不同小鼠之间异基因骨髓移植免疫耐受的实验研究

目的　研究有效诱导异种骨髓移植耐受的方法和对异基因骨髓移植重建的影响。方法　将C57BL 6J小鼠辐射后 ,尾静脉注射 1× 10 7个BALB c小鼠骨髓细胞 (输入骨髓细胞前 4h ,注射供鼠的活化NK细胞 ) ,观察生存期、体重、病理组织学等指标。结果　经骨髓及NK细胞输注的小鼠能显著提高受体小鼠的生存率 ,减轻移植物抗宿主病 (GVHD)的病理伤害程度。结论　在小鼠异基因骨髓移植初期 ,输入供鼠的NK细胞和骨髓细胞 ,能促进造血重建 ,预防移植物抗宿主病的发生     

建立大鼠异基因骨髓移植模型的实验研究

目的：建立较稳定的异基因骨髓移植模型,为异基因骨髓移植的相关研究提供实验参照。方法：以雄性SD大鼠为供鼠,雌性Wistar大鼠为受鼠,受体大鼠随机分成A（对照组）、B（移植组）两组,移植当天A、B组均接受8.5Gy的全身照射（TBI）,于照射后6h,A组回输等量培养液,B组经尾静脉输注供鼠骨髓细胞（2×10^8个/kg）。观察生存期外周白细胞计数,B组存活鼠检测Y染色体及观察有无移植物抗宿主病（GVHD）临床及病理表现。结果：A组大鼠于15d内全部死亡,外周白细胞计数明显减低,骨髓病理示造血组织减少,提示死于造血衰竭。B组大鼠均达到造血重建,8只存活超过50d,骨髓中能检测到供鼠Y染色体,另2只鼠分别于18、31d死亡,肝及小肠病理未见明显GVHD。结论：B组大鼠异基因骨髓成功植入,预处理的方式是可行的,同时单纯输入异基因骨髓细胞不能引起明显的GVHD。     

异基因骨髓移植70例报告

本文报告异基因骨髓移植(BMT)70例,其中供、受者ABO血型不合者25例;HLA/MLC配型不合者13例。配型不合患者加用胎肝及胎儿胸腺细胞输注,以预防移植物抗宿主病(GVHD);霉菌及病毒感染的预防常规加用大蒜新素。结果加输胎肝及胸腺细胞者9例中无1例发生Ⅱ-Ⅳ度GVHD,大蒜新素预防用药组间质性肺炎发生率明显降低,慢性髓性白血病慢性期与急性白血病第一次缓解期BMT后长期存活概率分别为82.8％及66.6％。     

非亲缘异基因骨髓移植后并发急性移植物抗宿主病的诊治

移植物抗宿主病(ＧＶＨＤ)是异基因造血干细胞移植的主要障碍。我院近１年完成的１０例非亲缘异基因骨髓移植中 ,１例发生超急性移植物抗宿主病 (ａＧＶＨＤ) ,经抢救好转 ,现报道如下。１．供受体情况 :患者女性 ,１２岁 ,山东省临沂市学生。７年前发现血白细胞数增高 ,２年前血白细胞数升至１３０×１０９／Ｌ,当地骨髓涂片检查确诊为慢性髓细胞白血病 (ＣＭＬ)慢性期 ,予羟基脲治疗。移植前血象 :白细胞数７．５×１０９／Ｌ,血红蛋白量１０９ｇ／Ｌ,血小板数２９６×１０９／Ｌ;骨髓象 :有核细胞增多 ,粒系增生明显活跃 ,以中幼粒以下阶…     

来氟米特预防小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的实验研究

目的 评估来氟米特（LEF）对小鼠异基因骨髓移植（allo-BMT）术后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防作用.方法 以SPF级雄性C57BL/6（H-2b）为供鼠,雌性BALB/C（H-2d）为受鼠,建立allo-BMT/aGVHD动物模型,并将大鼠随机分为：A组（模型对照组）、B组（环孢菌素A组,剂量为10 mg·kg^-1·d^-1）、C组（LEF组,剂量为10 mg·kg^-1·d^-1）,同时根据临床表现、病理组织学检查、平均生存时间评估各组aGVHD的严重程度.结果 B组和C组受鼠平均生存时间均较A组显著延长（均P〈0.01）,B组和C组间平均生存时间的差异均无统计学意义（均P〉0.05）;B组和C组受鼠的aGVHD临床表现和病理改变均较A组明显减轻.结论 LEF可有效预防小鼠allo-BMT术后出现的aGVHD,并可减轻其症状和病理损害程度,同时显著延长平均生存时间.     

小鼠同种异基因骨髓移植aGVHD动物模型的建立

目的：建立一个德定可靠的异基因骨髓移植（allogeneic bone marrow transplantation,Allo-BMT）急性移植物抗宿主病（acute graft-vetsus-host disease,aGVHD）动物模型,为Allo-BMT中aGVHD研究提供理想的实验平台。方法：以雄性C57BL／6（H-2b）为供鼠,雌性BALB／C（H-2d）为受鼠,受鼠致死性全身照射（total body irradiation,TBI）（8.0Gy）预处理后,在移植物中混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞以引起不同程度的aGVHD。根据存活期、外周血白细胞计数、临床表现及病理检查等判断aGVHD程度。结果：单纯异基因骨髓组只有部分小鼠出现aGVHD,75％的小鼠长期存活（〉30d）。混合不同比例的供鼠骨髓细胞和脾细胞的Allo-BMT小鼠出现aGVHD的时间和程度均有差异,其中骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合组小鼠,均可在相对集中的时间内（8-15d）观察到典型的aGVHD临床和病理改变。结论：建立Allo-BMT aGVHD模型需要加入一定比例的脾细胞,供鼠骨髓与脾细胞1.5：1或1：1混合进行的Allo-BMT,可作为理想的aGVHD动物模型。     

自然杀伤细胞对小鼠异基因骨髓移植中移植物抗宿主病效应的影响

目的:研究自然杀伤细胞(NK)在异基因骨髓移植中对移植物抗宿主病(GVHD)的影响.方法:以近交系小鼠C57BL/6(H-2b)为供鼠、BALB/c(H-2d)为受鼠,在移植物中增加供者的外周T细胞和(或)NK细胞进行异基因骨髓移植,根据临床表现和病理检查,比较不同移植组的存活率和GVHD发生情况.结果:增加1×106供鼠NK细胞的移植组中40%小鼠出现GVHD,增加2×106供鼠NK细胞的移植组中仅30%出现GVHD;与单纯异基因骨髓移植细(80%急性GVHD、20%慢性GVHD)和骨髓 T细胞组(100%急性GVHD)比较,GVHD发生率显著下降(P＜0.01),30、60和120 d存活率显著增高(P＜0.01).结论:在小鼠异基因骨髓移植中,同种异基因反应性NK细胞可抑制GVHD效应,延长存活期.     

FTY720对小鼠异基因骨髓移植后急性GVHD的预防作用

目的 评估FTY720对小鼠异基因骨髓移植诱发急性移植物抗宿主病（aGVHD）的预防作用。方法36只受体BALB／c小鼠,接受直线加速器一次性全身照射后4～6h内,经尾静脉注射供体小鼠骨髓和脾脏细胞。受体小鼠分为移植方式对照组（A组）和异基因移植治疗组（B组）;同时A组分未移植组（A1）、同基因移植组（A2）和异基因移植对照组（A3）,B组分CsA5mg／kg组（B1）,FTY7200．3mg／kg组（B2）和FTY7201mg／kg组（B3）。移植后受体小鼠,根据生存时间、体重变化和病理组织学检查,评估各组aGVHD严重程度。结果 异基因移植各组在移植后第7d造血开始恢复,第14d流式细胞仪检测显示异基因骨髓细胞已植入,病理组织学检查A3组发生重度aGVHD;与B1和B2组比较,B3组aGVHD严重程度最低。结论小鼠异基因骨髓移植后给予FTY720具有预防aGVHD作用．以剂量为1mg／kg时作用显著。     

Attenuation of GVHD for allo-bone marrow transplantation recipient by fasL-fas pathway in an H-2 haplotype disparate mouse combination

Fas (CD95 ) ,atypeⅠtransmembraneproteinoftumornecrosisfactor (TNF)andtumorgrowthfactor (TGF )receptorfamily ,isexpressedonavari etyofhumanorgansandsometumorcellsbesidesac tivatedmatureTcellsandlymphocytestransducedbyhumanTlymphocytevirus (HTLV ) ,humanim…     

延迟连续移植预防小鼠移植物抗宿主病的实验研究

目的研究延迟连续移植对小鼠异基因移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的影响。方法近交系BALB/c（H-2d）受鼠接受8.0 Gy全身放疗（TBI）后,分4组（每组n=20）输注供鼠C57BL/6（H-2b）骨髓和脾细胞的混合液：①经典移植组（TBI后4 h输注）;②连续移植组（TBI后4 h、1-3天连续输注）;③延迟移植组（TBI后4天输注）;④延迟连续移植组（TBI后4-7天连续输注）。流式细胞仪检测移植后各组T细胞亚群、NK细胞、H-2b的表达,比较各组受鼠生存率、aGVHD情况及造血重建。结果经典移植组均于3周内死于aGVHD,连续移植组、延迟移植组60天生存率分别是30%、50%。延迟连续移植组60天生存率为70%,高于其他3组（P＜0.05）。延迟连续移植组20天时外周血白细胞计数恢复正常,30天时T细胞亚群和NK细胞的表达恢复正常,60天时H-2b细胞的百分率为98.13%±1.11%。结论延迟连续骨髓移植可减轻小鼠异基因移植后的aGVHD,提高生存率,同时不影响骨髓植入、造血和免疫重建,是一种简单有效的预防aGVHD的新方法。     

异基因骨髓移植后肾病综合征的临床与病理分析

目的探讨异基因骨髓移植后肾病综合征的临床和病理特点。方法对1例异基因骨髓移植后发生肾病综合征患者的临床、病理资料及治疗进行综合分析。结果本例患者在骨髓移植后28个月发生肾病综合征,在此之前患者有皮肤、口腔和肝脏损害表现;肾脏病理表现为膜性肾病。糖皮质激素及霉酚酸酯治疗后肾病综合征完全缓解。结论异基因骨髓移植后肾病综合征是慢性移植物抗宿主病的肾脏表现,可能为自身免疫性疾病,是移植物对宿主产生的一种排斥反应。肾穿刺活检对该病的诊断和预后判断具有重要价值,免疫抑制剂治疗有效。     

Graft-versus-leukemia effects from donor lymphocyte infusion after nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation in mice

Background Nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantation has been used since the 1990s as a new hematological stem cell transplantation strategy for treating hematological diseases. The purpose of this study was to explore the graft-versus-leukemia (GVL) effects of donor lymphocyte infusions (DLIs) after nonmyeloablative allogeneic bone marrow transplantations, while assessing the declines in treatment-associated morbidity, mortality, and graft-versus-host disease (GVHD).Methods A total of 615 (H-2k) mice were injected with L615 tumor cells and received 500 cGy (60Coγ-ray) irradiation three days later, followed by an allogeneic bone marrow transplantation (allo-BMT). The allo-grafts consisted of 3×10（7） bone marrow cells and 1×10（7） spleen cells from BALB/C (H-2d) donor mice. Two days after the allo-BMT, the recipient mice were given 200 mg/kg of cyclophosphamide. Subsequently, recipient mice were infused with either donor spleen cells ［2×10（7）］ on day 14 or 21, or donor spleen cells ［5×10（7）］ pretreated with hydrocortisone and cyclosporin A (CsA) in vitro on day 14 post-BMT.Results The median survival time of mice that received DLI on day 21 and pretreated DLI on day 14 post-BMT was longer than that of controls and the day 14 DLI group (P<0.01). No evidence of severe GVHD was observed in the day 21 DLI group nor in the day 14 treated DLI group. Mixed chimerism was confirmed in the day 14 DLI group, the day 14 treated DLI group, and the day 21 DLI group on the thirteenth day post-transplantation; full donor chimerism was observed two weeks after DLI.Conclusion Donor lymphocyte infusion after nonmyeloablative bone marrow transplantation may reduce transplantation-associated morbidity and mortality while strengthening graft-versus-leukemia effects.     

白介素-11对小鼠异基因骨髓移植后aGVHD的预防作用

目的 评估白介素-11(Interleukin-11,IL-11)对小鼠异基因骨髓移植(allo-BMT) 后急性移植物抗宿主病(aGVHD) 的预防作用. 方法 用主要组织相容性抗原(MHC) 完全不合的纯种近交系SPF级小鼠,雄C57BL/6(H-2b)为供鼠,雌性BALB/C(H-2d)为受鼠,建立allo-BMT/aGVHD 动物模型,随机分3组:模型对照组、IL-11组(剂量为500μg/(kg·d)、环孢菌素A(CsA)组(剂量为10mg/(kg·d),观察其对aGVHD 的预防作用. 结果 IL-11组、CsA组受鼠生存时间均长于模型对照组(P<0.01);IL-11组、CsA组受鼠aGVHD临床表现和病理改变均较模型对照组明显轻.IL-11组、CsA组之间平均生存时间比较无统计学差异(P=0.901). 结论 IL-11可有效预防小鼠allo-BMT后aGVHD,减轻其症状和病理损害程度,显著延长平均生存时间.     

不同成分淋巴细胞输注对荷瘤小鼠异基因骨髓移植的影响

目的:建立荷瘤小鼠非清髓异基因骨髓干细胞移植模型,探讨不同成分的供者淋巴细胞输注(DLI)对移植效果的影响及抗肿瘤机制. 方法: 受者鼠为Balb/c(H-2Kd)小鼠,供者鼠为C57bl/6(H-2Kb)小鼠,受者小鼠腹腔接种小鼠肝癌细胞株H22细胞,观察腹水生成情况及生存状况. 于接种瘤细胞后d5给予全身照射预处理,随后给受者小鼠尾静脉输注供者鼠的骨髓细胞,建立荷瘤小鼠的MHC不相合亚移植模型. 依据不同DLI将荷瘤鼠受者鼠随机分为A,B,C,D,E组,每组10只. A,B,C,D组均给予预处理,A组预处理后于移植d1,7给予供者小鼠全脾细胞0.5×107个;B组分别于移植d1,7给予去除CD8 细胞供者鼠脾细胞0.5×107个;C组于移植d1,7给予去除CD4 细胞供者鼠脾细胞0.5×107个;D 组只接受预处理不作移植及DLI;E组为对照组,既不作预处理,也不接受骨髓细胞移植及DLI. 观察各组成瘤率、生存期、嵌合状态、造血恢复情况及移植物抗宿主病(GVHD). 结果:所有小鼠均产生腹水,成瘤率100%;生存期C组最长为(35.6±3.1)d,B组为(23.7±10.9)d,B,C两组相比有统计学差异(P＜0.05);接受移植的A,B,C组嵌合率均高于0.80,只接受预处理的D组鼠白细胞计数自行恢复正常;GVHD评分C组与B组有明显差异(P＜0.05). 结论:建立非清髓荷瘤小鼠异基因骨髓干细胞移植模型条件适宜,说明去除CD4 细胞的DLI能够有效地减轻GVHD反应,延长荷瘤鼠生存期;去除CD8 细胞的DLI会加重GVHD反应,影响移植.     

异种骨髓移植后1例慢性移植物抗宿主病动物模型的观察

目的 探讨异种造血嵌合体模型中慢性移植物抗宿主病（graft-versus-host disease,GVHD）发生的特点及机制。方法 本研究对40余只异种造血嵌合体模型中出现的一只慢性GVHD实验兔行血常规、肝功、骨髓涂片检查，对其肝、肺、小肠、皮肤等脏器行常规病理、胶原纤维染色等检查，并同时用PCR测其外周血中供体细胞嵌合情况。结果 该实验兔外周全血细胞减少，PCR检查未发现供体细胞，骨髓轻度增生不良；病理结果显示其病变仍以皮肤为重但均较同种GVHD轻，其病变侵犯部位与同种GVHD无明显区别。结论 异种骨髓移植的慢性GVHD出现时间晚，较罕见，临床表现不如同种慢性GVHD典型，病变较同种GVHD轻；其病变侵犯器官与同种GVHD无明显区别。