高血压大鼠脑缺血再灌注后IGF-Ⅰ Bcl-2的表达与细胞凋亡

目的观察高血压大鼠脑缺血再灌注后胰岛素样生长因子(IGF)-Ⅰ、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2表达与细胞凋亡的关系。方法制备高血压大鼠脑缺血再灌注模型,用免疫组织化学染色法及流式细胞术分别观察脑组织中IGF-Ⅰ、Bcl-2的表达情况及细胞凋亡。结果同对照组相比缺血再灌注组神经细胞凋亡率增高(P<0.01);IGF-Ⅰ与Bcl-2的表达均升高(P<0.01),IGF-Ⅰ比Bcl-2升高显著(P<0.05)。结论IGF-Ⅰ、Bcl-2同时参与了脑缺血再灌注后的细胞凋亡;IGF-Ⅰ可能通过调控Bcl-2发挥抗凋亡作用。     

川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注后1L-1β和ICAM-1表达的影响

目的:探讨川芎嗪对大鼠脑缺血再灌注后1L-1β和ICAM-1表达的影响。方法:采用免疫组织化学方法检测脑缺血再灌注模型大鼠脑组织中的1L-1β和ICAM-1含量,同时利用TTC染色法测脑梗死体积。结果:川芎嗪组大鼠脑缺血后的梗死体积显著减小,川芎嗪组脑组织中的1L-1β和ICAM-1免疫阳性细胞在各时间点的表达与模型组相比明显减少(P<0.05)。结论:川芎嗪能显著降低脑缺血再灌注后1L-1β和ICAM-1表达从而防止脑缺血再灌注炎性损伤,起到脑保护作用。     

藻蓝蛋白对大鼠脑缺血-再灌注后胰岛素样生长因子及其受体的影响

目的 观察大鼠脑缺血.再灌注后神经功能缺失评分和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体(IGF-1R)的表达,探讨藻蓝蛋白对脑缺血-再灌注损伤的干预作用.方法 成年健康雄性Wistar大鼠64只,随机分为假手术组4只、模型组和给药组各30只.模型组和给药组分别设缺血-再灌注6,12 h,1,3,7,14 d 6个观察时相点.应用线栓法建立大脑中动脉阻塞再灌注(MCAO/R)模型,给药组灌胃给予藻蓝蛋白.观察各组脑缺血-再灌注后神经功能缺失评分,采用免疫组织化学方法分别观察不同时间点IGF-1和IGF-1R表达,以及藻蓝蛋白对上述指标的影响.结果 模型组大鼠出现不同程度神经功能缺失症状,缺血侧脑组织IGF-1与IGF-1R表达较假手术组显著增强,主要位于皮质区和纹状体区;给药组大鼠缺血.再灌注24～48 h神经功能缺失评分较模型组显著降低,症状明显改善.皮质区和纹状体区IGF-1与IGF-1R表达的变化趋势与模型组相似,但相同时间点显著高于模型组.结论 藻蓝蛋白可能通过上调脑缺血-再灌注损伤后大鼠IGF-1和IGF-1R的表达而发挥其神经保护作用.     

葡萄籽原花青素对大鼠脑缺血再灌注后转化生长因子β1表达的影响

目的:探讨葡萄籽原花青素对脑缺血再灌注(I/R)大鼠的转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法:采用改进的Longa方法制作大鼠脑缺血再灌注模型,动物分为正常对照组、假手术组、脑缺血再灌注组和药物干预组。药物干预组在手术前1h给予葡萄籽原花青素,之后每天同一时间给药,直到被处死。药物干预组和缺血再灌注组于术后以及处死前分别两次给予神经功能评分。大鼠处死并取出样本分别进行HE染色和TGF-β1免疫组化染色。结果:大鼠神经功能评分显示大鼠造模成功率约为88%,TGF-β1在正常SD大鼠海马区神经元细胞和神经胶质细胞中有少量表达,缺血再灌注组各亚组阳性表达较正常对照组均明显增高(P<0.05);药物干预组各亚组与正常对照组比较TGF-β1表达均升高(P<0.05),在相同时间点TGF-β1表达趋势基本与I/R组相同,但阳性表达明显高于I/R组(P<0.05)。结论:葡萄籽原花青素能通过增加TGF-β1表达,以达到脑缺血再灌注的保护作用。     

人参皂甙Rb1对大鼠脑缺血再灌注后巢蛋白表达的影响

目的:观察大鼠脑缺血再灌注后脑组织内巢蛋白的表达以及人参皂甙Rb1(Ginsenoside Rb1,GRb1)对神经的保护机制.方法:阻塞大鼠大脑中动脉2h制备脑缺血再灌注模型,大鼠随机分为缺血再灌注组(I/R组)和GRb1给药组(GRb1组).两组按不同的再灌注时间(3h、12h、1d、2d、3d、5d、10d)分为7个亚组,应用免疫组织化学技术检测脑内巢蛋白的表达.结果:与I/R组相比,GRb1能减轻脑组织的病理改变,上调各时间点巢蛋白阳性细胞数.结论:GRb1对脑缺血再灌注损伤有神经保护作用,其机制与上调缺血再灌注大鼠脑内巢蛋白表达水平有关.     

IGF-1及其受体在乙型病毒性肝炎组织中表达的临床意义

目的 探讨胰岛素样生长因子-1(IGF-1)及其受体在乙型病毒性肝炎活检组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组化技术，对105例肝炎组织及10例正常肝组织中的IGF-1及其受体的表达情况进行检测分析。结果 半定量分析结果显示，正常肝组织中IGF-1及其受体的表达与急性肝炎、慢性轻度至中度肝炎组织间存在显著性差异；急性、慢性轻度、慢性中度肝炎与慢性重度肝炎间存在显著性差异；而正常肝组织与慢性重度肝炎间无显著性差异。结论 IGF-1及其受体的表达强度可以作为判断肝炎发展过程中不良转化的重要指标。     

降纤酶对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的探讨降纤酶对脑缺血再灌注损伤的保护作用及其作用机制。方法肾血管型高血压大鼠(RHR)70只 ,随机分为降纤酶组、对照组和伪手术组 ,按Longa氏方法改良复制成可再灌注的大脑中动脉闭塞 (MCAO)模型 ,缺血2h后恢复灌注。降纤酶组经股静脉给予降纤酶10U·kg-1体重 ,对照组给予等量的生理盐水。脑片行TTC及HE染色 ,观察两组在不同时间点的梗死灶的大小、脑微血管损害的表现及并发出血情况。结果降纤酶组的梗死灶的体积较对照组明显缩小 ,脑微血管损害减轻 ,镜下出血灶减少。结论降纤酶具有保护脑缺血再灌注损伤的作用。     

尤瑞克林对大鼠脑缺血再灌注损伤肝细胞生长因子表达的影响

目的：观察尤瑞克林在大鼠脑缺血再灌注损伤过程中对脑组织中肝细胞生长因子（ HGF）表达的影响。方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组和实验组,每组8只。线栓法制作大脑中动脉脑缺血再灌注模型,实验组于再灌注后5 min静脉注射尤瑞克林3.5×10－3 PNA U· kg－1。在缺血2 h再灌注48 h后,断头取脑,免疫组织化学法和PCR法检测脑组织中HGF的表达。结果与模型组相比,实验组脑组织中HGF蛋白和mRNA的表达明显增高,差异均有统计学意义（ P＜0.05）。结论尤瑞克林可能通过促进HGF的表达来发挥对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

慢性间歇性低氧动物模型的比较

阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)导致的慢性间歇性低氧(CIH)是引起或加重多种心脑血管病的重要病理因素。建立CIH动物模型,通过控制动物呼吸的环境气体氧浓度的方法模拟间歇性低氧条件,是研究CIH相关心血管疾病发病机制的重要方法之一。该文从实验动物、气体控制仪器、气体种类及浓度、间歇性低氧处理时间、缺氧循环模式等方面总结及对比了近年来CIH动物模型的造模方法,以求为OSAHS相关心血管疾病的动物实验研究提供参考。     

间歇低氧的大鼠模型体内的氧化应激、炎症反应导致代谢紊乱发生的机制

目的探讨慢性间歇低氧大鼠体内的氧化应激、炎症反应导致代谢紊乱发生的机制。方法建立慢性间歇低氧的大鼠模型,模拟阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（obstructive sleep apneahypopnea syndrome,OSAHS）睡眠中发生的慢性低氧、再氧合病理生理过程。将50只雄性SD大鼠,分为慢性间歇低氧组（40只）和空白对照组（10只）。将慢性间歇低氧组的大鼠放入自制的间歇低氧动物舱内,提供间歇低氧（最低吸入氧浓度6%～7%,最高吸入氧浓度20%～21%,各维持时间5～7 s）;将空白对照组大鼠置于相同规格的间歇低氧动物舱内,给予空气脉冲供气。间歇低氧刺激总时间：8 h/d（9AM～5PM）,持续12周。实验结束后,酶联免疫吸附测定法（ELISA法）测定大鼠血清丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）和hs-CRP水平;并检测代谢紊乱相关指标如空腹血糖、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHOL）、大鼠尾动脉血压,每一个指标作为一个危险因素,没有危险因素的为正常组,仅有1个危险因素的为低危组,有2个危险因素的为高危组,有3个危险因素的为代谢综合征组（MS组）。结果根据危险因素,将慢性间歇低氧组的大鼠分为正常组,低危组,高危组,代谢综合征组。随着间歇缺氧的时间延长,发生代谢紊乱的危险因素逐渐增加,超氧化物歧化酶（SOD）活性降低,丙二醛（MDA）、hs-CRP的水平逐渐增高,与空白对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论间歇缺氧模型大鼠体内氧化应激存在,导致慢性低度炎症反应,可能是导致阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者发生代谢紊乱的重要机制。     

慢性间歇性低压低氧对成年和幼年大鼠缺血/再灌注心脏保护作用的比较

目的观察慢性间歇性低压低氧(CIHH)对成年和幼年大鼠心脏缺血/再灌注损伤的保护作用的异同点。方法♂成年和新生Sprague-Dawlay(SD)大鼠随机分为4组:对照28d组(CON28)、对照42d组(CON42)、CIHH处理28d组(CIHH28)和CIHH处理42d组(CIHH42)。间歇性低氧处理组动物于低压氧舱分别接受28d、42d模拟3000米海拔高度(PB=525mmHg,PO2=108.8mmHg)的低压低氧处理,每天5h。对照组动物除了不接受低氧处理外,其它处理均与间歇性低氧组动物相同。应用Langendorff离体心脏灌流技术,给予心脏缺血(停灌30min)/再灌注(复灌60min)处理,记录离体大鼠心脏在不同时期的心功能变化。心功能参数包括左室发展压(left ventricular developing pressure,LVDP)、左室压力最大变化速率(maximum changerate of LVDP,±LVdp/dtmax)、左室舒张末压(left ventricularend di-astolic pressure,LVEDP)、冠脉流量(coronary flow,CF)和心率(heartrate,HR)。结果①对成年大鼠,基础状态和缺血/再灌注状态下CIHH28d组各心功能参数与CON28d组相比差异均无统计学意义。CIHH42d组各心功能参数均好于CON42d组,表现为LVDP、LVEDP、±LVdp/dtmax和CF恢复均增加(P<0.05)。②对幼年大鼠,基础状态下,CIHH大鼠CF较对照大鼠明显增多,其余心功能参数与对照大鼠无差异。CIHH大鼠缺血/再灌注后心脏功能的恢复明显好于对照动物,表现为LVDP、LVEDP、±LVdp/dtmax和CF恢复均增加(P<0.05),且CIHH42d组比CIHH28d组心功能改善更明显。结论CIHH可增强成年和幼年大鼠抗心肌缺血/再灌注损伤的能力,具有明显的心脏保护作用,CIHH42d组保护作用更为明显;CIHH的心脏保护作用有明显的年龄差异,在幼年大鼠更易产生保护作用。     

慢性间歇低氧诱发大鼠高血压模型的建立

目的:观察间歇低氧对大鼠尾动脉收缩压的影响及胸主动脉、肾小动脉病理变化。方法:16只SD雄性大鼠随机分为间歇低氧组(IH)和空白对照组(UC),每组8只,IH大鼠置于间歇低氧舱中,7 h·d~(-1),给予循环充入氮气和空气,每次循环为8 min,间歇缺氧舱内氧浓度波动于8．5%～21%,UC大鼠不予任何特殊处理。分别于实验前及实验d7,14,21．28测量大鼠尾动脉收缩压。d28处死大鼠,取标本观察胸主动脉与肾小动脉病理改变。结果:IH大鼠尾动脉收缩压逐渐升高,从第2周开始显著升高,第2,3,4周时其收缩压分别升高了13．75mmHg (P＜0．01)．22．25mmHg(P＜0．01)和29．87 mmHg(P＜0．01)。实验后两组大鼠之间比较,第1周收缩压无显著差异,第2周后IH大鼠较UC大鼠收缩压明显升高(P＜0．05或P＜0．01)。d28两组大鼠胸主动脉未见明显病理改变,但IH大鼠肾小动脉血管壁在d 28时较UC大鼠明显增厚,并有部分出现肾小动脉硬化。结论:慢性间歇低氧可导致大鼠持续性血压升高,提示阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)引起的长期夜间反复低氧是OSAHS患者高血压发生的重要原因,此模型的建立为OSAHS致高血压机制的深入研究提供了可行手段。     

Chronic intermittent hypobaric hypoxia protects the heart against ischemia/reperfusion injury through upregulation of antioxidant enzymes in adult guinea pigs

Aim： To investigate the protection and the anti-oxidative mechanism afforded by chronic intermittent hypobaric hypoxia （ClHH） against ischemia/reperfusion （I/R） injury in guinea pig hearts.
Methods： Adult male guinea pigs were exposed to ClHH by mimicking a 5000 m high altitude （pB=404 mmHg, po2=84 mmHg） in a hypobaric chamber for 6 h/day for 28 days. Langendorff-perfused isolated guinea pig hearts were used to measure variables of left ventricular function during baseline perfusion, ischemia and the reperfusion period. The activity and protein expression of antioxidant enzymes in the left myocardium were evaluated using biochemical methods and Western blotting, respectively. Intracellular reactive oxygen species （ROS） were assessed using ROS-sensitive fluorescence.
Results： After 30 min of global no-flow ischemia followed by 60 min of reperfusion, myocardial function had better recovery rates in ClHH guinea pig hearts than in control hearts. The activity and protein expression of superoxide dismutase （SOD） and catalase （CAT） were significantly increased in the myocardium of ClHH guinea pigs. Pretreatment of control hearts with an antioxidant mixture containing SOD and CAT exerted cardioprotective effects similar to ClHH. The irreversible CAT inhibitor aminotriazole （ATZ） abolished the cardioprotection of ClHH. Cardiac contractile dysfunction and oxidative stress induced by exogenous hydrogen peroxide （H2O2） were attenuated by CIHH and CAT.
Conclusions： These data suggest that CIHH protects the heart against I/R injury through upregulation of antioxidant enzymes in guinea pig.     

右美托咪定不同处理方式对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的干预研究

目的通过大鼠右侧大脑中动脉阻闭再灌注模型,探讨右美托咪定(Dex)3种不同干预方式对大鼠局灶性脑缺血再灌注脑损伤的影响、机制及差异性。方法将100只健康雄性SD大鼠随机分为5组:假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(L/R组)、Dex预处理组(Dex1组)、Dex后处理组(Dex2组)和Dex预处理联合后处理组(Dex3组),每组20只。应用Dex对动物模型做预处理、后处理、预处理联合后处理3种方式的干预,并检测各组大鼠脑组织超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量以及血清神经元特异性烯醇化酶(NSE)含量。结果①与Sham组比较,其他4组大鼠脑组织SOD活性降低,MDA含量升高,血清NSE含量升高(P<0.05)。②与L/R组比较,3个Dex组脑组织SOD活性均显著升高,MDA含量降低,血清NSE含量降低(P<0.05)。③Dex1组、Dex3组脑组织MDA含量和血清NSE含量低于Dex2组(P<0.05);Dex3组脑组织MDA和血清NSE含量低于Dex1组(P<0.05);Dex3组脑组织SOD活性高于Dex2组(P<0.05)。结论三种不同干预方式的Dex处理均能减轻局灶性脑缺血再灌注损伤。Dex预处理联合后处理能够产生效果更佳的脑缺血再灌注损伤保护作用。Dex抑制过度氧化应激反应,减少过量氧自由基生成,可能是其脑缺血再灌注损伤的保护作用机制之一。     

rhG-CSF对新生鼠缺氧缺血性脑损伤HIF-1α表达的影响

目的：探讨重组人粒细胞集落刺激因子（recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF）对缺氧缺血性脑损伤新生鼠海马区及皮质HIF-1α（hypoxiainducible factor 1α）表达的影响。方法：将7日龄新生Wistar大鼠随机分成假手术组,HIBD组和rhG-CSF治疗组。在乙醚麻醉下行右侧颈总动脉结扎,氮氧混合气缺氧2.5h制备HIBD模型。应用免疫组织化学法检测HIF-1α。结果：免疫组化结果显示：在新生大鼠大脑皮层和海马区,HIBD组较假手术组HIF-1α表达明显增加（P〈0.01）,治疗组较HIBD组HIF-1α表达明显增加（P〈0.01）。结论：缺氧缺血性脑损伤后,脑组织HIF-1α表达增加,可能与促进血管形成及抑制神经细胞凋亡有关。rhG-CSF可能通过调节HIF-1α的表达,减少神经细胞凋亡,增强脑组织对缺氧的耐受,从而改善缺氧缺血性脑损伤小鼠的预后。     

生长激素对老龄大鼠缺血再灌注心肌的保护作用

目的通过老龄大鼠心肌缺血再灌注模型,术后应用生长激素(GH),观察其对心肌细胞凋亡、心肌胰岛素样生长因子含量以及心脏功能的影响。方法24只老龄SD大鼠(20月龄)随机分为对照组、治疗组,每组12只。结扎左前降支缺血10min制作心肌缺血再灌注模型,对照组皮下注射生理盐水(0.3ml/d)。治疗组每天皮下注射人重组生长激素(rhGH)0.5U/kg,连续7d,第7次注射于术前进行。在体法检测心功能,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,DAB免疫组织化学法检测心肌细胞胰岛素样生长因子含量,并行心肌组织病理学检查。结果心肌病理检查见心肌缺血区呈大小不一坏死灶,缺血心肌间有炎症细胞浸润,心肌排列不整齐,治疗组轻于对照组。治疗组心肌细胞凋亡率明显低于对照组(P<0.01),胰岛素样生长因子染色强度明显高于对照组(P<0.01),心功能优于对照组(P<0.05)。结论老龄大鼠心肌缺血再灌注后应用生长激素,可减轻心肌细胞凋亡,提高心肌胰岛素样生长因子含量,保护心功能。     

慢性间断性低氧对发育期幼鼠认知功能的影响及机制研究

目的 探讨慢性间断性低氧对发育期幼鼠认知功能的影响及其可能机制.方法 21日龄SD雄性幼鼠20只,随机均分为对照组、慢性间断性低氧(CIH)组.CIH组幼鼠在自制缺氧舱内每天缺氧8h,连续缺氧6周.利用Morris水迷宫检测幼鼠认知功能的变化;利用HE染色在光镜下观察海马神经元组织学结构变化.结果 与对照组比较,CIH组幼鼠出现认知功能障碍(P＜0.05);对照组海马神经元形态正常,CIH组海马神经元出现变性坏死.结论 CIH致发育期幼鼠认知功能障碍,其机制可能与海马神经元病理损伤有关.     

血红素加氧酶-1在脑缺血/再灌注损伤中的作用研究

目的探讨血红素加氧酶-1(HO-1)表达和活性变化在脑缺血/再灌注(I/R)致脑损伤中的作用。方法♂小鼠随机分为4组,每组30只。以40g.L-1水合氯醛400mg.kg-1ip麻醉,从颈总静脉抽取并回输约40%总血量加双侧颈总动脉夹闭20min,建立脑I/R损伤模型。3组小鼠于建模前16h分别予以脑室内注射150μmol.L-1氯化正铁血红素(Hemin)、150μmol.L-1锌原卟啉Ⅸ(ZnPPIX)或人工脑脊液(ACSF)3μl/只。假手术组仅麻醉并分离暴露双侧颈总动脉和右侧颈总静脉20min。采用Westernblot法检测海马HO-1蛋白表达;分光光度计法检测海马HO活性和脑黄嘌呤氧化酶(XO)活性及丙二醛(MDA)和活性氧(ROS)含量;TUNEL法检测海马细胞凋亡。结果Hemin组海马HO-1表达明显增强,HO活性升高,脑XO活性、MDA和ROS含量降低,海马神经元凋亡减少(vsACSF,P<0.05);ZnPPIX组海马HO-1表达无变化(vsACSF,P>0.05),HO活性降低,脑XO活性升高伴脑MDA、ROS含量增加及海马神经元凋亡增多(vsACSF,P<0.05)。结论HO-1表达升高对脑I/R致脑损伤具有保护作用,其作用机制与抗脂质过氧化和清除自由基有关。     

依达拉奉联合奥扎格雷对大鼠脑缺血再灌注损伤保护作用机制的研究

目的观察依达拉奉联合奥扎格雷对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响及其作用机制。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组,即假手术组、缺血/再灌注组、生理盐水对照组、奥扎格雷组和依达拉奉联合奥扎格雷组。采用线栓大鼠大脑中动脉法建立局灶性脑缺血/再灌注模型,观察依达拉奉联合奥扎格雷对各组大鼠的神经行为、脑梗死面积,脑组织中IL-1,TNF-α的含量的影响。结果与假手术组比较脑缺血/再灌注组大鼠神经功能缺陷严重,脑梗死面积大,脑组织中IL-1,TNF-α的含量明显增多,差异具有显著性(P<0.05);与奥扎格雷组相比脑组织中IL-1含量明显减少,差异具有显著性(P<0.05),其它指标无差异。结论依达拉奉联合奥扎格雷对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用,可以改善大鼠神经功能,减少梗死面积,降低脑组织中IL-1,TNF-α的含量,其机制可能与其抑制了IL-1,TNF-α的表达有关。