琥乙红霉素片含量测定方法的改进

目的:改进琥乙红霉素片剂含量的测定方法.方法:采用高效液相色谱法,以Waters XBridgeTM Shied C18(250 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱;0.067 mol·L-1磷酸二氢铵溶液(用三乙胺调节pH至6.5)-乙睛(65:35)为流动相;检测波长210 nm;流速为1.0 ml·min-1;柱温为20℃.结果:红霉素A在39.83～139.41 μg·ml-1范围内呈良好的线性关系(r=0.999 3),平均回收率为98.6%(RSD=0.9%,n=9),检测限为1.19 μg,定量限为3.58 μg.将该法测定结果与效价法测定的含量进行比较,结果基本一致.结论:该方法更简便、准确,重复性好.     

琥乙红霉素效价测定中最佳水解条件的选择

目的:选取琥乙红霉素效价测定中的最佳水解条件。方法:在受控的不同温度条件下,用高效液相色谱法测定不同时间琥乙红霉素溶液的水解程度和红霉素溶液的稳定性。其色谱柱为HYPERSIL BDS C_(18)柱(5μm,4.6 mm×200 mm),柱温50℃,流动相为叔丁醇-PBS(pH 7.0)[取0.2 mol·L~(-1)的磷酸氢二钾溶液50 mL,加入0.2 mol·L~(-1)的氢氧化钠溶液29.63mL,水 200 mL,用磷酸调pH至7.01]-水-乙腈(1:60:12:12),流速1.0 mL·min~(-1),UV检测波长 215 nm,进样量 100 μL。结果:琥乙红霉素的水解反应为一级反应,且水解反应速率与温度之间的关系,符合阿仑尼乌斯经验公式。在20℃的条件,琥乙红霉素至少应放置16 h方可完全水解。在40℃条件,琥乙红霉素至少应放置6 h使完全水解;在此条件下红霉素未发生分解。结论:选择40℃为琥乙红霉素效价测定的水解温度,可以大大加快实验速度。     

高效液相色谱法测定琥乙红霉素片的含量

目的:改进琥乙红霉素片的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱柱为ZORBAX SB-C18,以0.067 mol·L-1磷酸二氢铵溶液(三乙胺含量0.3%,调p H值至7.5)-乙腈(50∶50)为流动相,检测波长208 nm,用外标法计算琥乙红霉素片含量。结果:含量在0.53~5.27 mg·m L-1(R2=0.999 4)浓度范围内呈良好的线性关系,平均回收率为98.18%(RSD=0.96%)。结论:该方法简便、准确,重复性好,灵敏度高,适用于琥乙红霉素片含量的测定。     

HPLC-MS/MS法测定琥乙红霉素颗粒体内活性代谢物

目的:建立琥乙红霉素人体内活性代谢物红霉素的HPLC-MS/MS分析方法。方法:选用克拉霉素为内标,血浆样品经正己烷-二氯甲烷-异丙醇(300∶150∶15)提取处理,通过检测活性代谢物红霉素的浓度来监测琥乙红霉素体内行为。色谱条件Waters C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水(80∶20,含0.5%甲酸)为流动相,流速0.6 mL·min-1,采用HPLC-MS/MS检测系统(SRM模式),质谱采用电喷雾电离源(ESI),红霉素选择检测离子对为m/z 734→m/z 158,内标克拉霉素选择检测离子对为m/z 748→m/z 158。结果:血浆中红霉素检测方法的线性范围为9.724～2431.0 ng·mL-1,最低检测限可达9.724 ng.mL-1。血浆中红霉素的平均回收率为77.6%～80.0%;日内、日间RSD均小于11%。结论:本法灵敏、准确、选择性高,可用于监测琥乙红霉素的体内行为。     

HPLC法测定大青根中腺苷和丁香树脂酚葡萄糖苷的含量

目的:建立HPLC法测定大青根中腺苷和丁香树脂酚葡萄糖苷含量的方法.方法:采用Diamnosil ODS-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水梯度洗脱,检测波长为254 nm,流速为1.0 ml·min-1,柱温为室温,进样量为10μl.结果:腺苷和丁香树脂酚葡萄糖苷线性范围分别为5～100μg·ml-1(r=0.999 6),5～100 μg·ml-1(r=0.999 3);平均回收率分别为98.2％(RSD=1.08％,n=6)和98.4％(RSD=1.18％和n=6);样品平均含量分别为0.081,0.014 mg·g-1.结论:本方法可用于大青根药材的质量控制.     

HPLC法测定琥乙红霉素口服制剂中红霉素残留量

目的建立琥乙红霉素口服制剂中红霉素残留量的检测方法.方法采用HamilT＆NRP-1 L21(250mm×4.6mm)色譜柱,柱温60℃,磷酸盐缓冲液(0.067mol·L-1,pH9.0)-乙晴-叔丁醇-水(4535128)为流动相,流速0.8ml·min-1,检测波长215nm,进样量100μL.结果红霉素在300u·ml-1～3000u·ml-1范围内呈良好线性关系(r=0.9995),平均回收率为103.7%,RSD为1.1%,最低检测限为15u.结论该法专属性强,灵敏度高,重现性较好,可作为琥乙红霉素口服制剂中红霉素残留量的测定方法.     

茜素红荷移分光光度法测定琥乙红霉素片(胶囊)溶出度的方法学研究

目的:建立茜素红荷移分光光度法测定琥乙红霉素片(胶囊)溶出度的方法.方法:通过考察琥乙红霉素原料在不同pH值、不同浓度的磷酸盐缓冲液中的溶解性及琥乙红霉素在其中与茜素红反应的最佳条件.选择出适当的溶出介质及反应条件,在确定溶出介质及反应条件后,通过对转速和取样时间的选择,确定了琥乙红霉素片(胶囊)的溶出方法,并对方法的回收率和线性进行了考察.结果:采用桨法,以0.04 mL·L-1pH 5.0的磷酸盐缓冲液为溶出介质,转速为100 r·min-1,溶出时间为45 min,荷移反应生成的荷移络合物在(525±2)mm波长处有最大吸收,琥乙红霉素浓度在50.6～202.4 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.997 7),方法平均回收率在99.4%以上,RSD为0.21%.结论:本方法稳定、准确、灵敏、快速,可控制琥乙红霉素片(胶囊)的内在质量.     

高效液相色谱-荧光检测法测定维生素B1片的含量

目的:建立高效液相色谱-荧光检测法测定维生素B1片的含量.方法:采用SunfireTM C18色谱柱(5.0μm,4.6mm× 150mm),柱温:30.0℃,流动相:0.02mol/L乙酸钠溶液-甲醇(70∶30),流速:1.0mL· min-1,激发波长:365nm、发射波长:475nm.结果:维生素B1在0.25μg·mL-1～15.00μg· mL-1的范围内线性关系良好(r=0.9993,n=6),测得平均回收率为96.5％,RSD=1.6％(n=9).结论:该方法准确可靠,检测灵敏度提高,可有效检测制剂中维生素B1的含量.     

HPLC测定红霉素中的红霉素A

目的 采用HPLC法测定红霉素中红霉素A的含量.方法 色谱柱为资生堂C_(18)MG柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(磷酸调pH8.2)(60:40),流速1.0 mL·min~(-1),检测波长215 nm.结果 红霉素A 0.386～7.710 mg·mL~(-1)与峰面积的线性关系良好(r=0.9999).平均回收率为99.3%(n=9).结论 所用方法灵敏、准确、简便.     

HPLC测定硬脂酸红霉素颗粒中的红霉素A

目的 采用HPLC法测定硬脂酸红霉素颗粒中红霉素A的含量.方法 采用资生堂C18MG色谱柱(250 mm× 4.6mm,5μm),流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(60∶40),流速1.0 mL·min-1,检测波长215 nm.结果 0.039 ～ 1.94 mg· mL-1红霉素A与峰面积的线性关系良好(r ＝0.9998),平均回收率为100.7％ (n ＝9).结论 所用方法灵敏、准确、简便.