氨溴索在大鼠胃内容物吸入性肺损伤中的抗炎作用

目的 探讨氨溴索在大鼠胃内容物吸入后肺组织损伤中的抗炎作用.方法 30只健康SD雄性大鼠随机分为3组:对照组、损伤组、氨溴索组.肺组织湿重/干重比、谷胱甘肽过氧化物酶活性、超氧化物歧化酶活性的测定;ELISA法测定血清及肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-10含量;光镜下观察肺组织结构变化.结果 与对照组比较,损伤组肺组织湿重/干重比增加(P＜0.05)、谷胱甘肽过氧化物酶活性及超氧化物歧化酶活性均降低(P＜0.05),血浆及肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10 (IL-1O)含量增高(P＜0.05);肺组织出现明显病理组织学损伤.与损伤组比较,氨溴索组肺组织湿重/干重比降低(P＜0.05)、谷胱甘肽过氧化物酶活性及超氧化物歧化酶活性均增高(P＜0.05),血浆及肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素10(IL-10)含量降低(P＜0.05).肺组织病理学损伤减轻.结论 氨溴索可通过抗氧化应激及抑制炎性细胞因子释放在大鼠胃内容物吸入性肺损伤中发挥抗炎保护作用.     

血红素加氧酶-1在肾脏疾病中的研究进展

血红素加氧酶（HO）是血红素降解的起始酶和限速酶,其主要功能是代谢血红素成为一氧化碳、胆绿素及铁离子。HO—1是HO的一种同工酶,为诱导型HO。HO-1及血红素代谢产物具有抗炎、抗氧化、抗凋亡、扩张血管等生理作用。HO-1作为一种重要的应激蛋白,在急性肾脏损伤、肾小球肾炎、肾间质纤维化等肾脏疾病的病理生理发展过程中发挥着重要的保护作用,有效地调控其表达有可能成为预防和治疗相关疾病的新策略。     

氨溴索对大鼠胃内容物吸入性肺损伤细胞凋亡的影响

目的研究细胞凋亡在胃内容物吸入性肺损伤中的作用机制,并初步探讨氨溴索对肺损伤发生后细胞凋亡的影响。方法 30只健康Sprague-Dawley大鼠随机分为3组:对照组、损伤组、氨溴索组。采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Bc12(B cell lymphoma/lewkmia-2)蛋白、Bax(Bc12 associated x protein)蛋白及Caspase-3蛋白表达;DNA原位末端标记(TUNEL)法测定肺组织细胞凋亡指数。结果与对照组比较,损伤组中Bax蛋白、Caspase-3蛋白表达增多,细胞凋亡指数增高;Bc12蛋白表达减少;差异均显著(P<0.05)。与损伤组比较,氨溴索组Bax蛋白、Caspase-3蛋白表达减少,细胞凋亡指数降低;Bc12蛋白表达增高;差异均显著(P<0.05)。结论细胞凋亡参与了胃内容物吸入后肺损伤发病过程,氨溴索在吸入性肺损伤组织中发挥抗细胞凋亡作用,可能机制在于调控死亡信号通路中Bax/Bc12蛋白表达相关。     

血红素加氧酶-1对急性肺损伤大鼠水通道蛋白1、5表达的影响

目的研究血红素加氧酶-1（HO—1）对ALI大鼠的保护作用和对肺组织水通道蛋白1（AQP-1）、AQP-5表达的影响及可能的调节机制。方法30只Wistar大鼠随机分成3组,即生理盐水组、ALI组和血红素组。尾静脉注射脂多糖后观察4h,光镜下观察肺组织病理改变程度,测定肺组织湿／干重比值,检测大鼠血清中IL-8及环磷酸腺苷（cAMP）的含量;免疫组化方法观察肺组织AQP-1、AQP-5及H0-1的表达。结果①与生理盐水组相比,ALI组肺组织湿／干重比值显著升高（P〈0．001）,血清IL8含量升高（P〈0．05）;血红素组肺组织湿/干重比值及IL-8含量均低于ALI组（P〈0．05）,肺损伤炎症减轻。②血红素组AQP-1、AQP-5的表达均显著高于ALI组（Pd0．001）。③ALI组大鼠血清cAMP含量与生理盐水组比较差异没有统计学意义,血红素组cAMP含量较ALI组增加（P〈0．05）。结论HO-1可以上调AQP-1、AQP-5的表达,减轻ALI时的肺水肿,可能是通过抑制炎症因子IL-8的表达实现的。cAMP可能参与了AI。I时AQP-1与AQP-5的调节。     

血红素加氧酶-1与糖尿病心肌病变

糖尿病心肌病变是一种独立于其它心血管并发症如高血压、冠心病之外的心脏病,氧化应激主导了糖尿病心肌病变的发病过程.血红素加氧酶(HO)-1,是体内参与亚铁血红素代谢的一种具有多种功能的微粒体氧化酶,在氧化应激过程中起重要的细胞保护作用,它的诱导已成为氧化应激的一种普遍标志.进一步探讨在糖尿病心肌病变中氧化应激与HO-1的关系对于预防和治疗糖尿病心肌病变具有重要价值.     

血红素加氧酶-1在糖尿病大鼠心肺、血管组织的表达

目的观察和比较糖尿病大鼠血管、心脏和肺脏组织中血红素加氧酶-1(HO-1)表达水平。方法应用RT-PCR和免疫组织化学技术检测链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠心脏、肺脏和胸主动脉HO-1mRNA和蛋白的表达。结果与对照组相比,糖尿病大鼠心脏和肺脏组织的HO-1表达增强,而胸主动脉HO-1表达无差异。结论与心脏、肺脏相比较,血管组织不能在糖尿病状态下有效表达HO-1。     

血红素加氧酶-1在肾脏功能及血压调节中的作用

Tenhunen于1968年首次提出血红素可被血红素加氧酶(HO)所降解。HO是一种最广泛存在的抗氧化防御酶,是热休克蛋白家族中的成员,主要分布于肺脏、肾脏、脾脏、肝脏、骨髓和网状内皮系统,是血红素代谢的限速酶,能催化血红素生成胆绿素、铁离子和一氧化碳(CO)[1]。HO-1作为其同工酶,     

氨溴索对吸入性肺损伤大鼠肺组织PBEF表达的影响及其抗炎作用

目的 探讨氨溴索对胃内容物吸入性肺损伤大鼠动物模型的抗炎保护作用.方法 54只健康Sprague-Dawley雄性大鼠随机分为3组:对照组、损伤组、氨溴索组.观察各组大鼠动脉血氧分压(PaO2)、肺组织湿重/干重比(W/D)、髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)活性变化;ELISA法测定血清肿瘤坏死因子α (TNF-α)含量;Western blot方法检测肺组织前B细胞克隆增强因子(pre-B-cell colony-enhancing factor,PBEF)蛋白表达;光镜下观察肺组织结构变化.结果 与对照组比较,损伤组各时相点PaO2降低(P＜0.05),肺组织W/D以及MPO活性增加(P＜0.05),血浆中TNF-α含量增高(P＜0.05);PBEF蛋白表达均增高(P＜0.05);肺组织出现明显病理组织学损伤.与损伤组比较,氨溴索组各时相点PaO2升高(P＜0.05),肺组织W/D以及MPO活性降低(P＜0.05),TNF-α含量降低(P＜0.05);PBEF蛋白表达均下降(P＜0.05);肺组织病理学损伤减轻.结论 在大鼠胃内容物吸入性肺损伤模型中,氨溴索可通过抑制肺组织PBEF表达、抑制炎症介质的释放发挥抗炎保护作用.     

血红素加氧酶-1在炎症性肠病中的研究进展

血红素加氧酶（heme oxygenase．HO）是血红素降解过程中的限速酶．可将血红素降解为等摩尔的胆绿素、游离铁和一氧化碳（CO）。近年研究发现HO-1具有抗炎、抗凋亡、抗增生效应。炎症性肠病（IBD）包括溃疡性结肠炎（UC）和克罗恩病（CD），其病因和发病机制尚未完全阐明。目前认为IBD主要系由免疫反应介导．并与遗传、环境因素密切相关。其特点之一是炎性细胞增多，炎性细胞因子表达增加。新近研究证实，HO-1的诱导表达对实验性结肠炎动物模型有重要保护作用，能减轻IBD由免疫系统活化所致的组织损伤，预示着HO-1在IBD的治疗中具有广泛应用前景。     

血红素加氧酶-1对大鼠体外循环术后肺组织抗炎性损伤的研究

【】 观察钴原卟啉诱导肺组织血红素加氧酶-1（HO-1）表达在大鼠体外循环术后肺组织损伤中发挥的抗炎性损伤作用,并对其作用机制进行分析。方法 雄性Wistar大鼠144只,随机分为3组：A组（对照组）、B组（钴原卟啉,CoPP）、C组［钴原卟啉（CoPP）+锌原卟啉（ZnPP）］。建立改良大鼠体外循环肺损伤模型。制模前24 h,A组大鼠腹腔注射生理盐水,B组腹腔注射CoPP（5 mg/kg）,C组腹腔注射CoPP（5 mg/kg）和ZnPP（5 mg/kg）。制模成功后采用断颈法分别于体外循环前（T0）,体外循环结束即刻（T1),体外循环后2 h（T2）、6 h（T3）、12 h（T4）、24 h（T5）将大鼠处死,每个时间点8只。取肺组织检测相应的指标。用多聚甲醛来固定部分右肺组织,然后用石蜡包埋, 以用于HO-1蛋白表达的免疫组化方法测定。剩余肺组织置于液氮中冻存备用,用于检测肺组织匀浆胆红素的含量,酶联免疫吸附（ELISA）法检测肿瘤坏死因子α（TNF-α）表达。结果 B组大鼠肺组织中HO-1蛋白表达在体外循环（CPB）开始前后均有明显增加,其活性测定结果与蛋白表达结果一致,在各时间点均强于A组和C组（P<0.05）,各组HO-1蛋白表达在T2期最高,A、B、C三组分别为0.1852±0.070、0.2873±0.091、0.1917±0.082。B组大鼠肺组织TNF-α的含量在CPB后各时间点均低于A组和C组（P<0.05）,三组TNF-α的含量在T2期最高,分别为：480.42±41.67 pg/mL、358.19±32.35 pg/mL、466.53±39.42 pg/mL。结论 CoPP可以诱导肺组织HO-1的高表达,而且经过CPB后仍保持较高的表达。内源性HO-1高表达在体外循环肺损伤中具有抗炎作用,可有效抑制TNF-α炎性细胞因子分泌,从而减轻体外循环术后肺的炎性损伤。     

血红素加氧酶-1在肝脏缺血再灌注损伤研究中新进展

肝脏缺血再灌注损伤(hepatic ischemia reperfusion injury,HIRI)的分子机制迄今尚未完全清楚。血红素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)是体内血红素降解的起始酶和限速酶,在体内分解血红素生成一氧化碳(CO)、胆绿素和自由铁。HO-1系统具有抗炎、抗氧化、抗凋亡和促进细胞存活、循环稳定和免疫调节的作用,在HIRI中发挥着至关重要的作用。通过药物或基因工程的方法诱导产生HO-1,能减轻HIRI,目前这一方向已经成为该领域的研究热点。     

实验性肝损伤大鼠肝脏HO-1的表达及CO水平变化

目的研究急性肝损伤时大鼠肝脏HO-1的表达情况和CO水平,探讨HO-1和内源性CO在大鼠急性肝损伤中的作用.方法制备急性四氯化碳肝损伤模型,采用RT-PCR和免疫组化法测定不同时间点大鼠肝脏HO-1 mRNA和蛋白的表达情况;测定各时间点肝组织SOD、MDA含量变化,同时测定股静脉血中HbCO水平和ALT、AST肝功能指标.结果HO-1mRNA在正常大鼠有弱表达,染毒3 h后表达显著增强,于24 h时间点表达最强,与对照组相比差异非常显著(P＜0.01);免疫组化结果显示;HO-1蛋白在正常大鼠表达较低或无,染毒3h后即有明显表达,16至48h的时间点内表达均显著增强,主要定位于肝实质细胞、库普细胞的胞浆内.对照组HbCO水平极低,给予四氯化碳3 h后HbCO水平开始升高,此后各时间点均明显高于对照组,差异有显著性,这与HO-1表达情况相一致.此外,染毒后大鼠血清ALT、AST和MDA明显升高,SOD活性则显著降低,和对照组相比差异均十分显著.结论大鼠急性肝损伤后出现HO-1表达持续上调和血中CO水平迅速增高,提示HO/CO系统参与急性肝损伤的病理生理过程,其表达增加可能对机体有重要调节作用.     

类叶升麻苷在体内诱导血红素加氧酶-1的表达

目的探讨类叶升麻苷(AS)是否在体内诱导血红素加氧酶-1(HO-1)的表达。方法 AS 12.5 mg/kg和25 mg/kg以腹腔注射的方式给予SD大鼠,在特定时间处死大鼠,取大脑皮层和纹状体组织以及肾脏和肝脏组织。提取组织蛋白,Western印迹方法检测HO-1。结果与正常对照组相比,AS可在皮层和纹状体中剂量依赖性诱导HO-1的表达上调,在外周肾脏和肝脏组织中AS剂量依赖诱导HO-1的表达上调。结论 AS可在体内诱导HO-1的表达。     

急性肝损伤大鼠肝脏血红素加氧酶-1/一氧化碳系统的变化及意义

目的:研究急性肝损伤时大鼠肝脏HO-1/CO系统的变化规律,探讨HO-1和内源性CO的作用机制及其病理生理意义.方法:采用D-氨基半乳糖(GalN)和脂多糖(LPS)联合腹腔注射制备大鼠急性肝损伤模型,动态测定各时间点(3,6,12,24,36 h)大鼠肝脏HO-1活性和蛋白表达情况,测定肝脏CO浓度以及血清ALT,AST水平和肝组织SOD活性、MDA含量变化.结果:Ga1N和LPS联合注射成功诱导了大鼠急性肝损伤,表现为染毒24 h时大鼠血清ALT,AST水平以及肝组织MDA浓度显著升高(10872.5±708.5 nkat/L,9246.8±814.7 nkat/L,5.06±1.21 μmol/g vs 1043.5±247.4 nkat/L,1278.6±273.8 nkat/L,2.03±0.59 μmol/g,均P＜0.01),SOD活性明显下降(813.7±168.3nkat/mg vs 1248.2±84.9 nkat/mg,P＜0.01),HE染色显示肝细胞出现严重损伤.染毒3-24 h大鼠肝脏HO-1活性明显增强,6-24 h呈现一定的时间依赖方式(4.02±0.74,5.97±1.51,6.13±1.18 μmol/g vs 2.86±0.41 μmol/g);Westernblot测定结果亦显示,HO-1蛋白表达显著增强,24 h时明显高于正常对照组(1.87±0.39 vs0.37±0.09,P＜0.01).正常大鼠肝脏的CO浓度极低,染毒后以时间依赖方式开始升高,并显著高于正常对照组(0.373±0.112,0.474±0.152,0.513±0.193 μmol/g vs 0.172±0.041 μmol/g,P＜0.01),这与HO-1表达情况相一致.结论:大鼠急性肝损伤时出现HO-1活性增加和蛋白表达持续上调以及CO浓度迅速增高,提示HO-1/CO系统参与急性肝损伤的病理生理过程,其表达增加可能对机体有重要调节作用.     

球囊损伤对大鼠颈动脉血红素氧合酶-1表达的影响

目的:观察球囊损伤对大鼠颈动脉血红素氧合酶-1(HO-1)表达的影响,以探讨HO-1在血管损伤反应过程中的意义。方法:通过逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)、蛋白印迹杂交(Western blotting)及免疫组化技术观察大鼠颈动脉球囊损伤后HO-1mRNA水平、蛋白质表达及其蛋白分布的动态变化。结果:正常大鼠颈动脉仅见微量HO-1 mRNA表达,球囊损伤后1 d HO-1 mRNA表达达高峰,4、7和14 d逐渐降低,HO-1蛋白表达与HO-1 mRNA表达基本一致,生成的HO-1蛋白主要分布在血管平滑肌细胞胞质中,并随新生内膜的形成和增厚,由中膜向增厚内膜中迁移。结论:球囊损伤可引起颈动脉HO-1表达增加,提示HO-1为血管自身抗损伤反应机制之一。     

血红素加氧酶-1在门静脉高压性胃病患者胃黏膜的表达

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)在肝硬化门静脉高压性胃病(PHG)患者胃黏膜的表达情况及其意义.方法 分别采集22例正常受试者(对照组)、20例门静脉高压(PHT)患者(PHT组)和22例PHG患者(PHG组)的胃黏膜标本,观察胃黏膜组织学变化,测定门静脉血流量(PVF).应用免疫组织化学法和Western blot方法检测HO-1蛋白在胃黏膜组织的表达情况,并分析HO-1蛋白与PVF、内镜下PHG严重程度的相关性,以及内镜下PHG严重程度与临床参数的相关性.结果 PHG组和PHT组患者胃黏膜中HO-1蛋白表达明显高于对照组(P＜0.05),而PHG组与PHT组之间比较差异无统计学意义(P＞0.05).PHG患者胃组织HO-1蛋白表达与内镜下PHG严重程度积分呈显著正相关(r =0.459,P＜0.05).内镜下PHG严重程度积分与食管静脉曲张程度(r=0.059,P＞0.05)、Child-Pugh分级(r=-0.001,P＞0.05)均无显著性相关.PHG组与PHT组患者的胃黏膜组织HO-1蛋白表达与PVF无显著性相关(r=0.071,P＞0.05).结论 HO-1蛋白在PHG患者胃黏膜中呈高表达,参与了PHG患者胃黏膜血液循环紊乱的发生.     

Heme oxygenase-1 alleviates ischemia／reperfusion injury in aged liver

AIM: To investigate if ischemia/reperfusion (I/R) injury in aged liver could be alleviated by heme oxygenase-1 (HO-1). METHODS: Three groups of SD rats (16 mo old) were studied. Group 1: control donors received physiological saline 24 h before their livers were harvested; group 2: donors were pretreated with hemih 24 h before their livers were harvested; and group 3: donors received hemin 24 h before their livers were harvested and zinc protoporphyrin (ZnPP, HO-1 inhibitor) was given to recipients at reperfusion. The harvested livers were stored in University of Wisconsin solution (4℃) for 6 h, and then transplanted to syngeneic rats. Serum glutamic oxaloacetic transaminase (SGOT), apoptotic cells, and apoptotic gene were measured 3, 6, 12, 24, 48 h after reperfusion. We measured the apoptotic index by TUNEL, determined the expression of antiapoptotic Bcl-2 and proapoptotic (caspase-3) gene products by Western blot.. RESULTS: After 3, 6, 12, 24, and 48 h of reperfusion, the SGOT levels (584.4±85.8 u/L, 999.2±125.2 u/L, 423.4±161.3 u/L, 257.8±95.8 u/L, and 122.4±26.4 u/L) in hemin group were significantly (all P<0.05) lower than those in saline group (1082.2±101.2 u/L, 1775.2±328.3 u/L, 840.4±137.8 u/L, 448.6±74.3 u/L, and 306.2±49.3 u/L). Liver HO-1 enzymatic activity correlated with beneficial effects of hemin and deleterious effects of adjunctive ZnPP treatment. Markedly less apoptotic (TUNEL+) liver cells 3, 6,12, 24, and 48 h after reperfusion (5.16±0.73, 10.2±0.67, 9.28±0.78, 7.14±1.12, and 4.78±0.65) (P<0.05) could be detected in hemin liver grafts, as compared to controls (7.82±1.05, 15.94±1.82, 11.67±1.59, 8.28±1.09, and 6.36±0.67). We detected the increased levels of Bcl-2 (1.5-fold) expression and compared with saline controls. These differences were most pronounced at 12 h after transplantation. In contrast, an active form of proapoptotic caspase-3 (p20) protein was found to be 2.9-fold lower at 24 h in hemin-pretreated group, as compared to saline liver transplant controls. CONCLUSION: HO-1 overexpression can provide potent protection against cold I/R injury. This effect depends, at least in part, on HO-1-mediated inhibition of antiapoptotic mechanism.