量最高,主根次之,须根含量最低。     

超高效液相色谱法测定侧柏炭中5个黄酮类成分

目的建立同时测定侧柏炭中杨梅素、槲皮苷、槲皮素、山柰酚和穗花杉双黄酮5种黄酮类化合物的超高效液相色谱(UPLC)分析方法。方法采用Waters Acquity UPLC系统,Waters BEH C18柱(50 mm×2.1 mm,1.7 mm);流动相为0.05%甲酸水溶液-甲醇,梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min;柱温30℃;进样量2μL;检测波长360 nm。结果杨梅素、槲皮苷、槲皮素、山柰酚和穗花杉双黄酮在线性范围内均具有良好的线性关系(r≥0.999 5);平均回收率在96.85%～99.01%,RSD≤4.00%。结论 UPLC分离效果及重复性好,且快速、简便,可作为侧柏炭的质量控制方法。     

HPLC法测定11种卷柏属药材中穗花杉双黄酮的含量

采用HPLC法测定11种卷柏属药材中穗花杉双黄酮的含量。色谱柱:Krom asil(250×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钠溶液系统,梯度洗脱,0→28 m in,甲醇50%→58%,30→35 m in,甲醇58%→70%;柱温:40℃;流速:1.0 m l/m in;检测波长:330 nm。结果表明,穗花杉双黄酮在153~767 ng范围内峰面积呈良好的线性关系,平均回收率为97.03%,RSD为0.80%(n=5)。     

卷柏中穗花杉双黄酮降血糖作用

目的:采用糖尿病小鼠模型,研究卷柏中穗花杉双黄酮(AMT)的降血糖活性,并进行量效关系考察.方法:雄性昆明种小鼠,一次性ip 180 mg·kg-1链脲佐菌素(STZ),建立糖尿病模型.以穗花杉双黄酮30,60,120,240,480 mg· kg-1ig给药治疗2周.给药期间测量小鼠摄食量、饮水量;给药2周后,检测空腹血糖(FBG),口服葡萄糖耐量(OGTT),血清胰岛素,观察胰腺HE染色切片,初步判断穗花杉双黄酮有效剂量.结果:穗花杉双黄酮30,60,120,240,480 mg· kg-1均能不同程度降低糖尿病小鼠饮水量、摄食量,FBG,改善OGTT,升高胰岛素水平;对胰岛组织还有一定修复作用.结论:穗花杉双黄酮可改善糖尿病小鼠血糖紊乱,调节胰岛素分泌,修复胰岛组织,最佳剂量为60 mg· kg-1.