中药芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠主动脉内皮细胞及PAI-1表达影响

目的:探讨中药芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠主动脉内皮细胞及PAI-1的影响.方法:将72只SD雄性大鼠随机分为6个实验组,其中一组为阴性对照组,给以普通饮食,一组为模型组,给予维生素D3,高脂和高胆固醇饮食,其余4组在给予高脂、高胆固醇饮食建立动脉粥样硬化大鼠模型同时给予芪丹通脉片低剂量组[0.36g/(kg·d)]、中剂量组[1.08g/(kg·d)]、高剂量组[3.24g/(kg·d)]、阳性对照新伐他丁组[4 mg/(kg·d)](n=12).16 wk后电镜观察大鼠主动脉内皮细胞损伤情况,并通过逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测PAI-1表达.结果:模型组内皮细胞损伤最严重、PAI-1表达明显高于对照组(P＜0.05);给予芪丹通脉片大鼠内皮细胞损伤减轻、PAI-1表达显著降低,中药高剂量组结果接近辛伐他丁组.结论:动脉粥样硬化大鼠主动脉内皮细胞损伤严重,其PAI-1表达增强,使用芪丹通脉片可明显改善内皮损伤程度,同时降低PAI-1表达,且其低、中、高浓度组PAI-1表达依次减少(P＜0.05).     

Effects of G-CSF on nerve repair and mobilization of bone marrow stem cells in rat models of focal cerebral ischemic stroke

目的 研究粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF)对卒中后骨髓干细胞的动员与血管再生和神经修复的影响.方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,成功造模大鼠(60只)分为生理盐水对照组和G-CSF治疗组.治疗组皮下注射G-CSF[2、10、50、250 μg/(kg·d)],对照组以等量生理盐水进行处理.治疗1、3、5、7d后,进行行为学评分并取外周血计数单个核细胞,提取RNA进行RT-PCR检测单个核细胞CD31、CXCR4mRNA的表达水平;实验动物灌注固定后取脑组织切片检测G-CSF作用后脑组织中CD31、CD133及基质细胞衍生因子SDF-1表达.结果 与生理盐水对照组相比,G-CSF治疗组神经功能有明显的改善(P＜0.05);G-CSF作用后外周血中单个核细胞数量明显增加;G-CSF低剂量作用组[2、10μg/(kg·d)]外周血单个核细胞CD31及CXCR4mRNA表达随着用药时间的延长而增强;高剂量[50、250μg/(kg·d)]在短时间内(1、3 d),外周血单个核细胞CD31、CXCR4 mRNA随着用药剂量的升高而增强,250μg/(kg· d)最强,且随着用药时间的延长(5、7d),G-CSF 作用逐渐减弱;G-CSF作用后脑组织内皮细胞标志CD31、CD133及SDF-1阳性表达明显增加.结论 G-CSF能改善MCAO后大鼠症状,其机制可能在于动员骨髓干细胞进入外周血并促进脑组织SDF-1表达以趋化干细胞,继而促进脑组织的血管再生和神经修复.     

缺血性脑卒中大鼠模型骨髓干细胞的动员和神经修复作用

目的研究粒细胞集落刺激因子(granulocyte-colony stimulating factor,G-CSF)对卒中后骨髓干细胞的动员与血管再生和神经修复的影响。方法线栓法制备大鼠大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,成功造模大鼠(60只)分为生理盐水对照组和G-CSF治疗组。治疗组皮下注射G-CSF[2、10、50、250μg/(kg.d)],对照组以等量生理盐水进行处理。治疗1、3、5、7 d后,进行行为学评分并取外周血计数单个核细胞,提取RNA进行RT-PCR检测单个核细胞CD31、CXCR4 mRNA的表达水平;实验动物灌注固定后取脑组织切片检测G-CSF作用后脑组织中CD31、CD133及基质细胞衍生因子SDF-1表达。结果与生理盐水对照组相比,G-CSF治疗组神经功能有明显的改善(P<0.05);G-CSF作用后外周血中单个核细胞数量明显增加;G-CSF低剂量作用组[2、10μg/(kg.d)]外周血单个核细胞CD31及CXCR4 mRNA表达随着用药时间的延长而增强;高剂量[50、250μg/(kg.d)]在短时间内(1、3 d),外周血单个核细胞CD31、CXCR4 mRNA随着用药剂量的升高而增强,250μg/(kg.d)最强,且随着用药时间的延长(5、7 d),G-CSF作用逐渐减弱;G-CSF作用后脑组织内皮细胞标志CD31、CD133及SDF-1阳性表达明显增加。结论 G-CSF能改善MCAO后大鼠症状,其机制可能在于动员骨髓干细胞进入外周血并促进脑组织SDF-1表达以趋化干细胞,继而促进脑组织的血管再生和神经修复。     

阿托伐他汀、氯吡格雷、普罗布考合用对兔动脉粥样硬化病变进展的抑制作用

目的:观察阿托伐他汀、氯吡格雷、普罗布考合用对兔动脉粥样硬化病变进展的抑制作用.方法:将47只雄性新西兰白兔随机分为正常对照组(A组,n=9)及高脂饮食组(N组,n=38).高脂饮食组以1%胆固醇饲料喂养6周,6周后随机抽取2只,观察主动脉组织病理形态,以明确动脉粥样斑块形成.6周时高脂饮食组依据兔子体重随机分为高脂组(高脂饮食)(B组,n=12)、阿托伐他汀组[高脂饮食+阿托伐他汀5 mg/(kg·d)](C组,n=12)、联合治疗组[高脂饮食+阿托伐他汀5 mg/(kg·d)+氯吡格雷10 mg/(kg·d)+普罗布考0.25 g/(kg·d)](D组,n=12),药物与高脂饮食同步干预.实验前、实验6、14周取血清,测定血脂(TC、TG、LDL、HDL)浓度.14周时取胸主动脉行苏木精-伊红染色(HE),测定内膜、中膜厚度及粥样斑块面积;免疫组化测定IL-6的阳性细胞百分比,染色结果行定量分析.结果:高脂饮食各组血脂显著增高,主动脉见典型脂质条纹,局部斑块形成,病变处IL-6显著表达.与单纯高脂组相比,①阿托伐他汀组、联合治疗组主动脉内膜增厚显著减轻,粥样斑块面积缩小(P<0.05),联合治疗组则更为明显(P<0.01).②阿托伐他汀及联合治疗组均能降低斑块中IL-6百分数,联合治疗组更为显著,两者比较,有显著性差异.③阿托伐他汀及联合治疗组均能降低血清胆固醇水平,但两者无显著性差异.结论:阿托伐他汀、氯吡格雷及普罗布考均有抑制内膜增生和动脉粥样硬化病变进展的作用,联合使用抗动脉粥样硬化效果更佳.     

广藿香对感染后肠易激综合征大鼠内脏高敏感作用及机制研究

目的 探讨广藿香提取物对感染后肠易激综合征(PI-IBS)模型大鼠内脏高敏感性的调控作用及其机制.方法 采用结肠灌注乙酸的方法复制大鼠PI-IBS模型.将SD大鼠随机分为正常组、PI-IBS模型组、马来酸曲美布汀片(TMT)组[0.1 g/(kg·d)]、广藿香油组[3 g/(kg·d)]、广藿香水提物组[6 g/(k...     

疏血通注射液对Ⅱa型分泌型磷脂酶A2在动脉粥样硬化模型大鼠主动脉表达的影响

目的 探讨疏血通注射液是否能影响Ⅱa型分泌型磷脂酶A2(sPLA2 Ⅱa)的表达并分析其可能的作用机制.方法 通过建立大鼠动脉粥样硬化模型,观察sPLA2 Ⅱa在食饵性动脉粥样硬化模型大鼠主动脉的表达.30只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、高脂模型组、疏血通组3组(n=10).对照组饲以普通饲料,高脂模型组大鼠给予高脂饲料喂养,疏血通组大鼠给予高脂饲料喂养并予疏血通注射液[4 mL/(kg·d)]静脉注射,持续12周.监测血糖、血压;免疫组织化学法及western blot法检测3组大鼠主动脉中sPLA2 Ⅱa的表达.结果 在高脂模型组、疏血通组大鼠主动脉血管平滑肌与动脉粥样硬化斑块中明显可见sPLA2 Ⅱa的表达.高脂模型组大鼠的主动脉壁中sPLA2 Ⅱa表达较正常对照组明显增加(P＜0.01);疏血通组大鼠主动脉壁的sPLA2 Ⅱa表达与高脂模型组相比,明显减少(P＜0.01).结论 sPLA2 Ⅱa表达的增加可能是导致动脉粥样硬化的重要原因之一,疏血通注射液可抑制sPLA2 Ⅱa在主动脉的表达,从而减轻动脉粥样硬化.     

消糖胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的:观察消糖胶囊对糖尿病大鼠肾脏的保护作用. 方法:采用单侧肾脏切除加四氧嘧啶注射的方法制备大鼠糖尿病模型,将实验大鼠随机分为正常组[蒸馏水10 mL/(kg·d)],模型组[蒸馏水10 mL/(kg·d)],开博通组[2.5 mg/(kg·d)],消糖胶囊大[3.81 g/(kg·d)]、中[2.54 g/(kg·d)]、小[1.27 g/(kg·d)]剂量组,每组10只. 灌胃给药4 wk后,分别测定实验大鼠肾质量、肾功及尿白蛋白排泄量. 结果:消糖胶囊大、中、小剂量组肾质量、肾质量/体质量比值、尿素氮、肌酐、尿蛋白排泄量均显著低于模型组(P<0.05),与开博通组比较,各项指标差异无统计学差异. 结论:消糖胶囊具有抑制肾脏肥大、减少尿蛋白分泌,改善肾功能的作用.     

小凹蛋白1-NFκB通路介导乙酰水杨酸姜黄素酯的抗动脉粥样硬化作用

目的探讨乙酰水杨酸姜黄素酯对动脉粥样硬化病变的作用及机制。方法 40只7周龄Apo E-/-小鼠,随机分为对照组、高脂组、辛伐他汀组[5 mg/(kg·d)]、乙酰水杨酸姜黄素酯低剂量组[23.8 mg/(kg·d)]和乙酰水杨酸姜黄素酯高剂量组[71.5 mg/(kg·d)],其中对照组给予普通饲料,其他组给予高脂饲料喂养。连续干预4周之后处死动物,检测血清中血脂水平;油红O染色法观察小鼠主动脉斑块;ELISA法或免疫组化法检测血清和肝脏炎症因子TNF-α、IL-6水平;Western blot检测小鼠肝脏中小凹蛋白1和NFκB p65的表达。结果与对照组相比,高脂组血清中TC和LDL-C升高,HDL-C降低,主动脉粥样斑块增多。与高脂组相比,乙酰水杨酸姜黄素酯组小鼠血清中的TC和LDL-C降低,肝脏脂质减少,血清和肝脏炎症因子水平下降,而主动脉粥样硬化斑块减轻;肝脏小凹蛋白1水平升高而NFκB p65水平降低。结论乙酰水杨酸姜黄素酯能抑制高脂喂养所致的Apo E-/-小鼠动脉硬化斑块的形成;机制可能与增加肝脏小凹蛋白1、减少NFκB p65蛋白水平,调节肝脏脂质代谢及炎症反应有关。     

马齿苋酰胺E治疗大鼠溃疡性结肠炎的作用及其机制

目的 探讨马齿苋酰胺E(OE)治疗大鼠溃疡性结肠炎(UC)的作用机制.方法 60只雄性SD大鼠随机分为5组:正常组、三硝基苯磺酸(TNBS)组、OE低[9 mg/(kg·d)]、中[18 mg/(kg·d)]和高剂量组[36 mg/(kg·d)].采用TNBS灌肠法建立大鼠UC模型,OE低、中、高剂量组在造模后第3天开...     

大蒜素对小鼠外周血淋巴细胞的影响

目的探索大蒜素对小鼠外周血淋巴细胞的影响。方法将40只清洁级昆明小鼠随机分为生理盐水对照组[0.1 mL生理盐水/(10 g·bw)]、大蒜素低剂量组[100 mg/(kg·bw)]、大蒜素中剂量组[200 mg/(kg·bw)]和大蒜素高剂量组[400 mg/(kg·bw)],每组10只,每天灌胃1次,灌胃容量0.1 mL/10 g,连续灌胃14 d后,随机选取8只,采用摘眼球的方式进行取血,制取为单细胞悬液,用流式细胞仪进行检测,分析大蒜素对于小鼠外周血中的CD4~+T细胞、CD8~+T细胞及CD4~+/CD8~+值及淋巴细胞周期的影响。结果高剂量组及中剂量组与对照组相比淋巴细胞亚群和周期均出现了显著性差异,CD4~+T细胞、CD4~+/CD8~+值相对提高,CD8~+T细胞值降低(P0.05);G_2/M期及S期的细胞的比例增加,G_0/G_1期的细胞的比例降低(P0.05)。结论大蒜素具有一定的免疫调节功能,尤其中、高浓度的大蒜素通过对外周血淋巴细胞周期的阻滞作用,使外周血淋巴细胞处于较高的增殖状态,促进淋巴细胞亚群的分化,激化小鼠的免疫功能,对小鼠的细胞免疫和体液免疫功能具有增强作用。     

丹酚酸B对糖尿病动脉粥样硬化斑块内血栓相关因子的影响

[目的]观察丹酚酸B对抗糖尿病动脉粥样硬化斑块血栓形成的作用及可能的发生机制。[方法]选取50只8周龄雌性ApoE-/-小鼠,腹腔注射链尿佐菌素200 mg/kg联合高脂饲料喂养12周,将血糖水平>11.1 mol/L 40只ApoE-/-小鼠作为糖尿病动脉粥样硬化模型小鼠,随机分为模型组(MOD)、丹酚酸B高剂量组(SalBH)、丹酚酸B中剂量组(SalBM)与洛伐他汀组(LVT)4组,每组10只。各组均连续灌胃8周。实验期满后,测定空腹血糖水平;酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清I型纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的浓度。免疫组织化学染色检测斑块内组织因子(TF)的表达,利用Image-Pro Plus Version 6.0(IPP)图像分析系统计算结果。[结果]与MOD组比较,各治疗组TF平均光密度值明显降低(P<0.05);与MOD组比较,SalBM组PAI-1浓度明显降低(P<0.05)。[结论]丹酚酸B能够降低糖尿病动脉粥样硬化斑块内TF的表达和血清PAI-1含量,提示丹酚酸B可能是通过以上机制来减少粥样硬化斑块内的血栓形成。     

青蒿琥酯对非酒精性脂肪肝小鼠肝脏TLR4及MyD88表达的影响

目的 观察青蒿琥酯对非酒精性脂肪肝病(NAFLD)小鼠肝脏Toll样受体4(TLR4)、髓样分化因子S8(MyD88)和磷脂酰肌醇-3激酶(PI3K)表达的影响.方法 70只昆明小鼠随机分为正常对照组、模型组、青蒿琥酯高[60 mg/(kg·d)]、中[30 mg/(kg ·d)]、低[15 mg/(kg·d)]剂量组.采用高脂饲料构建NAFLD小鼠动物模型,于给药后12周末处死,观察肝脏病理变化,酶法检测血清三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,RT-PCR法检测肝组织TLR4、MyD88、PI3K mRNA表达.结果 各青蒿琥酯剂量组小鼠血清TG、TC和ALT水平比模型组显著降低,肝脏脂肪变性明显减轻,肝组织TLR4、MyD88及PI3K表达量也显著降低(P＜0.01,P＜0.05).与正常对照组相比,模型组肝组织TLR4、MyD88及PI3K表达量显著升高(P＜0.01),且三者有相同的变化趋势.结论 TLR4/MyD88及其下游PI3 K/AKT通路可能在NAFLD发病中起重要作用.青蒿琥酯可通过降低TLR4、MyD88、PI3K mRNA表达,减轻NAFLD小鼠肝脏脂肪变性程度,降低血脂,改善肝功能指标.     

木犀草苷对小鼠非酒精性脂肪肝病的作用研究

目的 探讨木犀草苷对小鼠非酒精性脂肪肝病(NAFLD)的保护作用。 方法 将52只昆明小鼠随机分为对照组(11只)和模型组(41只),对照组给予标准饲料,模型组给予高脂饲料。喂养8周,对照组和模型组各随机取一只,经病理确认建模成功后,将模型组随机分为4组,NAFLD模型组、木犀草苷低[50 mg/(kg·d)]、中[100 mg/(kg·d)]、高[200 mg/(kg·d)]剂量组,每组10只。木犀草苷组给予相应木犀草苷量灌胃,对照组和NAFLD模型组给予等量生理盐水灌胃。4周后处死小鼠,测定血清甘油三酯(TG)、血清总胆固醇(TC)、天冬氨酸氨基酶(AST)及丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平,血清及肝组织总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽(GSH)及丙二醛(MDA)水平,肿瘤坏死因子(TNF-α)及白细胞介素-6(IL-6)水平;并观察各组肝组织切片变化。 结果 与正常对照组比较,NAFLD模型组TG、TC、AST及ALT水平明显升高,血清及肝组织MDA、TNF-α及IL-6水平显著升高(均P<0.05),T-SOD、GSH水平明显下降(均P<0.05)。与NAFLD模型组比较,木犀草苷低、中、高剂量组TG、TC、AST及ALT水平明显下降(均P<0.05),血清及肝组织MDA、TNF-α及IL-6水平显著下降(均P<0.05),T-SOD、GSH水平明显升高(均P<0.05)。木犀草苷组脂肪变细胞数量较NAFLD模型组显著改善。 结论 木犀草苷减少非酒精性脂肪肝脂质的沉积,减轻氧化应激及炎症反应程度,对非酒精性脂肪肝具有较好的保护作用。      

阿斯匹林对可溶性HSP60及动脉粥样硬化的影响

目的探讨热休克蛋白60(HSP60)在动脉粥样硬化的发生、发展过程中起着重要作用。以了解sHSP60与动脉粥样硬化的关系及阿司匹林的作用。方法通过单剂量注射维生素D(600000IU/kg)及高脂饮食喂养建立大鼠动脉粥样硬化模型,并随机分为对照组、高脂饮食组及阿司匹林治疗组(0.1g/kg体重)。应用十二烷基磺酸钠聚丙烯酰凝胶电泳及蛋白免疫印迹法,测定可溶性HsP60(sHPs60)。结果高脂组sHSP60及hsCRP明显高于对照组及治疗组。结论sHSP60可能是与血脂水平无关的动脉粥样硬化预测因子;阿司匹林可减轻脂质沉积,可能与其降低sHSP60水平、抗炎及抗血小板等多种作用有关。     

芪丹通脉片对动脉粥样硬化大鼠血清NO含量及动脉壁eNOS基因表达的影响

目的: 观察芪丹通脉片(QDTMT)对实验性动脉粥样硬化(AS)大鼠血清一氧化氮(NO)含量和动脉壁匀浆中内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因表达的影响,探讨QDTMT的抗AS机制. 方法: 将健康雄性SD大鼠72只随机分为6组,每组12只:模型组(model)、空白对照组(control)、阳性对照辛伐他汀组(simvastatin)、QDTMT低剂量组(QDTMT-L)、QDTMT中剂量组(QDTMT-M)、QDTMT高剂量组(QDTMT-H). 采用高脂饮食配合灌胃给予维生素D3建立大鼠AS模型,各组动物灌胃给药. 采用萘胺重氮分光光度法测定血清NO含量,采用半定量RT-PCR方法检测各组动物动脉壁匀浆中eNOS基因的表达,分析造模及各药物组血清NO含量及eNOS基因表达的变化. 结果: 与空白对照组相比,模型组和各用药组血清NO含量均明显增加(P<0.01);模型组eNOS基因的表达较空白对照组明显减少(P<0.01),与模型组相比,辛伐他汀组及各中药组均能增加eNOS基因的表达(P<0.01),且QDTMT各剂量组之间存在量效关系. 结论: QDTMT能增加AS大鼠动脉壁eNOS基因的表达,这可能是QDTMT抗AS的机制之一.     

大黄素对小鼠动脉粥样硬化模型的干预研究

目的 观察大黄素对小鼠动脉粥样硬化(AS)模型血脂、血清炎性因子等的影响,评价大黄素在降脂和抗动脉粥样硬化方面的作用.方法 将60只雄性apoE-/-小鼠适应性饲养1周后,随机分为模型组(n=15)和大黄素组(n=45),大黄素组又随机分为高剂量组(1200 mg/kg·d)、中剂量组(900 mg/kg·d)和低剂量组(600 mg/kg·d)三个亚组,每组15只.正常对照组给予普通颗粒饲料;模型组给予高胆固醇饲料(0.25％胆固醇+15％脂肪),大黄素组给予高胆固醇饲料+大黄素,喂养12周处死.处死前动物称量体重、血脂检测、血清炎性因子检测.结果 12周末模型组小鼠体重增加显著高于大黄素高剂量组(P＜0.05);大黄素治疗组TC水平均显著降低(P＜0.05～0.01),且药物的作用呈现明显的剂量依赖性(P＜0.05);三个大黄素治疗组hsCRP水平和Fib浓度均显著降低(P＜0.05～0.01),且中剂量组和低剂量组均显著高于高剂量组.结论 大黄素对AS的发生具有全面的干预作用.     

孕激素对大鼠阴道上皮细胞的影响

目的:研究孕激素对大鼠阴道上皮厚度、细胞层数以及雌激素受体、孕激素受体表达的影响。方法:本研究选用性成熟期雌性SD大鼠40只,体重285～329 g,随机分为4组,对照组(D组)、实验组1(S1组)、实验组2(S2组)、实验组3(S3组),每组10只,全部行双侧卵巢切除术。D组给予灭菌植物油肌内注射,S1组、S2组、S3组分别给予黄体酮1 mg/(kg.d)、5 mg/(kg.d)、25 mg/(kg.d)肌内注射。4周后采用放射免疫法测血清雌激素、孕激素水平,取大鼠阴道上段同一部位组织制成病理切片,测量阴道上皮厚度、细胞层数,采用免疫组织化学方法进行雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的染色,计数阴道上皮细胞内细胞核ER、PR阳性的细胞所占比例。结果:大鼠血清中孕酮浓度S3组>S2组>S1组>D组,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),上皮厚度及细胞层数S2组、S3组多于D组,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),随着孕激素的剂量增大S1组、S2组、S3组阴道上皮的ER-、PR的阳性表达评分不断降低,ER-的阳性表达率D组显著高于S2组、S3组,组间比较差异有统计学意义(P<0.01),D组中PR的阳性表达显著高于S3组,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:孕激素可促进卵巢切除大鼠阴道上皮厚度及细胞层数增加,并可抑制阴道上皮中雌激素、孕激素受体的表达。     

隔药饼灸对动脉粥样硬化兔血脂及胸主动脉G蛋白偶联胆汁酸受体5的影响

目的 观察隔药饼灸对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)兔血脂及胸主动脉G蛋白偶联胆汁酸受体5(takeda G-protein-coupled receptor 5,TGR5)含量的影响.方法 将40只新西兰雄性兔随机分为空白组、模型组、抗生素组、隔药饼灸组与阿托伐他汀组,每组8只.空白组用普通饲料喂...