系统性红斑狼疮患者骨髓间质干细胞对T细胞增殖作用的研究

骨髓间充质干细胞（MSCS）是存在于骨髓微环境中的多潜能非造血干细胞,具有调节造血干细胞的生长和分化的功能。体外MSCs具有高度扩增、多向分化和自我更新的能力。近年,MSCs的免疫调节作用备受关注,MSCs可抑制T细胞的活化和增殖、促进造血、防治移植物抗宿主病（GVHD）等,MsCS与同种异体T淋巴细胞共培养时不能引起T细胞的增殖反应。由于它的无或低免疫原性和免疫调节作用,MSCS移植在临床上有广阔的应用前景。     

异基因骨髓间质干细胞移植治疗难治性红斑狼疮

目的探索异基因骨髓间质干细胞移植（MSCT）对难治性红斑狼疮（SLE）的疗效及安全性。方法取相关供体（母亲）的骨髓，体外扩增，输注细胞数（MSC）≥1×10^6／kg。选择难治性SLE患者进行MSCT，比较移植前后临床表现的改善及实验室指标如24h尿蛋白定量、抗核抗体（ANA）、抗ds-DNA、血清补体G、血清白蛋白、肾小球滤过率、血像的变化，评价MSCT的疗效。结果2例女性难治性SLE患者在行MSCT后，随访3月。例1患者血清肌酐（Cr）、尿蛋白和ANA滴度下降，血红蛋白、补体G和肾小球滤过率上升；例2患者血清白蛋白、补体C3上升，尿蛋白下降，高血压得到改善。2例均无移植相关并发症。结论MSCT治疗难治性SLE安全有效，远期疗效有待进一步观察。     

骨髓间充质干细胞对系统性红斑狼疮患者T细胞活化的影响

背景:骨髓间充质干细胞具有免疫调节作用,可治疗自身免疫性疾病.目的:探讨在体外人骨髓间充质干细胞对系统性红斑狼疮患者T细胞活化的影响.方法:分离、培养人骨髓间充质干细胞,培养至第3代以后的细胞胰蛋白酶消化后用流式细胞仪确定其浓度,按照不同浓度将骨髓间充质干细胞设为1×108,1×107L-1两组.取肝素抗凝新鲜27例系统性红斑狼疮患者患者外周血10 mL,分离培养T淋巴细胞,以1×109L-1的细胞浓度,100 μL/孔,接种两组骨髓间充质干细胞上,以单纯统性红斑狼疮患者的T淋巴细胞作为对照组.通过流式细胞术计算CD3+T细胞CD25(IL-2R)和 CD38细胞的表达率.结果与结论:与对照组比较,1×108L-1浓度组的骨髓间充质干细胞对系统性红斑狼疮患者CD25及CD38的表达呈明显抑制作用(P<0.01),1×107L-1浓度组,无明显变化.结果表明:骨髓间充质干细胞抑制系统性红斑狼疮患者T细胞的活化,且对这种抑制作用具有数量依赖性.     

异基因骨髓间质干细胞移植治疗难治性红斑狼疮

目的探索异基因骨髓间质干细胞移植(MSCT)对难治性红斑狼疮(SLE)的疗效及安全性。方法取相关供体(母亲)的骨髓,体外扩增,输注细胞数(MSC)≥1×106/kg。选择难治性SLE患者进行MSCT,比较移植前后临床表现的改善及实验室指标如24 h尿蛋白定量、抗核抗体(ANA)、抗ds-DNA、血清补体C3、血清白蛋白、肾小球滤过率、血像的变化,评价MSCT的疗效。结果2例女性难治性SLE患者在行MSCT后,随访3月。例1患者血清肌酐(Cr)、尿蛋白和ANA滴度下降,血红蛋白、补体C3和肾小球滤过率上升;例2患者血清白蛋白、补体C3上升,尿蛋白下降,高血压得到改善。2例均无移植相关并发症。结论MSCT治疗难治性SLE安全有效,远期疗效有待进一步观察。     

异基因骨髓间质干细胞移植治疗重症难治性红斑狼疮的护理

近年来,骨髓间质干细胞(MSCs)已用于临床治疗.南京大学医学院附属鼓楼医院近期率先采用异基因骨髓MSCs移植治疗2例重症难治性系统性红斑狼疮(SLE),获得成功,作者体会到,在移植过程中,有效的护理措施十分重要,有助于提高移植成功率.现将护理体会总结如下.     

异基因骨髓间质干细胞移植治疗重症难治性红斑狼疮的护理

近年来，骨髓间质干细胞（MSCs）已用于临床治疗。南京大学医学院附属鼓楼医院近期率先采用异基因骨髓MSCs移植治疗2例重症难治性系统性红斑狼疮（SLE），获得成功，作者体会到，在移植过程中，有效的护理措施十分重要，有助于提高移植成功率。现将护理体会总结如下。     

系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞对淋巴细胞增殖的影响

目的:探讨SLE患者骨髓基质细胞对淋巴细胞增殖的影响.方法:初诊住院的SLE患者30例为SLE组,取其髂前上棘或髂后上棘的骨髓;心胸外科非血液病非自身免疫病患者15例为正常对照组,取其手术切除的肋骨骨髓.采用四甲基偶氮唑盐比色法,测定并比较两组骨髓基质细胞及其上清液对外周血淋巴细胞增殖反应的影响.结果:空白对照的外周血淋巴细胞增殖吸光度值为0.61±0.11.而正常对照组及SLE组的骨髓基质细胞培养上清液均对外周血淋巴细胞增殖有抑制作用,吸光度值分别为0.36±0.09和0.46±0.11;两组骨髓基质细胞亦对外周血淋巴细胞增殖有抑制作用,吸光度值分别为0.50±0.10和0.57±0.11,且两组的抑制作用有差异(P＜0.05～0.01);与SLE组的培养上清液比较,SLE组的培养上清液加抗转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)单克隆抗体(单抗)的抑制作用明显减弱(P＜0.01);而培养上清液加抗巨噬细胞炎症蛋白-1(macrophage inflammation protein-1,MIP-1)单抗、上清液加抗干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)单抗,其抑制作用明显增强(P＜0.01);上清液加抗白介素-6的抑制作用变化不大.结论:SLE患者骨髓基质细胞及其培养上清液均对淋巴细胞的增殖有抑制作用,这种抑制作用比正常人弱;另外,当在SLE患者骨髓基质细胞培养上清液中加入细胞因子MIP-1、IFN-γ、TGF-β的单抗后,这种抑制作用会出现相应的变化,说明SLE患者的骨髓基质细胞存在缺陷,由于这种缺陷导致的细胞因子分泌异常是SLE患者免疫功能异常的重要原因之一,提示骨髓造血微环境与SLE的发生、发展有着密切的关系.     

自体骨髓干细胞移植治疗系统性红斑狼疮的护理

系统性红斑狼疮 (ＳＬＥ)是一严重危害青年女性健康的疾病 ,在我国患病率约 70 / 10万。由于缺乏有效的治疗 ,患者病情反复发作 ,迁延不愈。对有肾损害 ,神经系统侵犯等预后不良因素的患者 5年生存率仅 60 % ,被称为“不是癌症的癌症”。 1998年 10月我院进行了第一例骨髓移植治疗ＳＬＥ ,填补了国内空白 ,目前我中心已成功完成了三例 ,均获临床及免疫学完全缓解。因进行自体骨髓干细胞移植(ＡＢＭＳＣＴ)的ＳＬＥ病人的基础病变都很严重 ,再加上ＡＢＭＳＣＴ本身也有一定的危险性 ,故整个治疗过程中护理要求极高。对这类病人进行护理时既要…     

骨髓间充质干细胞抑制再生障碍性贫血患者外周血T细胞增殖的实验研究

背景：既往研究发现骨髓间充质干细胞具有免疫抑制作用,而再生障碍性贫血患者存在T淋巴细胞异常活化及增殖。目的：体外分析骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞增殖的抑制作用。方法：分离再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞,行羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯（CFDASE）荧光染色,与体外培养扩增的骨髓间充质干细胞按3︰1比例直接接触法及Transwell法共培养,加入植物血凝素（PHA）刺激T淋巴细胞增殖,并设阴性及阳性对照。流式细胞术检测各组T细胞增殖情况,评价骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞增殖的影响。结果与结论：CFDASE染色分析显示,直接接触组T细胞增殖较阳性对照组明显减低（P〈0.01）;Transwell组T细胞增殖亦较阳性对照组减低（P〈0.05）;直接接触组T细胞增殖较Transwell组明显减低（P〈0.01）。骨髓间充质干细胞可能通过直接接触及分泌某些细胞因子方式抑制再生障碍性贫血患者异常增殖的T细胞,以直接接触方式发挥主要作用。     

骨髓间充质干细胞抑制再生障碍性贫血患者外周血T细胞增殖的实验研究

背景:既往研究发现骨髓间充质干细胞具有免疫抑制作用,而再生障碍性贫血患者存在T淋巴细胞异常活化及增殖。目的:体外分析骨髓间充质干细胞对再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞增殖的抑制作用。方法:分离再生障碍性贫血患者外周血T淋巴细胞,行羧基荧光素乙酰乙酸琥珀酰亚胺酯(CFDASE)荧光染色,与体外培养扩增的骨髓间充质干细胞按3︰1比例直接接触法及Transwell法共培养,加入植物血凝素(PHA)刺激T淋巴细胞增殖,并设阴性及阳性对照。流式细胞术检测各组T细胞增殖情况,评价骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞增殖的影响。结果与结论:CFDASE染色分析显示,直接接触组T细胞增殖较阳性对照组明显减低(P<0.01);Transwell组T细胞增殖亦较阳性对照组减低(P<0.05);直接接触组T细胞增殖较Transwell组明显减低(P<0.01)。骨髓间充质干细胞可能通过直接接触及分泌某些细胞因子方式抑制再生障碍性贫血患者异常增殖的T细胞,以直接接触方式发挥主要作用。     

狼疮骨髓间质干细胞的免疫调节及免疫治疗

间质干细胞（MSC）具有向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞、骨髓基质细胞、肝脏细胞和神经细胞等多种细胞分化的一类多能干细胞。MSC不仅具有支持造血和修复作用，还有多种免疫调节作用，它们还可诱导免疫耐受。MSC已用于治疗移植物抗宿主病（GVHD），最近作者采用异基因MSC移植治疗系统性红斑狼疮（SLE）取得了满意的效果，     

异体骨髓间充质干细胞移植治疗系统性红斑狼疮的护理

系统性红斑狼疮(systemic lupus erythemato-sus,SLE)是一种比较常见的系统性自身免疫性疾病,其典型病变特征包括多种自身抗体阳性以及皮肤、关节、肾脏等全身多个器官或系统受到损害。SLE发病多见于年轻妇女,病程长且反复发作。现有的糖皮质激素治疗虽然疗效尚可,但是不良反应     

骨髓间质干细胞

培养中的ＭＳＣｓ易于粘附到塑料瓶壁上。利用这一特点可以将ＭＳＣｓ与其它细胞分开。这些细胞有干细胞的特征，能向多种骨髓基质细胞分化，ＭＳＣｓ可用于细胞移植，或作为基因治疗的载体。     

狼疮骨髓间质干细胞的免疫调节及免疫治疗

间质干细胞(MSC)具有向成骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、肌细胞、骨髓基质细胞、肝脏细胞和神经细胞等多种细胞分化的一类多能干细胞[1].……     

雌激素对系统性红斑狼疮外周血T、B细胞BCL-2表达的影响

目的：探讨雌激素对系统性红斑狼疮（SLE）外周血淋巴细胞B细胞凋亡抑制基因(BCL－2）表达的影响。方法：用流式义双标免疫荧光法对29例SLE患者外周血淋巴细胞体外经雌二醇处理后测定BCL－2的表达。结果：雌二醇可使活动期SLE病人T细胞CD3^ ,Cd4^ ,CD8^ 亚群BCL－2蛋白表达增加，而不增加非活动期SLE病人、正常人T细胞BCL－2的表达。CD19^ B细胞BCL－2蛋白表达在各组间无显著差异。结论：雌二醇能上调活动期SLE病人T细胞BCL－2的表达而参与SLE的发生。     

间充质干细胞调控趋化因子配体2对系统性红斑狼疮作用的机制探讨

目的:探讨趋化因子配体2[chemokine(C-C motif)ligand 2,CCL2]在间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植治疗系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)中的作用。方法:采用酶联免疫吸附试验检测SLE患者及正常对照者的血清、尿液及骨髓MSCs培养上清中的CCL2及白细胞介素(interleukin,IL)-17的表达水平,并采用流式细胞术检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中Th17-CD4+IL-17+的百分率及其表面CCR2的表达。将18只雌性MRL/lpr SLE小鼠随机分为SLE小鼠组(n=6)(未治疗组)、脐带MSCs移植联合CCL2中和抗体治疗SLE小鼠组(n=6)及脐带MSCs移植联合同型对照IgG2B治疗SLE小鼠组(n=6),另选6只同周龄雌性C57BL/6小鼠作为健康阴性对照组。采用酶联免疫吸附试验检测各组血清CCL2及IL-17的水平,流式细胞术检测各组PBMCs中CD4+CCR2+IL-17+细胞百分率。结果:SLE患者血清[(839.0±160.5)pg/mL]、尿液[(881.8±162.7)pg/mL]及骨髓MSCs培养上清[(22 935±2 304)pg/mL]的CCL2含量均显著高于正常对照者[(433.0±31.0)pg/mL、(222.7±52.8)pg/mL、(8 394±5 125)pg/mL];SLE患者PBMCs中CD4+CCR2+IL-17+细胞百分率较正常对照者显著升高(P<0.01)。脐带MSCs移植联合CCL2中和抗体治疗SLE小鼠组血清CCL2浓度显著低于未治疗组,PBMCs中CD4+T细胞亚群IL-17、CCR2表达较未治疗组显著降低。结论:MSCs移植治疗SLE的效果可能通过抑制CCL2表达,进而下调患者Th17细胞水平来实现。     

人骨髓间充质干细胞对异体T淋巴细胞增殖的影响及机制研究

目的:探讨骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)的免疫调节作用及可能机制。方法:从人骨髓中分离培养MSCs,并通过其形态的均一性及流式细胞术检测其表面标志以鉴定其纯度。用尼龙柱法分离异体血T淋巴细胞,用植物血凝素(PHA)刺激,再将其分别与MSCs及不同浓度MSCs培养上清(100μL和200μL)共同孵育,以单独培养的异体淋巴细胞为对照组,MTT法分别测定T细胞的增殖并计算增殖转化抑制率。结果:MSCs及MSCs培养上清均可使PHA刺激引起的异体T细胞的增殖转化受抑,MSCs组抑制率为54.9%,MSCs培养上清组(100μL和200μL)抑制率分别为21.6%和37.6%(P<0.01或P<0.05)。结论:MSCs通过细胞接触和分泌某些因子对同种异体免疫反应有负调节作用。     

系统性红斑狼疮患者外周血T淋巴细胞亚群及Ag-NORs的变化

目的探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血T淋巴细胞亚群及Ag-NORs的变化及意义。方法49例SLE病人及43例健康体检者分别检测外周血T淋巴细胞亚群(CD3 、CD4 、CD8 )及Ag-NORs。结果T淋巴细胞Ag-NORs含量在SLE初发病例升高,经治疗后有一定程度降低(P<0.05);稳定期与正常人相比无显著性差异(P>0.05)。CD3 T细胞SLE各期与对照组相比均无显著差异(P>0.05)。在初发病例及活动期,CD4 T细胞及CD4 /CD8 均降低(P<0.05),CD8 细胞均升高(P<0.05)。在SLE稳定期各亚群正常人相比均无显著性差异(P>0.05)。T淋巴细胞Ag-NORs与T淋巴细胞亚群间无相关性(P>0.05)。结论外周血T淋巴细胞亚群及Ag-NORs分析有助于了解SLE患者免疫功能紊乱的状况。     

人骨髓间充质干细胞对T淋巴细胞的免疫调节作用

为了探讨人骨髓间充质干细胞（mesenchymal stem cell，MSC）体外对T淋巴细胞的免疫调节作用，从人骨髓液中分离培养MSC，通过细胞形态、免疫组织化学及流式细胞术检测其表面标记进行鉴定；将植物血凝素（PHA）及从人脐血中分离培养的树突状细胞（dendritic cell，DC）作为刺激因素，经磁珠分选的人CD2^＋ T淋巴细胞作为反应细胞．用^3H—TdR标记β液体闪烁计数仪检测与MSC共培养前后T淋巴细胞增殖能力的变化；用流式细胞术检测与MSC共培养10天后的CD2^＋ T细胞内各亚群Th1、Th2、Tc1、Tc2比例的变化。结果表明：MSC能明显抑制由DC诱导的T淋巴细胞增殖（P=0．004），同时MSC抑制由PHA引起的T细胞增殖，但不具有显著性差异（P=0．26），MSC培养上清液单独并不具备抑制T细胞增殖的作用，与MSC共培养后的T细胞亚群中，Th2及Tc2亚群含量较共培养前明显增加（P〈0．05）。结论：MSC对由DC和PHA诱导的淋巴细胞增殖反应均具有抑制作用，并且这种作用可能与细胞间相互作用及诱导T细胞亚群的改变有关。     

系统性红斑狼疮患者淋巴细胞增殖活性分析

目的:探讨系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞核仁嗜银蛋白(AgNORs)和T细胞亚群及辅助性T细胞亚群(Th)的的关系及其临床意义,指导临床诊断与治疗。方法:PBMC经多克隆T细胞活化剂刺激,以图像分析法检测AgNORs区面积与细胞核仁面积的百分比(I.S%);以微量细胞毒法检测T淋巴细胞亚群水平;以ELISA法检测血清中干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4水平以来评价辅助性T细胞亚群活性。结果:(1)13例稳定期和17例活动期系统性红斑狼疮患者PBMC中活化T细胞AgNORs表达分别为(5.14±1.06)I.S%和(3.21±1.40)I.S%,与正常对照组(6.69±1.30)I.S%相比,均显著下降(分别有P<0.05,P<0.01);活动期显著低于稳定期(P<0.01);(2)与稳定组和正常对照组相比,活动期系统性红斑狼疮患者CD4+T细胞计数(23.5±7.8)%和CD4+/CD8+比值(0.58±0.31)显著降低(P<0.01),CD8计数明显升高,为(37.4±12.1)%(P<0.05);(3)与稳定组和正常对照组相比,活动期SLE患者血清IL-4水平明显升高,为(37.2±2.7)pg/mL,(P<0.05),IFN-γ分泌为(17.9±2.7)pg/mL,较正常对照组明显降低(P<0.05),与稳定期患者无显著差异(P>0.05)。结论:系统性红斑狼疮患者细胞免疫活性低于正常水平;(2)活动期患者血清IL-4分泌水平增高,IFN-γ水平降低,提示Th1类活性降低,在系统性红斑狼疮中存在Th1/Th2的不平衡。