分子印迹流动注射化学发光法测定紫草中紫草素

目的 建立分子印迹流动注射化学发光法定量分析紫草素的新方法。方法 在酸性条件下,紫草素对高锰酸钾-甲醛体系发光反应具有明显的增敏作用,以甲基丙烯酸为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂合成紫草素的分子印迹聚合物,并将其作为分子识别物质,利用紫草素-高锰酸钾-甲醛化学发光体系,结合流动注射化学发光分析技术,建立测定紫草素的分子印迹流动注射化学发光分析方法。结果 体系的化学发光强度与紫草素质量浓度呈线性关系,其标准曲线为Y＝43.2 X＋12.68,r＝0.999 3,线性范围为1.20～80.0 μg/mL,检出限为0.36 μg/mL。结论 利用分子印迹流动注射化学发光分析法测定紫草中的紫草素简便、快速、准确。     

罗红霉素分子印迹聚合物的合成及其特性研究

目的 探讨采用分子印迹技术合成罗红霉素分子印迹聚合物的方法，并对其特性进行研究。方法 以罗红霉素为模板分子，α-甲基丙烯酸为功能单体，以乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂，采用分子印迹技术合成分子印迹聚合物。通过特异性吸附实验研究分子印迹聚合物的特性。结果 通过静态平衡吸附法研究了模板聚合物的结合动力学以及该聚合物的结合能力和选择特性，通过Scatchard分析法研究了印迹聚合物对模板分子的结合特性，经计算聚合物的最大表观结合量(Q_max)和平衡离解常数(Kd)分别为90.3 mg·g^-1和1.35 mg·mL^-1。结论 合成的分子印迹聚合物有形状、大小以及识别位点都与模板分子相匹配的空穴，即具有印迹作用。     

槲皮素磁性分子印记聚合物的制备及其吸附性能

以槲皮素(Qu)为模板分子、N-乙烯基吡咯烷酮(NVP)和丙烯酸(AA)为功能单体、N,N'-亚甲基双丙烯酰胺(MBA)为交联剂、H₂O₂-Vc为引发剂、KH570修饰的Fe₃O₄纳米颗粒为磁性载体,借助表面分子印迹技术制备了能够对Qu进行特异性识别的槲皮素磁性分子印迹聚合物(Qu-MMIPs)。利用X射线衍射仪(XRD)、透射电子显微镜(TEM)、傅里叶变换红外光谱仪(FT-IR)、振动样品磁强计(VSM)和紫外-可见分光光度计(UV-Vis)对样品进行了结构和性能表征。结果表明:Fe₃O₄磁性载体表面已成功包覆了分子印迹聚合物。与化学组成相同的磁性非印迹聚合物(Qu-MNIPs)相比,Qu-MMIPs对Qu有较高的吸附选择性。静态吸附平衡实验和Scatchard分析结果表明,Qu-MMIPs中存在两类不同的结合位点,平衡解离常数分别为1.646×10^-6mol/L和6.387×10^-6mol/L,最大吸附量分别为23.041 mg/g和29.923 mg/g。     

SBA-15表面S-naproxen分子印迹聚合物微球的 合成与分子识别特性

以手性药物左旋萘普生（S-naproxen）为模板分子,四乙烯基吡啶（4-VPy）为功能单体,采用表面印迹法,以介孔材料SBA-15为载体合成了能选择性识别S-naproxen的分子印迹聚合物微球。扫描电镜及孔结构分析结果表明,所合成的分子印迹聚合物微球具有粒径均匀、孔径分布窄、比表面积大等特点;同时扫描电镜、X射线衍射和红外光谱分析结果表明载体表面形成了分子印迹聚合物层,Scatchard分析表明分子印迹聚合物在自组装过程中存在两类结合位点,聚合物高亲和力和低亲和力结合位点的最大表观结合容量分别为Qmax1=2.504 μmol/g,Qmax2=16.680 μmol/g;分子印迹聚合物的热力学研究表明,吸附过程可以自发进行。     

紫外光聚合法制备L-DBTA手性分子印迹聚合物的研究Ⅱ.聚合物性能

以丙烯酸为功能单体,二苯甲酰-L-酒石酸(L-DBTA)为模板分子,三羟甲基丙烷三丙烯酸酯(TMPTA)为交联剂,采用紫外光聚合方法合成了L-DBTA手性分子印迹聚合物.通过HPLC表征,表明合成的手性分子印迹聚合物对L-DBTA模板分子具有很好的识别性,L-DBTA的选择性比二苯甲酰-D-酒石酸(D-DBTA)高.通过Scatchard分析表明,L-DBTA手性分子印迹聚合物中只存在一类影响聚合物识别能力的结合位点.293.15K时,结合位点的平衡离解常数为0.064mmol/L,最大表现结合容量为6.4mg/g.MIPs结合热力学研究表明,印迹分子L-DBTA与分子印迹聚合物手性识别基团之间的识别机理可以用Langmuir等温吸附描述,结合热力学参数为△H=7.40 kJ/mol,△S=42.74 J/(mol·K),△G298=-5.34kJ/mol.L-DBTA与MIPs相互作用速率快,表观活化能为7.40 kJ/mol.     

配合物分子印迹聚合物的识别性能

以乙酸镍和2,2′-联吡啶配合物为模板、4-乙烯吡啶为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂,合成了具有类似金属螯合抗体结合位点的金属配合物印迹聚合物,系统研究了金属离子对模板聚合物选择性结合2,2′-联吡啶的调节作用。结果表明:印迹聚合物对N i(Ⅱ)-2,2′-联吡啶配合物有选择性识别能力。采用Scatchard模型评价分子印迹聚合物的结合特性,得到高亲和力结合位点的平衡离解常数Kd1=0.082 mm o l/L,表观最大结合量Qm ax1=82.2μm o l/g,低亲和力结合位点的Kd2=0.400 mm o l/L,Qm ax2=91.3μm o l/g。     

延胡索与白芷组分配伍对延胡索乙素在大鼠肝微粒体中酶促反应动力学的影响

目的 研究延胡索总生物碱（TA）中延胡索乙素（TET）在肝微粒体中的酶促反应动力学,并比较白芷有效组分白芷香豆素（Cou）、挥发油（VO）与TA配伍后对TET酶促反应动力学的影响。方法 超速离心法制备大鼠肝微粒体,采用高效液相色谱法测定孵育液中TET原形药物的浓度。比较TA、TA-Cou、TA-VO、TA-Cou-VO配伍各组中TET的酶促反应动力学,推导出药物米氏常数（K_m）和最大反应速度（V_max）;并计算TET肝内清除率（CL_int）。结果 TA配伍组中的TET在大鼠肝微粒体内代谢反应的V_max、K_m和CL_int分别为0.12 μmol/(L?min?mg)、5.40 μmol/L、0.022 L/(min?mg);TA-Cou组分别为0.27 μmol/(L?min?mg)、40.18 μmol/L、0.006 L/(min?mg);TA-VO组分别为0.57μmol/(L?min?mg)、22.60 μmol/L、0.025 L/(min?mg);TA-Cou-VO组分别为0.84 μmol/(L?min?mg)、23.25 μmol/L、0.036 L/(min?mg)。结论 TA配伍白芷有效组分可降低TA中TET在肝内的CL_int。     

纳米级白藜芦醇和白藜芦醇β-环糊精包合物生物利用度的比较研究

目的 通过检测给药后血浆中白藜芦醇的量,比较纳米级白藜芦醇和白藜芦醇β-环糊精包合物生物利用度的差异。方法 采用高效液相色谱法,测定给药后不同时间段大鼠血浆中白藜芦醇的质量浓度,使用3p97软件进行药动学参数模拟。结果 纳米级白藜芦醇药动学参数：AUC＝315.89 μg?min/mL,t_max＝21.71 min,C_max＝3.23 μg/mL;白藜芦醇β-环糊精包物药动学参数：AUC＝185.83 μg?min/mL,t_max＝40.44 min,C_max＝1.69 μg/mL。结论 纳米级白藜芦醇达峰时间短,且生物利用度明显高于白藜芦醇β-环糊精包合物。     

青蒿素在不同溶剂中平衡溶解度和表观油水分配系数的测定

目的 测定青蒿素在不同pH缓冲液和7种非极性溶剂中的平衡溶解度以及在正辛醇-水中的表观油水分配系数,为青蒿素新剂型的研究与开发提供实验基础。方法 采用高效液相–柱后衍生化–紫外检测法测定青蒿素在不同pH缓冲溶液及7种非极性溶剂中的平衡溶解度;采用摇瓶法测定青蒿素的表观油水分配系数。结果 37 ℃时青蒿素在纯水中的平衡溶解度为82.4 μg/mL,随着pH的增大平衡溶解度呈先增大（pH 5.0～6.8）后减小（pH 6.8～8.0）的趋势;37 ℃时青蒿素在肉豆蔻酸异丙酯（IPM）、油酸乙酯（EO）和中链甘油酸三酯（MCT）中平衡溶解度较大,分别为10.34、9.28、8.46 mg/mL,青蒿素的正辛醇-水表观油水分配系数P为12.2（lg P＝1.09）。结论 青蒿素水溶性差,在非极性溶剂IPM、EO、MCT中平衡溶解度较大。     

分子印迹聚合物修饰电化学晶体管检测抗坏血酸分子

以抗坏血酸（AA）为模板分子、邻苯二胺（o-PD）为功能单体,在金电极表面电聚合制备分子印迹聚合物膜（MIP）,并以该MIP修饰的电极为栅极制备了具有高选择性、高灵敏度的AA电化学晶体管（OECT）传感器件。应用循环伏安法（CV）、交流阻抗法（EIS）对分子印迹聚合物电极进行一系列的表征与检测。实验结果表明：以pH=5.2,浓度为0.2 mol/L HAc-NaAc（体积比2.1∶7.9）的缓冲液为背景溶液,o-PD与AA的物质的量之比为1∶2,以0.5 V/s的扫描速率在0~0.8 V内扫描20圈,所得分子印迹膜电极性能最佳。应用以该分子印迹修饰电极作为栅极的电化学晶体管检测AA,得到AA浓度的检测限为0.3 μmol/L,沟道电流与AA浓度在0.3~3 μmol/L（低浓度）与3~100 μmol/L（高浓度）这2个范围内成线性关系。     

分子影像学的研究现状

将分子生物学技术和现代医学影像学相结合而产生的一门新的边缘学科——分子影像学(molecular imaging)正在向我们走来。利用PET、MRI、光学成像技术已可以在动物模型中发现转基因的表达、了解胚胎的发育、发现微小肿瘤等，并可用于基因治疗，细胞移植等。本文综述了分子成像技术及分子介入治疗的一些最新进展。     

中药DNA分子标识鉴定研究进展

分子生物学技术在生药学中应用研究方兴未艾。综述了ＤＮＡ分子遗传标记技术在近缘易混淆生药鉴定、药材道地性研究、中药质量标准化、中医药古迹考证、药材种子种苗检测等方面的研究进展，并提出一些值得注意的问题以及偏隍可能的发展方向。     

X-连锁肌营养不良症分子缺失的初步研究

作者应用DMD位点完整的cDNA分子中的cDMD 8作为杂交探针,对6例无亲缘关系的DMD/BMD个体基因组进行了Southern分子杂交,在国内首次报告3例DMD个体基因组DMD位点存在分子缺失,且其缺失部位和分子大小均表现为遗传异质性,证实了Koenig等的观点:分子水平的亚显微缺失为该位点的主要突变方式之一。本研究为直接,快速,准确地进行X—连锁肌营养不良症的产前基因诊断奠定基础。     

门诊消化系统疾病患者幽门螺杆菌感染状况分析

目的 运用TaqMan探针分子检测方法分析首都医科大学附属北京安贞医院消化系统疾病患者幽门螺杆菌（Helicobacter pylori,Hp）感染现状、分布特征及不同分子分型构成,从而为防治Hp感染以及临床用药提供理论依据。方法 选取2018年4月至2019年9月行胃镜检查的患者10 839例为研究对象,行Hp分子检测,并进行分子分型和感染程度分级,同时分析不同季节、性别及年龄段Hp的检出率及分子分型构成。结果 10 839例研究对象中,Hp阳性检出率为33.76%,男性高于女性（P<0.05）。Hp的检出率夏季最高,且随着年龄的增长,呈现先增加后减少的趋势,在31~40岁年龄段,检出率达到高峰,季节、年龄段间Hp的检出率差异有统计学意义（P<0.05）。Hp的两种分子分型中男性的Ⅰ型检出率高于女性（P<0.05）。结论 男性Hp的检出率高于女性;Hp的检出率与季节、年龄相关;Hp的两种分子分型中,Ⅰ型的Hp检出率较高。     

分子模拟技术在释药技术中的应用

环糊精包合技术和缓控释技术是发展较快的释药技术,分子模拟技术在这两种释药技术中的应用也越来越多。简述环糊精包合技术和缓控释释药技术的优点、影响因素和释药原理,介绍几种重要的分子模拟技术在环糊精包合技术和缓控释释药技术中的应用,并给出了分子模拟技术在具体应用中的力场及模拟的条件,分析分子模拟技术的在环糊精包合技术和缓控释技术中应用的优点和难点,展望分子模拟在其应用中的前景,指出分子模拟技术有望成为研究释药技术的一种常规项的工具。     

盐酸头孢吡肟中高分子聚合物含量测定方法学研究

目的 采用高效液相色谱法测定盐酸头孢吡肟中高分子聚合物,并进行方法学研究.方法 采用分子排阻色谱法,色谱柱:Sephadex G-10柱(13.0 mm ×400 mm,TIANHE);流动相:流动相A为pH7.0的0.01mol/L磷酸盐缓冲液[0.01 mol/L Na2HPO4溶液-0.01 mol/L Na...     

PPARs泛激动剂设计、分子对接及分子动力学模拟研究

目的:得到治疗效果好,副作用小的PPAR泛激动剂.方法:用core hopping的方法对LY465608中间链部分和尾链部分进行结构替换.得到新的化合物并与3个蛋白质受体进行分子对接.应用分子动力学模拟先导化合物与PPAR-α、β、γ受体的相互作用情况.基于Lipinski's rule of five,对得到的先导化合物进行ADME预测.结果:对接结果表明得到的目标化合物能与PPAR-α、β、γ活性位点区域的氨基酸残基形成氢键,使AF-2螺旋稳定于激活构象.分子动力学模拟结果表明模拟过程中受体与激动剂复合物体系是稳定的.ADME预测发现它们体内的吸收、分布、代谢和排泄情况符合作为药物的一般特点.结论:得到的8个化合物可以作为PPAR泛激动剂予以进一步的研究.     

Key Techniques and Application Progress of Molecular Pharmacognosy

At the boundary between pharmacognosy and molecular biology, molecular pharmacognosy has developed as a new borderline discipline. This paper reviews the methods, application, and prospect of molecular pharmacognosy. DNA marker is one of genetic markers and some molecular marker methods which have been successfully used for genetic diversity identification and new medicinal resources development. Recombinant DNA technology provides a powerful tool that enables scientists to engineer DNA sequences. Gene chip technique could be used in determination of gene expression profiles, analyses of polymorphisms, construction of genomic library, analysis of mapping, and sequencing by hybridization. Using the methods and theory of molecular biology and pharmacognosy, molecular pharmacognosy represents an extremely prospective branch of pharmacognosy and focuses on the study of systemic growth of medicinal plants, identification and evaluation of germplasm resources, plant metabolomics and production of active compounds. Furthermore, the great breakthrough of molecular pharmacognosy could be anticipated on DNA fingerprint analysis, cultivar improvement, DNA identification, and a global DNA barcoding system in the future.     

基于网络药理学研究大川芎方治疗偏头痛的作用机制

目的 研究大川芎方治疗偏头痛的分子作用机制。方法 结合文献挖掘、分子对接和网络分析研究大川芎方中化合物群与偏头痛相关靶蛋白的相互作用。结果 分子对接发现大川芎中有38个活性成分,且大部分具有较好的口服生物利用度和良好的脑内暴露量,进一步网络分析发现senkyunolide M,riligustilide,levistolide A,chuanxiongterpene等16个化合物为其主要活性成分,可通过与CGRP、p38、TNF-α、iGluR5、NOS等18个靶蛋白作用,抑制神经源性炎症和神经递质的产生,降低源自三叉神经的感受器对伤害性信息的超敏化,并对抗皮层扩布性抑制,从而发挥治疗偏头痛的作用。结论 通过网络分析明确了大川芎方治疗偏头痛的分子作用机制,诠释了其科学内涵,有助于推动后续相应制剂的药效物质基础研究和分子机制实验研究。      

rhTL1A基因原核表达载体的构建、表达与纯化

目的：构建人肿瘤坏死因子样分子1A（TL1A）原核表达质粒并诱导其表达,纯化及鉴定目的蛋白。方法：人HUVECs总RNA经逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TL1A基因,克隆到pTA2载体,酶切和测序鉴定正确后构建重组原核表达质粒pQE-TL1A,并转化大肠杆菌M15［pREP4］。IPTG诱导目的蛋白表达并进行Western blotting鉴定;镍离子亲和层析柱(Ni²⁺-NTA)纯化靶蛋白。结果：目的基因经酶切其结果与预期相符,测序结果显示目的基因与GenBank登录的序列(登录号AF520785)完全一致;工程化大肠杆菌M15［pREP4］经IPTG诱导表达相对分子质量约22 000的目的蛋白;Western blotting鉴定结果显示,重组蛋白能够与抗His单克隆抗体特异性结合。结论：成功地构建了重组原核表达质粒pQE-Tl1A,并纯化获得高纯度重组TL1A蛋白。