荧光原位杂交技术在快速产前诊断应用的研究进展

随着分子生物学技术和医学遗传学的发展,产前诊断技术向早期、快速、准确、无创伤发展,使越来越多的出生缺陷能够在胚胎发育的较早期诊断出来.荧光原位杂交技术（FISH）是一种为遗传病诊断提供更直观、快速诊断的分子细胞遗传技术,随着DNA技术的发展与染色体特异性探针的出现,FISH技术越来越多应用于生殖医学领域的临床诊断.该文对FISH技术在快速产前诊断中的研究进展作一综述.     

用荧光原位杂交技术进行染色体异常者胚胎植入前遗传学诊断

目的：初步探索应用荧光原位杂交(FISH)技术为染色体异常患者进行胚胎植入前遗传诊断(PGD)。方法：针对染色体结构异常的种类．分别选择亚端粒探针及着丝粒探针，用荧光原位杂交技术为5例染色体异常患者进行植入前遗传学诊断。结果：5例患者共行7个PGD周期，共获卵134个，活检47个胚胎，FISH分析可供移植胚胎16个，6个移植周期移植其中15个胚胎，获得1例临床妊娠，并经产前诊断验证，已顺利诞生1健康男婴。结论：荧光原位杂交技术能有效地应用于染色体异常者胚胎植入前遗传学诊断。     

染色体异常的产前诊断及荧光原位杂交技术的应用

染色体异常的产前诊断及荧光原位杂交技术的应用苏光乔惠珍（第一附属医院妇产科）近年来，随着科学的发展，死于传染病及营养不良的小儿比例在不断下降，而先天畸型和一些遗传病的发病率相对升高，加上环境污染日益严重，胎儿畸型等先天性疾病已成为婴儿死亡率的主要原因...     

荧光原位杂交技术的应用

荧光原位杂交（fluorescence in situ hybridization, FISH））技术是一门新兴的分子细胞遗传学技术,在疾病诊断中发挥了重要作用。本文主要对FISH技术的原理特点以及临床应用作一综述。     

荧光原位杂交(FISH)技术在产前诊断中的应用

目的 探讨FISH技术在产前诊断中的应用前景.方法 应用国产探针(CSP18 /CSPX/CSPY探针组和 GLP13 /G LP21探针组 ) 对 50例羊水中的细胞进行检测,从而判断胎儿13、18、21、X和Y染色体的数目有无异常,同时与50例羊水染色体培养结果进行对比.结果 严格按照实验流程操作,50例羊水的FISH均检测成功,与胎儿羊水染色体核型分析的结果相比较,准确率为 100%.但部分FISH检测结果中出现少量带有异常杂交信号的核.结论 FISH技术相比羊水培养具有时间周期短,准确率高等特点,具有重要的应用价值,但并不能完全取代羊水培养在产前诊断中的作用.     

荧光原位杂交技术及其在医学临床中的应用

染色体荧光原位杂交（Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅｉｎｓｉｔｌｌｈｙ ｂｒｉｄｉｚａｔｉｏｎＦＩＳＨ）技术是 80年代在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性的分子细胞遗传学技术。在临床细胞遗传学研究中,常规的染色体显带技术常常存在难以分辨染色体缺失、重复及复杂、细微的相互易位等问题,ＦＩＳＨ是在细胞水平上的一种分子技术手段,该技术与ＦＩＳＨ技术的结合为人类染色体畸变的研究提供了更为精确可靠的诊断依据［1］。因而ＦＩＳＨ技术已广泛应用于产前诊断、肿瘤生物学以及哺乳动物染色体进化等研究领域,成为医学…     

荧光原位杂交技术快速诊断胎儿染色体数目异常应用分析

目的:分析荧光原位杂交技术(Fluorescence in situ hybridization,FISH)在快速诊断胎儿染色体数目异常中的应用。方法:对本院2009年1月-2012年1月接受产前诊断的1 500例孕妇,利用荧光原位杂交技术检测其羊水间期核细胞的染色体数目。结果:1 500例孕妇中27例胎儿诊断为21-三体综合征;6例为18-三体综合征;2例为13-三体综合征;1例为45,XO(特纳综合征);1例47,XXY;1例47,XYY;共检查出38例胎儿染色体数目的异常。结论:在产前快速诊断胎儿染色体数目的异常中应用荧光原位杂交技术,具有简便、快捷、准确等特点,在临床应用中有一定价值。     

荧光原位杂交技术及其在遗传学中的应用进展

目的探讨荧光原位杂交技术及其在遗传学中的应用。方法通过阅读文献,对荧光原位杂交技术及其应用的进展进行综述。结果荧光原位杂交技术是由细胞遗传学、分子生物学及免疫学技术相结合而产生的一门新技术,在基因定位、产前诊断、遗传病检测、肿瘤遗传学基础研究等领域应用广泛。近年来,探针的种类及该技术都有新的进展,染色体描绘、比较基因组杂交、光谱染色体自动核型分析等都是在荧光原位杂交技术基础之上发展起来的多色荧光杂交新技术。结论荧光原位杂交技术与常规细胞遗传学方法相比,分析方法简便、迅速、精确,直观性强,既可以检测中期分裂相又可以检测间期细胞核,在遗传学领域有着广阔的应用前景。     

荧光原位杂交技术在膀胱癌诊断中的临床应用

目的探讨荧光原位杂交技术(FISH)在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法对30例可疑膀胱尿路移行上皮细胞肿瘤的血尿患者的尿液标本同时行尿脱落细胞学检测和荧光原位杂交分析,并与最终的病理学检查结果对比。结果尿脱落细胞学的灵敏度为33.33%,特异度为100%,FISH的灵敏度为85.71%,特异度为88.89%,两者灵敏度相比差异具有统计学意义(P<0.05),而两者特异度相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FISH技术在检测膀胱移行上皮细胞癌方面具有较高的灵敏度和特异度,在膀胱癌的诊断中具有重要的临床意义和实用价值。     

荧光原位杂交技术在快速诊断胎儿染色体数目异常中的应用

目的 探讨荧光原位杂交（FISH）技术在快速产前诊断胎儿染色体数目异常中的价值.方法 采用13、18、21、X和Y染色体特异性DNA探针,对123例高危孕妇的羊水间期细胞进行FISH检测,同时行常规染色体核型分析平行诊断,以此监测对比荧光原位杂交结果的准确性.结果 所测123份标本的13、18、21、X、Y染色体数目均与常规染色体核型分析的结果相符,其中,检测结果显示染色体数目正常的为120例,染色体数目异常的为3例,分别为21-三体2例,18-三体1例;正、异常与常规染色体核型分析结果符合率均为100%.结论 荧光原位杂交技术检测过程简单、快捷,特异性较强,且灵敏度较高,是一种可用于临床的快速产前诊断方法.     

染色体畸变与膀胱移行细胞癌临床病理相关性研究

目的 探讨通过多色荧光原位杂交(Multicolor Fluorescence in Situ Hybridization,M-FISH)检测3、7、9、17号染色体数目畸变情况与膀胱移行细胞癌(Bladder Transition Cell Carcinoma,BTCC)临床分期与病理分级的关系.方法 采用3、7、17号染色体着丝粒探针和9p21区带探针对46例BTCC尿脱落细胞进行M-FISH检测,得出其敏感性,并分析染色体畸变与BTCC生物学特性的相关关系.结果 ①M-FISH的灵敏度为73.90％(34/46).②M-FISH在肿瘤Ta～T1、T2～T4的阳性率分别为50.00％和84.38％,其阳性率与BTCC临床分期呈正相关性(P＜o.05).③M-FISH在肿瘤G1、G2、G3的阳性率分别为42.86％、80.00％和100.00％,其阳性率与BTCC病理分级呈正相关性(P＜0.05).④M-FISH在复发性BTCC的敏感性为83.33％(10/12).结论 使用M-FISH技术检测尿脱落细胞3、7、9、17号染色体数目畸变在无创性辅助诊断BTCC,分析其浸润深度和恶性程度及对预后复发的监测具有重要的参考价值.     

Preimplantation gender diagnosis by fluorescence in situ hybridization

目的：应用荧光原位杂交技术进行人类胚胎植入前性别诊断。方法：对2例甲型血友病基因携带、1例男性葡萄糖6磷酸脱氢酶（G-6-PD）缺乏患和2例Y染色体异常的患进行了6个周期的超排卵治疗。胚胎活检后取单个细胞进行固定,然后用荧光原位杂交技术检测胚胎的性别,根据遗传学规律选择胚胎性别后将胚胎移植入子宫。结果：5例患经6个治疗周期共取卵123个。可供活检的胚胎共61个,活检成功率为86.9％,活检后继续分裂率为62.3％,活检细胞固定率为98.1％。我们共移植了16个女性胚胎和3个男性胚胎,获得1例生化妊娠和3例临床妊娠,分别在羊水细胞和减胎组织中证实诊断的准确性。结论：荧光原位杂交技术用于遗传病的种植前诊断准确有效。对血友病等进行植入前性别诊断能避免选择性流产和重型患儿的出生,有利于优生。     

荧光原位杂交在染色体异常产前诊断中的应用研究

目的对国产荧光原位杂交（FISH）试剂盒在染色体异常产前诊断中应用的可行性进行评估。方法对115例羊水样本行常规染色体核型检测外,进行间期FISH快速检测。采用国产FISH探针,特异性识别21、18、13、X、Y染色体。结果 115例样本中FISH杂交成功100例,结果获取需24～48h,其中95例为正常;3例为21三体;1例为18三体,结果与染色体核型分析一致;另有1例异常细胞数比例未达到判定阈值而结果不能判定,该样本的核型分析显示为47,XXY[7]/46,XY[43]的低比例嵌合体。未见假阴性和假阳性。结论国产FISH试剂盒具有较好的敏感性和特异性,与核型分析相比具有用材少、耗时短、操作简便及人员专业性依赖程度小的优势,但存在探针靶点有限、实验操作失败和结果不能判定的概率较高等问题。     

荧光原位杂交在染色体异常产前诊断中的应用研究

目的 对国产荧光原位杂交(FISH)试剂盒在染色体异常产前诊断中应用的可行性进行评估.方法 对115例羊水样本行常规染色体核型检测外,进行间期FISH快速检测.采用国产FISH探针,特异性识别21、18、13、X、Y染色体.结果 115例样本中FISH杂交成功100例,结果获取需24～48 h,其中95例为正常;3例为21三体;1例为18三体,结果与染色体核型分析一致;另有1例异常细胞数比例未达到判定阈值而结果不能判定,该样本的核型分析显示为 47,XXY[7]/46,XY[43]的低比例嵌合体.未见假阴性和假阳性.结论 国产FISH试剂盒具有较好的敏感性和特异性,与核型分析相比具有用材少、耗时短、操作简便及人员专业性依赖程度小的优势,但存在探针靶点有限、实验操作失败和结果不能判定的概率较高等问题.     

分子和细胞遗传学新技术在出生缺陷诊断及防治中的应用

SincePinkelandGray[1] firstappliedFluorescenceinsituhybridization (FISH)techniquestocytogeneticdiagnosis ,FISHtechnology ,acombinationofmolecu larandconventionalcytogenetictechniques (molecularcytogenetics) ,hasbroughtmoderncytogeneticstoanewerawithsignif…     

荧光原位杂交在产前诊断中的应用

目的 分析荧光原位杂交分析技术（fluorescence in situ hybridization,FISH）在快速诊断羊水细胞染色体异常中的应用价值。方法 以2013年6月至2017年12月间在首都医科大学附属北京妇产医院产前诊断中心接受羊水穿刺的1 676名孕妇为研究对象,抽取羊水后同时进行荧光原位杂交分析和染色体核型分析,然后比对两种检测的检测结果。结果 共收集1 676名同时进行核型分析和FISH检测的孕妇检测结果。羊水穿刺指征包括：高龄（637例,38.1%）、唐氏筛查高危（699例,41.71%）、无创游离DNA检测高风险（315例,18.79%）、B超异常（16例,0.95%）等。FISH检测结果阳性240例（14.13%）,包括21三体140例、18三体44例、13三体14例、性染色异常32例以及嵌合体10例。核型分析阳性252例,除包括上述240例FISH检测阳性结果外,还包括22号染色嵌合体1例、平衡结构重排6例、非平衡结构重排1例以及多态4例。结论 FISH检测能够快速准确诊断21号、18号、13号以及性染色体数目异常,根据FISH结果可进行进一步临床处理。怀疑胎儿携带其他染色体异常时,需联合核型分析等方法综合使用。     

荧光原位杂交检测浸润性乳腺癌中人类表皮生长因子受体2基因临床应用的可行性研究

目的比较免疫组织化学（IHC）及FISH2种方法检测浸润性乳腺癌中人类表皮生长因子受体2（Her-2）表达的差异性,同时探讨其临床病理联系,为FISH技术应用于Her-2的临床检测提供实验依据。方法采用IHC及FISH分别检测51例浸润性乳腺癌中Her-2蛋白表达及基因扩增,两种方法均严格按照美国临床肿瘤协会（ASCO）和美国病理家协会（CAP）联合制定的乳腺癌Her-2基因临床检测指南进行。结果 51例浸润性乳腺癌中,IHC染色-/＋17例（33%）、＋＋18例（35%）及＋＋＋16例（31%）,FISH检测Her-2基因扩增阳性27例（53%）,阴性24例（47%）。2种检测结果呈正相关（r=0.612,P〈0.001）。同时实验表明IHC染色-/＋的17例中Her-2基因扩增3例（18%）,IHC＋＋18例中Her-2基因扩增9例（50%）,而IHC＋＋＋16例中Her-2基因扩增15例（94%）,2种方法相比较差异有统计学意义（P〈0.01）。本实验还显示Her-2基因的扩增与患者年龄、T分类、N分类、淋巴结转移及PR的表达状态等均无相关性,仅与ER的表达状态显著相关（P〈0.01）。结论 IHC检测浸润性乳腺癌组织中Her-2的蛋白表达作为曲妥珠单抗药物选择的初筛手段,必要时还要联合FISH技术检测Her-2的基因扩增状态,方能准确指导临床选用曲妥珠单抗。