肾炎康复片对大鼠肾间质纤维化的保护作用

目的:研究肾炎康复片对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用。方法:21只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、肾间质纤维化组(UUO组)及肾炎康复片组(SKT组),观察大鼠UUO术后14d梗阻侧肾脏的组织学变化、纤维连接蛋白(FN)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-l)的表达情况。结果:与Sham组相比,UUO组大鼠肾间质纤维化面积显著增加(P<0.01),FN及TIMP-1表达均有显著增高(P<0.01);与UUO组相比,SKT组大鼠肾间质纤维组织面积减少,FN及TIMP-1表达减弱(P<0.01);UUO组和SKT组大鼠FN及TIMP-1与肾间质纤维化面积成正相关(P<0.01)。结果:肾炎康复片可下调FN和TIMP-1在UUO大鼠肾间质中的表达,从而延缓肾间质纤维化的进展。     

基质金属蛋白酶/组织金属蛋白酶抑制物表达失衡在衰老大鼠肾小管间质损害中的意义

目的研究基质金属蛋白酶(MMP)及组织金属蛋白酶抑制物(TIMP)在不同鼠龄的单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾小管间质中的表达变化,探讨其可能的作用.方法选用3月、26月龄大鼠制备UUO模型,采用组织病理及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹等方法观察UUO术后3、7、14 d不同鼠龄大鼠的肾脏组织学改变和MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2等在梗阻肾小管间质中的表达情况;用明胶酶谱法检测UUO术后不同时间点MMP-2、MMP-9的蛋白水解活性.结果在对照组,TIMP-1、TIMP-2仅微弱表达于3月龄肾脏中,而在26月龄大鼠肾脏中其表达显著增加(P<0.01);老年鼠肾组织中MMP-2、MMP-9的蛋白水解活性显著低于3月龄大鼠(P<0.01).与对照组相比,3月龄、26月龄大鼠梗阻侧肾脏的肾小管间质纤维化面积随UUO术后时间的延长而增加,TIMP-1、TIMP-2及MMP-2、MMP-9的mRNA及蛋白质的表达在术后各时间点均显著增高(P<0.01), MMP-2和MMP-9的蛋白水解活性随UUO术后时间的延长而逐渐下降.其活性的下降与TIMP-2及TIMP-1蛋白质表达的增加呈明显的负相关.与3月龄鼠比较,26月龄鼠肾小管间质纤维化面积在UUO术后各时间点也明显增加(P<0.01),TIMP-1、TIMP-2在肾组织中各时间点的mRNA及蛋白质表达均显著增高(P<0.01),MMP-2、MMP-9的蛋白水解活性在各时间点均显著下降(P<0.01).结论衰老引起的TIMP的高表达及MMP蛋白水解活性下降可能是使衰老大鼠肾小管间质损害加重的重要因素之一.     

MMP-9与TIMP-1在肾小管上皮细胞转分化中的作用

目的研究结扎大鼠单侧输尿管(UUO)制备的实验性肾纤维化模型梗阻肾基质金属蛋白酶9(MMP-9)和组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)表达的动态变化,探讨MMP-9和TIMP-1在肾小管上皮细胞转分化中的作用。方法将64只雄性大鼠随机分为假手术组和UUO组(n=32),UUO组结扎单侧输尿管,术后3d、7d、14d、21d每组各处死8只大鼠,用免疫组化法检测大鼠梗阻肾组织MMP-9、TIMP-1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SAM)及纤维连接蛋白(FN)的表达。结果UUO术后3d,PAS染色见少量肾小管基底膜(TBM)局灶性断裂。术后7d,TBM断裂程度加重,基底膜断裂的肾小管数增多。术后14d直至术后21d,可见部分TBM增厚、扭曲,基底膜断裂程度和基底膜断裂的肾小管数较7d时略减轻和减少。与假手术组相较,UUO组随着梗阻时间的延长,肾间质中α-SMA、FN、TIMP-1蛋白表达逐渐增多。UUO组术后3d可见MMP-9在肾小管间质有强阳性表达,术后7d达高峰,14～21d呈下降趋势。α-SMA、MMP-9、TIMP-1主要表达于肾小管上皮和肾间质。MMP-9阳性染色面积与α-SMA阳性染色面积、TBM的断裂程度、基底膜断裂的肾小管个数均呈正相关(r分别为0.894,0.854,0.821,P均<0.05)。结论肾小管间质MMP-9和TIMP-1蛋白表达的动态变化影响TBM完整性与ECM堆积。MMP-9与TIMP-1相互拮抗调节肾小管基底膜代谢,参与肾小管上皮细胞转分化,影响肾纤维化进展。     

阿利吉仑对大鼠肾纤维化TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的探讨阿利吉仑对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的作用及机制。方法 24只雌性SD大鼠随机分为3组,Sham组、UUO组及aliskiren组,除Sham组外,UUO组及aliskiren组均行左侧输尿管结扎术。aliskiren组术前1 d开始灌胃给药,阿利吉伦50 mg/(kg·d),每日1次,连续2周。术后第14天处死大鼠,留取梗阻侧肾组织行HE染色和Masson染色,光镜下观察各组大鼠肾组织病理变化,免疫组化和Western印迹检测肾组织TGF-β1、Smad2和Smad7蛋白表达水平。结果阿利吉仑可明显减轻大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生及肾小管扩张和萎缩。免疫组化和Western印迹结果均显示:与Sham组相比,UUO组TGF-β1、Smad2表达明显上升,而Smad7表达明显下降(均P<0.05);与UUO组相比,aliskiren组TGF-β1、Smad2表达明显下降,Smad7表达明显上升(均P<0.05)。结论 TGF-β1/Smad信号通路与肾间质纤维化有关,阿利吉仑可抑制肾间质纤维化,其机制可能与下调TGF-β1、Smad2的表达和上调Smad7的表达有关。     

姜黄素对单侧输尿管梗阻大鼠模型干预的研究

目的 观察姜黄素对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾小管间质病变的影响，探索防治肾间质纤维化的新途径。方法 采用UUO致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为假手术组、模型组、姜黄素组。术后第4周，处死各组大鼠，用HE、Masson染色评定肾小管间质纤维化程度；用免疫组化方法检测肾组织内转化生长因子β1（TGF—β1）、基质金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）的表达部位及蛋白表达水平。结果 与假手术组相比，肾间质纤维组织相对面积显著扩大（P〈0.01），肾组织内TGF-β1和TIMP-1蛋白质表达均显著上调（P〈0．01）。姜黄素干预后，上述上调指标都被显著抑制（P〈0．01）。结论 姜黄素具有抗肾纤维化的作用，其机制可能与下调肾组织TGF—β1进而抑制TIMP-1的表达有关。     

罗格列酮联合替米沙坦对单侧输尿管梗阻大鼠慢性肾间质纤维化的影响

目的:观察罗格列酮(RGZ)、替米沙坦(TEL)单用及联合应用对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用.方法:24只大鼠制备UUO模型,按2×2析因实验设计,分4组,每组6只,分别于术前1 d至术后14 d给予生理盐水、RGZ、TEL、RGZ+TEL混悬液灌胃,术后第14天处死各组大鼠,观察梗阻侧肾脏病理组织学变化,并用免疫组化SP方法检测肾组织中TGF-β1、MMP-9及TIMP-1的表达.结果:RGZ和TEL单用可减少UUO模型大鼠肾间质纤维化面积(F:915.253和1373.645,P均<0.001),联合用药减少更明显(F=1073.611,P<0.001).BGZ或TEL单用均可降低UUO模型大鼠肾脏TGF-β1(F=119.737和456.814,P均<0.001)和TIMP-1(F=49.771和89.235,P<0.001)的表达,联合应用效果更为显著(F=312.767和112.274,P<0.001).RGZ、TEL单独或联合应用对UUO模型大鼠肾组织MMP-9的表达无明显影响(F=2.315、6.815和1.297,P>0.05).结论:RGZ和TEL均可下调TGF-β1的表达,纠正MMP-9/TIMP-1失衡,延缓UUO大鼠肾小管间质病变的进展,二者联合应用作用优于单独应用.     

丹红注射液对单侧输尿管梗阻大鼠Ets-1、MMP-09和TIMP-1表达的影响

目的 观察丹红注射液对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠逆转录病毒E26转录因子1(Ets-1),基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响,初步探讨其抗肾间质纤维化的作用机制.方法 SD大鼠60只,随机分为假手术(A组),UUO(B组),厄贝沙坦[C组,50mg/(kg·d),灌胃]和丹红注射液治疗组[D组,7 mg/(kg·d),腹腔注射].手术后3、7及14d留取标本.RT-PCR测Ets-1 mRNA含量;免疫组织化学法测Ets-1、MMP-9、TIMP-1及TGF-β1和I型胶原表达.结果 D组肾间质纤维化面积和I型胶原表达明显低于B组(P<0.05).D组7d Ete-1 Mrna 表达量达峰值并明显高于B组,B组术后3d Ets-1表达开始升高,7d到达峰值,14d开始下降,与MMP-9的趋势一致.Ets-1与MMP-9和MMP-9/TIMP-1比值正相关(r=0.711和0.635,P=0.001和0.005).D组各时间点下调TIMP-1表达(P<0.05),TIMP-1与TGF-β1和I型胶原正相关(r=0.831和0.478,P＝0.000和0.045).结论 丹红注射液上调Ets-1表达促进细胞外基质降解而减轻肾间质纤维化.     

MicroRNA-21在单侧输尿管梗阻大鼠间质纤维化肾脏组织中的表达及意义?

目的：观察 MicroRNA-21(miRNA-21)在单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾脏组织中的表达,初步探讨其在转化生长因子-β1(TGF-β1)/Smad3致大鼠肾间质纤维化(RIF)信号通路中的机制。方法选择20只 SD 雄性大鼠,分为 UUO 组和假手术组(Sham 组),分别于建模后第3天、第7天各采集每组5只大鼠肾脏组织,应用实时荧光定量 PCR(Real-time qPCR)方法检测肾脏组织中 miRNA-21的表达变化,采用 Masson 染色、苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学技术评价肾组织纤维化,使用免疫组织化学检测肾脏组织中 TGF-β1、Smad3、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达情况。结果建模后第3天和第7天 UUO 组肾脏组织中 miRNA-21与 Sham 组比较均升高(P <0.01),7 d UUO 组肾组织中 miRNA-21与3 d UUO 组相比升高(P <0.01)。建模后3、7 d UUO 组 Masson 染色纤维化评分、TGF-β1、Samd3、α-SMA 及 Col-Ⅰ蛋白阳性表达面积较 Sham 组升高(P <0.01),以上指标7 d UUO 组较3 d UUO 组比较表达增强(P <0.01)。UUO 组肾组织中 miRNA-21的表达与肾间质纤维化评分正相关(r=0.888,P <0.01);肾组织 miRNA-21与 TGF-β1、Smad3、Col-Ⅰ、α-SMA 蛋白表达呈正相关(r =0.799、0.849、0.882、0.896,P <0.01)。结论UUO 大鼠肾组织中 miRNA-21在建模后表达上调,且间质纤维化程度越重表达越高,TGF-β1/Smad3信号通路可能是通过上调 miRNA-21从而介导大鼠肾间质纤维化。     

螺内酯与苯那普利联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠肾脏骨形态发生蛋白-7表达的影响

目的 探讨螺内酯与苯那普利联合应用对单侧输尿管梗阻大鼠(UU0)肾脏骨形态发生蛋白-7(BMP-7)及转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响.方法 40只雄性Wistar大鼠随机分为5组:单侧输尿管梗阻(UUO)组;假手术组,除不结扎离断输尿管外,其余处理同UUO组;螺内酯组,给予UUO模型大鼠螺内酯混悬液50 nag·kg-1·d-1;苯那普利组,给予苯那普利30 mg·kg-1·d-1;联合治疗组,给予螺内酯50 nag·kg-1·d-1+苯那普利30 mg·kg-1·d1.观察第14天血浆和肾组织醛固酮含量的变化及肾间质纤维化程度、BMP-7及TGF-β1,的表达.结果 ①与假手术组相比,UUO组大鼠肾间质蓝染面积显著增加(P<0.05),血浆和肾组织醛固酮含量显著增高(P值均<0.05),螺内酯、苯那普利和联合治疗组则显著低于UUO组(P值均<0.05).②与假手术组相比,UUO组的肾小管间质TGF-β1阳性面积百分比显著增高(P<0.05),BMP-7阳性面积百分比显著降低(P<0.05),螺内酯、苯那普利和联合治疗组的TGF-β1阳性面积百分比显著低于UUO组(P值均<0.05),而BMP-7阳性面积百分比则显著增加(P值均<0.05).联合治疗组与螺内酯、苯那普利组的差异均有统计学意义(P值均<0.05).结论 与单用螺内酯、苯那普利相比,两药联合应用能减轻UUO大鼠肾间质纤维化,下调TGF-β1的表达及BMP-7表达增加可能是其机制之一.     

冬虫夏草对梗阻性肾病大鼠肾间质表皮生长因子及转化生长因子-β1表达的影响

目的探讨冬虫夏草对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用及可能机制。方法将大鼠分成3组:假手术组(SOR组)、单侧输尿管梗阻手术组(UUO组)和冬虫夏草治疗组(CST组)。无菌条件下UUO组及CST组均进行左侧输尿管结扎手术,而SOR组仅分离左侧输尿管但不结扎及剪断输尿管。于手术当天开始CST组予冬虫夏草菌粉,SOR组及UUO组予蒸馏水,均每天一次性灌胃。于术后第7、14、21、28天分别检测血尿素氮、血肌酐;梗阻肾组织行HE染色,ELISA测定表皮生长因子-β1(EGF)及Western blot检测转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。结果 3组大鼠的血尿素氮、血肌酐值于各时间点的差异无统计学意义(P>0.05);CST组HE染色见肾间质纤维化程度较UUO组减轻;CST组肾组织TGF-β1的表达明显低于UUO组(P<0.05),EGF的表达明显高于UUO组(P<0.05)。结论冬虫夏草可能通过调节TGF-β1及EGF的表达而减轻输尿管梗阻引起的肾间质纤维化。     

Effects of Calcium Dobesilate on Glomerulus TIMP1 and Collagen Ⅳ of Diabetic Rats

To observe the effects of calcium dobesilate on the expression of glomerular tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP1), collagen Ⅳ, and ultrastructure of glomerular basement membrane in diabetic rats, rats model of diabetes was established by unilateral nephrectomy and intraperitoneal injection of 1% STZ (55 mg/kg), and rats were administered calcium dobesilate 100 mg/kg (DD group) or distilled water (DM group) respectively. 12 weeks later, the changes in the renal ultrastructure and creatinine clearance rate (Ccr) were examined in each group. The expression of glomerular TIMP1 and collagen Ⅳ were studied by immunohistochemical staining. Our results showed that after 12 weeks, the Ccr in DD group increased and was significantly higher than that in DM group. Electron microscopy showed that thickness of glomerular capillary basement membrane (GBM) in Group DD was less than that of DM group. No hyperplasia of collagen fibers was found, and the distance between the holes of endothelial cells in DD group was not as even as that in the normal group, but more even than that of DM group, and podocyte processes was still in order. Immunohistochemical staining of glomeruli showed that expression of TIMP1 and collagen Ⅳ in DD group were significantly less than those of DM group DM. It is concluded that calcium dobesilate can improve diabetic nephropathy by inhibiting the over- accumulation of collagen Ⅳ and calcium dobesilate may also contribute to diabetes by inhibiting the expression of TIMP1.     

Effects of calcium dobesilate on glomerulus TIMP1 and collagen IV of diabetic rats

Summary To observe the effects of calcium dobesilate on the expression of glomerular tissue inhibitor of metalloproteinase 1 (TIMP1), collagen IV, and ultrastructure of glomerular basement membrane in diabetic rats, rats model of diabetes was established by unilateral nephrectomy and intraperitoneal injection of 1% STZ (55 mg/kg), and rats were administered calcium dobesilate 100 mg/kg (DD group) or distilled water (DM group) respectively. 12 weeks later, the changes in the renal ultrastructure and creatinine clearance rate (Cer) were examined in each group. The expression of glomerular TIMP1 and collagen IV were studied by immunohistochemical staining. Our results showed that after 12 weeks, the Cer in DD group increased and was significantly higher than that in DM group. Electron microscopy showed that thickness of glomerular capillary basement membrane (GBM) in Group DD was less than that of DM group. No hyperplasia of collagen fibers was found, and the distance between the holes of endothelial cells in DD group was not as even as that in the normal group, but more even than that of DM group, and podocyte processes was still in order. Immunohistochemical staining of glomeruli showed that expression of TIMP1 and collagen IV in DD group were significantly less than those of DM group DM. It is concluded that calcium dobesilate can improve diabetic nephropathy by inhibiting the over- accumulation of collagen IV and calcium dobesilate may also contribute to diabetes by inhibiting the expression of TIMP1. Dong Junwu, male, born in 1968, M. D., Ph. D.     

羟苯磺酸钙治疗慢性肾功能衰竭的临床观察与实验研究

目的观察羟苯磺酸钙对慢性肾功能衰竭（肾衰）的治疗作用，探讨该药对肾脏的保护机制，从而初步评价其治疗慢性肾衰的应用价值。方法 临床观察部分：选取131例慢性肾衰患者，分为两组：①治疗组73例，在常规综合治疗的基础上加用羟苯磺酸钙胶囊0．5g．3次／d；②对照组58例，采用常规综合治疗，观察8周内两组患者肾功能的变化。动物实验部分：建立5／6肾切除大鼠慢性肾衰模型，设立假手术组、5／6肾切除组以及羟苯磺酸钙组，治疗12周后观察大鼠肾功能以及残肾组织病理改变。结果临床观察部分：治疗2周后，患者血肌酐（Scr）即明显降低，内生肌酐清除率（Ccr）上升，并维持至第8周；血尿酸（UA）治疗后明显降低。动物实验部分：12周后，与5／6肾切除组比较．羟苯磺酸钙组大鼠肾功能改善，残肾组织病理改变明显减轻。结论羟苯磺酸钙能够抑制肾脏纤维化的进展，改善肾脏功能，任慢性肾功能衰竭的治疗方面具有一定的应用价值。     

氟非尼酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的疗效观察

目的：观察氟非尼酮对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的疗效,探讨氟非尼酮对肾间质纤维化大鼠肾 组织中I型胶原(collagen type I,Col I),III型胶原(collagen type III,Col III),α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA),结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)和血小板源性生长因子(platelet derived growth factor, PDGF)表达的影响。方法：将15只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和氟非尼酮组(n=5)。对模型组和氟非尼酮 组大鼠行左侧输尿管结扎术建立单侧输尿管梗阻模型。氟非尼酮组从造模前24 h开始以氟非尼酮[125 mg/(kg.d)]溶于 0.5%羧甲基纤维素钠(sodium carboxyl methyl cellulose,CMC-Na)中灌胃,模型组和假手术组以等体积0.5% CMC-Na灌 胃。于术后14 d处死大鼠,取梗阻侧肾组织行HE和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理改变;用免疫组织化学检测 Col I,Col III,α-SMA,PDGF,CTGF的蛋白表达;用RT-PCR检测Col I,Col III,PDGF,CTGF mRNA表达。结果：模 型组肾间质损伤指数、胶原相对面积评分及Col I,Col III mRNA和蛋白表达均较假手术组增高(P<0.05),氟非尼酮治 疗后明显改善(P<0.05)。模型组肾组织α-SMA,PDGF,CTGF蛋白表达及PDGF,CTGF mRNA表达均较假手术组明显 增加(P<0.05),氟非尼酮治疗后表达均明显减少(P<0.05)。结论：氟非尼酮(125 mg/kg.d)能够显著改善单侧输尿管梗阻 大鼠肾间质纤维化,其作用机制与抑制肌成纤维细胞的活化及关键促纤维化因子PDGF和CTGF的表达有关。     

脐带间充质干细胞外泌体对大鼠肾间质纤维化的抑制作用

目的: 探讨人脐带间充质干细胞来源的外泌体（human umbilical cord mesenchymal stem cell derived exosomes,hucMSC-Ex）对单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction, UUO）所致大鼠肾小管间质纤维化的修复作用。方法: 分离培养hucMSC并从培养上清液中提取hucMSC-Ex。采用单侧输尿管结扎法构建肾间质纤维化模型,将大鼠随机分为假手术组、UUO组和hucMSC-Ex组,每组6只,hucMSC-Ex组大鼠在术后24 h 尾静脉注射250 μg hucMSC-Ex。7 d后收集肾脏组织,观察各组肾脏大体观。蛋白质印迹检测肾组织纤维化相关蛋白TGF-β1、E-钙黏蛋白和波形蛋白,并对肾脏组织切片进行HE染色、Masson染色和免疫组织化学染色,观察大鼠梗阻侧肾脏病理结构变化、炎症细胞浸润情况及肾纤维化程度,综合评价hucMSC-Ex对大鼠肾脏纤维化的抑制效果。结果： 与假手术组相比,UUO组大鼠肾脏炎性细胞浸润显著增加,组织结构严重破坏,广泛胶原沉积;hucMSC-Ex干预后组织形态结构部分恢复,胶原沉积减少,炎性细胞浸润减少。同时,UUO组大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、TGF-β1和波形蛋白表达升高,E-钙黏蛋白表达降低;但hucMSC-Ex输注后能够抑制α-SMA和TGF-β1的表达,逆转上皮间质转化。结论： hucMSC-Ex可以减轻大鼠肾组织病理损伤,延缓大鼠肾间质纤维化的进程。     

没食子儿茶素没食子酸酯对大鼠肾间质纤维化的影响及机制探讨

目的探讨没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾间质纤维化的保护作用。方法将30只健康、雄性SD大鼠随机分为UUO组、假手术组(SOR)和EGCG组,术前分别给UUO组和SOR组灌生理盐水,EGCG组分别灌胃EGCG20mg/(kg.d),连续3天。术后第8天分别处死各组大鼠,用免疫组织化学方法测定转化生长因子β(TGF-β)的表达情况。行HE和Masson染色,动态观察肾间质病理学改变。结果EGCG组TGF-β的表达量(1.94±0.31)与模型组(3.11±0.39)比较明显降低(p<0.01)。EGCG能显著减少UUO大鼠肾小管间质TGF-β的表达,减轻胶原在肾间质的沉积,改善了肾脏病理改变。结论没食子儿茶素没食子酸酯对单侧输尿管梗阻所致的大鼠肾脏纤维化的形成有明显的抑制作用,其作用可能跟降低TGF-β的表达有关。     

依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的防治作用

目的:动态观察血管紧张素转换酶抑制剂依那普利对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质纤维化的影响.方法:采用单侧输尿管梗阻模型,雄性SD大鼠64只随机分为假手术组(n=16)、模型组(n=24)和依那普利治疗组(n=24).治疗组从造模前24 h开始以依那普利10 nag/(kg·d)灌胃,模型组和假手术组以等体积的生理盐水灌胃.分别于造模后第3,7,14,21天处死大鼠,取梗阻侧肾组织,行HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理改变,采用real-time PCR方法检测肾组织Ⅰ型胶原mRNA的表达,应用Westem免疫印迹检测结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF)蛋白表达.结果:随着梗阻时间的延长,模型组大鼠肾间质损伤指数评分逐渐增加,肾间质胶原相对面积逐渐增大,Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达逐渐增加.依那普利治疗后,肾间质损伤指数和肾间质胶原相对面积下降,Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达均减少,与模型组比较,差异在第3,7,14天有统计学意义(P<0.05),而在第21天无统计学意义(P>0.05).结论:依那普利可减轻梗阻肾间质纤维化,这一作用可能与其能抑制肾组织Ⅰ型胶原mRNA和CTGF蛋白表达有关.     

补肾活血排毒法组方中药对慢性肾脏病大鼠肾脏细胞凋亡的影响

目的 观察补肾活血排毒法组方中药对慢性肾脏病大鼠的治疗作用及细胞凋亡的影响.方法 采用单侧输尿管梗阻(UUO)动物模型,将SD雄性大鼠分为假手术组、UUO模型组、补肾活血排毒法中药低剂量治疗组和高剂量治疗组,自动生化分析仪检测肾功能;苏木素-伊红(HE)染色检测肾脏组织病理损伤;TUNEL法检测肾组织细胞凋亡;Western blot法检测B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)水平.结果 与UUO模型组相比,补肾活血排毒法中药各剂量组血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)均明显下降(P＜0.05).病理观察,模型组可见肾小管上皮细胞凋亡、坏死、脱落,炎性细胞浸润,补肾活血排毒法中药各剂量组均较UUO模型组肾损伤程度轻(P＜0.05).TUNEL法检测UUO模型组细胞凋亡数较假手术组明显增多,补肾活血排毒法中药各剂量组可显著减少细胞凋亡数目(P＜0.05).与UUO模型组相较,补肾活血排毒法中药各剂量治疗组Bcl-2水平明显上调,Bax水平下调,Bcl-2/Bax比值升高(P＜0.05).以上结果均呈剂量依赖性.结论 补肾活血排毒法中药能明显下调血清肌酐和尿素氮水平,抑制UUO大鼠肾脏细胞凋亡,调节Bcl-2、Bax水平.