Cx43在室性心律失常中的作用研究进展

缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)能促进心脏的正常发育,是心肌细胞间化学耦联和电耦联的基础.Cx43数目减少及分布模式改变导致心肌细胞间传导速度和方向发生变化,室性心律失常的发生率增加.骨髓间充质干细胞移植及药物干预能提高病变心肌Cx43数量和改善病变心肌Cx43的分布,减少室性心律失常的发生.     

连接蛋白43在正常胎儿和室间隔缺损患儿心脏的表达

目的 探讨正常胎儿和室间隔缺损患者心脏连接蛋白43（Cx43)表达的分布规律。方法 应用SP免疫组化方法。检测10例正常胎儿和5例室间隔缺损患者心肌细胞Cx43的蛋白表达。结果 1、Cx43主要在心室肌表达，心房较少，2、正常胎儿心室肌细胞的Cx43多数分布于细胞表面，少数位于闰盘处，3、室间隔缺损心肌Cx43表达的颗粒细小，分布不均。结论 Cx43的表达在胎儿时期主要位于心肌细胞表面，闰盘处少。室间隔缺损在未出现心功能异常之前对Cx43的表达影响不明显。     

黄芪对扩张型心肌病大鼠心肌缝隙连接蛋白43表达的影响

目的探讨黄芪对扩张型心肌病(DCM)大鼠心肌缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响。方法应用多柔比星腹腔注射建立DCM大鼠模型;模型组大鼠按照不同的给药方法随机分为黄芪组和模型对照组,黄芪组应用黄芪颗粒加双蒸馏水灌胃,模型对照组和正常对照组用定量的双蒸馏水灌胃,三组均1次/d灌胃4周。12周末超声测量各组大鼠心脏左心室射血分数(LVEF),逆转录聚合酶链反应法检测Cx43 m RNA,采用免疫组化方法观察Cx43分布。结果与模型对照组比较,黄芪组大鼠心肌Cx43m RNA、Cx43平均灰度值、LVEF均增高,差异均有统计学意义(P均0.05);黄芪组较模型对照组心肌Cx43的分布紊乱有改善。结论黄芪能改善DCM大鼠心肌Cx43表达和分布,并能改善其心功能。     

Gata4转录后蛋白共价修饰

目的：Gata4是心脏发育重要的转录因子,其转录活性和DNA亲和力受转录后蛋白共价修饰的调节,并影响下游目的基因和相关转录因子表达,胚胎干细胞分化,心肌细胞生长和心脏发育。该文总结Gata4转录后蛋白共价修饰对其转录活性的影响,寻找其与心脏发育和先天性心脏病（congenital heart disease, CHD）的关系。结果发现乙酰化、磷酸化、SUMO化使其转录活性和DNA亲和力升高,下游基因表达上升,促进胚胎干细胞分化等呈正性调节;去乙酰化和甲基化下调Gata4转录活性,呈负性调节。因此,Gata4蛋白共价修饰对研究先天性心脏病及其他一些心脏疾病有重要的临床意义。     

先天性巨结肠肠壁Cx43蛋白和Cajal间质细胞的分布

目的：观察缝隙连接蛋白43（Cx43）及Cajal 间质细胞(ICC)在先天性巨结肠(HD)肠壁中的分布,探讨Cx43和ICC与HD发病的关系。方法：运用免疫组织化学方法观察42例经病理诊断为HD的肠壁标本内各层之间Cx43蛋白和ICC的分布情况,其中男33例,女9例（年龄2个月至10岁）,实验标本均为散发病例,全部取材经组织病理学检测符合HD诊断,包括常见型30例,短段型12例,并取5例肠套叠患儿（30 d至8岁,男4例,女1例）作为对照组。结果：HD狭窄段(无神经节细胞肠段)肠壁肌层内Cx43和ICC表达缺失,各层中几乎未见Cx43表达和ICC分布,与HD扩张段（有神经节细胞肠段）及正常对照组之间的差异有显著性意义(P<0.01)。HD移行段肠壁Cx43和ICC有中等强度表达,与扩张段、狭窄段之间差异有显著性(P<0.01)。HD扩张段肠壁Cx43和ICC呈强阳性分布,黏膜下层和纵肌层未见或少见Cx43表达。HD扩张段和正常对照组肠壁内Cx43和ICC表达差异无显著性。结论：Cx43表达缺失或减少、缝隙连接结构的破坏及ICC结构、分布异常,导致细胞间物质、电信号的传递障碍,可能是HD发病的原因之一。［中国当代儿科杂志,2009,11（3）：213-216］     

野百合碱致右心衰竭幼鼠Connexin43的变化及卡托普利和坎地沙坦的干预作用

目的 探讨Connexin43(Cx43)在野百合碱(MCT)致右心衰竭幼鼠中的变化及卡托普利和坎地沙坦的干预作用.方法　50只SD幼鼠腹腔注射MCT诱发肺动脉高压(PAH),随机分为心衰4周组(E1组)、心衰6周组(E2组)、卡托普利组(C1组)、坎地沙坦组(C2组)和二药联合组(C3组).另20只幼鼠腹腔注射9 g·L-1盐水作为对照,分为正常对照4周组(N1组)和正常对照6周组(N2组).测定每组存活幼鼠的血流动力学和相关生理指标,采用ELISA法检测其血清Cx43水平,免疫组织化学法和 RT-PCR法测定其右心室心肌组织Cx43和Cx43 mRNA的表达.结果　E1组与N1组比较,右心室肥厚指数、中心静脉压(CVP)、右心室收缩压 (RVSP) 显著升高,右心室压最大上升速率 (RVdp/dt) 显著降低,右心室心肌细胞排列紊乱、肌浆溶解,并可见空泡变性,右心衰竭模型成功.E1组血清Cx43水平、右心室心肌组织Cx43和Cx43 mRNA均较N1组降低.E2组与N2组比较,CVP、RVSP显著增高,RVdp/dt显著降低,血清Cx43水平、右心室心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA均降低.E2组与E1组比较,右心室肥厚指数、CVP、RVSP持续增高,RVdp/dt持续降低,E2组血清Cx43、右心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA进一步降低.C1组、C2组与E2组比较,血流动力学改善,右心室肥厚减轻,血清Cx43水平、右心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA均增高.C1组、C2组分别与C3组比较,血流动力学、血清Cx43水平、右心室心肌组织Cx43蛋白和Cx43 mRNA表达比较差异均无统计学意义.结论　PAH致右心衰竭时,Cx43参与心力衰竭的发生发展,随着心力衰竭的加重,其表达进一步降低;Cx43在幼鼠血清、右心室心肌组织中的水平具有一致性;卡托普利或坎地沙坦可能通过促进Cx43的表达缓解压力负荷性右心衰竭,二者比较无明显差异,联合用药并不能提高疗效.     

先天性巨结肠患儿肠壁缝隙连接蛋白43的分布

目的 观察缝隙连接蛋白43(Cx43)在先天性巨结肠(HD)肠壁中的分布,探讨Cx43与HD发病的关系.方法 HD患儿42例.男33例,女9例;年龄2个月～10岁.均为散发病例,全部取材经组织病理学检测符合HD诊断,包括常见型30例,短段型12例;其中并回肠闭锁1例,并先天性肠扭转不良2例.同时取5例肠套叠患儿(30 d～8岁;男4例,女1例)作为对照组.采用免疫组织化学方法观察42例经病理诊断为HD的标本肠壁各层之间Cx43蛋白分布情况,取阳性细胞计数进行半定量分析.采用SPSS 11.5软件进行统计学分析.结果 HD狭窄段(无神经节细胞肠段)肠壁肌层内Cx43的表达缺失,各层中几乎未见Cx43的表达,与HD扩张段(有神经节细胞肠段)及健康对照组间的差异有统计学意义(P＜0.01).HD移行段肠壁环肌层和环肌层与纵肌层交界处Cx43有中等强度表达,与扩张段、狭窄段之间有明显差异(P＜0.01).HD扩张段肠壁环肌层与纵肌层交界部位Cx43呈强阳性分布,黏膜下层和纵肌层未见或少见Cx43表达.HD扩张段和健康对照组肠壁环肌层和环肌层与纵肌层交界处Cx43有中至强度表达,二组肠壁肌层内Cx43表达无显著性差异(P＞0.05).结论 Cx43表达的缺失或减少及缝隙连接结构的破坏,可能是使细胞间物质、电信号的传递障碍而导致HD发病的原因之一.     

缝隙连接蛋白43在扩张型心肌病大鼠心肌中的表达及其与左室射血分数的相关性

目的探讨缝隙连接蛋白43(Cx43)在扩张型心肌病(DCM)模型大鼠左侧心室肌的表达及其与左心室射血分数(LVEF)的相关性。方法应用多柔比星腹腔注射建立DCM大鼠模型;分别于造模成功当时(8周末)、造模4周后(12周末)检测正常对照组、DCM组的LVEF,留取左侧心室肌检测Cx43 mRNA表达和免疫组化观察Cx43的分布。结果与对照组比较,DCM组在8周末、12周末Cx43 mRNA、Cx43平均灰度值及LVEF均明显下降,12周末下降最明显,差异均有统计学意义(P均0.05)。Cx43 mRNA、平均灰度值与LVEF呈正相关(r=0.91、0.89,P均0.01)。结论 DCM大鼠心肌Cx43表达明显减少且分布紊乱,Cx43可能参与了DCM的病理过程。     

星形胶质间隙连接和连接蛋白

间隙连接(CJ)是人体及动物细胞膜上的一种特殊结构,构成相邻细胞间的细胞CJ通讯,其关键成分是连接蛋白(Cx).星形胶质是中枢神经系统中数量最多的细胞,不仅起支持作用,而且在保持神经系统功能方面发挥巨大作用,其中许多方面需要依靠Cx表达以及由Cx组成的Cx半通道和CJ.星形胶质之间的CJ主要由Cx43构成.该文就Cx的结构,特别是Cx43基因表达和调控及其生理功能进行总结.     

结构性心脏病介入治疗相关瓣膜损伤的防治北大核心CSCD

结构性心脏病是指以心脏和大血管结构异常为主要表现的一大类心脏病,既包括先天性疾病也包括后天获得性疾病,主要包括先天性心脏病、获得性心脏瓣膜病和心肌病。近年来,结构性心脏病的介入手术治疗已逐渐成熟并广泛应用于临床。由于患者心脏瓣膜及瓣膜相关组织较为脆弱或先天性发育不良,加之手术复杂,介入手术操作可引起相关瓣膜损伤并发症,该文就结构性心脏病介入治疗相关的瓣膜损伤原因及其防治措施进行介绍。     

Expression of Cx43-related microRNAs in patients with tetralogy of Fallot

Background

Abnormal expression of connexin 43 (Cx43) has been reported to play an important role in the development of conotrunccal anomalies. However, less is known about the underlying reason for its abnormal expression. MicroRNAs (miRNAs), as an important part of gene expression regulation, have been implicated in some cardiac diseases. This study aimed to investigate the expression of Cx43 and its related miRNAs in patients with tetralogy of Fallot (TOF), and illustrate the potential role of abnormal miRNAs regulation to Cx43 expression in the pathology of TOF.

Methods

Real-time polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the expression of Cx43 and 10 Cx43-related miRNAs in the myocardium from 30 TOF patients and 10 normal controls. Immunohistochemistry was used to detect Cx43 protein expression. Putative miRNA binding sites in the 3’UTR of Cx43 were examined in 200 TOF patients and 200 healthy individuals, using Sanger sequencing, to exclude sequence variations resulting in binding difficulties of miRNAs.

Results

Cx43 mRNA and protein expression in the myocardium tissue was significantly increased in TOF patients. The expression of MiR-1 and 206 was significantly decreased in the TOF patients as compared with the controls (P<0.05). No obvious difference was observed in the expression of the other 7 miRNAs between the TOF patients and controls (P>0.05). No meaningful sequence variation was detected in the putative miR1/206 binding sites in the 3’UTR of Cx43.

Conclusions

This study indicated that miR-1 and 206 is down-regulated in TOF patients, which may cause an up-regulation of Cx43 protein’s synthesis. It provided a clue that miR-1 and 206 might be involved in the pathogenesis of TOF, additional experiments are needed to determine if in fact, miR-1 and 206 contribute substantially to TOF.     

Expression of Connexin 43 in the hearts of rat embryos exposed to nitrofen and effects of vitamin A on it

Rats with experimental congenital diaphragmatic hernia (CDH) have heart hypoplasia and conotruncal and great vessel malformations that are likely related to disturbed neural crest developmental control. Neural crest cells communicate through intercellular gap junctions whose main protein is Connexin 43 (Cx43). The migration and participation of neural crest cells in heart development is likely influenced by this protein which might be also directly involved in myocardial development. Vitamin A is beneficial for heart hypoplasia in CDH rats. The aims of this study were to examine the status of Cx43 in the heart of embryonal rats exposed to nitrofen and to assess if vitamin A reverts these effects. Pregnant rats received either 100 mg nitrofen or olive oil on E9.5. Each group was divided into two subgroups according to the subsequent treatment with intragastric vitamin A (15,000 i.u.) or vehicle on E10.5 and E11.5. The pups were recovered on E13, E15, and E21 and the hearts were dissected out and pooled. Cx43 mRNA expression was determined by quantitative real-time PCR. Comparisons among groups were made with ANOVA and Bonferroni post hoc tests with a threshold of significance of P<0.05. In control rats Cx43 mRNA was minimally expressed on E13 and E15 and fully expressed on E21. Nitrofen significantly increased Cx43 mRNA on E15. Additional treatment with vitamin A tended to moderate this increase on E15. Cx43 was overexpressed in the hearts of nitrofen-exposed embryonal rats on day E15 of gestation. Vitamin A tended to normalize this expression. The mechanism of action of Cx43 deserves further investigation.     

胶质细胞源性神经营养因子、Cajal间质细胞和缝隙连接蛋白43在先天性巨结肠中的表达分布研究

摘要 目的 探讨胶质细胞源性神经营养因子（GDNF） mRNA、Cajal间质细胞（ICC）及缝隙连接蛋白43（Cx43）与先天性巨结肠(HD)发病的关系 。方法 依据纳入和排除标准选择2006年8月～2007年9月经病理诊断为HD的患儿，取手术切除结肠标本作为HD组，根据取材位置不同分为狭窄段（又分为短段型和常见型）、移行段和扩张段亚组。应用半定量RT PCR及免疫组化技术检测结肠组织GDNF mRNA水平和ICC、Cx43的分布，以肠套叠患儿手术结肠标本作为对照组。结果 研究期间HD组纳入42例，对照组纳入5例。①狭窄段亚组GDNF mRNA表达较扩张段亚组和对照组明显降低（P＜0.05）；扩张段亚组和对照组GDNF mRNA表达差异无统计学意义（P＞0.05）。狭窄段亚组中短段型较常见型GDNF mRNA表达低（P＜0.05）。② ICC在对照组和扩张段亚组主要分布于黏膜下丛和肌间丛，呈现连续性分布，相互连接形成网络状结构。ICC在狭窄段亚组结肠组织内的分布显著减少或消失，与对照组和扩张段亚组差异有极显著统计学意义（P＜0.001），肌间丛的网络状结构完全破坏，残存ICC形态异常；移行段亚组结肠组织内ICC的分布较对照组和扩张段亚组减少（P＜0.05），但较狭窄段亚组显著增加（P＜0.001），其形态部分接近正常，但肌间丛缺乏连续性分布，未能形成正常的网络状结构。③狭窄段亚组肠壁肌层内Cx43表达缺失，各层中几乎未见Cx43表达。移行段亚组肠壁环肌层与纵肌层交界处Cx43有中等强度表达。扩张段亚组肠壁环肌层与纵肌层交界处Cx43呈强阳性分布，黏膜下丛和肌间丛未见或少见Cx43表达。结论 GDNF mRNA表达异常、ICC分布减少和形态异常、Cx43表达缺失或减少和缝隙连接结构的破坏可能引起细胞间物质和电信号的传递障碍，而导致HD发病的原因之一。     

缝隙连接蛋白43在先天性巨结肠肠壁中的分布

目的观察缝隙连接蛋白43（Cx43）在先天性巨结肠症（HD）肠壁中的分布，探讨Cx43与HD发病的关系。方法运用免疫组化法观察30例HD患儿及30例对照组肠壁中Cx43的分布情况。患儿男26例，女4例，年龄1个月～8岁。其中短段型1例，普通型20例，长段型5例，全结肠型4例。另取3例新鲜组织在电镜下观察缝隙连接的分布情况。结果HD无神经节细胞肠段肠壁内Cx43的表达消失，与HD有神经节细胞肠段及对照组相比，具有显著性差异（P〈0．01）。HD有神经节细胞肠段肠壁环肌层及肌间层有阳性至强阳性的Cx43表达，纵肌层偶有表达或表达缺失，与对照组无显著差异（P〉0．05）。电镜下在HD无神经节细胞肠段未见缝隙连接的超微结构，而HD有神经节细胞肠段可见其存在。结论Cx43的表达缺失或减少，及缝隙连接结构的破坏可能与HD的肠动力障碍的发病机制有关。     

Approach to a Child with Congestive Heart Failure

Pediatric heart failure (PHF) is an important cause of mortality and morbidity. Whereas ischemic heart disease is the most important cause of heart failure in adults, congenital heart diseases (CHD) and cardiomyopathies are important etiologies of PHF. Management of PHF also differs from that of adults. Here authors have reviewed the literature on PHF with respect to etiology, symptoms, investigations and treatment strategies.

     

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目的探讨儿童感染性心内膜炎(IE)的临床特点、治疗方法及转归。方法回顾分析中南大学湘雅二医院儿科1980—2004年确诊的174例IE患儿的临床特点。174例患儿中男94例,女80例,年龄3个月至14岁,病程3d至4个月。结果(1)99例IE发生在先天性心脏病的基础上,35例发生在风湿性心脏病的基础上,35例发生在无器质性心脏病基础上,4例于先天性心脏病手术后发生,1例发生在肥厚性心肌病的小儿。(2)临床主要表现:发热(150例,86·2%)、肝大(74例,42·5%)、脾大(55例,31·6%)、贫血(65例,37·4%)、血沉增快(68例,39·1%)、多发性脏器栓塞(34例,17·8%)。细菌培养76例(76/174)阳性,阳性率43·7%,其中55例为葡萄球菌。(3)受累瓣膜以二尖瓣赘生物最多见,占48·3%。(4)并发症以顽固性心衰为主(25·2%),其次为神经系统并发症(13·2%),瓣膜腱索断裂最少见(0·57%)。(5)由于IE临床表现很不典型,病例早期被误诊为流感、肺结核、急性风湿热、肾小球肾炎等10余种疾病。(6)治愈率为60·9%,其中单用抗生素治疗治愈76例(71·6%),抗感染治疗联合外科手术治愈30例(28·3%)。死亡28例(16·1%),脑栓塞及顽固性心衰是IE最常见的死亡原因。结论发生IE的基础心脏病中,先天性心脏病跃居首位,风湿性心脏病逐渐减少。血培养、超声心动图检查有助于IE的诊断。对于IE最重要的治疗措施是应用抗生素,若经内科治疗效果不满意应尽早考虑外科治疗。