丙型肝炎病毒核心抗原检测技术的应用评价

目的 探讨丙型肝炎病毒核心抗原(HCV-cAg)检测技术筛查丙型肝炎的应用价值.方法 对门诊体检人群、无偿献血人群进行HCV抗体初检、复检,筛选HCV阳性血清标本、HCV可疑血清标本检测HCV-cAg;同时对单项丙氨酸氨基转移酶(ALT)增高的标本和血液筛查合格的标本进行HCV-cAg的检测.对HCV-cAg阳性标本进...     

ELISA检测丙型肝炎病毒核心抗原的临床应用价值

【目的】探讨丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原酶联免疫吸附试验（ELISA）检测方法的临床应用价值。【方法】采用HCV核心抗原ELISA试剂盒,对32例HCVRNA基因扩增试验检测为阳性的临床丙肝感染者血清进行检测,同时用抗-HCVELISA检测试剂盒作为对照进行比较。【结果】与HCVRNA PCR检测为对照,HCV抗原检测试剂盒的灵敏度为96．9％,特异性为96．7％。32例HCVRNAPCR检测阳性血清,用抗-HCV检测法进行检测,其中有5例阴性,将这5例阴性标本用HCV核心抗原检测法进行检测,其中4例为阳性。【结论】丙型肝炎核心抗原ELISA检测方法能缩短窗口期、敏感性高、特异性好、费用低廉,在临床上具有很好的推广前景。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的研制及初步应用

目的　研制丙型肝炎病毒核心抗原 (HCV cAg)ELISA检测试剂 ,用于诊断早期丙型肝炎。方法　用基因工程表达的HCV cAg ,免疫Balb/c小鼠 ,制备抗HCV cAg单克隆抗体 ,建立检测HCV cAg双抗体夹心酶联免疫吸附试验 (ELISA) ;以此检测 12 5份抗 HCV、抗 HIV、抗 TP阴性 ,但单项ALT高的献血者血浆。结果　 12 5份单项ALT高的献血者血浆中检出 9份HCV cAg阳性。结论　HCV cAg双抗体夹心ELISA试剂 ,有望用于早期丙型肝炎诊断。     

4种国产丙型肝炎病毒抗体酶联免疫诊断试剂的检测结果分析

目的探讨不同国产酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂在实际血样丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测中的效能。方法采用4种不同厂家的ELISA试剂对59例初筛为抗-HCV阳性的标本分别进行抗-HCV检测,并对不同方法的检测结果进行比较分析,观察不同试剂间检测结果的一致性。结果 28 500份血样检测到阳性标本59例,阳性检出率为0.2%,4种试剂的检测结果具有较高的吻合性。结论随着现代生物技术的快速发展,国产抗-HCV酶法试剂在灵敏性、特异性、重复性、稳定性等方面都有了很大的提高。国产抗-HCV试剂广泛应用于临床检验,可以作为HCV感染的补充试验。     

化学发光法和酶联免疫吸附法检测丙型肝炎病毒抗体的比较分析

目的 探讨化学发光法(CLIA)和酶联免疫吸附试验(ELISA)对丙型肝炎病毒(HCV)抗体的检测意义.方法 分别用CLIA法和ELISA法检测2 460例血清样本,收集CLIA/ELISA法检测阳性及可疑血清标本,以重组免疫印迹法(RIBA)最终确认.结果 两种方法共筛选57例CLIA/ELISA法检测阳性及可疑血清...     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂盒的临床应用评价

目的采用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒核心抗原（HCVcAg）。方法对苏州市吴中人民医院2011年2月至2012年2月的2 523份输血、手术前住院患者血清标本进行抗-HCV初、复检检测。将初、复检均阳性的其中10份、仅初检阳性的15份和仅复检阳性的17份血清标本分别采用ELISA检测HCVcAg和采用RT聚合酶链反应（RT-PCR）检测HCV。结果 ELISA检测HCVcAg阳性结果为4份（40%）。32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用ELISA检测HCVcAg阳性6份,阳性率为18.75%。采用RT-PCR荧光定量检测HCV 10份初、复检抗-HCV均阳性的血清标本结果均为阳性,32份仅初检或复检抗-HCV阳性标本采用RT-PCR荧光定量检测HCV阳性5份,阳性率为15.63%。结论 HCVcAg的敏感性与RT-PCR荧光定量检测HCV类似,能对HCV的感染作出早期诊断。     

酶联免疫吸附试验检测丙型肝炎病毒抗体影响因素分析

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测丙型肝炎病毒抗体（抗HCV）目前已是血站、医院的常用检测方法,虽然该方法操作简单、灵敏度高,但在实际操作中,ELISA检测抗-HCV结果假阴性、假阳性问题还是比较常见,给临床诊断、治疗带来很大困难。影响ELISA检测抗-HCV的因素较多,现就比较常见的影响因素进行分析总结。     

双抗原夹心酶联免疫技术检测丙型肝炎病毒抗体

1993年3月，国家卫生部下发文件要求对献血员进行抗HCV抗体的检测，随后有10几家检测HCV抗体的ELISA试剂上市，并进行批批检定，但全是间接ELISA法。由于间接法技术自身的缺陷及各生产厂家的产品存在一定的质量问题，导致了一些误诊和漏检。为此，应从根本上解决试剂本身的质量问题，建立双抗原夹心ELISA技术检测抗HCV抗体可大大提高检测试剂的特异性和敏感性。目前双抗原夹心法大多用于检测抗HIV和Tp抗体。此类试剂的敏感性和特异性均优于标记抗人免疫球蛋白的间接法。而丙型肝炎病毒抗体的检测仍采用间接ELISA技术，目前已有快速金标试剂采用双抗原夹心法原理，通过免疫层析检测抗HCV抗体。但灵敏度较低，不能用于献血员的筛选。我们通过对基因工程抗原进行改造，以适应标记辣根过氧化物酶，建立双抗原夹心ELISA法检测抗HCV抗体。     

三种国产抗-HCV酶联免疫诊断试剂检测结果与电化学发光法比较

目的探讨A、B和C三种不同国产酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂检测丙型肝炎病毒抗体（抗-HCV）结果的差异性,并将检测结果与电化学发光法检测结果进行比较。方法随机挑选临床检测样本94例。所有样本再使用B、C和Roche电化学发光法试剂盒进行检测。ELISA试剂都使用各自的试剂盒S/CO值进行阴阳性判断,电化学发光检测结果判断以仪器的COI作为判断标准,结果〉1为检测有反应性。结果 A、B、C和电化学发光检测的阳性率分别为84.04%（79/94）、35.11%（33/94）、25.53%（24/94）和39.36%（37/94）,A试剂显著高于电化学发光法,而C试剂显著低于电化学发光法。A、B、C和电化学发光检测的结果一致性分别为55.32%（52/94）、95.74%（90/94）和86.17%（81/94）。将A试剂盒检测的结果分为阴性组（〈1）、弱阳性组（1~8）、阳性组（〉8）三个组,阴性和阳性组四种试剂检测结果符合率较好,而弱阳性组符合率较低。结论 3种国产试剂对阴性和阳性标本与Roche电化学发光法检测符合率很高,弱阳性标本符合率则存在差异,对于弱阳性标本建议使用确诊试验。     

不同小鼠IgG对丙型肝炎病毒核心抗原酶联免疫法检测的影响

目的获得最适合产品配制的小鼠-IgG。方法采用不同厂家的小鼠-IgG分别配制成不同的抗HCV-cAg酶结合物溶液,用酶联免疫法测定OD值。结果不同厂家的小鼠-IgG配制成的抗HCV-cAg酶结合物溶液,其检测结果有区别。结论配制抗HCV-cAg酶结合物溶液前应检测小鼠-IgG与产品的适配性。     

慢性丙型病毒性肝炎患者血清细胞因子水平检测及临床意义

目的 探讨慢性丙型病毒性肝炎患者血清白介素-10(IL-10)、白介素-12(IL-12)和白介素-18(IL-18)水平与患者病情严重程度的关系及意义.方法 采用ELISA方法检测137例慢性丙型肝炎患者和95例健康志愿者的血清IL-10、IL-12和IL-18水平.结果 患者血清IL-10、IL-12和IL-18水平与健康对照者比较差异均有统计学意义(P＜0.05).且随着病情进展,IL-10和IL-18水平呈增高趋势,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 慢性丙型病毒性肝炎患者血清IL-10、IL-12、IL-18水平在判断慢性丙型病毒性肝炎炎性损伤及病情进展方面有一定的临床价值.     

双抗原夹心酶联免疫吸附试验对丙型肝炎病毒抗体检测灵敏度及特异性的影响

目的:探究双抗原夹心酶联免疫吸附试验对丙型肝炎病毒抗体(抗-HCV)检测灵敏度及特异性的影响。方法:选取2016年5月~2017年4月我院进行手术和血液透析前抗-HCV检测的患者270例,经血液筛查(荧光定量PCR法)抗-HCV阳性12例,抗-HCV阴性258例,采用双抗原夹心酶联免疫吸附法(ELISA)和间接ELISA分别对270例患者血清进行抗-HCV检测,比较两种检测方法的特异性、灵敏度。结果:双抗原夹心ELISA法灵敏度、特异性均高于间接ELISA法(P<0.05)。结论:双抗原夹心酶联免疫吸附试验可提高丙型肝炎病毒抗体检测灵敏度及特异性,可作为临床血液标本筛查首选方法。     

用酶联免疫夹心法测定肝炎患者血清丙型肝炎抗原

目的建立血清中丙肝病毒NS3抗原（HCAg-NS3）的酶免检测方法。方法以特异性强、敏感度高、识别不同HCAg-NS3抗原表位的HCAg-NS3单克隆抗体和高效价的纯化抗-HCV分别作为包被抗体和酶标记抗体，采用夹心ELISA法测定血清中HCAg-NS3抗原。结果优化了酶免疫反应条件；该方法对HCAg-NS3的最低检测限为1—2ng／ml；批内（n=13）及批间（n=3）变异系数（CV）分别为4．51％和5．64％；对52例抗-HCV阳性血清测定HCAg-NS3抗原的检出率为21．2％，对15例HCAg-NS3阳性标本测定HCV RNA的检出率为60％，1350例抗-HCV阴性的其他类型肝炎患者血清标本中，HCAg-NS3检出率为1．7％，50例正常人血清标本的HCAg-NS3抗原测定结果均为阴性。结论该方法敏感性较高，特异性、重复性和稳定性均良好，可以作为早期诊断HCV感染的有效方法。     

基层医院丙型病毒性肝炎筛查与控制情况的探讨

目的 了解基层医院对丙型病毒性肝炎筛查情况,探索早期筛查加以控制丙型肝炎的重要性.方法 对2009年1月至2011年12月来院诊疗的患者丙型肝炎筛查和诊疗情况进行回顾性调查,抗-HCV检测应用酶联免疫法(ELISA),HCV-RNA采用PCR方法检测.结果 3年共检测丙型肝炎抗体7 920例,抗-HCV阳性者共175例,阳性率2.21%,其中进行HCV-RNA检测者39例,阳性者36例,相对规范治疗的8例.结论 注重基层医院丙型肝炎病毒筛查,提高医务人员对丙型肝炎的认知率,对抗-HCV阳性患者进行必要的指导和干预,有效地控制丙型肝炎的感染.     

酶联免疫吸附测定法检测H CV抗原与抗体的结果分析

目的：探讨应用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测丙型肝炎病毒（HCV）抗原、抗体。方法将 HCV-RNA PCR法检测的50例标本分为阳性组（34例,HCV-RNA阳性）、阴性组（16例,HCV-RNA阴性）,对所有标本应用ELISA法进行HCV抗原与抗体检测,对结果进行统计分析。结果阳性组 HCV 抗体阳性率、抗原阳性率均显著高于阴性组,差异均有统计学意义（P＜0．05）。阳性组中,HCV抗原及抗体联合检测与 HCV-RNA检测结果的符合率为94．12％（32/34）,与 HCV抗原、抗体单独检测比较,差异有统计学意义（χ2＝20．4424,P＝0．0000）。结论 ELISA法检测HCV抗原与抗体,有助于临床准确诊断丙型病毒性肝炎。     

丙型肝炎病毒抗体酶联免疫试验S/CO比值与补充试验阳性的相关性研究进展

丙型肝炎病毒（HCV）是1989年被发现的，1990年美国第一代抗-HCV酶联免疫吸附试剂（EIA）获得美国食品药品管理局（FDA）批准，目前第三代试剂的灵敏度和特异性都有很大提高。我国的抗-HCV诊断试剂自1993年面世以来，经广大科技工作者和生产单位努力，经过国家“八五”、“九五”攻关，其质量也不断改进。     

献血者丙型肝炎病毒（HCV）核心抗原的检测

目的：探讨在无偿献血者中开展丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—CAg）检测的应用价值。方法：采用美国强生公司HCV核心抗原（HCV—CAg）酶联免疫分析（ELISA）试荆，对无偿献血者样进行了检测与结果分析。阳性者用荧光定量PCR方法进行HCV检测，并将抗体检测、抗原检测、病毒核酸检测（nucleic aeldtesting，NAT）的检测结果进行比较。结果：676份合格血样的HCV—CAg结果均为阴性。63份抗-HCV阳性中有11例HCV—CAg阳性，138例ALT阳性中有2例阳性，合计检出13例HCV C抗原阳性标本。经荧光定量PCR检测有12例HCVRNA阳性，其中11份抗-HCV阳性，ALT阳性的1份。结论：现行的抗-HCV检测方法有可能出现HCV感染的漏检，HCV—CAg检测方法可提高检测的灵敏度。应在献血者中开展该检验项目．     

温湿度对高通量酶联免疫吸附实验测定丙型肝炎病毒抗体结果的影响

目的探讨实验室温湿度对高通量酶联免疫吸附实验(ELISA)测定丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)标准品结果的影响。 方法利用艾德康全自动酶免仪(ELISA 1100型),恒温24℃、不同相对湿度(%RH)(30%RH、40%RH,50%RH、60%RH、70%RH、80%RH、90%RH)条件下及湿度50%RH、不同温度(16℃、18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃、38℃、40℃)条件下,分别对HCV-Ab标准品进行测定。 结果在排除湿度影响的情况,在温度16℃～36℃条件下进行实验显示,HCV-Ab的S/CO值(分别为3.93±0.09,4.43±0.15,5.16±0.11,6.00±0.17,6.43±0.12,7.43±0.10,7.84±0.15,7.97±0.47,8.24±0.29,8.64±0.61,9.24±0.43)之间差异有统计学意义(F＝620.08,P＝0.000),且标准品S/CO值均随着温度升高而逐渐升高,HCV-Ab标准品的ELISA结果与温度呈正相关(r＝0.97)。36℃和38℃之间S/CO值(9.24±0.43,9.29±0.30)差异无统计学意义(t＝0.52,P>0.05),而38℃和40℃之间的S/CO值(9.29±0.30,8.65±0.77)差异有统计学意义(t＝8.17,P<0.05)。而在排除温度影响的情况,不同湿度(30%RH、40%RH,50%RH、60%RH、70%RH、80%RH、90%RH)间S/CO值结果(分别为7.20±0.18,7.09±0.32,5.83±0.27,5.38±0.24,3.91±0.28,3.27±0.49,3.04±0.85)差异有统计学意义(F＝985.64,P＝0.000),且标准品S/CO值随着湿度升高而逐渐降低,HCV-Ab标准品ELISA结果与湿度呈负相关(r＝－0.98)。 结论不同的温湿度对高通量ELISA检测结果有着重要影响,尽量选择温度不超过36℃和湿度较低的环境进行高通量的ELISA测定,综合考虑推荐全自动酶免仪工作温度范围控制在18℃～25℃之间,湿度控制在35%RH～50%RH之间。     

间接EIA检测抗丙型肝炎病毒核心抗原IgM抗体

以基因重组的ＨＣＶ核心抗原包固相载体,建立了ＥＩＡ检测抗ＨＣＶｃＩｇＭ抗体的方法。为去除特异性抗ＨＣＶ ＩｇＧ及类风湿因子的干扰,用关抗人ＩｇＧ作血清标本稀释液,用抗入ＩｇＭ μ Ｆ（ａｂ‘）２片段制备酶结合物。该ＥＩＡ法对部分ＨＣＶ感染者的检测结果显示,在急性丙型肝炎中抗ＨＣＶｃ ＩｇＭ有较高的检出率,并与ＨＣＶ ＲＮＡ的检出率密切相关,揭示此 ＨＣＶ早期感染的血清学标志,与ＨＣＶ的复制有关。     

丙型肝炎病毒核心抗原检测试剂的临床评价

[目的]对研制的丙型肝炎病毒核心抗原（HCV—cAg）ELISA检测试剂进行临床特异性及敏感性评价。[方法]制备抗HCV-核心区（Core）抗原四株单克隆抗体，研制出双抗体夹心检测HCV～core抗原酶联免疫检测（ELISA）试剂。三家临床单位收集抗HCV阴性样品3040份，HBsAg阳性100份，抗HIV阳性40份，从10万份抗-HCV筛查出临界样品28人份。[结果]3040份阴性样品检测有3份HCV—cAg阳性，3份经HCVPCR检测有1份阳性，100份HBsAg阳性，40份抗HIV阳性样本检测均为阴性，在10万份抗HCV抗体筛查样品中，选择28份抗-HCV检测临界样品进行HCV—cAg检测，有4份阳性，4份HCV—cAg阳性样品中有3份HCV—RNA检测阳性。[结论]研制的双抗体夹心HCV-核心抗原ELISA试剂具有很好的特异性和灵敏度。