血吸虫蛋白水解酶速发超敏反应的种特异性

由于假阴性和假阳性反应,血吸虫粗抗原皮内试验近年来已不为人所喜用。为了提高血吸虫皮内试验抗原的可靠性,作者提纯了一种血吸虫酸性蛋白水解酶,能致敏宿主,只引起速发型超敏反应,对埃及或曼氏血吸虫感染均有特异性。作者用小鼠肥大细胞脱粒试验及猴皮内试验对曼氏及埃及血吸虫粗抗原与提纯蛋白水解酶的抗原性质进行了比     

用单克隆抗体测定血吸虫病循环抗原Ⅰ.一株具有诊断意义的单克隆抗体的特异性分析

本文报道用40:B1 McAb检测曼氏血吸虫感染者血或尿中血吸虫成虫循环阴极(M)抗原具高度特异性。用曼氏血吸虫成虫排泄/分泌抗原(ESA)(含循环阴极(M)抗原)免疫的BALB/c小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,获得数株能识别阴极(M)抗原的McAb。用IFA分别定位于成虫肠道、体部和皮层,抗体亚类分别为IgG_3,IgM或IgG_1。分析了其中一株McAb 40:B1(IgG_3,用IFA定位于成虫肠道和体部)检测血吸虫循环抗原的特异性。     

肝片形吸虫:分子克隆、核苷酸序列以及编码与曼氏血吸虫脂肪酸结合蛋白类似的多肽基因的表达

已证明用肝片形吸虫成虫分子量12kDa的抗原性多肽(Fh12)免疫小鼠,再以曼氏血吸虫攻击感染,其虫负荷减少50%以上。而感染曼氏血吸虫的小鼠5至6周后产生抗Fh12的抗体,表明这种片吸虫来源的抗原是一种交叉反应性和交叉保护性的抗原。本文报告从牛的肝片形吸虫成虫在液氮     

63kDa血吸虫抗原的免疫化学特性和诊断潜力

作为血吸虫病诊断的重要一步,确定不同发育时期血吸虫抗原,了解它的特性并评价其在寄生虫-宿主间所起的作用是十分必要的。已分离和纯化了许多不同发育时期的血吸虫抗原,它们在免疫诊断中具有潜在的应用价值。本研究用特异性抗曼氏血吸虫鼠单克隆抗体(McAb)抽取和纯化了血吸虫抗原,并评价此McAb在曼氏血吸虫病诊断中的适用性。     

人类免疫缺陷病毒-1 Vif蛋白的表达及生物学功能

目的 分析上海HIV-1分离株病毒感染因子(Vif)蛋白编码基因突变特点,构建HIV-1vif基因原核表达质粒,并了解其免疫原性.方法 采用RT-PCR法扩增23例上海HIV-1分离株vif基因并测序,与HIV-1国际标准毒株比较;将vif编码基因克隆入原核表达载体pET32b(+),构建pET32b(+)-HIV-1/Vif重组质粒;将该质粒转化入细胞BL21D3(Star)表达,并纯化HIV-1 Vif蛋白,制备Vif蛋白鼠多克隆抗体,并以ELISA检测Vif蛋白及其鼠多克隆抗体的免疫原性.统计学处理采用t检验.结果 上海HIV-1分离株vif基因与国际标准毒株相比较,核苷酸突变率为(0.179±0.006)%,并具有多处相似的变异位点,上海HIV-1分离株Vif蛋白第151～240位氨基酸相对保守;成功构建HIV-1 vif基因原核表达质粒pET32b(+)-HIV-1/Vif,表达并纯化Vif蛋白,制备了Vif多克隆抗体;重组HIV-1 Vif蛋白与HIV感染者及健康人血清反应比较,差异无统计学意义(P＞0.05);鼠多克隆抗体与重组Vif蛋白反应与健康对照组血清比较差异有统计学意义(t=178.61,P<0.01).结论 上海HIV-1分离株vif基因与HIV-1国际标准毒株比较存在较高突变,成功地构建了HIV-1 vif基因原核表达载体pET32b(+)-HIV-1/Vif,制备了Vif多克隆抗体.     

血吸虫病与其他寄生虫病网络精选(2003.01.01-2003.04.30)

1　血吸虫病1.1　曼氏血吸虫与恶性疟原虫的交叉反应　 Naus等 [1 ] 报告 ,在肯尼亚、乌干达和苏丹恶性疟疾和曼氏血吸虫感染者中 ,检测针对恶性疟原虫裂殖体和曼氏血吸虫虫卵、成虫的特异性免疫球蛋白 Ig G1 和 Ig G3。结果发现抗疟原虫的 Ig G3和抗血吸虫的 Ig G3明显相关。这种相关似乎是该 2种寄生虫间存在着交叉反应的抗原组分。以后在巴西和巴基斯坦的研究中证实了这点。巴西的血吸虫病流行区没有疟疾 ,巴基斯坦的疟疾流行区没有血吸虫病 ,2个流行区的感染者中存在抗这 2种寄生虫抗原 Ig G3的交叉反应 ,而在未感染这 2种寄生虫的…     

血吸虫28kDa谷胱甘肽S转移酶的种间变异

曼氏血吸虫28kDa谷胱甘肽S转移酶(Sm 28GST)是一种侯选的疫苗抗原,但血吸虫种间异源抗原交叉保护的可能性尚未完全了解。克隆不同种血吸虫28kDa GST并评价其种缘关系是必要的。选用牛血吸虫Salamance株(Sb)、埃及血吸虫Libore株(Sh)、曼氏血吸虫波多黎各株(Sm)和日本血吸虫大陆株(Sj)作为实验材料,用谷胱甘肽琼脂糖柱纯化各种成虫抽提液中的GST。重组体Sm 28GST在大肠杆菌表达并经亲     

两个地区的曼氏血吸虫分离物的表膜抗原及其交叉保护性

用波多黎各和埃及两个地区的曼氏血吸虫进行动物实验,以比较波多黎各(PR)和埃及的曼氏血吸虫(E)童虫表膜抗原是否有差别,并就动物体内两个地区血吸虫诱发的交叉保护性的能力作了评价。表膜抗原:实验使用的抗血清为(1)接     

血吸虫成虫31/32kDa蛋白分子研究的进展

曼氏血吸虫成虫31/32kDa蛋白的基因已经克隆和表达,核苷酸和氨基酸序列分析表明:31kDa蛋白在多肽水平上与哺乳动物组织蛋白酶B有同源性,32kDa蛋白的核苷酸顺序与血红蛋白酶相同。来源于成虫肠道的血吸虫31/32kDa蛋白可用于三种人体血吸虫病时免疫诊断。     

曼氏血吸虫原肌球蛋白:重组蛋白的制备、纯化及其用于免疫诊断的可能性

从曼氏血吸虫成虫及童虫中曾分离出一约40kDa多肽,它具有较强的免疫原性,并为慢性曼氏血吸虫感染者和经照射尾蚴免疫的动物血清所识别。该多肽为原肌球蛋白(tropomyosin),是肌肉收缩系统中的一种主要调节分子。本研究用DNA重组技术制备曼氏血吸虫原肌球蛋白,与正常人及多种寄生虫感染病人血清进行Western blot和ELISA,进一步研究其在免疫诊断中的价值。     

日本血吸虫成虫31/32KD诊断蛋白:与血吸虫单克隆抗体和病人血清的免疫印斑反应

应用免疫印斑试验观察日本血吸虫成虫蛋白与感染日本血吸虫病人和鼠血清的反应证实:日本血吸虫和曼氏血吸虫具有相同的31/32KD诊断蛋白;两者均来源于成虫肠管:与抗血吸虫单克隆抗体的反应基本相同。但是,两种血吸虫蛋白至少有一个抗原决定簇不同。日本血吸虫诊断蛋白与血吸虫病人和其他寄生虫病患者血清检测结果,证实了血吸虫成虫31/32KD蛋白可应用于日本血吸虫病的血清学诊断。     

日本血吸虫和曼氏血吸虫成虫31/32kD蛋白的纯化及在诊断中的应用

本研究以前染蛋白为指示,将制备型SDS—PAGE和电渗析技术相结合,分离、纯化日本血吸虫和曼氏血吸虫成虫31/32kD蛋白,用于ELISA中诊断血吸虫病。结果:纯化日本血吸虫成虫31/32kD蛋白(Psj31/32)与急、慢性日本血吸虫病和曼氏血吸虫病人血清反应的阳性率分别为100％、100％和98.4％;纯化曼氏血吸虫成虫31/32kD蛋白(Psm31/32)与上述病人血清反应的阳性率均为100％。与NHS和其它寄生虫病人血清反应的特异性较高。Psj31/32和Psm31/32检测同种血清,它们的OD值具有高度的正相关关系,但OD值与曼氏血吸虫病人粪便中虫卵数量(EPG)无相关关系。结果提示:两种纯化的31/32kD蛋白在血吸虫病诊断中具有较高的敏感性和特异性,并具有共同抗原决定簇存在,不仅可用于诊断急、慢性日本血吸虫病,而且Psj31/32也可作为诊断曼氏血吸虫病的候选抗原,用于我国输入性曼氏血吸虫病的诊断。     

曼氏血吸虫不同地理株活疫苗保护性的比较

作者等曾证实曼氏血吸虫减毒后能诱导对同株血吸虫感染的保护性。为了了解不同株曼氏血吸虫间是否存在交叉保护性,以及实验室里的长期小鼠传代是否影响其抗原性,作者用下列6个不同地理株曼氏血吸虫作了保护性免疫试验:PR/LS株和PR/NM株均来自南美波多黎各,长期在B.glabrato螺及小鼠间传代保种,BR株来源于巴西病     

日本血吸虫副肌球蛋白的克隆和部分核苷酸序列:一种血吸虫病的候选疫苗抗原

副肌球蛋白是多数无脊椎动物肌肉中的主要结构蛋白,脊椎动物则无副肌球蛋白,若用作疫苗候选抗原将不会发生自身免疫反应。已证明曼氏血吸虫的副肌球蛋白(Sm97)有希望成为曼氏血吸虫病疫苗候选抗原,其部分及全部cDNA已得到。本文报告编码日本血吸虫副肌球蛋白的cDNA的克隆及测序。作者从日本血吸虫菲律宾株成虫     

曼氏血吸虫和光滑双脐螺存有共同抗原表位 Ⅰ.共同抗原表位存在于早期曼氏血吸虫的表面

曼氏血吸虫尾蚴和刚转变童虫的表面为抗原表达的部位,它们分别存在于糖萼和表面膜。糖萼是尾蚴与螺组织间的相互界面,故糖萼和螺组织间有交叉反应是不足为奇     

用纯化肝片吸虫12KD交叉反应抗原成功地免疫鼠抗曼氏血吸虫感染

已有实验证明肝片吸虫成虫的亚细胞组份能诱导鼠产生交叉抗曼氏血吸虫感染的免疫反应。作者用凝胶过滤以及离子交换层析法从肝片吸虫成虫分离了一种12KD 的抗原。用该抗原免疫的小鼠能产生与曼氏血吸     

可溶性曼氏血吸虫抗原和照射减弱疫苗对小鼠血吸虫病的免疫作用

本文比较了接种单剂肝片吸虫或曼氏血吸虫成虫可溶性提取物与照射减弱曼氏血吸虫尾蚴或童虫对小鼠曼氏血吸虫病的保护作用。并对吸虫抗原提取物与减弱尾蚴疫苗结合应用的免疫效果进行了评价。肝片吸虫成虫(Fhww)或曼氏血吸虫成虫(Smww)可溶性抗原提取物:肝片吸虫、曼氏血吸虫分别经生理盐水反复洗涤后制成匀浆,悬于Hank’s平衡盐溶液中。经超声处理后,在4℃、3000g离心30′,最后收集其可溶性部分。免疫时抗原提取物的蛋白浓度为     

曼氏血吸虫62kDa条带:一种放射致弱疫苗T细胞抗原和钙网蛋白

曼氏血吸虫成虫可溶性抗原(SAWA)的62/60kDa条带可被照射致弱尾蚴免疫的小鼠血清所识别,并可诱导T细胞应答。为证实并进一步研究上述发现,本研究用曼氏血吸虫SAWA 62/60kDa免疫的小鼠血清对曼氏血吸虫成虫cDNA表达文库进行筛选,并对纯化后的62kDa和60kDa蛋白进行氨基酸测序,以鉴定其作为疫苗免疫后T细胞抗原决定簇的性质和可能性。     

在体外免疫复合物对曼氏血吸虫肉芽肿的调节作用

曼氏血吸虫感染能在体内诱发一种复杂的T细胞介导的免疫应答,导致虫卵周围产生迟发型肉芽肿超敏反应。此反应是慢性血吸虫病发病率升高的一个重要因素。本文用体外肉芽肿形成模型研究由免疫复合物(IC)介导的对曼氏血吸虫卵抗原肉芽肿型超敏反应的调节作用。结果显示经慢性血吸虫病人血清处理过的曼氏血吸虫感染者外周血单核细胞(PBMCs)与用正常人血清处理过的PBMCs相比较,前者能在体外抑制曼氏血吸虫可溶性抗原(SEA)周围肉芽肿形成,后者则无此抑制作用。进一步实验发现,从慢性血吸虫     

用羊抗血清检测不同临床型曼氏血吸虫病患者治疗前后血清中的血吸虫循环多糖和蛋白抗原

为了研究曼氏血吸虫病伴有肾损害和肝内芽肿的不同免疫病理,有些作者曾分别用抗成虫蛋白抗原(Pt)和抗成虫多糖抗原(Po)的两种羊抗血清进行研究。用Pt抗血清时在肾肝的沉积物中测到曼氏血吸虫抗原,用Po抗血清时在慢性血吸虫病人和实