慢性免疫性血小板减少症患者外周血淋巴细胞亚群及相关细胞因子的研究

目的本研究检测慢性免疫性血小板减少症(CITP)患者淋巴细胞亚群数量以及相关细胞因子的变化,初步探讨它们在CITP发病机制中的可能作用。方法选择40例CITP患者,正常健康体检者20例,检测外周血单个核细胞T淋巴细胞,Th细胞、Ts细胞、B淋巴细胞和NK细胞的表达率,测定CD~(4+)细胞中Th17细胞、Th22细胞、T-reg和Th1细胞的表达率;应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中IL-17、IL-22、IL-6、TNF-α的水平。结果与正常对照组相比,T淋巴细胞总数、Th细胞、Ts细胞、B淋巴细胞、NK细胞,Th17细胞,Th22细胞表达率,IL-17、IL-22水平、IL-6、TNFα的表达水平差别均无统计学意义(P0.05),Th1表达率上升,T-reg表达率下降,差别均有统计学意义(P0.05)。结论慢性ITP患者免疫自稳能力下降和Th1功能亢进可能在其发病过程中起主导作用,而Th17,Th22可能与慢性ITP的发生无关。     

Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜患者T细胞亚群表达的研究

目的探讨Fas、FasL在特发性血小板减少性紫癜（rrP）患者T细胞亚群及血小板中的表达状况及其在ITP发病机制中的作用。方法收集ITP患者及健康人群外周抗凝静脉血,分离纯化得T细胞和血小板。以PE标记的anti-CRTH2mAb和cy5标记的anti-CD4、CD8mAb及FTTC标记的anti-Fas、FasL mAb做三色流式细胞术,分析ITP患者Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas、FasL表达的变化;以FITC标记的anti-Fas、FasL mAb作单色流式细胞术,分析ITP患者血小板Fas、FasL表达的变化。结果与健康人群相比,ITP患者外周血Th、Th1、Th2细胞百分率均明显下降（P〈0．05）,Tc、Tc1、Tc2细胞百分率均无明显变化（P〉0．05）;Th、Th1、Th2及Tc、Tc1、Tc2细胞Fas、FasL表达均明显升高（P〈0．05）;同时,111P患者血小板Fas的表达明显升高（P〈0．05）,而FasL的表达无明显变化（P〉0．05）。结论ITP患者存在免疫功能失调,T细胞亚群及血小板Fas、FasL表达异常可能与ITP患者免疫病理机制有关。     

免疫性血小板减少症患者外周血Th17/Treg相关因子的表达及意义

目的:探讨辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)在免疫性血小板减少症(ITP)患者外周血的表达情况及临床意义.方法:选取60例ITP患者作为ITP组和同期60名健康体检者作为对照组,应用流式细胞术进行Th17、Treg细胞比例的测定,应用ELISA法进行血清白细胞介素17(IL-17)、IL-1...     

免疫性血小板减少症患者Th17/Treg细胞失衡与特异性转录因子表达异常

目的探讨Th17/Treg细胞失衡以及特异性转录因子表达异常在免疫性血小板减少症(ITP)中的临床意义。方法入组ITP患者40例,应用流式细胞术(FCM)检测Th17与Treg细胞、RT-PCR技术检测Th17特异性转录因子ROR-γt和Treg特异性转录因子Foxp3表达水平以及Aim Plex流式高通量技术检测Th17细胞因子IL-17A与IL-22以及Treg细胞因子TGF-β与IL-10水平。20例健康者作为正常对照组。结果与对照组相比较,ITP组Th17、Treg与Th17/Treg比值均显著降低(P 0.05),Th17细胞因子IL-17A与IL-22表达水平均显著升高(P 0.05),Treg细胞因子TGF-β与IL-10表达水平均显著降低(P 0.05)。Th17特异性转录因子ROR-γt与Treg特异性转录因子Foxp3表达水平均显著升高(P 0.05)。结论 ITP患者存在Th17/Treg细胞失衡以及特异性转录因子表达异常,反应了ITP患者机体免疫功能紊乱。     

Th17细胞在免疫性血小板减少症患者中数量及功能研究

目的：研究免疫性血小板减少症（ITP）患者,rh17细胞数量、相关功能分子水平及其与临床指标的相关性。探讨Th17细胞在ITP发病机制中的作用。方法：ITP患者40例,正常对照组14名。应用流式细胞术（FCM）检测骨髓IL-23R＋CD4＋／CD4＋细胞比例;应用ELISA检测骨髓上清液IL-17、IL-23水平;RT—PCR测定骨髓单个核细胞中IL-17mRNA的相对表达水平,并与临床指标进行相关性分析。结果：ITP患者骨髓中IL-23R＋CD4＋／CD4＋细胞比例[（4．933±6．162）％]、IL-17水平[（13．434±7．189）ng／L]、IL-23水平[（56．930±58．512）ng／L]、IL-17mRNA相对表达水平（O．921±0．196）均明显高于正常对照组[（0．897±0．803）％]、[（4．134±2．879ng／E]、[（17．841±11．033）ng／L]、（0．749±0．136）（P〈0．05）;活动期ITP患者IL-23R＋CD4＋／CD4＋细胞比例[（6．699±7．008）％]、IL-17水平[（16．021±7．114）ns／L]、IL-23水平[（72．474±64．835）ng,L1、IL-17mRNA相对表达水平[0．967±0．186]均明显高于缓解期患者[（1．656±1．286）％]、[（7．972±3．326）ng/L]、[（24．114±17．654）ng／L）]、（0．801±0．163）（P〈0．05）。ITP患者上述指标与其临床指标存在相关性。结论：Th17细胞在ITP患者免疫发病机制中发挥重要作用,在ITP患者中不仅数量增加,而且功能活跃。     

成人原发免疫性血小板减少症患者外周血Th9细胞的表达及其临床意义

目的 观察Th9细胞及IL-9在成人原发免疫性血小板减少症(primary immune thrombocytopenia,ITP)患者中的表达,探讨其在ITP发病过程中的作用.方法 纳入新诊断的成人ITP患者25例及年龄性别匹配的健康对照患者25例,利用流式细胞术检测研究对象外周血Th9细胞比例,实时荧光定量PCR检测IL-9、TGF-β、PU.1和IRF4的相对表达量,ELISA法检测IL-9的表达情况,血细胞计数仪进行血小板(PLT)计数.结果 与健康对照组相比,ITP患者外周血Th9细胞比例增高,且PLT≤30×109/L的患者Th9细胞比例高于PLT＞30× 109/L的患者(P＜0.05).ITP患者IL-9 mRNA及蛋白水平均增高,且PLT≤30×109/L的患者IL-9 mRNA及蛋白水平高于PLT＞30×109/L的患者(P＜0.05).与健康对照组相比,ITP患者Th9细胞发育的主要调控因子TGF-β、PU.1和IRF4水平增高(P＜0.05).ITP患者Th9细胞比例和IL-9蛋白水平均与PLT负相关(r=-0.428 1,P=0.032 8;r=-0.537 5,P=0.005 6).随访11例患者,发现经有效治疗后,Th9和IL-9与治疗前相比均呈下降趋势(P＜0.05).结论 Th9的异常活化可能参与了成人ITP疾病的发生与发展,这为进一步理解ITP的免疫学发病机制及选择免疫调节治疗潜在靶点提供了新的线索.     

原发免疫性血小板减少症患者外周血中Th9/Th17的水平及意义

原发性免疫性血小板减少症(ITP)为一种自身免疫性疾病,目前对于其发病机制尚未完全阐释清楚。本研究选取ITP患者,通过流式细胞术检测患者血浆中Th9/Th17的含量,并通过观察影响两者表达的转录因子水平,分析其对ITP患者影响及可能的作用机制。ITP患者Th9/Th17、IL-9/IL-17含量明显升高,并且其相应的转录因子水平也升高,并且利用四者对活动期ITP进行诊断,发现Th9/Th17对活动性ITP的诊断效能均较高。以上结果表明,Th9/Th17可能通过上调其转录因子影响ITP发病,并与IL-9/IL-17存在协同作用,可利用Th9/Th17对活动性ITP进行早期诊断。     

Fas／FasL 在原发免疫性血小板减少症发病机制中的作用研究

目的：探讨Fas及FasL系统在成年原发免疫性血小板减少症（IT P）发病机制中的作用。方法收集成年初诊IT P患者及健康成年人外周抗凝静脉血。采用流式细胞术检测ITP患者Th／Tc、Th1／Th2、Tc1／Tc2细胞Fas及FasL的表达率、血小板表面Fas及FasL的表达率。结果与健康对照组相比,ITP组Th、Th1、Th2、Tc、Tc1、Tc2细胞表面Fas及FasL的表达率均明显升高（P＜0．05）;同时ITP组血小板表面 Fas的表达率明显升高（P＜0．05）,而血小板表面 FasL 的表达无明显变化（P＞0．05）。结论 ITP患者T细胞亚群及血小板表面Fas及FasL表达的异常,可能与ITP发病机制密切相关。     

细胞因子 IL-17A 与免疫性血小板减少症发病关系的初步研究

目的 通过观察免疫性血小板减少症（ITP）患者外周血中辅助性 T（Th）细胞相关细胞因子水平的变化,探讨其与 ITP 发病的关系。 方法 应用微量样本多重蛋白定量技术（CBA）检测和比较 35 例慢性 ITP 患者和 30 例健康体检者（正常对照组）外周 血中 IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ 和 IL-17A 的水平。 结果 ITP 患者外周血 IL-17A 水平较正常对照组显著升高,两组 IL-17A 的水平 分别为（6.767±1.066）pg/ml 和（1.679±0.253）pg/ml,比较有统计学差异（P＜0.01）;而患者外周血 IL-2、IL-4、IL-6、IFN-γ 水平与 正常对照组相比均无统计学差异（均 P ＞0.05）。血小板计数≥20×109/L 的患者外周血 IL-17A 水平为（8.217±1.477）pg/ml,血小板 计数＜20×109/L 的患者外周血 IL-17A 水平为（5.238±1.490）pg/ml,两者间比较无统计学差异（P ＞0.05）。 结论 慢性 ITP 患者 外周血 IL-17A 水平异常升高,提示 Th17 细胞和 IL-17A 可能在 ITP 的发生、发展中发挥重要的作用。     

成人慢性免疫性血小板减少症患者T细胞亚群、NK细胞和树突状细胞亚群的水平研究

目的研究成人慢性免疫性血小板减少症(Immune Thrombocytopenia,ITP)患者免疫细胞、免疫因子表达水平以及二者之间的相关性。方法选取2013年11月～2017年3月期间我院血液科收治的240例ITP患者,根据ITP国际工作组提出的诊断标准分为重度ITP患者(重度ITP组)和非重度ITP患者(非重度ITP组),每组各120例。另外选择同期120例健康体检人员,作为健康组。分别检测上述三组Th1细胞、Th17细胞、调节性T细胞(Regulatory cells,Tregs)、Th17/Treg、自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)、树突状细胞(Dendritic cells,DC)等细胞比例和白介素-2(Interleukin-2,IL-2)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子(Tumor Necrosis Factor,TNF-α)、γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)等免疫因子表达水平,分别分析与ITP病情之间以及二者之间的相关性。结果免疫细胞Th17、Treg、Th17/Treg和DC比例与患者病情呈显著相关性,而Th1、NK细胞比例与患者病情无显著相关性;免疫因子IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ与患者病情呈显著相关性,而Ig G与患者病情无显著相关性。免疫细胞与免疫因子在ITP中的相关性分析显示,Th1细胞比例与IL-2、IL-6、TNF-α呈显著正相关;Th17细胞比例与IL-2、IL-6、IFN-γ呈显著正相关;Treg细胞比例与IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ呈显著负相关;Th17/Treg细胞比例与IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ、IgG呈显著正相关;NK细胞比例与IL-6、TNF-α、IFN-γ呈显著正相关;DC比例与IL-2、IL-6、TNF-α呈显著正相关。结论细胞免疫失衡引起机体免疫因子水平异常,是导致ITP发生发展的促进因素。