脂氧素A4对内毒素攻击的肺泡Ⅱ型上皮细胞Na+-K+-ATP酶的影响

目的 探讨促炎症消退介质脂氧素A4(LipoxinA4,LXA4)对内毒素(endotoxin)攻击的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞(Alveolar type Ⅱ epithelial cells,ATⅡ)Na+-K+-ATP酶的影响.方法 AT Ⅱ成功分离纯化后随机(随机数字法)分为5组:①空白组(PBS);②溶剂对照组(乙醇,0.7μL/mL);③脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)(1μg/mL)组;④LXA4(1×10-7mol/mL)组;⑤LPS(1μg/mL)+LXA4(1×10-7mol/mL)组.药物干预4 h后用RT-PCR法检测ATⅡ上Na+-K+-ATP酶α1,β1亚基的mRNA的表达,用高效液相法测定细胞ATP,ADP,AMP和腺嘌呤核苷酸总量(TAN),间接测得Na+-K+-ATP酶的活性和AT Ⅱ能荷.结果 RT-PCR结果显示:LPS组α1,β1亚基的mRNA表达较空白组明显降低(P＜0.05),而LPS+LXA4组的α1,β1亚基的mRNA表达较LPS模型组有明显增高(P＜0.05).酶活性检测结果显示:LPS组Na+-K+-ATP酶活性较空白组明显增高(P＜0.05).与LPS刺激组比较,LPS+LXA4组酶活性明显增高(P＜0.05).能荷结果显示:LPS组较空白组明显增高(P＜0.05),其余各组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 LXA4能上调内毒素攻击的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞Na+-K+-ATP酶α1,β1亚基mRNA表达,增强Na+-K+-ATP酶的活性,并能有效维持细胞的能量代谢平衡,提示LXA4可能通过上调Na+-K+-ATP酶的基因表达和功能活性,维持细胞代谢稳定,从而起到促进肺泡水肿液清除的作用.     

休克肠淋巴液对大鼠红细胞膜泵活性及氧自由基的影响

目的 观察休克肠淋巴液引流对失血性休克大鼠、休克肠淋巴液回输对正常大鼠红细胞膜泵活性及氧自由基的影响.方法 雄性Wistar大鼠24只,按随机数字表法分为假休克组、休克组、休克肠淋巴液引流组、休克肠淋巴液回输组,每组6只.休克组与引流组于麻醉和手术后复制失血性休克模型,引流组于休克1 h引流肠淋巴液;假休克组仅麻醉与手术;回输组于麻醉和手术后将引流的休克肠淋巴液回输.各组于休克3 h或相应时间点取腹主动脉血制备红细胞膜悬液,检测红细胞膜泵活性与自由基指标.结果 与假休克组比较,休克组红细胞膜Na+-K+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)、Ca2+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)、超氧化物歧化酶(SOD)活性(NU/mg)均显著降低(Na+-K+-ATP酶:0.039±0.011比0.068±0.010;Ca2+-ATP酶:0.035±0.016比0.087±0.015; SOD活性:0.785±0.289比1.202±0.328,P＜0.05或P＜0.01),丙二醛(MDA)含量(nmol/mg)显著升高(1.914±0.225比0.913±0.138,P＜0.01);与休克组比较,引流组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性(0.056±0.009)、Ca2+-ATP酶活性(0.079±0.025)、SOD活性(1.220+0.380)均显著升高,MDA含量(1.214±0.127)显著下降(P＜0.05或P＜0.01).与假休克组比较,回输组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性(0.050+0.013)、Ca2+-ATP酶活性(0.056±0.023)显著降低(均P＜0.05),SOD活性(0.862±0.288)有所降低(P＞0.05),MDA含量(1.456±0.270)显著升高(P＜0.01).结论 休克肠淋巴液回流是引起红细胞膜泵活性降低、加重红细胞膜自由基损伤的关键因素.     

红细胞溶血液Na+-K+-ATP酶活力测定

目的建立利用红细胞溶血液测定红细胞Na+-K+-ATP酶活力测定方法.方法用蒸馏水将红细胞破坏,测其血红蛋白含量及红细胞Na+-K+-ATP酶活力,并与用红细胞膜酶测定法进行相关性比较.结果健康成人红细胞溶血液Na+-K+-ATP酶活力为4.345±1.175μmol Pi/gHb@h;两种方法的相关系数为0.685.结论利用红细胞溶血液进行红细胞Na+-K+-ATP酶活力测定具有操作简便,结果准确的特点,更适合于一般实验室开展.     

红细胞溶血液Na+-K+-ATP酶活力测定

目的建立利用红细胞溶血液测定红细胞Na+-K+-ATP酶活力测定方法.方法用蒸馏水将红细胞破坏,测其血红蛋白含量及红细胞Na+-K+-ATP酶活力,并与用红细胞膜酶测定法进行相关性比较.结果健康成人红细胞溶血液Na+-K+-ATP酶活力为4.345±1.175μmol Pi/gHb@h;两种方法的相关系数为0.685.结论利用红细胞溶血液进行红细胞Na+-K+-ATP酶活力测定具有操作简便,结果准确的特点,更适合于一般实验室开展.     

细胞膜泵活性在急性肾衰竭致多器官损伤中的机制

目的 观察急性肾衰竭(ARF)致多器官损伤家兔肾、心肌、胰腺细胞膜泵活性的变化,探讨ARF致多器官损伤的作用机制. 方法 将42只家兔按随机数字表法分为对照组、HgCl2组和甘油组,后两组再分为12、24、48 h 3个亚组,每组6只.以皮下注射1% HgCl2(1.3 ml/kg)或肌肉注射50%甘油(10 ml/kg)分别复制ARF模型.各组分别于不同时间点留取肾、心肌、胰腺组织并制备组织匀浆,采用定磷法检测上清液中的ATP酶活性. 结果 与对照组比较,两个ARF模型组肾组织匀浆Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性均随ARF病情程度加重而逐渐降低,于48 h达最低水平[HgCl2组分别为(0.84±0.16)、(0.52±0.17)、(0.45±0.09) μmol·mg-1·h-1,甘油组分别为(0.85±0.22)、(0.49±0.21)、(0.54±0.17) μmol·mg-1·h-1];心肌和胰腺组织匀浆Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶、Mg2+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性也逐渐降低,48 h时达最低[心肌HgCl2组分别为(0.56±0.11)、(0.51±0.19)、(0.55±0.19)、(0.37±0.19) μmol·mg-1·h-1,甘油组分别为(0.52±0.19)、(0.62±0.10)、(0.61±0.16)、(0.54±0.10) μmol·mg-1·h-1;胰腺HgCl2组分别为(0.81±0.12)、(0.71±0.15)、(0.73±0.18)、(0.62±0.16) μmol·mg-1·h-1,甘油组分别为(0.72±0.13)、(0.57±0.18)、(0.66±0.14)、(0.59±0.23) μmol·mg-1·h-1],与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01). 结论 ARF致心肌、胰腺损伤的机制与组织细胞膜泵活性降低有关.     

高渗盐水对大鼠缺血再灌注损伤肾组织Na+-K+-ATP酶活性的影响

目的 探讨高渗盐水对缺血再灌注损伤肾组织Na+-K+-ATP酶活性的影响.方法 56只SD大鼠随机分为假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和高渗盐水处理组(H组).肾缺血再灌注损伤模型的建立:左侧肾蒂夹闭45 min后松开,分别于再灌注4 h、6 h、12 h,测定左肾系数、血清肌酐(Cr)、左肾组织Na+-K+-ATP酶(Na+-K+-ATPase)活性和丙二醛(MDA)含量.结果 H组左肾系数、血清肌酐和丙二醛明显低于IR组,而左肾组织Na+-K+-ATP酶活性明显高于IR组.结论 高渗盐水预处理对实验SD大鼠缺血再灌注肾损伤有保护作用.     

高血压灌注对猪心肺复苏后胃肠组织超微结构和酶学的影响

目的 观察猪心肺复苏(CPR)后高血压灌注对胃肠组织超微结构和酶学的影响.方法 采用直流电致实验猪心室纤颤(室颤)4 min后行CPR.复苏成功的10只猪按随机数字表法分为对照组(n=5)和高血压灌注组(n=5),后者给予去甲肾上腺素升高血压,使平均动脉压(MAP)维持在室颤前基础状态的130％.于复苏前后测定血清二胺氧化酶(DAO)水平及胃肠组织ATP酶活性,并在光镜和电镜下观察组织结构.结果 自主循环恢复(ROSC)后2h、4h高血压灌注组与对照组DAO水平均较室颤前明显升高(高血压灌注组:15.66±2.24、15.76±0.95比8.38±0.70,对照组:14.87±1.34、13.85±0.52比9.92±0.78,均P＜0.05);而两组间均无差异.ROSC后24 h高血压灌注组胃组织Na+-K+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)和Ca2+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)明显高于对照组(Na+-K+-ATP酶:6.07±1.49比2.89±1.48,Ca2+-ATP酶:7.67±1.86比3.07±1.50,均P＜0.05);而两组间肠组织中ATP酶活性无明显差异.在光镜和电镜下观察高血压灌注组胃肠黏膜结构、线粒体损伤均轻于对照组.结论 CPR后出现消化道功能受损、能量代谢异常、血清DAO水平升高、肠微绒毛破坏;高血压灌注能够改善能量代谢、减少黏膜损伤,对消化道具有保护作用.     

肠淋巴液引流改善失血性休克大鼠液体复苏后的红细胞代谢

目的 观察肠淋巴液引流对失血性休克大鼠液体复苏后红细胞代谢的作用.方法 18只雄性Wistar大鼠,按随机数字表法均分为假手术组、休克组、休克+引流组.复制失血性休克模型,维持低血压1.5 h后,行液体复苏(全血量+等量林格液)30 min,复苏结束后继续观察3h.休克+引流组维持低血压1h后引流肠淋巴液.在复苏后3h或相应时间点经腹主动脉取血,制备红细胞悬液,检测红细胞膜泵活性以及三磷酸腺苷(ATP)、乳酸(LA)水平;制备红细胞内液,检测2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)、Na+、K+浓度;制备血浆,检测Na+、K+、Cl-、总Ca浓度.结果 与假手术组比较,休克组红细胞ATP(μmol/g)、Na+-K+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)、Ca2+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)、血浆总Ca( mmol/L)显著降低(ATP:6.698±0.938比10.670±1.466,Na+-K+-ATP酶:0.042±0.010比0.066±0.019,Ca2+-ATP酶:0.054±0.015比0.081±0.017,总Ca:2.27±0.18比2.66±0.21,P＜0.05或P＜0.01),红细胞LA(mmol/g)和血浆K+(mmol/L)、Cl-(mmol/L)均显著升高(LA:3.472±0.853比1.743±0.395,K+:5.83±0.34比5.23±0.37,Cl-:113.37±3.63比106.35±4.99,P＜0.05或P＜0.01),2,3-DPG(mmol/L)无显著差异(2.196±0.609比2.590±0.574,P＞0.05).与休克组比较,休克+引流组红细胞2,3-DPG(4.459±0.900)、ATP(8.859±1.189)、Na+-K+-ATP酶(0.089±0.022)、Ca2+-ATP酶(0.082±0.020)均显著升高,LA( 2.060±0.810)显著下降(P＜0.05或P＜0.01),其他指标组间比较差异无统计学意义.结论 休克肠淋巴液引流可改善失血性休克大鼠液体复苏后红细胞的代谢状况,保护红细胞结构与功能.     

大承气汤对家猫脑出血急性期的保护作用及一氧化氮改变的研究

目的探讨大承气汤对家猫脑出血脑保护作用机制.方法采用家猫脑出血模型,观察脑出血后及药物作用后1.5、12h脑组织中一氧化氮(NO)含量及Na+K+-ATP酶活性变化.结果药物作用后12h脑组织中NO含量,及Na+K+-ATP酶活性变化,与模型组比较有显著差异.(P<0.05).结论大承气汤可降低NO的毒性,增加Na+K+-ATP酶的活性,对出血脑组织有保护作用.     

三七总皂苷对烫伤大鼠心肌细胞及红细胞膜ATP酶活性的影响

目的研究三七总皂苷(PNS)对烫伤早期心肌细胞膜(Ca2+-Mg2+)-ATP酶和(Na+-K+)-ATP酶活性的影响.方法采用30%体表面积Ⅲ度烫伤大鼠模型,用生化反应法分别测定心肌细胞膜与红细胞膜上(Ca2+-Mg2+)-ATP酶和(Na+-K+)-ATP酶活性变化.结果大鼠烫伤后心率加快,心电图T波低平,心肌细胞与红细胞膜(Ca2+-Mg2+)-ATP酶和(Na+-K+)-ATP酶活性均显著下降(P＜0.01),(Ca2+-Mg2+)-ATP酶活性在心肌细胞与红细胞之间呈显著正相关(r=0.951,P＜0.01).100mg/kg的PNS可使心率及T波恢复、ATP酶活性明显增加(P＜0.01或0.05).结论PNS显著增加烫伤大鼠心肌细胞膜(Ca2+-Mg2+)-ATP酶和(Na+-K+)-ATP酶活性是其改善心功能的重要机制之一.     

不育男性患者精浆 Ig A 型抗精子抗体对精液参数的影响

目的探讨精浆IgA型抗精子抗体(anti‐sperm antibody ,AsAb)对精液参数的影响.方法用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测191例不育男性患者精浆的IgA型AsAb ,据此分为阳性和阴性两组,将两组患者的精液主要参数进行比较分析.结果精浆IgA型AsAb阳性组患者精子的密度、精子活率、精子总活力(PR+ NP)明显低于阴性组患者,差异具有统计学意义(P<0.01);两组患者的精液正常形态精子百分率差异无统计学意义(P>0.05).结论精浆IgA型AsAb不影响精液正常形态精子百分率,但能使精子的密度、活率、总活力明显降低,是导致男性不育的重要因素之一.     

不育男性精子中的顶体酶活性及精液参数研究

目的研究不育男性精子中顶体酶活性与精液参数。 方法选取我院收治的不育男性140例作为研究对象,再按照顶体酶参数是否正常划分为两组,观察组1（n=68）为精液参数正常组,即精液量、液化时间、外观、精子活力、外形以及数量等均无明显异常,观察组2（n=72）为精液参数异常组,即抗精抗体为阳性或上述检查有不少于1项明显异常,且存在生殖系统急慢性炎症史;选取1年内正常生育男性70例作为研究对象,设为对照组。应用手淫法对所有男性精液予以收集,且应用改良Kennedy法检测精子顶体酶活性,对比3组男性精子顶体酶活性。结果观察组2（a+b）级精子活动率明显低于其他两组（P<0.05）;对照组精子浓度明显高于观察组（P<0.05）;对照组顶体酶活性明显高于观察组1与观察组2（P<0.05）。 结论顶体酶活性低下密切关联于男性不育,检测不育男性精子中顶体酶活性临床价值重大,可将精子质量全面反映出来,进而评价其功能状态,有推广价值。       

德城区计生站不孕不育患者免疫性抗体检测分析

目的：分析近年来检测出的抗精子抗体（ASAb）、抗子宫内膜抗体（EMAb）、抗新磷脂抗体（ACL）与不孕不育症的关系。方法：采用ELISA法检测2569例男性不育患者血清中的抗精子抗体,3595例女性不孕不育患者血清抗精子抗体,抗子宫内膜抗体,抗新磷脂抗体。结果：男性抗精子总抗体阳性率40．8％,IgM阳性率10．5％,女性抗精子总抗体阳性率53．5％,IgM阳性率为20．5％。男女两组比较,抗精子总抗体阳性率、IgM的阳性率均有极显著性差异（P〈0．01）。女性不孕不育患者EMAb的总阳性率为30．6％,ACL的总阳性为20．5％．ASAb、EMAb、ACL检测中,其中两项同时阳性的占16．5％,三项同时阳性的占8．5％。结论：在免疫性不孕不育中最常见的是由ASAb引起的,ASAb、EMAb、ACL的检测对免疫性不孕不育患者的诊断,治疗具有重要意义。     

解脲支原体感染与精子动态、形态学分析

目的 讨论解脲支原体(UU)感染与精子动态及形态学改变的关系.方法 对878例男性不育患者精液标本检测UU,同时做计算机辅助动态学和形态学分析.结果 878例男性不育患者中UU感染阳性342例(38.95%)、UU阴性536例(61.05%).UU阳性组精子活力低下224例(65.50%)、密度低下117 例(34.21%)、形态学分析正常形态＜15% 198例(80.49%).UU阴性组精子活力低下258例(48.13%)、密度低下83例(15.49%)、形态学分析正常形态＜15% 296例(57.59%).UU感染与精子密度、活力低下均有显著性意义(P＜0.01),与精子形态异常有关(P＜0.01).结论 UU感染与精子密度、活力以及形态异常密切相关.     

一氧化氮与抗精子抗体对女性原因不明不孕影响的研究

目的 :探讨NO与抗精子抗体 (AsAb)对女性原因不明不孕的影响及NO与AsAb之间的关系。方法 :分别采用硝酸还原酶法、酶联免疫吸附法测定 10 0例原因不明女性不孕患者月经中期血清中NO及AsAb水平 ,其中原发不孕 3 4例 ,继发不孕 66例 ,并以 3 0例正常健康生育年龄妇女作为对照。结果 :原因不明不孕妇女血清中NO水平及AsAb阳性率显著高于正常对照组 (P <0 .0 1) ,AsAb阳性与AsAb阴性妇女血清中一氧化氮水平比较 ,二者无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,但均显著高于正常对照组 (P <0 .0 1)。结论 :NO和AsAb是原因不明不孕的主要因素 ,但两者影响女性生殖过程的方式存在不同 ;NO合成酶抑制剂可能为高NO水平的不孕妇女提供新的治疗途径。     

解脲脲原体和血清抗精子抗体对精液质量的影响

目的分析解脲脲原体（Uu）和血清抗精子抗体（AsAb）对精液质量的影响。方法选取62例男性不育患者,以Uu选择培养基对其分泌物培养鉴定,以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测其精浆和AsAb、IgM、IgG和IgA,以精液分析仪进行精子密度、存活率、a＋b级活力和畸形率分析;然后根据结果不同,分为Uu阴性和Uu阳性不育组、AsAb阴性和AsAb阳性不育组,分别加以比较。结果 Uu阳性不育组精子畸形率为（25.62±17.90）%,较Uu阴性不育组的（12.81±8.46）%明显增高（P〈0.05）,而两组间精子密度、精子存活率和精子活力差异无统计学意义（P〉0.05）;AsAb阳性不育组精子密度、精子存活率和精子活力分别为（37.21±42.95）×106/mL、（23.82±20.30）%、（11.79±12.62）%;AsAb阴性不育组分别为（90.01±83.52）×106/mL、（52.25±30.10）%、（35.28±23.46）%,两组比较差异有统计学意义（P〈0.05）,而两组间精子畸形率差异无统计学意义（P〉0.05）;AsAb各亚型间精子存活率和精子活力差异有统计学意义（P〈0.05）,而各亚型间精子畸形率和精子密度差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 Uu和AsAb严重影响精液质量,这对男性不育类型的鉴别诊断和选择治疗方案具有重要意义。     

男性不育者精液中一氧化氮和顶体酶、透明质酸酶、酸性磷酸酶的变化

目的探讨男性不育者精液中一氧化氮(NO)和顶体酶(ACE)、透明质酸酶(HYD)、酸性磷酸酶(ACP)的变化。方法参照世界卫生组织(WHO)标准方法进行精液常规分析,按精子密度、活动率不同分组。采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO3-);用改良的Kennedy法检测精子ACE活性;用Singer法测定HYD活性;采用磷酸苯二钠法检测ACP。结果72例不育各组NO含量明显高于正常生育组(P<0.01),而ACE、HYD、ACP活性则明显低于正常生育组(P<0.01),随精子密度、活动率减少和畸形率增高而NO含量升高,ACE、HYD、ACP活性降低。结论精液酶类是评价精子成熟、活动率及穿卵受精能力的重要指标,NO对精子酶活性有抑制灭活作用,可影响精子的受精能力,对男性不育的诊断治疗具有重要价值。     

不育症患者精浆胰岛素样生长因子-1含量测定及临床意义

目的探讨精浆中胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平与男性生殖状态的关系。方法应用免疫放射分析(IRMA)技术对126例不育男性精浆和血清中的IGF-1含量进行了检测。结果不育症组精浆IGF-1含量明显低于生育组,差异有显著性(P<0.01)。不育症组血清IGF-1含量与生育组差异无显著性(P>0.05)。生育组精浆和血清中IGF-1含量之间无明显相关性(P>0.05)。不育症组中白细胞(WBC)精液组和血清抗精子抗体(AsAb)阳性组精浆IGF-1含量均低于非WBC精液组和血清AsAb阴性组(P<0.05)。精浆IGF-1含量在精子活动力、精子活动率等精子功能下降组均明显低于精子功能正常组(P<0.01)。结论精浆中IGF-1的浓度与精子的密度、活动力、活动率有关,检测精浆中IGF-1浓度对于判断男性的生殖状态具在重要价值。     

精液中支原体衣原体及抗精子抗体的检测及评价

目的评价人型支原体(Mh)、解脲支原体(Uu)、衣原体(CT)感染和抗精子抗体(AsAb)对精液质量的影响。方法对85例不育男性和33例生育男性的精液进行Mh、CT及AsAb检测和精液质量分析,Mh用培养法,CT用乳胶法,AsAb用酶联免疫吸附试验(ELISA),精液质量用计算机扫描法,对其精子密度、活动力、活力、畸形率、液化时间进行测量。结果不育组Mh、CT、AsAb阳性率明显高于生育组,差异有统计学意义(P0.01);Mh或/和CT和AsAb阳性组的精子密度、活动力、活力明显低于阴性组,差异有统计学意义(P0.01);畸形率、液化时间明显高于阴性组,差异有统计学意义(P0.01)。结论Mh体和CT感染及AsAb阳性对精液多项参数有明显影响,是导致男性不育的原因之一。     

精液中一氧化氮含量与精子凋亡关系的初探

目的研究精液中一氧化氮(NO)含量对精子凋亡的影响及其与男性不育之间的相关性,寻找治疗男性不育的有效途径。方法依据世界卫生组织(WHO)标准进行精液常规检测。应用硝酸还原酶法测定不育组和对照组精液中NO的含量。应用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测精子凋亡情况,观察不育组精子凋亡的形态结构改变,统计2组间精子凋亡率。结果不育组精液中NO含量[(58.37±14.14)μmol/L]高于对照组[(35.20±8.23)μmol/L](P<0.01);对照组精子凋亡率为9.67%±2.54%,低于不育组精子凋亡率33.98%±10.54%(P<0.01)。将不育组分为弱精组、少精组和畸形精子组,以畸形精子组NO含量最高,凋亡率也为最高,弱精组及少精组次之。结论不育组高浓度NO和精子凋亡率呈正相关,随着NO浓度增高,精子凋亡率增加。精液中高浓度NO可能是男性生育力下降的原因之一。