婴幼儿哮喘与T辅助细胞亚群功能失衡研究

目的探讨Ｔ辅助细胞（Ｔｈ）亚群功能失衡在婴幼儿哮喘发病中的作用及其影响因素。方法酶联免疫吸附试验方法，对２０例哮喘患儿和１５例健康对照者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）分别经植物血凝素（ＰＨＡ）和脂多糖（ＬＰＳ）刺激后，培养上清液中各细胞因子含量进行测定。结果经ＰＨＡ刺激后哮喘组Ｔｈ产生ＩＦＮγ、ＩＬ２水平明显低于正常对照组（ｔ′＝４．１５，４．０７；Ｐ均＜０．０１），而ＩＬ４、ＩＬ６、ＩＬ１０水平则显著升高（ｔ′＝４．７３，５．９１，３１８，Ｐ均＜０．０１）。经ＬＰＳ刺激后，哮喘组单核巨噬细胞产生ＩＬ１０水平明显高于正常对照组（ｔ′＝５．６０，Ｐ＜０．０１）而ＩＬ１２水平则降低（ｔ′＝３．３４，Ｐ＜０．０１）。相关分析发现ＩＦＮγ与血清ＩｇＥ水平呈高度负相关（ｒ＝－０．６６４，Ｐ＜０．０１），ＩＬ４、ＩＬ１０与ＩｇＥ呈高度正相关（ｒ＝０．７７６，０７４０；Ｐ＜０．０１）。结论哮喘患儿生成Ｔｈ１类细胞因子不足，Ｔｈ２类因子增多；单核巨噬细胞产生ＩＬ１０增多，ＩＬ１２减少，导致Ｔｈ１／Ｔｈ２功能失衡     

胰岛素样生长因子1对新生儿脐带血单个核细胞产生细胞因子？…

目的 研究胰岛素样生长因子１（ＩＣＦ－１）对新生儿免疫功能的影响。方法 利用无血清、无激素培养系统,体外培养１０例健康足月顺产儿脐带血单个核细胞（ＣＢＭＣ）。１０例健康成人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）为正常对照,观察ＩＧＦ－１对ＣＢＭＣ细胞因子产生的影响。结果 与正常组比较,植物血凝素（ＰＨＡ）诱导的ＣＢＭＣＩＬ－２、ＩＬ－４、干扰素γ（ＩＦＮ－γ）、ＩＬ－１０和ＩＬ－１２水平显著低下（Ｐ值均〈０     

白细胞介素6在病毒性心肌炎发病中的作用

目的 探讨白细胞介素６（ＩＬ－６）在病毒性心肌炎发病中的作用。方法 用脑心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）诱发小鼠急性心肌炎，使用逆转录聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）及ＥＬＩＳＡ法测定了心肌组织内ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达及蛋白含量的变化，使用抗ＩＬ－６抗体体现人投入观察其作用。结果 ＥＭＣＶ感染后ＩＬ－６ｍＲＮＡ的表达明显增强，蛋白含量增加．抗ＩＬ－６抗体投入后导致生存率降低（Ｐ〈０．０５），心肌内病毒滴定度增高     

静脉注射免疫球蛋白对急性川崎病患儿淋巴细胞凋亡的影响

通过观察静脉注射免疫球蛋白（ＩＶＩＧ）对川崎病（ＫＤ）患儿淋巴细胞凋亡（ＡＰＯ）的影响，进一步探讨ＩＶＩＧ对免疫性疾病的作用机理。对２６例川崎病患儿和２０名健康儿童外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）经抗－ＣＤ３单克隆抗体刺激培养不同时间（０，１２，２４，４８，７２小时）ＡＰＯ百分率和ＤＮＡ片断化分析，２６例患儿随机分为两组，阿司匹林＋ＩＶＩＧ治疗组（ｎ＝１６）和阿司匹林治疗组（ｎ＝１０），并对ＰＢＭＣ经植物血凝素（ＰＨＡ）刺激淋巴细胞增殖反应进行了观察。结果：ＫＤ患儿ＡＰＯ百分率和ＤＮＡ片断化较正常儿童明显降低（Ｐ＜０．００１）和延迟；ＩＶＩＧ治疗后，降低的ＡＰＯ百分率和延迟的ＤＮＡ片断化被逆转，同时与单用阿司匹林组比较，临床症状明显改善。淋巴细胞增殖反应下调（Ｐ＜０．００１）。外周血淋巴细胞ＡＰＯ下调可能参与了ＫＤ的发病。ＩＶＩＧ治疗ＫＤ的机理可能部分归于对被抑制的淋巴细胞ＡＰＯ的逆转。ＩＶＩＧ对其它淋巴细胞凋亡不足的自身免疫性疾病治疗可能存在同样机理。     

下呼吸道感染患儿外周血单个核细胞呼吸道合胞病毒感染的研究

为探讨呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）对外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的感染情况及感染后细胞免疫的变化，采用免疫组化法对１８例ＲＳＶ性急性下呼吸道感染患儿ＰＢＭＣ内ＲＳＶ及其Ａ、Ｂ亚型抗原进行了检测；采用ＡＰＡＡＰ法、ＭＴＴ比色法和ＥＬＩＳＡ法对Ｔ细胞亚群及Ｔ细胞表面白细胞介素２受体表达、ＰＢＭＣ培养上清液白细胞介素２（ＩＬ－２）活性和可溶性ＩＬ－２受体水平进行了测定。结果显示：１８例ＲＳＶ感染患儿中７例ＰＢＭＣ内可检测到ＲＳＶ抗原；１１例ＲＳＶＡ亚型感染者５例ＰＢＭＣ内均为ＲＳＶＡ亚型阳性，７例ＲＳＶＢ型感染者２例Ｂ亚型阳性；７例恢复期和１０例对照组患儿均为阴性；发病３天以内ＰＢＭＣ中ＲＳＶ抗原阳性者多于３天以后（Ｐ＜０．０５）。ＲＳＶ感染组ＰＢＭＣ内ＲＳＶ抗原阳性者，ＣＤ４细胞比率和ＩＬ－２水平均低于阴性者（ｔ＝２．３８，２．４０，Ｐ值均＜０．０５）。提示：ＲＳＶ性急性下呼吸道感染患儿ＰＢＭＣ可被ＲＳＶ感染，可能由此加重免疫活性细胞损害，导致细胞免疫功能紊乱。     

紫癜性肾炎患儿外周血单个核细胞白细胞介素-13的变化

目的　探讨白细胞介素１３（ＩＬ－ １３） 在紫癜性肾炎（ＨＳＰＮ） 的变化。方法　应用逆转录－ 多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ） 及双抗体夹心ＥＬＩＳＡ 法,分别检测了３０ 例健康儿童和２０ 例ＨＳＰＮ 患儿活动期和恢复期外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ） 在植物血凝素（ＰＨＡ） 刺激下ＩＬ－ １３ ｍＲＮＡ和蛋白水平的变化。结果　①ＨＳＰＮ 活动期ＰＢＭＣ中ＩＬ－１３ ｍＲＮＡ 和蛋白水平均显著高于正常对照组（０ ．４８ ±０ ．１１ ｖｓ０．３６±０．１６ 和４７ ．８９ ±１１ ．６７ ｐｇ／ｍｌｖｓ３５．２２±４．４２ ｐｇ／ｍｌ, Ｐ均＜ ０．０１） ,恢复期与正常对照组相比无显著差异（０．３８±０．１２ ｖｓ０．３６±０ ．１６ 和３５ ．９４ ±５．６０ ｐｇ／ｍｌｖｓ ３５ ．２２±４ ．４２ ｐｇ／ｍｌ,Ｐ均＞ ０．０５）;②临床上表现为蛋白尿型、肾病综合征型及急性肾炎综合征型者,活动期ＰＢＭＣ中ＩＬ－ １３ ｍＲＮＡ和蛋白水平均显著高于正常对照组,而表现为单纯血尿型者与正常对照组相比无显著差异。结论　ＨＳＰＮ 患儿活动期ＩＬ－ １３ 表达异常,且与临床类型有一定的相关关系。     

联合用药对卡马西平血浓度及临床疗效的影响

采用高性能液相色层分析法对１１８例服用卡马西平的癫痫患儿测定了血卡马西平（ＣＢＺ）及其中间代谢产物１０、１１－环氧卡马西平（Ｅ－ＣＢＺ）药浓度。７８例单用ＣＢＺ，４０例合用其他抗痫药，其中１５例合用苯巴比妥（ＰＢ）、７例合用苯妥英钠（ＰＨＴ）、１０例合用丙戊酸钠（ＶＰＡ－Ｎａ）、８例合用硝基安定（ＮＴＺ）。各组ＣＢＺ平均给药剂量相似。结果表明，合用ＰＢ或ＰＨＴ组血ＣＢＺ药浓度与临床疗效明显低于单药组（Ｐ＜０．０１）。合用ＶＰＡ－Ｎａ组血ＣＢＺ浓度与单药组无显著差异，Ｅ－ＣＢＺ血浓度明显高于单药组（Ｐ＜０．０１），而临床疗效低于单药组（Ｐ＜０．０５）。合用ＮＴＺ组血ＣＢＺ及Ｅ－ＣＢＺ浓度与临床疗效与单药组比较，差异均无显著意义（Ｐ＞０．０５）。提示ＣＢＺ抗痫治疗不宜与ＰＢ或ＰＨＴ合用，Ｅ－ＣＢＺ浓度与临床疗效无相关性。     

甲基氢化泼尼松对哮喘患儿单核-巨噬细胞产生IL-10/IL-12及其mRNA表达的影响

目的了解激素对哮喘患儿单核巨噬细胞（ＭｏＭφ）产生白细胞介素（ＩＬ）１０、ＩＬ１２的影响,认识其对哮喘细胞因子网络的调节作用。方法将临床３０例哮喘患儿随机分为甲基氢化泼尼松（ＭＰ）治疗组（１５例）和对照组（１５例）,用ＥＬＩＳＡ方法测外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）产生ＩＬ１０、ＩＬ１２的水平;用逆转录聚合酶链反应（ＲＴＰＣＲ）测定两因子的ｍＲＮＡ表达。结果ＭＰ在基因转录和蛋白合成两个水平对ＭｏＭφ产生ＩＬ１０有明显抑制作用,对ＩＬ１２的抑制则不明显。结论皮质激素可能部分通过调节ＭｏＭφ分泌ＩＬ１０、ＩＬ１２的能力而影响哮喘Ｔ辅助细胞１／Ｔ辅助细胞２功能,以达到抗炎作用。     

毛细支气管炎患儿外周血单个核细胞产生IL-4、IL-6和IL-10水平研究

采用ＥＬＩＳＡ法测定２０例毛细支气管炎（毛支）患儿外周血单个核细胞（ＰＢＭＣｓ）产生Ｔｈ２类细胞因子水平。结果表明，毛支组ＩＬ－４、ＩＬ－６和ＩＬ－１０水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１，０．０１，０．０５），即Ｔｈ２类细胞因子水平增高。提示毛支患儿可能存在与哮喘相似的免疫功能异常，即Ｔｈ亚群功能失衡，并与发病密切相关。     

过敏性紫癜白细胞介素2水平及其受体表达

采用￣３Ｈ－ＴｄＲ掺入法检测急性期过敏性紫癜患儿白细胞介素２（ＩＬ－２）水平，同时用抗Ｔａｃ单克隆抗体以ＡＰＡＡＰ方法检测外周血淋巴细胞中白细胞介素２受体阳性细胞（ＩＬ－２Ｒ￣＊）及用ＥＬＩＳＡ方法检测血清中可溶性白细胞介素２受体（ＳＩＬ－２Ｒ）水平。结果显示急性期过敏性紫癜患儿ＩＬ－２水平和ＩＬ－２Ｒ￣＋细胞均比正常对照组显著降低（Ｐ＜０．０１），血清中ＳＩＬ－２Ｒ水平与正常对照组相比显著升高（Ｐ＜０．０１）。提示，在过敏性紫癜的发病机制中ＩＬ－２和ＩＬ－２Ｒ具有重要意义。     

病毒性肝炎T细胞亚群和几种细胞因子变化的研究

为了探讨小儿病毒性肝炎发病的细胞免疫机制，应用不标记抗体桥联酶标技术（ＡＰＡＡＰ法）检测了５６例病毒性肝炎患儿的外周血Ｔ细胞亚群及膜性白细胞介素２受体（ｍＩＬ－２Ｒ）表达率。应用酶联免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法分别检测了４９例病毒性肝炎患儿单个核细胞培养上清液（ＰＢＭＣｓ）中肿瘤坏死因子α（ＴＮＦα）、白细胞介素６和８（ＩＬ－６、ＩＬ－８）及α干扰素（ＩＦＮ－α）浓度。结果显示：甲型肝炎（简称甲肝）急性期、慢性乙型肝炎（简称乙肝）及丙型肝炎（简称丙肝）组与正常对照比较，ＣＤ４细胞降低，ＣＤ８细胞升高。用植物血凝素（ＰＨＡ）刺激前，甲肝急性期患儿ｍＩＬ－２Ｒ表达率明显高于其他各组，用ＰＨＡ刺激后，各组ｍＩＬ－２Ｒ表达率均显著高于刺激前，但乙肝及丙肝组ｍＩＬ－２Ｒ表达率与正常对照比较则明显降低。甲肝急性期、乙肝及丙肝患儿ＰＢＭＣｓＴＮＦα、ＩＬ－６、ＩＬ－８均较正常对照组升高，而α干扰素（ＩＦＮ－α）均较正常对照组降低。甲肝恢复期ＣＤ４、ＣＤ８和ＰＨＡ刺激前ＰＢＭＣ上ｍＩＬ－２Ｒ表达率以及上述各细胞因子水平均恢复正常。提示细胞免疫功能紊乱与小儿病毒性肝炎的发病及肝损害过程有关。     

心力衰竭时内分泌改变与血液动力学关系的研究

对２０例健康儿童、２３例心衰病儿检查血浆肾素活性（ＰＲＡ）、血管紧张素Ⅱ（ＡＴⅡ）、醛固酮（ＡＬＤ）、心钠素（ＡＮＦ）。心衰病儿上述四项内分泌素显著高于健康儿童，其升高程度与心衰程度相一致，并分别分析他们与心脏指数（ＣＩ）、主动脉峰值流速（ＰＦＶＡ）、肺动脉峰值流速（ＰＦＶＰ）的关系。通过Ｂａｙｅ判别，Ｙ０＝－１５．９２００＋１２．１５３７ｌｏｇＡＴⅡ＋６．０９９４ｌｏｇＡＮＦ，Ｙ１＝－２７．０６８６＋１５．３５２２ｌｏｇＡＴⅡ＋８．３４６７ＡＮＦ，Ｙ０＞Ｙ１为正常；Ｙ１＞Ｙ０为心衰。     

哮喘患儿外周血白细胞介素10水平及其对白细胞介素2等的调节作用

目的 探讨白细胞介素２、１０（ＩＬ－２、１０），一氧化氮（ＮＯ）和肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ－α）在小儿哮喘发病机制中的作用。方法 采用双抗夹心酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）技术检测了２８例哮喘患儿血浆及外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）在植物血凝素（ＰＨＡ）刺激下产生ＩＬ－１０的水平，同时检测了ＮＯ、ＩＬ－２和ＴＮＦ－α的水平，并研究了重组人ＩＬ－１０（ｒｈＩＬ－１０）对ＰＢＭＣ体外诱生ＮＯ、ＩＬ－２和Ｔ     

亚临床维生素A缺乏儿童的免疫功能损害：附80例调查报告

观察亚临床维生素Ａ缺乏（ＳＶＡＤ）儿童淋巴细胞增殖，ＩＬ－２，ＩＬ－６和Ｂ细胞生长因子活性（ＢＣＧＦ）及体外ＩｇＧ亚类产生能力，并行维生素Ａ酸（ＲＡ）体我纠正试验和口服维生素Ａ（ＶｉｔＡ）１月后的随访，结果示ＩＬ－２，ＩＬ－６和ＢＣＧＦ活性，Ｔ细胞和Ｂ细胞增殖反应，以及ＩｇＧ１，ＩｇＧ２和ＩｇＧ４体外产量在ＳＶＡＤ组明显低于维生素Ａ，正常组（ＶＡＮ），ＩｇＧ３在ＳＶＡＤ和ＶＡＮ组间无差别，ＩＬ－２     

低浓度一氧化氮及妥拉苏林对兔低氧性肺动脉高压的作用比较

目的　探讨吸入低浓度一氧化氮（ＮＯ） 及妥拉苏林气管内和右心室内给药对肺动脉高压的作用。方法　予急性低氧性肺动脉高压家兔模型吸入６×１０－ ６ ＮＯ及气管内滴入和右心室内注入０－５ ｍｇ／ｋｇ 妥拉苏林,通过左颈总动脉插管和右心室插管观察平均动脉压（ＭＡＰ） 、右心室收缩压（ＳＲＶＰ）及血气的变化。结果　低氧通气使家兔ＳＲＶＰ由（１４－０ ±２－２） ｍｍＨｇ（１ ｍｍＨｇ＝ ０－１３３ ｋＰａ）上升至（１７－４±２－０） ｍｍＨｇ（Ｐ＜０－０５）,吸入６×１０－６ ＮＯ 后降至基础水平（ Ｐ＜ ０－０５）;吸入前后ＭＡＰ差异无显著意义（Ｐ＞ ０－０５）。低氧通气同时吸入ＮＯ对动脉血氧分压无影响。妥拉苏林两种给药途径均使ＭＡＰ和ＳＲＶＰ下降（Ｐ＜０－０５） ;气管内给药还使ＳＲＶＰ／ＭＡＰ比值由０－２１±０－０６ 下降至０－２０±０－０６（ Ｐ＜０－０５）,该效应与吸入ＮＯ相比,差异有显著意义（ Ｐ＜ ０－０５） 。气管内给药使ＭＡＰ、ＳＲＶＰ下降的百分率均小于右心室内给药（Ｐ＜０－０５）。结论　吸入６ ×１０－６ ＮＯ能选择性扩张肺血管;妥拉苏林气管内给药具有一定的肺血管选择性,仍弱于ＮＯ的作用;但右心室内给药缺乏肺血管选择性。     

甲基氢化泼尼松对哮喘患儿单核—巨噬细胞产生IL—10／IL—12及其mR …

目的 了解激素对哮喘患儿单核－巨噬细胞产生白细胞介素（ＩＬ）－１０，ＩＬ－１２的影响，认识其对哮喘细胞因子网络的调节作用。方法 将临床３０例哮喘患儿随机分为甲基的氢化泼尼松治疗组和对照组，用ＥＬＩＳＡ方法对外周血单个细胞产生ＩＬ－１０，ＩＬ－１２的水平；用逆转录聚合酶链反应测定两因子的ｍＲＮＡ表达。     

哮喘患儿白细胞介素2,6的检测及其意义

采用克隆化小鼠细胞毒性Ｔ淋巴细胞系（ＣＴＬＬ）及ＥＢ病毒转化的Ｂ淋巴母细胞样细胞株（ＣＥＳＳ）生物学活性法，分别测定了正常儿及哮喘患儿外周血淋巴细胞产生白细胞介素２，６（ＩＬ－２，６）的水平，以及其他多项免疫学指标，并在动物模型上进行验证，以探讨ＩＬ－２，６在哮喘免疫发病机理中的作用。结果表明：轻中症哮喘患儿ＩＬ－２，６的活性水平高于对照组（ＩＬ－２：２１２８８±６１８１；１６１５２±３４１１，Ｐ＜０．０５；ＩＬ－６：１７３．１８±５０．７８；１２０．５３±３５．０９，Ｐ＜０．０１），而哮喘持续状态时显著低于对照组（ＩＬ－２：１００５２±４０１５，Ｐ＜０．０１；ＩＬ－６：６６．８２±１１．１８，Ｐ＜０．０１）。提示ＩＬ－２，６可能是哮喘气道高反应性的重要介质，在哮喘的免疫发病机制中占有重要地位。     

产前注射乙型肝炎免疫球蛋白预防乙型肝炎病毒宫内感染的临床研究

目的 减少新生儿宫内感染乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）,探讨孕妇被动免疫预防ＨＢＶ宫内感染的作用。方法 将１４１例无症状ＨＢｓＡｇ（＋）孕妇随机分为两组,预防组６９例,自孕２８周起每月注射１次乙型肝炎免疫球蛋白（ＨＢＩＧ）,每次２００ ＩＵ;对照组７２例,不注射ＨＢＩＧ。在孕妇孕２８周、分娩前和新生儿出生时分别检测静脉血ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ和抗－ＨＢｓ,部分产妇检测乳汁ＨＢｓＡｇ,ＨＢｅＡｇ。结果 预防组新生儿血清ＨＢｓＡｇ检出率（５．８％）明显低于对照组（１６．７％）Ｐ＜０．０５;预防组新生儿抗－ＨＢｓ阳性率（３０．４％）显著高于对照组（９．７％）Ｐ＜０．０５;两组母亲乳汁ＨＢｓＡｇ检出率无显著差异。结论 产前多次肌注ＨＢＩＧ可减少携带ＨＢＶ母亲所生新生儿宫内受ＨＢＶ感染。     

轮状病毒VP4全基因的序列分析及其在原核系统中的初步表达

目的 研究轮状病毒（ＲＶ）我国地方株ＶＰ４基因特点，并获得高效表达的ＶＰ４。方法 采用ＲＴ－ＰＣＲ技术扩增ＲＶＰＩＡ型我国地方株（ＣＲ１８８的完整ＶＰ４基因，克隆到原核表达质粒ｐＥＴ２１ａ（＋）中：（１）用末端终止法进行核苷酸序列测定。并与人（ＨＲＶ）标准株作比较分析；（２）重组质粒转化原核表达宿主菌Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）异丙硫半乳糖甙（ＩＰＴＧ）诱导表达，经十二烷基硫酸钠－聚丙烯酰胺凝胶     

新生儿B细胞功能与细胞因子

检测１８例健康新生儿脐血Ｔ细胞（ＴＬ）产生白细胞介素４（ＩＬ－４）及ＩＬ－６水平同时，观察ＩＬ－４、ＩＬ－６及ＩＬ－１０对Ｂ细胞（ＢＬ）功能即ＳＡＣ诱导的ＢＬ增殖与免疫球蛋白Ｇ（ＩｇＧ）合成的影响。结果发现新生儿ＴＬ产和珠ＩＬ－４及ＩＬ－６水平显著低于居人并与其ＢＬ功能低下呈显著正相关，ＩＬ－４、ＩＬ－６及ＩＬ－１０可不同程度地纠正新生儿低下的ＢＬ功能。本文提示ＴＬ产生的ＩＬ－４、ＩＬ－６及ＩＬ－