氧化铝脱色纯化虫草素工艺研究

目的 探索氧化铝柱层析脱色纯化蛹虫草培养基中虫草素的工艺.方法 以蛹虫草小麦培养基原料,水加热提取,采用酸性氧化铝干柱层析、醇沉去杂、重结晶来纯化得到高纯度虫草素.结果 氧化铝柱层析参数:层析剂为酸性氧化铝,30％乙醇为洗脱溶剂,洗脱用量为2倍柱体积,酸性氧化铝用量为蛹虫草小麦培养基重量:酸性氧化铝重量为1g∶3g.氧化铝脱色液浓缩,浸膏乙醇超声溶解,沉淀过滤,滤液冷置结晶,晶体重结晶即得白色针状虫草素晶体.结论 该工艺可简捷有效地将蛹虫草小麦培养基中0.2％虫草素纯化至97％虫草素,同时也适合于虫草发酵液、虫草菌丝体虫草素的分离纯化.     

虫草素的研究与开发进展

综述了国内外虫草素(3’-脱氧腺苷)药理作用与产品开发状况。虫草素具有抑制微生物生长、抗肿瘤、调节免疫、抗炎等药理作用,以虫草素为主要成分的新药已在临床试用于白血病的治疗。虫草素的生产主要有化学合成法和液体发酵法,通过超声提取、树脂或活性碳吸附分离纯化,高效液相色谱法检测纯度。超临界萃取技术在虫草素的分离纯化中应用日趋广泛,高效毛细管电泳法在虫草素定量检测上发展也很快。通过对虫草素的深入研究,有望开发出系列保健食品和药品。     

蛹虫草化学成分研究

从蛹虫草菌丝中分离出六种化学成分。经结构鉴定为β-谷甾醇,麦角甾醇,D-甘露醇,腺嘌呤,腺苷及虫草素(3′-脱氧腺苷)。从蛹虫草菌丝中分离出虫草素、腺嘌呤及麦角甾醇尚属首次。     

高速逆流色谱法分离制备蛹虫草发酵液中虫草素

目的 以蛹虫草发酵液虫草素粗提物为原料,对高速逆流色谱(HSCCC)分离制备虫草素条件进行研究.方法 利用HPLC测定分配系数法结合分析型HSCCC对分离虫草素的溶剂体系进行筛选,确定虫草素分离的最佳溶剂体系为醋酸乙酯-正丁醇-0.5％氨水(2∶3∶5),并运用此溶剂体系,上相作为固定相,下相作为流动相,利用制备型HSCCC分离制备蛹虫草发酵液中虫草素.结果 400 mg虫草素粗产品通过制备型HSCCC一次分离制备获得质量分数为98.7％的虫草素产品43.8 mg.结论 该法效率高,操作简单,为虫草素的大量制备提供了重要参考.     

酶法提取蛹虫草中虫草素的研究

目的 研究UPLC浏定虫草素的方法及酶法提取蛹虫草中虫草素的工艺条件.方法 对酶种类、酶用量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值进行考察,确定最佳提取工艺.结果 中性蛋白酶提取蛹虫草中虫草的最佳工艺为:酶用量1.5%,酶解温度50℃,酶解pH值5.5,酶解时间60 min.结论 该工艺条件下,虫草素提取得率为0.732%,与未加酶的热水浸提相比,虫草素提取得率增加6.2倍.     

高效液相色谱法测定人工虫草菌丝中腺苷和虫草素的含量

为定量测定蛹虫草菌丝体中腺苷和虫草素的含量，用ＹＷＧＣ_１８不锈钢柱，磷酸二氢钠氢氧化钠缓冲液（ｐＨ６.８，加１％四氢呋喃）为流动相，高效液相色谱法同时分离和测定了人工蛹虫草菌丝中腺苷和虫草素，并考察了提取方法。二组分的线性关系良好，回收率满意。     

储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响

目的:研究储存时间对腺苷和虫草素在柞蚕蛹虫草中分布和含量的影响。方法:采用RP-HPLC法分别测定柞蚕蛹虫草子实体、菌核及整草中腺苷和虫草素含量,并与相同储存时间的米饭虫草进行比较。结果:储存1年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素的含量顺序为子实体菌核;总量顺序为菌核子实体。储存2年的柞蚕蛹虫草腺苷和虫草素含量有所降低,其分布规律以及总量顺序没有明显变化。储存1年的柞蚕蛹虫草中腺苷总含量高于2年的,差异有统计学意义(P0.05),但其虫草素的含量差异无统计学意义(P0.05)。米饭虫草中腺苷含量是柞蚕蛹虫草的1.6倍,虫草素的含量是柞蚕蛹虫草5倍。结论:储存时间对腺苷和虫草素分布规律以及总量顺序无明显影响,但对其腺苷总含量有明显影响。     

人工蛹虫草总核苷提取工艺优化考察

目的:优化考察利用大孔吸附树脂纯化提取分离人工蛹虫草总核苷的工艺方法。方法:通过正交设计优化总核苷的提取分离条件,用高效液相色谱分析和检测各组分。结果:最佳提取条件为样品在10倍量水中80℃水浴提取3次,每次2 h,滤液合并,减压浓缩后上AB-8弱极性大孔树脂柱,蒸馏水洗脱除去多糖类大分子物质。以30%乙醇洗脱得总核苷提取液,减压浓缩,真空干燥后得到人工蛹虫草总核苷。结论:利用色谱法对提取过程中与提取液前体及中间体进行了比较分析,结果显示该工艺具有简单、快速、高效等优点。     

HPLC法测定蛹虫草子实体及其培养基的虫草素含量

目的:建立蛹虫草子实体及其培养基中虫草素(Cordycepin)含量的测定方法。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,选用YMC-PackC18色谱柱(250×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水(20:80),流速为1mL/min,检测波长为260nm,柱温为30℃,分析时间为20min。结果:蛹虫草子实体中虫草素含量为0.503mg/g,平均加样回收率(n=9)为100.8%(RSD=1.33%);蛹虫草培养基中虫草素含量为0.118mg/g,平均加样回收率(n=9)为101.7%(RSD=1.82%)。结论:本方法分离度好、精密度高、专属性强、灵敏度高,可用于蛹虫草子实体及其培养基的质量评价。     

虫草素的药理作用研究进展

虫草素是从蛹虫草Cordyceps militari中分离的核苷类抗生素,并已成功地从人工培育的蛹虫草子实体中提取到,质量分数98％以上.虫草素不仅具有抗肿瘤、抗白血病、免疫调节等作用,还具有抗菌、消炎、抗病毒、降血糖、降血脂、抗衰老等多种生物活性和药理作用.近年来虫草素已引起国内外研究人员的极大关注,主要对虫草素的生物活性和药理作用研究概况进行综述.     

多指标优选蛹虫草提取工艺

目的:优选蛹虫草的提取工艺。方法:用多指标综合评分法,采用L9(34)正交试验设计,以虫草素、腺苷、尿苷、多糖及出膏率为检测指标,考察了4种因素(溶剂用量、乙醇体积分数、提取时间、提取次数)对其提取工艺的影响。结果:蛹虫草最佳提取工艺条件为加8倍量水,煎煮3次,每次1 h。结论:本研究优化了蛹虫草的提取工艺,并为蛹虫草的进一步利用和产品开发提供了实验依据。     

人工蛹虫草子实体化学成分研究

目的：研究人工蛹虫草子实体的化学成分。方法：大孔吸附树脂和硅胶色谱柱分离纯化，根据理化性质和波谱数据鉴定结构。结果：分离鉴定了9个化合物，分别为:麦角甾-4，6，8(14)-四烯-3-酮(1)，柠檬甾二烯醇(2)，二十四烷酸单甘油酯(3)，麦角甾醇(4)，麦角甾醇过氧化物(5)，麦角甾-7，22-二烯-3β，5α，6β-三醇(6)，虫草素(7)，腺苷(8)，N-(2-羟乙基)腺苷(9)。结论：化合物1～3，6，9均为首次从该种真菌子实体中分离得到。     

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定刘静明,刘岱,杨立新,钟裕容,崔淑莲(中国中医研究院中药研究所北京100700)蛹虫草CardycepsmiliLaris(L.)Link,为冬虫夏草同属真菌,近年来发现蛹草有重要的药用价值,越来越受到国内外的重视,国外报道从蛹虫草人工培养液中分离出虫草素,3′-氨基-3-去氧腺甙及肌氨酸氨基腺音。我们从蛹虫草菌丝中分离得6种成分:β-谷甾醇、麦角甾醇、D-甘露醇、腺嘌呤、腺苷和虫草素￣[1]。并对5批样品....     

蛹虫草化学成分及药理作用研究进展

综述近年蛹虫草化学成分及药理作用研究进展。蛹虫草的化学成分有核苷类、多糖类、虫草酸、虫草素、甾醇类以及氨基酸和微量元素等,其药理作用广泛,主要对神经系统、循环系统以及免疫系统等多种疾病疗效显著。     

北虫草的化学成分及药理作用

北虫草是一种药食两用真菌,在保健食品和药品行业日益成为热点。近10年研究表明,北虫草主要含有虫草素、腺苷、乙酰基虫草素等多种核苷、虫草多糖、氨基酸和无机元素的化学成分;药理研究显示北虫草中核苷和多糖类成分在抗肿瘤、抗炎、抗老化、免疫调节等方面有较为明显的作用。但有效成分的分离纯化制约着产业化的发展,北虫草有效成分药理作用机制研究也有待补足。     

正交设计优选蛹草拟青霉中虫草素和虫草多糖的提取工艺

目的:采用正交设计优化蛹草拟青霉菌丝体中虫草素和虫草多糖的提取工艺。方法:建立高效液相色谱测定指标成分虫草素含量的方法,采用正交试验法考察醇浓度、加醇量、提取次数与时间的组合3个因素对虫草素乙醇提取率的影响。醇提后残渣以水提取多糖,采用苯酚-浓硫酸比色法在490 nm处测定虫草多糖的含量,以单因素法筛选多糖提取工艺。结果:HPLC色谱条件下精密度的RSD为0.30%,稳定性的RSD为1.27%,重复性的RSD为2.93%。以乙醇浓度为90%,加醇量为10倍量,提取3次,每次1 h虫草素的提取率最高;而以乙醇浓度为95%,加醇量为6倍量,提取3次,每次1 h提取虫草素后的残渣再以水提取,虫草多糖得率最高。结论:所优化的提取工艺虫草素和虫草多糖提取率均较高,采用的含量测定方法稳定可靠。     

HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量

目的建立HPLC法测定蛹虫草中腺苷和虫草素的含量。方法采用SinochromODS Cl8柱,以磷酸盐缓冲液-甲醇(85:15)为流动相;流速为1.0 mL·min-1;检测波长为260 nm。结果腺苷在8.92~44.6μg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;虫草素在6.23~31.15μg?mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;腺苷平均加样回收率为97.80%,RSD为1.1%(n=5)。虫草素平均加样回收率为97.46%,RSD为1.5%(n=5)。结论本法专属性强,准确度高,重现性好,可作为蛹虫草质量控制的方法。     

虫草类产品中5种核苷类成分的测定及蛹虫草质量分析

目的建立HPLC法对4种常见虫草类样本[蛹虫草、发酵虫草菌粉(Cs-4)、中华被毛孢和冬虫夏草]中尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷5种核苷类成分进行含量测定,比较成分差异,确定蛹虫草的特征成分,为控制蛹虫草及其提取物的质量提供科学依据。方法采用岛津ODS-3 C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-水进行梯度洗脱,体积流量为0.8 mL/min,检测波长为260 nm,柱温为30℃。结果蛹虫草样品均含有尿苷、鸟苷、腺苷、虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷,而CS-4、中华被毛孢和冬虫夏草中未检测到虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷。供试品制备方法对核苷类成分的影响较大,蛹虫草粉采用6种方法制备供试品溶液,发现用水超声提取180 min获得的尿苷、鸟苷和腺苷的含量最高,且在24 h内稳定。虫草素性质稳定,而N6-(2-羟乙基)-腺苷对热和酸都不太稳定;其中4种制备方法测得的虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷含量一致。结论为蛹虫草及其提取物的质量分析提供了依据,以特征成分虫草素和N6-(2-羟乙基)-腺苷为指标可更好地对蛹虫草及其提取物的质量进行控制。     

人工蛹虫草子实体中虫草素的含量测定

人工蛹虫草子实体为天然蛹虫草（Ｃｏｒｄｙ－ｃｅｐｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ（Ｌ．ｅｒＦｒ．）Ｌｉｎｋ）中分离的菌种拟青霉（Ｐａｅｃｉｌｏｍｙｃｅｓｍｉｌｉｔａｒｉｓ）采用人工培养基培养所获得的子实体，经鉴定为麦角菌科虫草属植物。通过大量实验证明，具有同天然...     

人工蛹虫草核苷类成分的超声提取工艺优化研究

目的:探讨超声提取法在人工蛹虫草核苷类物质提取中应用的可行性。方法:利用正交设计法对人工蛹虫草核苷化合物的超声提取工艺进行了优化,用高效液相色谱法测定了主要活性成分虫草素的含量。结果:人工蛹虫草核苷类成分的最佳超声提取条件为:1.0 g干燥样品中加入20 m l,室温下超声30 m in,该过程重复提取两次,合并提取液。测得虫草素的含量为0.0197%。结论:该方法具有提取时间短、成本低、不破坏活性成分等优点,具有很好的应用前景。