S100A4基因差异表达与肾癌细胞分化、转移的关系

目的 探讨S100A4基因mRNA表达与肾癌细胞分化、转移的关系。方法 提取31例肾癌及正常组织配对标本的总RNA,用RT-PCR方法测定S100A4基因表达,并结合临床资料,对S100A4基因差异表达与肾癌病人临床表现的相关性进行分析研究。结果 31例配对标本采用RT-PCR方法分别进行S100A4mRNA荧光检测比较,29例标本肿瘤组织中S100A4基因mRNA表达明显高于癌旁正常肾组织。其中低分化肿瘤组病人的S100A4指数高于高分化组(7.94vs5.06,P<0.001);发生转移(包括淋巴结转移和远处转移)者高于无转移者(9.61vs5.53,P<0.001);低年龄组病人(≤50岁)S100A4指数与高年龄组无明显差异(6.31vs6.66,P>0.05);肾颗粒细胞癌组与透明细胞癌组无明显差异(6.98vs6.02,P>0.05);肿瘤直径≤5cm组与>5cm组无明显差异(5.95vs6.93,P>0.05)。结论 肾癌组织中S100A4基因mRNA可望作为肾细胞癌的病情发展及指导临床治疗的标记物之一;S100A4基因表达与肾细胞癌分化有关,癌组织S100A4mRNA测定有助于判定肿瘤的预后;S100A4基因差异表达与肾细胞癌转移明显相关。     

S100A9蛋白表达与宫颈鳞癌细胞侵袭、转移的关系研究

目的探讨S100A9蛋白表达与宫颈鳞癌细胞侵袭、转移的关系。方法采用S100A9重组腺病毒转染人宫颈鳞癌C-33A细胞,S100A9siRNA转染人宫颈鳞癌Caski细胞;应用Westernblot检测转染前后2种细胞中S100A9蛋白的表达,Transwell检测细胞侵袭与转移能力的变化。结果转染S100A9重组腺病毒后C-33A细胞中S100A9蛋白的表达明显增强;与未转染组、阴性对照组相比,转染组C-33A细胞的穿膜细胞数、穿过小室的细胞数均明显增多（均P＜0.05）。转染S100A9siRNA后Caski细胞中S100A9蛋白的表达明显降低;siRNA组Caski细胞的穿膜细胞数、穿过小室的细胞数均明显少于阴性对照组（均P＜0.05）。结论S100A9与宫颈鳞癌细胞的侵袭、转移相关。上调S100A9的蛋白表达,可促进C-33A细胞侵袭与转移的能力;下调S100A9的蛋白表达,可抑制Caski细胞侵袭与转移的能力。     

S100A4和VEGF—C的表达与胃癌淋巴转移的关系

目的:观察S100A4和血管内皮生长因子C(VEGF-C)在胃癌组织中的表达,分析其与肿瘤淋巴转移的关系以及二者的相关性.方法:采用免疫组化方法检测S100A4和VEGF-C在76例胃癌及24例癌周正常组织中的表达.结果:S100A4和VEGF-C在胃癌组织中的阳性表达率明显高于癌周正常组织(P<0.01).S100A4的表达与肿瘤分化程度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.01或P<0.05);VEGF-C的表达与肿瘤浸润深度、TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.01或P<0.05).S100A4和VEGF-C的表达呈正相关(rs=0.334,P=0.003),kappa系数为0.298.结论:S100A4可能参与VEGF-C淋巴管生成通路,在胃癌的淋巴转移中发挥重要作用.     

肿瘤转移相关基因S100A4的研究进展

肿瘤的发生发展受多种基因的调控。S100A4基因是近几年发现的一种具有促肿瘤作用的基因,该基因编码一种钙离子结合调节蛋白,通过与钙离子结合在肿瘤发生发展中发挥重要作用。本文就S100A4基因的结构、促肿瘤的作用及机制作一综述。     

激活素A在食管癌组织中的表达水平及与肿瘤分化和转移的关系

目的 探讨激活素A在食管癌组织中的表达水平变化,以及与肿瘤分化和转移之间的关系.方法 选取该院2010年6月到2012年6月收治的57例食管癌患者作为研究对象,同时选取因食管不适来院检查确诊无病变的36例患者作为对照研究.分别采用实时荧光定量PCR和免疫组织化学分析食管癌组织和正常食管组织激活素A mRNA和蛋白的表达水平,并分析激活素A与食管癌患者肿瘤分化、转移和术后生存复发之间的关系.结果 食管癌组织中激活素A mRNA和蛋白的表达水平明显高于正常食管组织(P＜0.05).低分化和中分化食管癌组织中激活素A表达水平明显高于正常食管组织和高分化食管癌组织(P＜0.05),低分化食管癌组织中激活素A水平明显高于中分化(P＜0.05).淋巴结转移患者中激活素A水平明显高于未转移患者(P＜0.05).激活素A阳性患者术后1、2、3年累积生存率明显低于激活素A阴性患者(P＜0.05),而累积复发率明显高于激活素A阴性患者(P＜0.05).结论 食管癌组织中激活素A表达异常,与肿瘤分化、转移和术后生存和复发密切相关,可作为临床预后辅助诊断指标.     

S100A4真核表达载体构建及对鼻咽癌细胞侵袭转移的影响

目的  构建S100A4稳定高表达的鼻咽癌细胞株,研究S100A4与鼻咽癌侵袭转移关系。方法  PCR方法扩增S100A4片段,将产物插入pCMV载体,将重组质粒及其空白质粒分别转染到鼻咽癌细胞CNE2;MTT法绘制细胞生长曲线,Western blot检测S100A4、E-cadherin、Fibronectin、基质金属蛋白酶2（MMP2）、基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达;Transwell实验检测细胞侵袭转移能力变化。结果  成功构建了S100A4稳定高表达的重组细胞株;细胞生长曲线表明S100A4稳定高表达的重组细胞株生长较快;S100A4稳定高表达的重组细胞株中E-cadherin、Fibronectin低表达而MMP2、MMP9高表达;Transwell实验发现S100A4稳定高表达的重组细胞株的侵袭细胞计数明显高于空白载体转染组和未转染组（P >0.01）。结论  S100A4能调控鼻咽癌上皮-间质转化（EMT）过程,并上调MMP2、MMP9表达而促进鼻咽癌细胞侵袭和转移。

     

角蛋白19表达与鼻咽癌分化转移的关系

目的 研究角蛋白19(Keratin 19)表达与鼻咽癌分化和转移的关系.方法 免疫组织化学检测62例鼻咽癌、17例淋巴结转移鼻咽癌和16例慢性鼻炎标本中角蛋白19的表达水平,并分析其表达水平与鼻咽癌临床病理特征的关系;采用 Western Blot检测不同分化程度和不同转移潜能NPC细胞系中角蛋白19的表达.结果 鼻咽癌患者中角蛋白19阳性率为74.2%(46/62);淋巴结转移鼻咽癌中阳性率为88.2%(15/17);对照组正常鼻咽上皮中阳性率为12.5%(2/16);角蛋白19在转移癌中表达高于鼻咽癌,而在鼻咽癌中又显著高于正常对照组,两者间差异有显著性(P＜0.05).角蛋白19表达水平与鼻咽癌的组织学类型、肿瘤原发灶大小、淋巴结转移和远处转移有相关性(P＜0.05),而与临床分期、年龄和性别无相关性.结论 角蛋白19表达与鼻咽癌的分化和转移有关,可作为鼻咽癌分化、转移的分子标志物.     

S100A4表达与乳腺癌预后关系的研究

目的探讨S100A4蛋白在乳腺癌组织中的表达,并评估其在乳腺癌预后中的作用。方法采用免疫组化S-P法检测167例乳腺癌组织中S100A4蛋白的表达情况,并分析其与临床、病理特征的关系及其对预后的影响。结果乳腺癌组织中S100A4蛋白表达率为46.1%(77/167),其表达与淋巴结转移呈正相关(P<0.01),与肿瘤大小、ER、PR、病理类型等无明显相关性(P>0.05);S100A4表达组患者其总的5年生存率明显低于非表达组(43.4%vs.82.6%,P<0.01)。结论乳腺癌S100A4蛋白表达与肿瘤浸润和转移有一定关系,是判断乳腺癌侵袭、转移与预后的有用指标之一,表达者其预后较差。     

Annexin I表达下调与鼻咽癌分化转移的关系

目的检测膜联蛋白I（AnnexinI）在正常鼻咽黏膜上皮组织（NNET）、原发鼻咽癌（NPC）组织及颈淋巴结转移鼻咽癌（LMNPC）组织中的表达,探讨其临床病理学意义。方法采用免疫组织化学S-P法检测30例NNET、98例原发NPC组织（高分化鳞癌5例,中度分化鳞癌13例,低分化和未分化癌80例）及20例LMNPC组织中AnnexinI蛋白的表达情况;采用SPSSl3．0软件包对数据进行非参数检验。结果与NNET比较,AnnexinI在原发NPC组织中的表达明显下调（P〈0．05）;与原发NPC比较,AnnexinI在LMNPC中的表达水平明显下调（P〈0．01）;98例原发NPC组织标本中,AnnexinI的表达水平与NPC的病理分化程度、临床分期、复发及局部淋巴结和远处转移有关,AnnexinI低表达的肿瘤较高表达的肿瘤分化差,有更晚的临床分期、更容易复发、更容易发生局部淋巴结和远处转移（P〈0．05or0．01）。结论AnnexinI与NPC的分化程度、转移和预后相关,有望成为预测鼻咽癌转移、预后和区别NPC分化程度的分子标志物。提示AnnexinI在鉴别NPC组织学分化程度、预测鼻咽癌病人预后及预警鼻咽癌转移和复发方面有一定的临床价值。     

S100A4在食管鳞癌中的表达及与浸润转移的关系

目的 探讨S100A4在食管鳞癌发生发展及浸润转移中的作用.方法 采用免疫组化检测100例食管鳞癌组织中S100A4、MMP-2及E-cadherin蛋白的表达,采用RT-PCR及Western blot检测食管鳞癌细胞系EC-1和TE-1中S100A4基因的表达并采用Boyden小室检测EC-1和TE-1细胞的体外侵袭能力.结果 100例食管鳞癌组织中S100A4蛋白的表达(52.0%)明显高于食管正常黏膜(26.0%)(P<0.01),与肿瘤分化程度、浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05),且与MMP-2表达呈正相关(P<0.01),与E-cadherin表达呈负相关(P<0.05).食管鳞癌细胞EC-1中S100A4mRNA(0.894±0.021)、蛋白(0.897+0.053)表达及体外侵袭力(91.00+17.44)明显高于TE-1细胞(S100A4 mRNA:0.812±0.040,蛋白:0.645±0.089,体外侵袭力:61.80±11.10)(P<0.01).结论 S100A4基因在食管鳞癌组织以及高侵袭性食管鳞癌细胞EC-1中的高表达提示其可能参与了食管鳞癌的发生发展及浸润转移.     

食管癌S100A4蛋白的表达特点

[目的]探讨食管癌转移相关蛋白S100A4的表达特点及意义.[方法] 用石蜡组织微阵列免疫组织化学ABC方法,检测S100A4在83例食管癌组织、38例癌前病变、9例非癌粘膜的表达和分布特点.[结果] S100A4表达率在食管癌、癌前病变与癌旁组织分别为59.0%,26.3%与22.2%,食管癌组显著高于癌旁正常组及癌前病变组,(P<0.05),但后两组间差异无显著性意义(P>0.05).腺癌与鳞癌该蛋白表达的阳性率分别为80%与54.4%,两者比较差异有显著性意义(P<0.05). S100A4的表达率在女性患者与男性患者分别为84.6%与54.3%,二者差异具有显著性意义(P<0.05); 在淋巴结转移组与无淋巴结转移组分别为70.5%与46.2%,二者差异具有显著性意义(P<0.05);但与患者年龄、肿瘤大小、分化程度无显著相关性(P>0.05).[结论] S100A4蛋白表达是食管癌发生、发展、演进过程中的分子事件,其表达与食管癌进展密切相关.     

三氧化二砷对人结肠癌细胞S100A4和COX-2表达影响的研究

目的 研究三氧化二砷(As2O3)对人结肠癌细胞S100A4和COX-2表达的影响.方法 选用人结肠癌HT-29细胞株,利用免疫组化方法,检测经As2O3作用后,血管内皮生长因子(VEGF)及环氧合酶2(COX-2)的变化.结果 As2O3可下调人结肠癌HT-29细胞S100A4和COX-2的表达,与未用药对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05).结论 As2O3能降低VEGF及COX-2的表达,在结肠癌治疗中有较好的应用前景.     

膀胱移行细胞癌中S100A4蛋白和钙粘蛋白-E表达及意义

目的通过检测S100A4蛋白和钙粘蛋白-E在膀胱移行细胞癌组织中的表达,探讨其在膀胱移行细胞癌发生、发展中所起的作用。方法采用免疫组织化学方法检测S100A4蛋白和钙粘蛋白-E在38例膀胱移行癌组织及其相应癌旁组织中的表达。结果 S100A4蛋白在膀胱移行细胞癌及癌旁膀胱组织中的阳性表达率分别为55.3%（21/38）、0.0%（0/38）。膀胱移行细胞癌组织中S100A4蛋白水平明显高于癌旁膀胱组织（P〈0.05）,在膀胱移行细胞癌组织中的表达与肿瘤病理分级（P〈0.05）、临床分期（P〈0.05）呈正相关,与有无淋巴结转移相关（P〈0.05）。E-cad蛋白在膀胱移行细胞癌组织中及癌旁组织中的阳性表达率分别为47.4%（18/38）、81.6%（31/38）,有显著性（P〈0.05）。膀胱移行细胞癌组织中E-cad蛋白阳性表达率与患者病理分级、临床分期及淋巴结转移有关（P〈0.05）。膀胱移行细胞癌组织中,S100A4蛋白与E-cad蛋白的表达呈负相关（P〈0.05）。结论 S100A4蛋白及E-cad蛋白在膀胱移行细胞癌组织中的表达变化与肿瘤的发生、进展、预后密切相关,是判断其生物学行为、预测转移趋势极具价值的指标。     

S100A4在肺鳞癌与肺腺癌细胞中的表达差异和生物学作用

目的研究S100A4在肺鳞癌与肺腺癌细胞系中的表达及对细胞增殖、转移、侵袭功能的影响。方法利用RT-PCR和Western Blot检测S100A4在肺鳞癌细胞系NCI-H520和肺腺癌细胞系SPC-A-1中的表达,利用siRNA干扰S100A4在两个细胞系的表达,CCK-8检测细胞增殖,划痕、Transwell实验检测细胞迁移侵袭。结果RT-PCR与Western Blot检测结果显示S100A4在肺鳞癌及肺腺癌细胞系中均有表达,且肺鳞癌细胞系NCIH520中S100A4表达水平低于肺腺癌细胞系SPC-A-1(P<0.05)。细胞荧光、Western Blot及RT-PCR验证S100A4敲除效率,CCK-8实验证明干扰S100A4后,两肺癌细胞系的增殖能力较空白对照组和阴性对照组均降低(P<0.05)、划痕及Tranwell实验证明干扰S100A4后,两肺癌细胞系的迁移能力与对照组相比也降低(P<0.05)。结论 S100A4在肺鳞癌细胞系与肺腺癌细胞系均有表达,且鳞癌高于腺癌,S100A4与肺癌细胞恶性进展有关,有可能成为肺癌治疗的新靶点。     

S100A4和E-cadherin在上皮性卵巢肿瘤中的表达及意义

目的:研究S100A4蛋白和上皮钙粘蛋白(E-cadher-in,E-cad)在人类上皮性卵巢肿瘤中的表达情况,探讨并分析两者与上皮性卵巢癌的浸润、转移发生的关系及其生物学意义.方法:采用免疫组织化学法SP法检测S100A4蛋白和E-cad在上皮性卵巢肿瘤中的表达与分布,结合临床病理情况分析两者与临床病理参数之间的关系.结果:上皮性卵巢癌中S100A4的表达率比卵巢良性肿瘤和上皮性卵巢交界性肿瘤中的表达率增高(P<0.05);S100A4在上皮性卵巢癌中的表达与组织学分级、有无转移、有无腹水有关(P<0.05),与临床病理分期无关(P0.05);E-cad在上皮性卵巢癌的表达与临床分期、有无转移、有无腹水有关(P<0.05),而与组织学分级无关(P0.05);S100A4,E-cad在上皮性卵巢癌中的表达与有无绝经、肿瘤大小、临床病理类型无关(P0.05);上皮性卵巢癌中S100A4和E-cad的表达呈负相关(r=-0.385,P<0.05).结论:S100A4和E-cad的相关表达与上皮性卵巢癌的发生发展关系密切,是判断上皮性卵巢癌生物学行为、预测侵袭转移的重要指标.     

联合分析S100A4和S100A6在胃癌中的表达情况

目的联合分析S100A4和S100A6与胃癌临床病理因素的相关性。方法利用免疫组织化学验证S100A4和S100A6在78例胃癌组织中的表达情况。结果在肿瘤组织中S100A4主要定位于细胞质,在42%(33/78)的胃癌组织中高表达。S100A4高表达与TNM分期(P=0.031)相关。S100A6在肿瘤细胞核和(或)细胞质中高表达(69%,54/78)。S100A6高表达与肿瘤大小、浸润深度和TNM分期相关。联合分析S100A6与S100A4在胃癌组织中的表达情况,进一步对临床资料分析结果表明,S100A4+/S100A6+者浸润深度越深,淋巴结发生转移,TNM分期越晚。结论联合分析S100A4和S100A6有助于分析胃癌的生物学行为。     

体外RNAi对S100A4基因表达及其对骨肉瘤细胞侵袭、转移能力的影响

[目的]应用RNAi技术抑制人骨肉瘤MG-63细胞S100A4基因的表达,并观察对MG-63细胞增殖及体外侵袭能力的影响。[方法]合成针对S100A4的siRNA载体,并根据目的mRNA序列,设计3条RNA干扰靶序列及非特异性的siRNA。将培养细胞分为C组(空白对照组);C1组(转染脂质体组);C2组(转染非特异性的siRNA组);S1、S2、S3组(转染特异性的siRNAⅠ、Ⅱ、Ⅲ组)。荧光倒置显微镜下观察转染情况,Real-time PCR方法检测转染前后S100A4基因表达变化,应用Western-Blot方法检测转染前后S100A4蛋白表达变化。筛选出转染效率最高的特异性siRNA组作为后续实验的实验组。后续实验分为正常细胞组,阴性对照组和实验组,应用MTT法和平板克隆形成实验检测细胞的增殖率变化,应用Transwell小室实验检测细胞的侵袭及转移能力变化。[结果]倒置显微镜下C2组与S1、S2、S3组培养细胞的细胞浆均可见绿色荧光。S1、S2与S3组的S100A4 mRNA表达水平均有不同程度的下调,以S3组最为显著。Western-Blot检测S100A4蛋白表达结果与其相符。MTT法和平板克隆形成实验均显示S3组细胞增殖受到抑制,与正常细胞组、阴性对照组比较差异有显著性意义(P<0.05)。Tran-swell小室实验显示RNA干扰S100A4基因表达后肿瘤细胞的运动侵袭能力明显下降,穿过人工基底膜细胞数量明显减少,与正常细胞组、阴性对照组相比差异有显著性意义(P<0.05)。[结论]体外合成的S100A4特异性siRNA能够抑制骨肉瘤细胞系MG-63的S100A4表达,进而抑制细胞的增殖和体外侵袭能力。