豚鼠卵巢组织片和分离的窦前卵泡玻璃化冷冻效果比较

目的：比较分析不同玻璃化冷冻配方对豚鼠卵巢组织片和单个窦前卵泡形态、存活率及体外发育能力的影响。方法：取5周龄雌性豚鼠卵巢,实验分新鲜对照组、组织片A液毒性组、组织片B液毒性组、卵泡A液毒性组和卵泡B液毒性组,及相应的冻融组,即组织片A液冻融组、组织片B液冻融组、卵泡A液冻融组、卵泡B液冻融组,共9组行毒性试验和冷冻保存。各组卵巢组织片行HE染色形态学观察,分离窦前卵泡经锥虫蓝染色活力测试并行体外培养。结果：A液冻融组和B液冻融组豚鼠卵巢组织片HE染色光镜观察可见大部分卵泡形态正常,A液组和B液组异常窦前卵泡数与新鲜对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）;在分离的窦前卵泡锥虫蓝染色活力测试中,冻融卵巢组织片A组的卵泡复苏率（为66．1％）显著低于（P〈0．05）冻融卵泡B液组（为78．5％）和新鲜对照组（为87．5％）;其余组别之间差异无统计学意义。体外培养卵泡发育情况组织片冷冻组比卵泡冷冻组差,以A液组尤甚,第6天存活卵泡数目不足（为20．0％）,与新鲜对照组（为60．0％）及卵泡B液冻融组（为50．0％）相比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：玻璃化冷冻法能较好地冷冻保存豚鼠卵巢组织片和分离的窦前卵泡,而单个豚鼠窦前卵泡玻璃化冷冻优于卵巢组织片的玻璃化冷冻;B液较A液更适合豚鼠卵巢卵泡的玻璃化冷冻保存。窦前卵泡的体外培养证明玻璃化冷冻复苏卵泡具有一定的继续发育能力。     

人类卵巢组织玻璃化冷冻及复苏后形态学及组织增殖活性观察

目的 探讨玻璃化冷冻对成人卵巢组织中原始卵泡与初级卵泡的形态学及细胞增殖状态的影响.方法 采用液氮直接覆盖玻璃化冷冻(direct cover vitrification,DCV)方法冻存成人卵巢组织块,液氮保存2周后复苏组织.观察和比较冻融前后人卵巢组织中原始卵泡与初级卵泡组织形态学改变;免疫组化染色测定经体外培养48 h后新鲜和冻融卵巢组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况.结果 冻融前后人卵巢组织内原始卵泡和初级卵泡分布差异无统计学意义(P>0.05);新鲜卵巢组织中,形态异常的原始卵泡比例与初级卵泡比例差异无统计学意义(P>0.05),冻融卵巢组织中,形态异常的原始卵泡比例低于形态异常的初级卵泡比例(P<0.05);新鲜组、新鲜及冻融后培养组均有PCNA的阳性表达,PCNA 阳性表达可见于中间型卵泡和初级卵泡的卵母细胞和颗粒细胞、卵巢组织间质细胞.结论 利用DCV方法对人卵巢组织进行冻存能够保存原始卵泡和初级卵泡,冻融过程对原始卵泡和初级卵泡形态结构都可能造成一定程度的损伤,冻融后组织内卵泡有体外生长发育的潜力.     

玻璃化冷冻人卵巢组织形态学研究

目的：探讨玻璃化冷冻及体外培养对人卵巢组织内各级卵泡的形态影响。方法采用液氮直接覆盖玻璃化冷冻（DCV ）方法冷冻保存成人卵巢组织,复苏后行体外培养,观察卵巢组织中卵泡的形态学改变。结果新鲜培养组与新鲜组、冷冻培养组与冷冻组相比,原始卵泡所占比例明显下降,初级卵泡和次级卵泡构成比显著增加（P＜0．05）;新鲜培养组较新鲜组形态正常的原始、初级、次级卵泡比例降低（P＜0．01）;冷冻组形态正常的初级、次级卵泡比例均低于新鲜培养组（P＜0．05）;冷冻培养组形态正常的次级卵泡比例低于新鲜培养组,差异有统计学意义（P＜0．05）。结论 DCV方案卵泡形态结构有一定损伤,体外培养有一定修复作用。     

BMP-4对人卵巢组织玻璃化冷冻卵泡作用的实验研究

目的 将人卵巢组织进行玻璃化冷冻和冷冻后体外培养,在培养中加入骨形态发生蛋白-4（BMP-4）,探讨其在玻璃化冷冻后人卵泡的生长、转化和存活方面的作用。方法 32例人卵巢组织标本分为新鲜组,玻璃化冷冻复温后卵巢组织随机分为未培养组、基本培养液组和BMP-4培养液组,前两组直接行组织学检查,后两组体外培养15d后行组织学检查、雌孕激素测定,评估卵泡存活和生长发育情况。结果 玻璃化冷冻后未培养组与新鲜组比较,原始卵泡、生长期卵泡占总卵泡的比率及形态正常的原始和初级卵泡百分率均无显著性(P>0.05);培养结束后基本培养液组和BMP-4组原始卵泡比例显著降低,生长卵泡比例显著升高,BMP-4组孕激素浓度显著低于基本培养液组(P<0.01)。结论 BMP-4有助于冷冻后人卵巢组织体外培养中原始卵泡向初级卵泡的转化,可降低体外培养中颗粒细胞孕激素的基础分泌,有利于卵泡体外存活,可能是玻璃化冷冻卵泡生长发育过程中的促进因子。 [关键词 ] 卵泡;玻璃化冷冻;体外培养;骨形态发生蛋白-4;     

不同玻璃化冷冻载体对人卵巢组织冷冻效果的影响

目的: 比较不同的玻璃化冷冻载体对人卵巢组织冷冻效果的影响,为人卵巢组织玻璃化冷冻方案的选择提供理论基础和实验参考依据.方法: 预处理人卵巢皮质切成10 mm×1 mm×1 mm大小,随机分为新鲜组(A组)、针浸润玻璃化冷冻组(B组)、表面玻璃化冷冻组(C组)和直接覆盖玻璃化冷冻组(D组).A组直接予以固定、组织切片及HE染色;B、C、D 3组采用不同玻璃化冷冻载体冷冻后,投入液氮保存2个月,采用快速复温法解冻后予以固定、切片及染色.行形态学分析,通过计算各组卵巢组织切片中正常形态始基卵泡率,比较各组冷冻效果.结果: 4组共计数809个始基卵泡,其中正常形态始基卵泡率分别为:A组96.12%,B组88.14%,C 组80.00%,D组81.25%.行玻璃化冷冻的3组卵巢组织正常形态始基卵泡率均明显小于A组(P< 0.01);而B组、C组和D组正常形态始基卵泡率差异均无统计学意义(P >0.05).结论: 玻璃化冷冻后人卵巢组织正常形态始基卵泡率较新鲜组织下降,但仍能较好地保存人类卵巢组织,可用于人类卵巢组织的冷冻保存.     

玻璃化冷冻兔卵巢组织自体移植后卵巢功能观察

目的 观察玻璃化冷冻兔卵巢组织经子宫系膜内种植后卵泡的发育情况。方法 15只新西兰白兔随机分为两组：1组（10只）,玻璃化冷冻兔卵巢组织子宫系膜内种植;2组（5只）,对照组。通过卵巢组织光镜、阴道脱落细胞学检查,观察种植后卵巢组织长期存活、卵泡生长发育及内分泌功能恢复及维持情况,观察存活的卵巢组织对促性腺激素的反应性,采集MⅡ期成熟卵进行卵泡浆内单精子注射（intracytoplasmic sperm injection, ICSI）,进一步观察移植后发育成熟的卵母细胞的受精情况。结果 移植2个月和6个月后卵巢组织中各级卵泡所占的比例与正常卵巢组织相比差异无统计学意义﹙P＞0.05）;移植半年后对卵巢组织应用卵泡刺激素,与未用卵泡刺激素的卵巢组织相比,近成熟卵泡所占的比例明显增多﹙P＜0.05）;成熟卵母细胞ICSI受精后,能够得到正常的胚胎。结论 玻璃化冷冻兔卵巢组织自体子宫系膜内种植能够很好地恢复卵巢功能,其功能可维持较长时间,结合体外受精技术可以产生正常的胚胎。     

慢速冷冻和玻璃化冷冻对人类卵巢组织中卵泡形态的影响

【目的】比较慢速冷冻、麦管玻璃化冷冻和尼龙网玻璃化冷冻对人类卵巢组织中卵泡形态的影响。【方法】16例人卵巢组织切成薄片随机分配到新鲜卵巢组（A组1、麦管玻璃化冷冻组（B组）、尼龙网玻璃化冷冻组（C组）和慢速冷冻组（D组）后行组织学和电镜检查。【结果】A、B、C、D组中形态正常的原始卵泡比例分别为72．5％±8．4％、65．6％±12．8％、66．1％±11．1％、48．4％±13．3％；形态正常的初级卵泡比例分别为62．0％±13．9％、58．1％±7．9％、59．0％±16．2％、37．0％±14．0％。D组中形态正常的原始卵泡比例和初级卵泡比例均明显低于A、B、C组。B、C组形态正常的原始卵泡比例和初级卵泡比例。与A组相比无统计学差异。B、C组中形态正常的原始卵泡超微结构无明显改变，D组中形态正常的原始卵泡超微结构存在一定程度的改变。【结论】玻璃化冷冻是人类卵巢组织较适宜的冷冻保存方法。     

兔冷冻卵巢组织自体多点种植后的组织形态和功能

目的：观察兔冷冻卵巢组织子宫系膜、卵巢囊和卵巢内多点种植后组织形态及功能,探讨移植部位和移植方法。方法：15只新西兰白兔随机分为3组,每组5只：1组,新鲜卵巢组织子宫系膜及卵巢囊种植;2组：冷冻卵巢组织子宫系膜及卵巢囊种植;3组：冷冻卵巢组织卵巢内种植。通过卵巢组织光镜和电镜观察、子宫内膜组织光镜观察、阴道脱落细胞学检查,反映种植后卵巢组织存活、卵泡生长发育及内分泌功能等情况。结果： 冷冻复苏组织和新鲜组织相比, 2组、3组移植后组织与冷冻复苏组织相比, 3个移植组间相比,正常卵泡和形态改变卵泡所占比率差异均无统计学意义(P＞0.05）;3个移植组的正常卵泡比率均低于新鲜组织(P＜0.05）;3个移植组卵巢组织中存在正常比例的各级卵泡,并且近成熟卵泡的比率与新鲜卵巢组织相比差异无统计学意义(P＞0.05）,2组、3组移植后组织与冷冻复苏组织比较,近成熟卵泡所占比率增加(P＜0.05）;冷冻后和移植后卵巢组织形态和超微结构无明显改变。结论： 小块卵巢组织冷冻可以获得良好的冷冻保存效果;冷冻卵巢组织自体多点种植后,卵巢组织光镜形态学和超微结构无明显改变,卵泡存活并正常发育;卵巢组织种植于子宫系膜、卵巢囊和卵巢内均可以得到良好的效果。     

Plexin A1蛋白及mRNA在小鼠卵泡发育过程中的表达

目的:探讨Plexin A1在小鼠卵巢不同发育阶段的表达。方法:选择不同发育时期的C57BL/6j小鼠,采用免疫组织化学方法测定小鼠卵巢中Plexin A1蛋白水平的表达,实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法检测Plexin A1mRNA水平的表达。结果:Plexin A1蛋白在小鼠卵巢各级卵泡的卵母细胞和颗粒细胞中均有表达。随着卵泡的不断发育,其在卵母细胞和颗粒细胞中的表达水平均逐渐增强。始基卵泡卵母细胞中的Plexin A1蛋白表达水平明显低于初级、次级和窦状卵泡的卵母细胞。始基卵泡颗粒细胞中未见明显Plexin A1蛋白表达,至初级卵泡阶段可见颗粒细胞开始有Plexin A1蛋白表达,其水平低于次级及窦状卵泡。闭锁卵泡中的Plexin A1呈强阳性表达,明显高于生长卵泡中的表达水平。Plexin A1mRNA在卵巢组织中的表达水平随周(日)龄呈先升高后降低的趋势,5d,7d,3周小鼠卵巢中Plexin A1 mRNA表达水平分别为3d小鼠的1.56、1.26、0.79倍(P<0.05),而2周小鼠卵巢中的Plexin A1mRNA表达水平与3d小鼠相当(P>0.05)。结论:Plexin A1在不同级别的小鼠卵泡中均有表达,且表达水平随卵泡的不断生长发育而增强,但闭锁卵泡中表达最强,提示Plexin A1在卵泡的生长发育及闭锁过程中可能发挥重要的调控作用。     

玻璃化冷冻对人卵巢组织形态结构及组织增殖活性的影响

目的:探讨玻璃化冷冻对人类卵巢组织卵泡形态、超微结构和组织增殖活性的影响。方法:采用12例人卵巢组织切成薄片随机分配到新鲜卵巢组(A组)和玻璃化冷冻组(B组),两组行组织学光镜和透射电镜检查卵泡形态及结构变化,免疫组化测定卵巢组织中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:A、B两组中原始卵泡和初级卵泡分布比例分别为86.4%、13.6%和84.5%%、15.5%,两组比较差异无统计学意义(P>0.05)。光镜下A、B两组中形态正常的原始卵泡分别为75.3%和69.3%,两组比较差异亦无统计学意义(P>0.05);但B组冻融后初级卵泡形态异常的比例(56%)高于A组(28.2%),两组比较差异有统计学意义(P<0.05);A、B组中形态正常的原始卵泡超微结构无明显改变,B组中初级卵泡超微结构存在一定程度的改变。A、B两组卵巢中PCNA阳性表达比较差异无统计学意义(P>0.05),PCNA阳性表达主要见于原始和初级卵泡的卵母细胞、颗粒细胞和卵巢组织间质细胞。结论:玻璃化冷冻是一种较适宜保存人类卵巢组织的方法。     

人胎儿卵巢组织异种移植后卵母细胞的发育及成熟能力

目的探讨人胎儿卵巢组织冷冻复苏、体外培养和异种移植后卵母细胞的发育和成熟情况。方法取5例胎龄20周引产的胎儿卵巢,采用丙二醇慢速冷冻保存,复苏后在组织培养条件下进行体外培养,6d后移植到免疫缺陷小鼠的肾被膜下,应用卵泡刺激激素作用23周后取出卵巢组织,机械法取出窦卵泡内的卵母细胞,结合体外成熟培养,观察卵子成熟情况,并通过移植前后组织学和增殖细胞核抗原(PCNA)表达变化观察卵泡发育情况。结果冷冻复苏组织和新鲜卵巢组织中各期卵泡的构成比之间差异无显著性(P>0.05);培养组织与新鲜组织和冻融组织相比,增殖期卵泡的比例显著增加(P<0.05);移植组织与新鲜组织、冻融组织和培养组织相比,增殖期卵泡比例亦显著增加(P<0.05)。各组织中原始卵泡均未见PCNA阳性表达,其表达最早出现于初级卵泡,新鲜组织和冻融组织中偶可见PCNA阳性表达,而培养组织和移植组织中可见明显的PCNA阳性表达。从移植卵巢的窦卵泡中获得未成熟卵子42个,经体外成熟培养有21.43%的卵子可发育到MII期。结论人胎儿卵巢组织能耐受冻融、组织培养和移植过程,其卵泡能够重新生长发育,恢复内分泌功能,且不影响卵母细胞的发育及成熟能力。     

超速冷冻法冷冻保存大鼠卵巢组织的实验研究

目的探讨超速冷冻法对SD大鼠卵巢组织的冷冻保存功效。方法采用液氮直投法冷冻大鼠卵巢组织。计数冻融后卵巢组织内形态正常始基卵泡数量。将卵巢组织自体移植，术后35天处死动物，测定血清雌二醇（E2）水平。结果新鲜和冻融后的大鼠卵巢组织中形态正常始基卵泡数量无统计学差异（P〉0.05）。移植术后35天，两移植组血清E2水平无统计学差异（P〉0.05）。结论液氮直投超速冷冻法可以有效的保存卵巢组织，对大鼠卵巢组织学和功能的影响较小。     

环磷酰胺作用下成年大鼠卵巢干细胞因子和mRNA的表达

目的 探讨化疗药物对卵巢的损伤及其可能机制.方法 将成年SD大鼠分为两组:生理盐水组和环磷酰胺组.大鼠腹腔注射环磷酰胺;8周后处死,固定一侧卵巢,连续切片,观察卵巢形态学改变并计数卵泡数目.免疫组化方法检测干细胞因子(SCF)蛋白在卵巢的表达,RT-PCR半定量法检测对侧卵巢SCFmRNA的表达.结果 环磷酰胺可引起卵巢间质的严重损害和局部纤维化的发生.SCF可表达于大鼠卵巢原始卵泡和初级卵泡的卵母细胞,次级卵泡和早期窦卵泡的颗粒细胞也可见SCF的表达.环磷酰胺组注射后8周卵泡颗粒细胞SCF蛋白显著升高,卵母细胞SCF蛋白显著减少(P＜0.05);卵巢SCF mRNA显著升高(P＜0.05).结论 SCF在化疗卵巢表达的变化有助于进一步阐释化疗药物损伤卵巢的机制.     

Fkbp38基因缺失导致小鼠早发性卵巢功能不全：基于激活mTOR通路并诱导细胞凋亡

目的 探讨他克莫司结合蛋白38（Fkbp38）在卵泡发育中的作用及其缺失导致早发性卵巢功能不全（POI）的机制。方法 采用Cre-loxp系统构建卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠,并应用PCR鉴定小鼠基因型,然后在蛋白水平上验证Fkbp38在卵母细胞中的敲除效果。通过HE染色在显微镜下计数敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡及窦卵泡数量分析卵母细胞缺失Fkbp38基因对小鼠卵泡发育的影响。通过繁殖实验及ELISA实验检测小鼠繁殖能力及血清性激素水平,明确卵母细胞敲除Fkbp38基因对卵巢功能的影响。TUNEL法检测敲除小鼠与同窝对照小鼠卵巢颗粒细胞凋亡情况。检测雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路下游靶蛋白磷酸化核糖体S6（PS6）活性验证Fkbp38基因对mTOR信号通路的影响。IF检测凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）及Bcl2-Associated X（BAX）表达明确Fkbp38基因敲除对卵母细胞发育的影响。结果 卵母细胞特异性敲除Fkbp38转基因小鼠模型构建成功。敲除小鼠较对照小鼠表现出生育力下降,性激素水平紊乱,卵巢内原始卵泡、初级卵泡和次级卵泡数均显著减少（P<0.05）,引起POI样改变。卵母细胞特异性敲除Fkbp38基因后,mTOR信号通路激活,颗粒细胞凋亡增加,卵母细胞内BAX蛋白表达增强,Bcl-2蛋白表达减弱,BAX/Bcl-2蛋白比值显著升高（P<0.05）。结论 Fkbp38在卵泡发育中发挥重要作用,其缺失致POI发生的机制可能是通过激活mTOR信号通路诱导细胞凋亡而引起的。     

Cyclin G1在小鼠卵巢的表达及其与卵泡发育的关系

目的观察细胞周期素G1（Cyclin G1）在小鼠卵巢中各级卵泡的表达及其与卵泡发育的关系。方法性成熟前小鼠用孕马血清促性腺激素（PMSG）刺激卵泡生长,用绒毛膜促性腺激素（hCG）刺激卵泡排卵及向黄体转化。于给药后不同时间取出卵巢,用免疫组化方法检测不同发育阶段卵泡Cyclin G1蛋白的表达和分布;用细胞免疫荧光方法检测不同成熟阶段的卵细胞中Cyclin G1蛋白表达。结果免疫组化染色结果显示,颗粒细胞中Cyclin G1的表达水平随卵泡发育成熟而逐渐增强,且一直定位在胞核;Cyclin G1在各个时期卵泡的卵母细胞中均有表达。该表达的定位与卵泡生长发育的不同阶段有关。随着卵泡的发育,Cyclin G1在卵母细胞的表达由胞核转至胞浆。至排卵前卵泡颗粒细胞,Cyclin G1表达水平减弱,当颗粒细胞分化为黄体细胞后表达水平进一步减弱。闭锁卵泡中Cyclin G1的表达水平很弱。细胞免疫荧光染色结果显示,处于生发泡时期（GV）卵母细胞仅有较弱的Cyclin G1表达,当卵母细胞生发泡破裂（GVBD）后,该表达增强;与处于第二次减数分裂中期（MⅡ）的卵母细胞相比,受精卵的Cyclin G1表达明显增强。结论Cyclin G1在小鼠卵泡发育及卵母细胞成熟过程中的表达具有时空特异性,可能作为细胞周期的正调节因子参与了卵泡生长发育和卵母细胞成熟过程的调控。     

人类卵子体外成熟及其胚胎冷冻复苏研究

目的:探讨取卵周期准备、卵泡发育状态、培养液成分对未成熟卵的获取率、体外成熟率、受精率、胚胎质量、胚胎移植后成功率及其胚胎冷冻复苏移植的影响。方法:19例进行卵子体外成熟的不孕不育患者为研究对象。其中1例为自然周期,14例为促性腺激素(Gn)诱导排卵周期,4例常规控制性促排卵(COS)周期;分别以TCM 199或人输卵管液(HTF)为基础培养液,进行卵子体外成熟培养。结果:当取卵时卵泡大小不均一且最大卵泡直径≥12 mm时,获卵率、受精率和胚胎质量下降;TCM 199组优质胚胎的形成率显著高于HTF组(P<0.01)。IVM胚胎经冷冻复苏、胚胎移植能获得与常规IVF周期相似的妊娠成功,出生后代健康、无畸形。结论:在IVM周期取卵时卵泡大小不均一且最大卵泡直径≥12 mm时,将影响胚胎着床率和累积妊娠率。TCM 199优于HTF培养液,能提高未成熟卵体外成熟后受精卵所形成胚胎的发育能力。IVM胚胎经冷冻复苏-胚胎移植能获得与常规IVF周期相似的妊娠成功,出生后代健康、无畸形。     

冻存复苏人卵巢皮质在裸鼠体内的发育及卵细胞的提取

目的 探求冻存复苏人卵巢皮质在裸鼠体内的发育及卵细胞的提取。方法 取手术切除的5例患者的卵巢皮质，放入1．5mol／L的二甲基亚砜＋10％血清中，应用可控程序冻冰仪逐渐降温，移入液氮中冻存。3个月后，将融解的卵巢皮质移植入90只裸鼠皮下，注射hFSH12周，刺激卵泡生长。注射hCG36h后，用18号针头穿刺提取卵细胞。结果 卵巢直径为3～9mm，穿刺获19个卵细胞，放入TC-199培养基，加20％胎牛血清。25mmol／L丙酮酸，75mIU／mLFSH和LH培养，获15个分裂中期的次级卵母细胞。结论 人卵巢组织冻融后可异体移植生长，且其卵细胞可在体外发育成熟。     

姜黄素对新生大鼠卵巢卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响

目的：探讨姜黄素对新生大鼠卵泡发育和卵母细胞凋亡的影响。方法：雌性SD大鼠分为母鼠灌胃组（受孕11.5d母鼠灌胃姜黄素（100mg·kg^-1·d^-1）直至分娩,分别取出生后1、2和4d龄雌仔鼠卵巢）,新生鼠腹腔注射组（正常出生1d龄雌仔鼠腹腔注射姜黄素（100mg·kg^-1·d^-1）,连续4d,分别取出生后2、4d龄卵巢）和对照组（以母、幼均未用药的正常同天龄新生鼠的卵巢为对照）。卵巢组织切片由苏木精-伊红染色,观察不同发育阶段的卵泡比例,TUNEL染色检测卵巢内卵母细胞凋亡情况。结果：在1d龄卵巢中,母鼠灌胃组未装配卵泡比例明显低于对照组（P〈0.05）,而原始卵泡的比例明显增加（P〈0.05）;在2d龄卵巢中,新生鼠腹腔注射组未装配卵泡比例明显低于对照组（P〈0.05）,而原始卵泡比例则明显高于对照组（P〈0.05）;在4d龄卵巢中,新生鼠腹腔注射组的原始卵泡比例显著下降（P〈0.05）。早期初级和发育卵泡比例显著升高（P〈0.05）。在1、2d龄卵巢中,母鼠灌胃组和新生鼠腹腔注射组卵母细胞TUNEL阳性率均明显低于对照组（P〈0.05）。结论：姜黄素能加快新生大鼠卵母细胞巢破裂,促进原始卵泡的发育启动,同时能抑制卵母细胞凋亡,可能有益于延长卵巢的生殖寿命。     

卵巢功能调控相关蛋白在不同发育阶段卵泡中的表达及其意义

目的：检测卵巢功能调控相关蛋白在不同发育阶段卵泡中的表达,探讨其在卵泡发育及卵巢功能调控中的作用及其意义。方法：选取包含原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡、成熟卵泡、闭锁卵泡及白体的育龄期女性卵巢组织,采用免疫组织化学法分析乙二醛酶I （Glyoxalase I）、泛素羧基末端水解酶L1（UCH-L1）、热休克蛋白27（HSP27）和血清淀粉样蛋白P （SAP）在不同阶段卵泡中的表达情况,并比较卵泡中其表达强度。结果：Glyoxalas I和UCH-L1在次级卵泡、成熟卵泡的颗粒细胞及卵泡膜细胞中呈强表达,表达强度高于其在原始卵泡及初级卵泡胞质中的表达;HSP27在原始卵泡及初级卵泡细胞质中呈强表达,表达强度高于其在在次级卵泡和成熟卵泡颗粒细胞及卵泡膜细胞中的表达;Glyoxalase I和HSP27在闭锁卵泡中呈强表达,表达强度高于其在生长卵泡中的表达;SAP在原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡和成熟卵泡均表达,表达强度无明显差异;4种蛋白在白体中均不表达。结论：UCH-L1强表达和HSP27弱表达与卵泡成熟发育有关;Glyoxalase I强表达及HSP27强表达与卵泡闭锁及卵巢功能衰退有关。