VEGF、bFGF与Graves病甲状腺组织血管形成的相关性研究

目的：研究血管内皮生长因子（VEGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在Graves病（GD）甲状腺组织中的表达及其与血管形成的关系。方法：应用免疫组织化学法检测28例GD甲状腺组织和19例正常甲状腺组织中VEGF、bFGF的表达，抗CD34单克隆抗体显示血管内皮细胞．根据CD34阳性的血管内皮细胞计数测定甲状腺组织内的微血管密度（MVD）。结果：VEGF、bFGF在GD甲状腺组织的表达明显高于在正常甲状腺组织的表达（均P〈0．01），二者的表达与GD甲状腺组织内微血管密度呈正相关（r=0．71，r=0．49，均P〈0．01）；VEGF、bFGF在GD甲状腺组织的表达存在相关性（P〈0．05）。结论：VEGF、bFGF与GD患者甲状腺内血管形成有关。     

Fas及其配体FasL在自身免疫性甲状腺疾病中的表达

目的：研究Graves病（GD）和桥本氏甲状腺炎（HT）组织中细胞凋亡有关的Fas及其配体FasL的表达情况，探讨它们在自身免疫性甲状腺疾病发病机制中的作用。方法：采用免疫组化技术，检测Fas蛋白及FasL在65例GD、47例HT和15例正常甲状腺组织中的表达情况。结果：Fas在GD和HT的甲状腺组织中的表达程度明显高于在正常甲状腺中的表达，且在HT中的表达程度比在GD明显增强。FasL在GD和HT的甲状腺组织中的表达程度均明显高于在正常甲状腺中的表达，且在HT中的表达程度比在GD明显增强。在GD和HT中Fas和FasL的表达程度呈正相关。结论：从正常到GD再到HT，Fas/FasL的表达逐渐增高，说明Fas/FasL在自身免疫性甲状腺疾病发展过程中起重要作用。GD和HT的甲状腺滤泡上皮细胞均可表达Fas及其配体FasL,提示甲状腺上皮细胞上Fas和FasL的相互作用可能是甲状腺中自身免疫性排斥的主要机制，也可能是自身免疫性疾病的共同的病理生理基础。     

Fas及其配体FasL在自身免疫性甲状腺疾病中的表达

目的研究Graves病(GD)和桥本氏甲状腺炎(HT)组织中细胞凋亡有关的Fas及其配体FasL的表达情况,探讨它们在自身免疫性甲状腺疾病发病机制中的作用。方法采用免疫组化技术,检测Fas蛋白及FasL在65例GD、47例HT和15例正常甲状腺组织中的表达情况。结果 Fas在GD和HT的甲状腺组织中的表达程度均明显高于在正常甲状腺中的表达,且在HT中的表达程度比在GD明显增强。FasL在GD和HT的甲状腺组织中的表达程度均明显高于在正常甲状腺中的表达,且在HT中的表达程度比在GD明显增强。在GD和HT中Fas与FasL的表达程度呈正相关。结论从正常到GD再到HT,Fas/FasL的表达逐渐增高,说明Fas/FasL在自身免疫性甲状腺疾病发展过程中起重要作用。GD和HT的甲状腺滤泡上皮细胞均可表达Fas及其配体FasL,提示甲状腺上皮细胞上Fas和FasL的相互作用可能是甲状腺中自身免疫性排斥的主要机制,也可能是自身免疫性疾病的共同的病理生理基础。     

乳腺癌VEGF的表达与肿瘤血管生成的关系

目的 了解血管内皮细胞生长因子（VEGF）在乳腺癌组织中的表达及对肿瘤组织内微血管密度（MVD）的影响.方法 应用免疫组化S-P法检测VEGF和CD34在42例乳腺癌和相应正常乳腺组织中的表达,计数组织内MVD.结果 42例乳腺癌组织中VEGF的阳性表达率明显高于正常乳腺组织（25/42 vs 7/42,P＜0.01）.CD34染色显示乳腺癌组织中有大量的新生血管形成,其密度明显高于相应的正常组织,分化差、有转移的癌组织MVD增高,并且,VEGF阳性组MVD明显高于VEGF阴性组（P〈0.05）.结论 乳腺癌组织中存在VEGF的过量表达和大量的新生微血管, VEGF的表达与组织内MVD密切相关.     

自身免疫性甲状腺疾病Bcl-2和Bax蛋白的表达

目的 研究格雷夫斯病（GD）和桥本甲状腺炎（HT）和HT合并甲状腺癌组织中细胞凋亡有关的自身基因bcl-2和bax的表达情况，探讨它们在自身免疫性甲状腺疾病发病机制中的作用。方法 采用二步法免疫组织化学技术检测Bcl-2及Bax在GD 65例、HT47例、HT并甲状腺癌12例和正常甲状腺组织15例的表达情况。结果 （1）Bcl-2在GD、HT和HT合并甲状腺癌的甲状腺组织中的表达程度均明显低于在正常甲状腺中的表达。在HT中的表达程度明显高于GD，在HT合并甲状腺癌中明显减弱。（2）Bax在GD、HT和HT合并甲状腺癌中的表达程度逐渐增强，组间差异有显著性，且均明显高于在正常甲状腺中的表达。（3）正常甲状腺中Bcl-2表达占绝对优势，不表达Bax;GD和HT中Bcl-2及Bax蛋白表达存在一定的平衡关系，而在HT合并甲状腺癌中Bcl-2／Bax表达明显失衡，Bax表达占绝对优势。结论 Bcl-2和Bax的表达变化可能在自身免疫性甲状腺疾病发病机制中起重要作用，Bcl-2/Bax表达比例改变在病情发展中起重要作用，可能作为相关病理演变的参照指标。     

Graves''病甲状腺自身抗体的免疫印迹研究

目的：研究Graves'病（Graves' disease,GD）甲状腺自身抗体的异质性。方法：以正常、GD及桥本氏甲状腺炎患者（HT）甲状腺组织作为抗原、运用Western blot检测20例GD甲亢期及20例GD缓解期患者的甲状腺自身抗体，并以正常阴性血清及标准阳性血清[甲状球蛋白（TGAb）＋、甲状腺过氧化物酶抗体（TPOA b）＋、TSH受体抗体（TRAb）＋]作为对照。结果；GD血清可与多种甲状腺抗原反应，每个患者出现的阳性条带带型均不一样。GD血清在HT及GD甲状腺组织抗原泳道出现的阳性条带数明显多于正常甲状腺组织抗原泳道出现的阳性条带数（P＜0．01）。且有的条带不出现于正常甲状腺组织抗原泳道。与标准阳性血清出现的阳性条带相比，GD血清出现更多的条带。结论：GD甲状腺自身抗体存在异质性，GD时存在除TGAb、TPOAb、TRAb以外其它的甲状腺抗体，甲状腺细胞中某些蛋白的变异可能是导致GD时产生甲状腺自身抗原的原因之一。     

T细胞共刺激分子在自身免疫性甲状腺疾病中的表达

目的 探讨T细胞共刺激分子CD54、CD40和B7—1分子在自身免疫性甲状腺疾病（AITD）中的作用。方法 采用免疫组化法观察48例桥本甲状腺炎（HT）、51例Graves病（GD）和50例非毒性结节性甲状腺肿（NTG）的甲状腺组织中CD54、CD40和B7—1的表达，应用Mias99图像分析系统进行定量分析。结果 ①3种T细胞共刺激分子CD54、CD40和B7—1在HT患者的甲状腺组织中呈阳性表达，强阳性染色区域主要分布在甲状腺滤泡细胞胞膜和细胞质；在GD患者的甲状腺组织中大部分呈弱阳性表达，少数病例在浸润的淋巴细胞区呈强阳性表达；在NTG的甲状腺组织中呈阴性表达。②CD54、CD40和B7—1的阳性颗粒面积、平均吸光度及积分吸光度值比较：HT组明显高于GD组，而GD组明显高于NTG组，3组组间差异均有极显著性意义（均P〈0．01）。结论 T细胞共刺激分子CD54、CD40和B7—1的异常表达可能与AITD的发病有关。     

凋亡相关蛋白HSP90α和Clusterin在自身免疫性甲状腺疾病中的表达

目的 探讨凋亡相关蛋白HSP90α、Clusterin的表达与自身免疫性甲状腺疾病发生发展的关系.方法 应用免疫组织化学SP法检测26例Graves病(GD)、15例桥本甲状腺炎(HT)患者甲状腺组织标本和11例正常甲状腺组织中HSP90α、Clusterin的表达,并分析两者之间的相关性.结果 HSP90α在甲状腺滤泡上皮细胞胞质、胞核均有表达.HSP90α在GD、HT均以胞浆表达为主.Clusterin在GD、HT主要表达在甲状腺滤泡上皮细胞的胞浆和胞膜.GD和HT中HSP90α、Clusterin的表达均明显高于正常甲状腺组织.结论 HSP90α和Clusterin在GD中异常高表达可能主要通过抑制部分甲状腺细胞凋亡,间接促进甲状腺组织的增生;HSP90α和Clusterin在HT中甲状腺滤泡上皮的高表达可能是机体在病理情况下的一种代偿现象,能阻止部分甲状腺细胞凋亡,对机体产生保护作用.HSP90α、Clusterin的表达可能在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的发生发展过程中起重要作用.     

甲状腺组织中钠/碘转运体基因表达的研究

目的：研究各种病理甲状腺组织中钠／碘转运体（NIS）基因的表达情况，探讨NIS与甲状腺疾病之间的关系。方法：甲状腺组织取自3例Graves病（GD）患者，2例桥本甲状腺炎（HT），2例甲状腺乳头状癌（TC），2例癌旁正常甲状腺组织，运用半定量逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）技术检测NIS mRNA的表达情况。结果：癌旁正常甲状腺组织表达NIS mRNA,GD甲状腺组织NIS基因表达量明显增多（P＜0．05）；HT组织中，1例NIS mRNA表达量减少，1例不表达；甲状腺癌组织不表达NIS基因。结论：不同病理甲状腺组织中NIS基因表达存在一定变化，NIS可能参与自身免疫性甲状腺疾病及甲状腺癌的发病机理。     

COX-2和VEGF蛋白在HCC组织中表达及其与HCC血管形成的关系 

目的：通过检测COX-2蛋白与VEGF蛋白在肝细胞癌(HCC)中的表达情况，探讨COX-2对HC血管形成的影响。方法：应用免疫组织化学（SP）法对30例肝癌组织、10例正常肝组织中的COX-2、VEGF蛋白进行定量检测。同时应用CD34标记肿瘤新生血管，根据CD34阳性的血管内皮细胞计数来测定微血管密度（MVD）值。结果：HCC组织中COX-2和VEGF表达阳性率明显高于对照组（P＜0.001），COX-2表达与VEGF表达显著相关（r=0.632,P＜0.01），且COX-2和VEGF均阳性的HCC组织MVD值明显高于两者均为阴性的组织（P＜0.01）。结论：VEGF的表达随着COX-2表达增高而增高，提示COX-2可能通过诱导VEGF表达而促进HCC血管形成。     

NADH-细胞色素b5还原酶在甲状腺过氧化氢生物合成中的作用

目的：探讨NADH－细胞色素b5还原酶（b5R)在甲状腺过氧化氢生物合成中作用。方法：应用高香草酸荧光分析技术及NADH－高铁氰化钾还原酶法，对正常和格雷夫斯病甲状腺过氧化氢（H2O2）和b5R进行测定，同时观察b5R抑制剂对H2O2生成和蛋白结合碘形成的影响。结果：格雷夫斯病甲状腺b5R活性的H2O2水平均明显高于正常，而H2O2酶活性在两者间差异无显著性，加b5R抑制剂对氯汞苯甲酸抑制b5R活性，格雷夫斯病和正常甲状腺b5R活性降低近85％，同时H2O2降低近50％，蛋白结合砂近52％，b5R活性的H2O2水平两者呈显著正相关，结论：b5R参与甲状腺内H2O2的生物合成，是甲状腺内产生H2O2的重要酶系。     

端粒酶基因hTRT在甲状腺乳头状癌的表达及意义

目的：探讨端粒酶基因hTRT在甲状腺乳头状癌的表达及其意义，方法：应用原位杂交方法检测端粒酶基因hTRT在30例甲状腺乳头状癌，19例甲状腺良性病变及16例癌旁正常甲状腺组织中的表达。结果：hTRTmRNA在甲状腺乳头状癌中的阳性率为（25／30，83．3％），显著高于甲状腺良性病变中的阳性率（3／19，15．8％）和正常甲状腺组织中的阳性率（0／16，0％），而且病期晚及有淋巴结转移者阳性率增高，结论：端粒酶基因hTRT为甲状腺乳头状癌恶性表型增高的标志，hTRTmRNA表达检测可望成为甲状腺乳头状癌辅助诊断和预后评估的一个手段。     

碘化钠和IL-1β对人甲状腺上皮细胞TRAIL表达的影响

目的 研究不同浓度碘化钠(NaI)和白细胞介素-1β(IL-1β)对体外培养的原代人甲状腺上皮细胞(TEC)肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的表达及凋亡的影响,探讨自身免疫性甲状腺疾病(AITD)的可能发病机制.方法 收集正常、Graves病(GD)和桥本甲状腺炎(HT)患者甲状腺组织进行原代细胞培养,以不同...     

五种多药耐药性基因在正常人体组织的表达

目的：观察五种多药耐药性（MDR）基因在正常人体组织中的表达。方法：采用二重RT-PCR法及免疫组织化学SP法，分别从mRNA和蛋白质表达水平检测（90例，共15种）正常人体组织中5种MDR基因的表达。结果：五种MDR基因在人体不同器官和组织中均有表达。同时表达5种MDR基因的器官和组织有肝脏、肺脏、肾脏、食管、结肠、小肠、胰腺、甲状腺、前列腺及胎盘。皮肤组织中未发现LRP基因表达（0/5）。乳腺和卵巢组织未发现MRP基因表达（0/5）。不同MDR基因在各种组织中的表达存在差别。结论：正常情况下，五种MDR基因的mRNA和蛋白质在人体组织中广泛表达，以在肝脏、肺脏、肾脏、结肠、小肠和胰腺组织中表达较强。     

TP、VEGF在原发性肝细胞癌中的表达及与肝癌血管生成的相关性研究

目的检测原发性肝细胞癌（HCC）肝组织中胸苷磷酸化酶（TP）、血管内皮细胞生长因子（VEGF）表达水平,井对肝癌组织中TP和VEGF的表达与肝癌血管生成进行相关性分析。方法应用免疫组织化学方法检测72例肝癌组织及19例正常肝组织中的TP、VEGF表达及微血管密度（MVD）均值,并分析其与HCC病理学分级和临床分期的相关性。结果肝癌组织TP、VEGF阳性表达率及MVD均值明显高于正常肝组织（P〈0．05）,且TP、VEGF的表达与肝癌病理分级、肿瘤包膜是否完整、肿瘤大小、有无门静脉癌栓明显相关（P〈0．05）;但与性别、年龄、AFP、是否肝硬化、child肝功能分级无关（P〉0．05）。结论TP、VEGF的表达与肝癌血管生成呈正相关,TP、VEGF在肝癌血管生成中具有协同作用。     

色素上皮源性因子与胃癌组织血管生成和临床病理因素的关系

 【目的】研究色素上皮源性因子（PEDF）和血管内皮生长因子（VEGF）在胃癌组织中的表达及与癌组织中微血管密度（MVD）的关系。探讨PEDF在胃癌组织血管生成中的作用及PEDF与胃癌临床病理因素的关系。【方法】用S—P免疫组织化学法检测82例人体胃癌组织标本中胃癌细胞内PEDF和VEGF的表达；标记CD34分子显示血管内皮细胞，并计数上述胃癌组织内的微血管密度；统计学分析上述分子标记物间的关系以及各分子标记物与胃癌临床病理因素间的关系。【结果】所有的正常胃黏膜均有PEDF表达，胃癌组织PEDF表达率约43％，VEGF表达率约54％；与高分化胃癌相比，低分化胃癌组织PEDF表达率低（P〈0．05），MVD高（P〈0．05）；PEDF低表达的胃癌细胞易侵犯浆膜（P〈0．05），易淋巴结转移（P〈0．01）和远处转移（P〈0．01）；胃癌组织PEDF表达与MVD（P〈0．01）和VEGF（P〈0．01）表达呈负相关关系，VEGF表达与MVD呈正相关关系（P〈0．01）。【结论】PEDF低表达和VEGF高表达可能是胃癌组织内微血管生成的分子基础。是促进胃癌细胞发生淋巴及血道转移的重要因素。     

Graves病和桥本甲状腺炎患者甲状腺原位凋亡和Fas/FasL的表达

目的:探讨正常人、Graves病(GD)和桥本甲状腺炎(HT)患者甲状腺细胞(TEC)凋亡率的差异,并观察凋亡相关蛋白的表达情况。方法:TUNEL法检测3种甲状腺组织的TEC凋亡率;免疫组化检测TEC凋亡蛋白Fas、FasL表达情况,RT-PCR检测FasmRNA表达的差异。结果:GD和HT患者TEC凋亡率显著高于正常对照(P<0.05),HT患者TEC凋亡率较GD患者也显著升高(P<0.05),FasL在正常、GD和HT甲状腺组织中存在连续性表达,但Fas在自身免疫性甲状腺疾病(AITD)患者的表达水平显著高于正常甲状腺组织,以HT的Fas表达水平最高(HT与正常对照相比,P<0.01;GD与正常对照比,P<0.05)。结论:凋亡可能在AITD的发病中起一定作用,Fas及其配基系统是与AITDTEC凋亡相关的蛋白。