Fas、Bcl-2蛋白在重度子痫前期胎盘滋养叶细胞凋亡的实验研究

目的探讨凋亡相关蛋白Fas、Bcl-2在胎盘滋养叶细胞中的表达及其意义,滋养叶细胞凋亡与Fas、Bcl-2两种蛋白的关系,从而于细胞凋亡的角度探讨重度子痫前期的发病机制。方法用免疫组织化学SP法检测重度子痫前期患者54例（试验组）,同时选择同期正常晚孕妇女20例（对照组）做胎盘组织中Fas、Bcl-2蛋白的表达及滋养叶细胞凋亡检测。结果细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Fas在重度子痫前期及正常孕妇胎盘组织中均有表达。其中Bcl-2蛋白的表达在试验组低于对照组（P〈0.05）;而Fas蛋白的表达在试验组明显高于对照组（P〈0.05）;在试验组及对照组均可观察到细胞凋亡现象,在滋养层细胞（合体细胞滋养层及细胞滋养层）、间质细胞、血管内皮细胞胞浆及细胞核内均有表达,尤以合体细胞最多见。试验组细胞凋亡较对照组明显增多（P〈0.05）。重度子痫前期时,Bcl-2与Fas蛋白的表达呈负性相关;Bcl-2蛋白表达与胎盘细胞凋亡呈负性相关,而Fas蛋白的表达与胎盘细胞凋亡呈正性相关（P〈0.01）。结论重度子痫前期的发病原因可能与胎盘滋养叶细胞凋亡及Bcl-2、Fas基因异常表达有关。     

重度子痫前期患者胎盘组织中Rab23的表达及对人胎盘滋养细胞凋亡及自噬的影响

目的 探讨重度子痫前期患者胎盘组织中Rab23的表达情况及对胎盘滋养细胞凋亡与自噬的影响.方法 收集2018年6月至2019年12月于新疆维吾尔自治区妇幼保健院进行分娩的54例重度子痫前期患者胎盘组织(观察组),以及54例同期健康足月妊娠妇女的胎盘组织(对照组).采用免疫组织化学染色与实时荧光定量聚合酶链反应法检测2组...     

子痫前期患者胎盘滋养细胞中TGF-β_1与PLGF的作用研究

目的分析子痫前期患者胎盘滋养细胞中TGF-β_1与PLGF的相关性及表达情况。方法选取2017年5月至2018年8月期间在太原市妇幼保健院收治的80例子痫前期患者,根据病情分为轻度子痫前期组(n=40)和重度子痫前期组(n=40),同时选取40例正常妊娠者作为对照,对比胎盘滋养细胞中TGF-β_1与PLGF的表达强度。结果重度子痫前期组患者TGF-β_1表达强度明显高于轻度子痫前期组和对照组,组间对比差异显著(P<0.05);重度子痫前期组PLGF表达强度明显低于轻度子痫前期组和对照组(P<0.05);各组TGF-β_1与PLGF表达呈负相关。结论 TGF-β_1与PLGF表达水平影响子痫前期患者发病与进展,与子痫前期患者胎盘浅着床存在密切关系。     

早发重度子痫前期患者脐血流、围产儿结局与胎盘病理变化的关系

目的探讨早发型子痫前期患者脐血流、围生结局与胎盘病理变化的关系。方法选取28例早发型重度子痫前期患者为研究对象(早发组),同期选取23例晚发型重度子痫前期患者作对照(晚发组),分析两组脐血流、围生结局与胎盘病理变化的关系。结果早发组的胎盘重量减轻,胎盘病理梗死发生率高;脐血流S/D值明显增高;围产儿病率亦高,两组比较有显著差异(P<0.05)。结论早发型重度子痫前期胎盘病理以梗死为主,胎盘梗死可能是早发型子痫前期发病的重要因素之一;临床可以监测脐血流S/D值来判定其胎盘病理改变。     

重度子痫前期的临床观察与治疗分析

目的通过对重度子痫前期的临床观察和治疗分析,以期早期诊断、早期防治、改善预后。方法选取98例重度子痫前期者且根据孕周分为早发型32例、晚发型66例,同时对两种类型者临床症状、体征、并发症、妊娠结局予以观察和相应治疗措施分析且对所统计数据进行处理分析。结果早发型重度子痫前期者头晕、上腹不适等临床自觉症状、血压明显升高、尿蛋白(3+)、大量胸腹水发生率和并发症发生率以及胎儿病死率均明显高于晚发型重度子痫前期者(P<0.05)。结论重度子痫前期对孕妇和胎儿危害较大,尤其是早发型重度子痫前期,同时尽量延长孕周、适时终止妊娠是处理重度子痫前期、改善围生儿结局的重要措施。     

子宫动脉血流指数与子痫前期关系的研究进展

子痫前期是妊娠期妇女特有的疾病,易导致母儿不良结局,但发病机制尚未阐明。现许多临床研究致力于子宫动脉血流指数预测子痫前期,以避免妊娠不良结局的发生。以下就子宫动脉血流指数与子痫前期关系的研究进展作一综述,为相关临床工作者提供参考。     

胎儿生长受限与重度子痫前期及子痫关系的探讨

目的探讨胎儿生长受限(FGR)的发生、预后与重度子痫前期及子痫的关系。方法回顾性分析重度子痫前期及子痫病83例,比较其对FGR发生率的影响及其在合并FGR的情况下对围产儿预后的影响。结果FGR的发生与重度子痫前期及子痫发生的孕周、终止妊娠的孕周、病情严重程度及有无合并症有关,重度子痫前期及子痫在合并FGR时,胎儿窘迫、新生儿窒息率和围产儿死亡率明显升高(P<0.05)。结论重度子痫前期及子痫与FGR关系密切,加强孕期保健、积极防治妊娠期高血压疾病才能减少FGR的发生,对改善妊娠结局有临床意义。     

PEG10在重度子痫前期患者胎盘组织中的表达及临床价值

目的：探讨印记基因 PEG10在重度子痫前期（SPE）患者胎盘组织中的表达及临床价值。方法选取2013年4月至2015年3月分娩以及因故中止妊娠的145位孕母作为研究对象,按照孕周和孕期发作 SPE 情况将研究对象分为4组：早发 SPE 组33例,早期健康组35例,晚发 SPE 组37例,晚期健康组40例。采集孕母胎盘组织制成切片,免疫组化法进行附染并检视 PEG10蛋白表达情况,CMIAS 病理图像分析软件测定吸光度 A 并比较。结果PEG10蛋白在4组滋养层细胞膜和胞浆均有表达。早发 SPE 组 PEG10蛋白表达强度明显高出早期健康组,晚发 SPE组 PEG10蛋白表达强度远远超出晚期健康组（ P ＜0.01）;晚发 SPE 组表达值较早发 SPE 组小幅偏低,但差异无统计学意义（P ＞0.05）。结论胎盘组织中 PEG10的高水平表达可能与 SPE 的发病有关。     

重度子痫前期的临床观察与护理

目的探讨防止重度子痫前期产妇并发症的发生措施。方法对收治的重度子痫前期的病例56例进行回顾性分析。结果发生子痫抽搐1例,产后出血6例,胎盘早剥3例,合并心力衰竭3例,肺水肿2例。56例产妇均好转或痊愈出院。结论严密监测生命体征,及时有效的降压,控制子痫的发生,监测胎心胎动,适时终止妊娠,是减少并发症的发生重要措施,注重产妇的心理护理,对降低孕产妇及围产儿的死亡率有非常重要的作用。     

重度子痫前期的观察与护理

目的总结防止重度子痫前期产妇发生子痫及其他并发症的护理方法。方法回顾性分析2002年1月至2007年12月收治的31例重度子痫前期病例的护理方法。结果及时有效的降压,控制子痫的发生,精心护理,对降低孕产妇及围产儿的死亡率至关重要。     

醋酸铜诱导Hela细胞的凋亡

目的研究醋酸铜对人宫颈癌细胞(Hela细胞)存活,生长,周期和凋亡的影响及Bcl-2,Fas基因表达的变化,探讨铜离子引起细胞凋亡的分子机制。方法体外培养Hela细胞,不同剂量醋酸铜(0~40μg/ml)作用72h,苔盼蓝拒染法测细胞存活率,噻唑蓝法(MTT)测醋酸铜对细胞生长的抑制作用。不同剂量的醋酸铜(0~60μg/ml)作用36h,碘丙啶(PI)单染测铜离子对细胞周期的影响;作用24、36和48h,Annexin V/PI双染法测细胞凋亡;作用24h,RT-PCR法检测与凋亡有关基因Bcl-2,Fas表达的变化。结果苔盼蓝拒染法显示,随着浓度醋酸铜的增加,细胞存活率降低;MTT法显示,醋酸铜对细胞生长有强烈的抑制作用。PI单染证明铜离子对细胞周期无影响。Annexin V/PI双染法的结果显示,随着醋酸铜浓度及作用时间的增加,细胞凋亡率显著升高。基因表达分析显示Bcl-2表达量随铜离子增加而降低,而Fas与Bcl-2相反。结论醋酸铜降低Hela细胞的存活率,抑制Hela细胞的生长,这主要是由细胞凋亡引起的。凋亡的发生可能与Bcl-2 mRNA水平的下降及Fas mRNA水平的升高有关。     

氟伐他汀对溶血性磷脂酰胆碱致动脉平滑肌细胞增殖和凋亡相关因子表达的影响

目的：观察氟伐他汀对溶血性磷脂酰胆碱（LPC）诱导人脐动脉平滑肌细胞（HUASMC）增殖和凋亡作用的影响,探讨他汀类药物抗动脉粥样硬化的机制。方法：采用体外培养的HUASMC,待其生长到融合状态时用不同浓度（10-7～10-5mol/L）氟伐他汀和LPC（1、2.5、5mg/L）干预后用MTT法检测细胞增殖,Hoechst-33258染色法观察细胞凋亡,免疫组化染色方法和RT-PCR检测血管平滑肌凋亡相关因子Survivin、Fas的表达。结果：（1）MTT结果反映LPC作用24hHUASMC数量明显增多,增殖指数增大,氟伐他汀能抑制LPC促增殖的作用,使OD值降低,细胞数量明显减少;（2）免疫组化和RT-PCR结果显示：LPC对照组（5mg/L）和氟伐他汀处理组在作用早期（6～12h）Survivin因子表达明显,胞浆内可见大量棕黄色颗粒,随时间延长Survivin因子表达逐渐下降,72h时Survivin因子表达明显减弱,与LPC对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）;而LPC对照组和氟伐他汀处理组在早期（6～24h）Fas因子表达不明显,晚期（48～72h）可检测到Fas因子大量表达,胞浆内可见棕黄色颗粒,晚期处理组与LPC对照组比较差异有统计学意义（P〈0.01）。结论：氟伐他汀抑制LPC对HUASMC的促增殖作用并诱导细胞发生凋亡,其凋亡作用主要与抑制Survivin因子和促进Fas因子表达有关。     

迷迭香酸抗过氧化氢诱导血管平滑肌细胞凋亡作用的研究

目的探讨迷迭香酸对过氧化氢(H2O2)诱导血管平滑肌细胞凋亡的保护作用及其机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡率;吖啶橙(acridine orange,AO)染色观察细胞形态学变化;MTT法检测细胞活性;Western blot检测细胞中Bcl-2、Bax、Fas和FasL蛋白的表达。结果经500μmol·L-1H2O2处理24h后,细胞凋亡率为34.9%±2.55%,出现核固缩、核碎裂等典型的凋亡形态学改变,所以随后实验选择500μmol·L-1H2O2为诱导血管平滑肌细胞凋亡的最佳浓度。①500μmol·L-1的H2O2处理血管平滑肌细胞24h能引起细胞活性明显降低;细胞凋亡率明显增加,达35.7%±1.33%;细胞中Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达升高,Bcl-2/Bax蛋白比值减少,Fas和FasL蛋白表达升高。②用迷迭香酸(10、20、40μmol·L-1)预处理细胞30min,可以增加细胞活性;降低细胞凋亡率,呈浓度依赖性;细胞中Bcl-2/Bax蛋白比值升高,Fas和FasL蛋白表达降低。结论迷迭香酸能拮抗H2O2诱导血管平滑肌细胞凋亡;其作用机制可能与升高细胞中Bcl-2/Bax蛋白比值,减少Fas、FasL蛋白表达有关。     

银杏叶提取物对重症胰腺炎胰腺细胞凋亡作用机制的探讨

目的　探讨银杏叶提取物 (EGb)对急性重症胰腺炎 (ASP)胰腺细胞凋亡的作用机制。方法　将 78只SD大鼠分为假手术 (SO)组、ASP组和治疗组。治疗组在ASP模型诱发后经腹腔注射金纳多注射液 2 0mg/kg ,每 6h注射一次 ,动态观察胰腺病理变化 ,免疫组化 (TUNEL法与SP法 )检测胰腺凋亡情况与细胞凋亡调控基因Bcl 2和C myc蛋白的表达。结果　治疗组胰腺病理损害程度较ASP组减轻。ASP组凋亡指数明显高于SO组 ,(P <0 0 1) ,且术后 3h达高峰 ,治疗组 3h、6h凋亡指数明显下降 (P <0 0 5 )。免疫组化 :ASP组Bcl 2表达明显增多 ,治疗组 3h的Bcl 2表达较ASP组同时相点上调 (P <0 0 5 ) ;ASP组C myc表达术后 6h达高峰 ,治疗组 3h、12h的C myc表达虽有增高 ,但无显著性差异。结论　金纳多能减轻胰腺病理损害、抑制胰腺细胞的凋亡 ,其抑制细胞凋亡可能与其上调凋亡调控基因Bcl 2的表达有关。     

硫化氢在大鼠阿霉素心肌病发病中的意义

目的探讨新型气体信号分子硫化氢(hydrogen sul-fide,H2S)对阿霉素(adriamycin,ADR)心肌病大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法♂性Wistar大鼠66只,随机分为6组①阿霉素组(ADR组,n=12):腹腔注射ADR,每次2.5mg.kg-1,1次/周,共用药10wk;②ADR+小剂量NaHS组(n=12):ADR用药方法同ADR组,同时经腹腔注射H2S供体NaHS,2.8μmol.kg-1.d-1,连续用药10wk;③ADR+大剂量NaHS组(n=12):ADR用药方法同ADR组,同时经腹腔注射NaHS,14μmol.kg-1.d-1,连续用药10wk;④ADR+PPG组(12只):ADR用药方法同ADR组,同时经腹腔注射PPG30mg.kg-1.d-1,连续用药10wk;⑤对照组(n=9):用相同容量的生理盐水代替ADR,给药方法同ADR组;⑥NaHS组(n=9):经腹腔注射NaHS,14μmol.kg-1.d-1,连续用药10wk。于第10周检测大鼠心功能和血流动力学指标,处死大鼠,取心肌组织制作病理切片,分别于光镜及透射电镜下观察其显微以及超微结构,用TdT介导dUTP缺口末端标记法(TUNEL)方法检测心肌细胞凋亡及用免疫组化测定心肌细胞中Fas和Bcl-2蛋白的表达,同时用敏感硫电极法测定血浆及心肌组织里的H2S含量。结果阿霉素组大鼠左室内压最大上升速率(+dp/dtmax)及左室内压最大下降速率(-dp/dtmax)明显降低(P均<0.01),心肌病理结果显示阿霉素组心肌细胞变性、线粒体和肌浆网水肿、细胞内空泡增多,呈心肌病样改变;心肌细胞凋亡数明显增加,心肌细胞中的Fas蛋白表达明显增加,Bcl-2蛋白的表达明显降低(P均<0.01);同时大鼠血浆及心肌组织H2S含量均明显低于对照组(P<0.01)。经外源性补充H2S供体NaHS后,大鼠心功能较前明显改善,光镜及电镜显示ADR+小剂量NaHS组及ADR+大剂量NaHS组心肌组织病理损害程度明显较阿霉素组减轻;心肌细胞凋亡率明显降低,Fas蛋白表达明显降低,Bcl-2蛋白表达明显增加(P均<0.01)。ADR+PPG组与ADR组相比较,差异无显著性,NaHS组和对照组相比较,差异无显著性(P>0.05)。结论H2S参与大鼠阿霉素心肌病的发病过程,外源性补充H2S供体可以改善阿霉素心肌病大鼠心功能,减轻心肌损伤,减少细胞凋亡,对其发病起到调节作用。     

NO水平下降通过氧化应激引起人胎盘滋养细胞凋亡

目的探讨一氧化氮(NO)水平下降诱导人胎盘滋养细胞凋亡的可能机制。方法体外培养人胎盘滋养细胞株(HTR-8),分别加入10、100、500、1 000μmol·L-1L-NAME,并设置对照组(0μmol·L-1L-NAME),孵育48 h;四甲基偶氮唑蓝法(MTT)检测L-NAME对细胞存活率的影响;采用硝酸还原酶法测定细胞中NO的含量;利用透射电镜、流式细胞术和Annexin-V FITC染色检测L-NAME对HTR-8细胞凋亡的影响;Fe3+还原比色法检测总抗氧化能力(T-AOC)、黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活性及硫代巴比妥酸比色法测定MDA含量。结果与对照组比较,100、500、1 000μmol·L-1L-NAME组细胞存活率及NO水平明显降低(P<0.05,P<0.01);Annexin-V FITC染色和流式分析均显示L-NAME能诱导细胞凋亡,并且呈剂量依赖性;NO水平与细胞凋亡数呈负相关(r=-0.5210);透射电镜结果显示:与对照组比较,实验组细胞核形态不规则,核膜固缩呈不规则状,染色质凝集或边集,线粒体肿胀或浓缩、嵴断裂或溶解,甚至消失,形成空泡,尤其在100μmol·L-1L-NAME组可见凋亡小体;同时,HTR-8细胞内T-AOC、SOD水平明显降低(P<0.05),MDA的含量明显升高(P<0.05);细胞凋亡数与T-AOC(r=-0.3212)、SOD(r=-0.2779)水平均呈负相关,与MDA(r=0.2807)含量呈正相关。结论氧化应激在NO水平降低引起的人胎盘滋养细胞凋亡中起重要作用。     

金雀异黄素对胃癌细胞SGC-7901凋亡的诱导及相关基因表达的调控

目的：研究金雀异黄素（Genistein,Gen）对胃癌细胞SGC-790t凋亡的影响及凋亡相关基因表达的调控。方法：应用MTT比色法检测Gen对胃癌细胞SGC-7901生长活力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;RT—PCR法检测凋亡相关基因Bcl-2、Fas表达水平的改变。结果：Gen对SGC-7901细胞有生长抑制作用,且呈时间／浓度依赖性;10．0mg·L^-1,20．0mg·L^-1Gen能诱导SGC-7901细胞凋亡,凋亡率与剂量正相关（r=0．9830）;Gen使SGC-7901细胞Bcl-2 mRNA表达下调,Fas mRNA表达上调。结论：Gen可能通过调控Bcl-2、Fas的基因水平而诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡。     

中华眼镜蛇毒活性组分诱导内皮细胞凋亡的机制

目的通过检测内皮细胞Bcl-2和caspase3的表达水平,探讨中华眼镜蛇毒活性组分(CCVAF)诱导内皮细胞凋亡的可能机制。方法采用血管内消化法原代培养牛肺主动脉血管内皮细胞(BAVEC)。实验分为不同浓度的CCVAF组(1.25,2.5,5,10 mg/L)和对照组(等体积的培养基)。采用流式细胞仪检测CCVAF作用24 h后各组BAVEC的Bcl-2表达水平;采用比色法测定caspase3的活性。结果经CCVAF作用后,流式细胞仪测定各组均未见到有阳性峰出现在M1,抗凋亡蛋白Bcl-2表达并没有受到药物的影响。而与对照组相比,capase3活性在1.25mg/L组即出现升高,此后随浓度的增加而升高,呈剂量依赖性(r=0.929,P<0.05)。各浓度组加入capase3活性抑制剂(Ac-DEVD-CHO)后,capase3活性明显降低,但仍然高于对照组(P<0.05)。结论 CCVAF不影响内皮细胞Bcl-2的表达,而能够上调capase3的活性。其可能不经Bcl-2影响的线粒体所在的凋亡通路调节细胞的凋亡。     

二乙酰二脱水卫矛醇诱导人白血病HL-60细胞凋亡与Bcl-2家族的关系

目的　探讨抗肿瘤药物二乙酰二脱水卫矛醇 (di acetyldianhydrogalactitol,DADAG )诱导肿瘤细胞凋亡机制。方法　透射电镜、DNA梯形条带、流式细胞术及Westernblot法分别检测凋亡和凋亡相关基因Bcl 2家族成员表达的动态变化。结果　透射电镜可见细胞异染色质固缩、边集及凋亡小体形成 ;DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的“DNAlad der” ;流式细胞仪DNA直方图上出现亚二倍体峰。DADAG4 μmol·L-1处理HL 6 0细胞 6h后 ,Bcl 2蛋白水平开始下降 ,Bad蛋白水平明显上调 ,相反 ,Bcl XL 蛋白水平呈时间依赖性地下降。结论　DADAG诱导白血病HL 6 0细胞凋亡 ,与Bcl 2、Bcl XL 蛋白水平下降 ,Bad蛋白水平明显上调有关