同种组织瓣移植后免疫排斥反应及其对策

同种瓣具有优良的抗血栓、抗感染性能及良好的血流动力学效果 ,且移植技术日趋成熟 ,使用方便 ,广泛应用于临床 ,治疗先天性心脏病及瓣膜病。但同种瓣移植后远期易钙化毁损 ,再次移植率高。同种瓣移植后免疫排斥反应及探讨相应的治疗措施是多年来研究的热点 ,现就此问题作一综述。一、同种组织瓣的免疫原性在同种不同个体间进行组织移植后会引起不同程度的免疫排斥反应 ,其强度由供受体间的组织不相容性程度决定。决定人同种移植物与受体是否相容的抗原是人类白细胞抗原(HLA) ,按编码产物的结构、表达方式、组织分布与功能可分为 3类 :HL…     

大鼠低温保存同种带瓣主动脉和肺动脉移植物免疫排异反应的研究

探讨同种移植物对宿主免疫状态的影响以及排异反应对移植物的作用。方法通过低温保存的大鼠同种异体带瓣主动脉和肺动脉异位移植的动物模型,观察同种移植后宿主体液和细胞免疫指标的变化,以及移植物的病理改变。结果低温保存同种带瓣管道移植后有明显的免疫排异反应发生,细胞和体液免疫参与免疫排异反应的过程;慢性免疫排异反应以细胞免疫为主。结论免疫排异反应导致移植血管内膜增厚、管壁钙化、狭窄和闭塞。     

同种带瓣主动脉用于矫正型大动脉转位合并肺动脉狭窄

将同带瓣主动脉 过适宜处理后，用以治疗１８例合并肺动脉狭窄的矫正型大动脉转位患者，其中内脑正位型１４例，内脏反应型４例，均合并室间隔缺损。方法手术缝闭肺动脉瓣口，修复ＶＳＤ，用经过冷冻处理的同种带瓣主动脉管道连接功能右心室和肺动脉。     

环孢素预处理对同种带瓣主动脉移植的保护作用

目的 观察环孢素预处理在同种带瓣管道移植的作用.方法 将1个月龄的中国白兔50只(取其带瓣主动脉)作为供体,体质量0.25 ～0.35 kg;将成年中国白兔50只,体质量2.50～3.50 kg,随机分2组作为受体,25只(移植时供体带瓣主动脉接受环孢素预处理)为实验组,25只(移植时供体带瓣主动脉不接受环孢素预处理)为对照组,移植前后应用葡萄糖代谢法检测带瓣血管的代谢,分别于第2、4周取出移植主动脉,观察血管是否通畅,苏木素-伊红(HE)染色组织病理图片观察,普通聚合酶链反应(PCR)鉴定MGP基因,荧光定量PCR 2-△△Cr方法检测实验组4周、8周时血管平滑肌细胞中的MGP mRNA的相对表达量.结果 (1)实验组通畅率为86.96％,明显高于对照组通畅率(59.09％),两组均数比较差异有统计学意义(P＜0.05);实验组(25例)葡萄糖代谢率均数±标准差值为(4.3950 ±0.5642) mmol/(L·24 h),对照组(25例)葡萄糖代谢为(4.4720±0 7213) mmol/(L·24 h),两组均数比较差异无统计学意义(P＞0.05).(2)组织病理学观察,对照组明显出现内膜增生、中膜坏死和外膜浸润,随时间推移细胞成分明显减少,瓣膜正常分层状结构和结缔组织不断丧失;(3)MGP基因在实验组中表达,而在对照组中不表达;实验组中术后4周的MGP mRNA表达量(14.564±0.243)明显高于术后8周的表达量(6.492±0.962).结论 环孢素预处理的同种带瓣主动脉可提高移植血管通畅率,降低血栓形成,血管内皮细胞改变较轻;MGP mRNA水平的动态变化可能与环孢素抑制血管平滑肌细胞的表型转化及增殖有关.     

同种带瓣主动脉片修补心内分流合并重度肺动脉高压

目的　探讨同种带瓣主动脉补片在治疗先天性心脏病重度肺动脉高压中对右心功能的保护作用。方法　自 1998年 5月至 2 0 0 1年 5月应用同种带瓣主动脉补片修补先天性心脏病重度肺动脉高压患者心内缺损 10例。平均肺动脉压 5 5～ 98mm Hg( 1k Pa=7.5 mm Hg) ,平均 72 .4 6± 12 .4 1mm Hg。动脉血氧饱和度 0 .87～ 0 .95 ,平均 0 .91± 0 .0 3。　结果　术后 4 8小时内均顺利脱机 ,无死亡。随访 3～ 2 8个月 ,平均 10 .3± 4 .2个月 ,活瓣均已关闭 ;平均肺动脉压2 0～ 4 8mm Hg,平均 3 6.3 7± 9.66mm Hg;动脉血氧饱和度 0 .95～ 0 .98,平均 0 .97± 0 .0 1;临床症状明显改善。　结论　同种带瓣主动脉补片的应用能有效预防右心功能不全的发生     

同种胰腺移植排斥反应的早期诊断

排斥反应同种胰移植物功能丧失的主要原因，早期诊断排斥反应对提高移植物存活率具有重要意义。目前诊断方法有多种，大部分缺乏特异性，综合分析可能有助诊断斥反应，现有的检测手段在不能鉴别移植物功能不良的情况下，活检是早期诊断排斥反应的最有效方法。     

带瓣静脉段同种异体移植的研究

在小口径血管同种异体移植实验研究取得成效的基础上,进一步作小口径带瓣静脉段同种异体移植。将犬的带瓣股静脉近侧段,经特殊制备后,间置移植于异体犬的股静脉。术后16周内,移植段管壁再生不全,其内膜前列环素生成量也低于正常值,其中的瓣膜一般均无功能。16周以后,管壁结构全由受体组织替代,内膜生理功能恢复正常,其中半数以上的瓣膜功能恢复。     

兔颈动脉移植同种主动脉带瓣血管模型的建立

目的 建立兔两侧颈动脉移植同种带瓣血管模型。方法 成年新西兰兔１０只作为受体分５组。１个月龄的新西兰白兔２０只作为供体，取其主动脉带瓣血管，移植于受体的两侧颈动脉，术后７、１４、２８、６０、１２０ｄ分别取出每组受体所移植的同种瓣并观察血流通常情况及有无血栓形成。结果 受体全部存活，１０只成年兔的两侧颈动脉血流均通畅，大体标本无血栓形成。结论 此模型对动物损伤小，显露好，且双侧移植有利于分组间对比研     

同种胰腺移植排斥反应的早期诊断(综述)

排斥反应是同种胰移植物功能丧失的主要原因,早期诊断排斥反应对提高移植物存活率具有重要意义.目前诊断方法有多种,大部分缺乏特异性,综合分析可能有助诊断排斥反应,现有的检测手段在不能鉴别移植物功能不良的情况下,活检是早期诊断排斥反应的最有效方法.     

免疫抑制剂防治同种带瓣主动脉移植后钙化的作用

目的 研究免疫抑制治疗在减轻免疫反应和防治同种带瓣主动脉移植物(AVH)组织钙化的作用.方法 120只Wistar近交系大鼠随机分为实验组和对照组.实验组(SD-Wistar)分别为接受低温保存的AVH移植的A组,接受低温保存的AVH移植后给予环孢素A(CsA)治疗的B组和接受1:5稀释树突状细胞(DC)单抗预处理低温保存,AVH移植后给予DC单抗治疗的C组.对照组(Wistar→Wistar)为D组.术后2、4、8、12、16周检测大鼠血液中T细胞抗原抗体αβ(TCR-αβ),CD28的表达水平.取出移植物,光镜和电子显微镜下观察其组织结构形态学变化,用原子火焰吸收法测定AVH组织钙的含量.结果 (1)实验组TCR-αβ、CD28的表达水平在不同时间均较对照组明显增强(P<0.01),表达高峰在移植后2～4周,此后表达水平逐渐下降,12周维持在低水平.(2)实验组移植物组织钙含量自移植后4周开始升高,而对照组各时点的钙含量差异无统计学意义(P>0.05).术后4周、8周组织钙含量(μg/g)冷冻组为2856±79、3587±168;CsA治疗组为2518±73、3237±187;DCmAb治疗组为2176±210、3089±176;对照组为860±60、870±50.结论 免疫抑制治疗可减轻免疫反应,延缓同种带瓣主动脉移植物组织钙化进程,疗效明显.     

同种带瓣主动脉和肺动脉移植在复杂先心病治疗中的应用

目的　研究同种带瓣主、肺动脉移植应用于复杂性先天性心脏病矫治的疗效。方法　制备同种带瓣管道 89根 (主动脉 5 5根、肺动脉 3 4根 ) ,临床应用 3 1例 ,其中主、肺动脉单瓣作右室流出道跨瓣补片术 14例 ,Rastelli手术 11例 ,右心室 -肺动脉连接 (RV -PA) 3例 ,肺动脉瓣置换1例 ,Ross手术 1例 ,改良Fantan手术 1例。结果　主、肺动脉单瓣作右室流出道跨瓣补片组 14例 ,1例术后 3d死于右心功能不全 ,存活 13例 ,随访 ( 4 3± 3 .2 )个月 ,超声心动图检查显示移植后瓣膜启闭功能良好 ,无增厚及粘连。复杂性先天心脏病矫治组 17例 ,死亡 7例 ,存活 10例 ,随访( 3 4.3± 6.3 9)个月 ,管道血流通过顺畅 ,管壁无变薄、钙化。结论　①同种带瓣管道具有管壁弹性好 ,易于缝合 ,术后排斥反应少等优点 ,可广泛应用于复杂性先天性心脏病矫治术 ,左、右室流出道的重建 ;②同种带瓣管道补片既能加宽右室流出道 ,且有良好抗返流作用 ,有利于术后患儿心功能恢复 ,使部分复杂的病例能够一次手术根治     

异种移植免疫排斥的研究进展

异种移植是解决人体器官严重短缺的重要思路.随着对异种移植排斥和人畜共患感染性疾病的深入研究,以及α-1,3-半乳糖苷转移酶基因敲除猪的成功构建,以猪为供体的异种移植与临床应用之间的距离正在逐渐缩短.阻碍异种移植发展的主要障碍仍是免疫排斥反应.本文试就目前异种免疫排斥的研究进展进行综述,希望对未来的临床异种移植研究提供参...     

同种带瓣主动脉用于矫正型大动脉转位合并肺动脉狭窄手术治疗

目的将同种带瓣主动脉经过适宜处理后，用以治疗１８例合并肺动脉狭窄的矫正型大动脉转位（ＣＴＧＡ）患者，其中内脏正位（ＳＬＬ）型１４例，内脏反位（ＩＤＤ）型４例，均合并室间隔缺损（ＶＳＤ）。方法手术缝闭肺动脉瓣口，修复ＶＳＤ，用经过冷冻处理的同种带瓣主动脉管道连接功能右心室和肺动脉。结果术后测压：右心室收缩压为３．３～６．４ｋＰａ（２５～４８ｍｍＨｇ），右心室－肺动脉压差０．６６～３．０ｋＰａ（５～２２ｍｍＨｇ），右心室／左心室压比值０．３～０．６。结论采用同种带瓣主动脉能使患者术后血流动力学指标更接近于人体正常生理状态。     

移植肾间质中浸润细胞免疫标记蛋白的变化与急性细胞性排异的关系

观察移植肾发生急性细胞性排异（ＡＣＲ）和无ＡＣＲ时，肾间质浸润细胞中一组标记蛋白的变化，及其与间质浸润ＣＤ４或ＣＤ８细胞的关系。方法选择１７例肾移植患者，定期行移植肾活检，采用ＰＡＰ四层法对一组标记蛋白进行观察。结果无ＡＣＲ的肾组织中，增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）和ＤＲ蛋白仅轻度增加，原癌蛋白２（Ｂｃｌ２）、ＩＬ２Ｒ和细胞间粘附分子１（ＩＣＡＭ１）的增加不明显。当移植肾出现ＡＣＲ时，上述标记蛋白均明显增加，尤以ＰＣＮＡ和ＩＬ２Ｒ增加最为显著，并与间质浸润的ＣＤ８密切相关。结论移植肾的免疫组化检查对移植肾急性细胞性排异反应有一定的意义；ＩＬ２Ｒ对于ＡＣＲ的诊断及鉴别诊断具有一定的临床应用价值。     

同种瓣移植后钙含量与免疫排斥反应的关系

目的 探讨同种异体带瓣大血管移植后钙含量与免疫排斥反应的关系。方法同种异体带瓣主动脉腹主动脉异位移植大鼠，随机分为异基因组（SD大鼠为供体，Wistar大鼠为受体）和同基因组（受体供体为同一种系的近交系大鼠）。各组随机分为5个小组，每组8只，分别于术后2,4,8,12、16周使用流式细胞仪测定大鼠CD25、CD71的表达，并且取出移植物，原子火焰吸收法测定钙含量，并对移植物进行光镜和电镜观察，同时免疫组化测定CD40L的表达。结果（1）异基因组移植后各个时间段的CD40L、CD25和CD71的表达均较同基因组高（P〈0．01），异基因组CD23、CD71和CD40L表达的高峰时间段主要在移植后早期（2-4周），此后的表达水平逐渐回落，12周后维持在低水平。（2）异基因组的钙含量从4周开始升高，随着时间的推移，逐渐升高，在12周达到高峰。同基因组各个时间段的钙含量无差别（P〉0．05）。（3）移植后异基因组出现内皮细胞脱落和平滑肌细胞坏死。结论同种瓣移植后的钙含量与免疫关系密切；移植后4周才开始钙化，随着时间的推移，钙含量逐渐升高，在12周达到高峰；移植后不同的时间钙含量并不与当时的免疫排斥水平正相关，但二者互相影响。     

核心蛋白聚糖抑制淋巴细胞增殖及皮肤移植免疫排斥反应的研究

目的 观察核心蛋白聚糖(DCN)对小鼠皮肤移植模型术后免疫排斥反应的影响.方法 以Ficoll密度梯度离心法提取C57BL/6J脾脏淋巴细胞,96孔板接种后,各孔加入25μg刀豆蛋白A.将细胞分为5组,分别加入0、25、50、75、100μg/L的DCN,同时设立仅含细胞悬液阴性对照组和培养液空白对照组.各组细胞培养24、48、72、96、120 h后,以噻唑蓝(MTT)比色法检测各组淋巴细胞增殖率,并以流式细胞仪检测各组细胞凋亡率.以24只健康成年BALB/C小鼠为供体,30只健康成年C57BL/6J小鼠为受体,将受体随机分为5组,建立背部皮肤移植模型.A组为阴性对照组,术后腹腔注射生理盐水1 ml;B组、C、D组受体小鼠于术后分别腹腔注射50、100、150μg的DCN.同时设立E组,为C57BL/6J对C57BL/6J的同种同基因移植对照组.观察各组受体移植皮片的存活时间和急性排斥反应发生时间.术后第7天,每组各取1只受体小鼠的移植皮片行病理学检查.结果 各组不同浓度DCN对小鼠脾脏淋巴细胞体外增殖均有抑制作用,并可诱导淋巴细胞凋亡,随DCN浓度升高对淋巴细胞增殖抑制作用更强,100μg/L组抑制作用最明显,细胞凋亡率为77.6%,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05);DCN具有抑制皮肤移植免疫排斥反应及延长移植皮片存活时间,150μg组皮片存活时间最长,平均为(16.6±2.4)d,与其他各组比较差异有统计学意义(P＜0.05).且随剂量增大抑制作用明显,移植皮肤急性排斥反应轻.结论 DCN具有免疫抑制作用,可能通过诱导活化的淋巴细胞凋亡抑制小鼠皮肤移植术后急性排斥反应发生,并延长移植皮片的存活时间.

Abstract：

Objective To study the inhibitory effect of decorin (DCN) on immunological rejection in skin transplantation.Methods Spleen lymphocytes were obtained from C57BL/6J mice,inoculated in a 96-well plate,and every well was added with 25 μg CoA.These cells were divided into 5 groups and cultured with DCN in different concentrations (0,25,50,75,100 μg/L) for different time (24,48,72,96 and 120 h).Negative control group (lymphocytes only) and blank control group (culture medium only)were set up.Cell proliferation rate was measured by methylthiazol tetrazolium (MTT) assay,and the percentage of cell apoptosis was analyzed by flow cytometry.Twenty-four healthy BALB/C mice served as donors.Thirty C57BL/6J mice served as recipients and divided into 5 groups.Full-thickness-skin was transplanted through back to back from donor BALB/C to recipient C57BL/6J.Postoperatively,the recipients in group A (negative control) were intraperitoneally injected with 0.9% NaCl,and those in groups B,C and D with DCN (50,100 and 150 μg/L respectively).In group F skin transplantation was performed between two C57BL/6J mice.After skin transplantation,the survival time of skin allografts and the time of acute rejection were observed.Skin specimens were collected from one recipient of every group 7 days after operation and examined pathologically.Results DCN obviously depressed mice spleen lymphocyte proliferation in vitro and inducef lymphocyte apoptosis in vitro.In 100 μg/L DCN group ( group C ),there were most significant inhibitory effects,and the apoptosis rate was 77.6%.There were significant difference between group C and other groups ( P＜0.05 ).DCN could inhibit immunological rejection of skin transplantation and prolong the survival time of skin allografts.Among all the groups,survival time in group D was longest with the average survival time being ( 16.6 ±2.4) days ( P ＜0.05 ).The inhibitory effect of DCN was increased and the acute rejection was alleviated with the increase of DCN dosage.Conclusion DCN has the inhibitory effect.It can induce lymphocyte apoptosis and inhibit acute immunological rejection in skin transplantation.It can prolong the survival time of skin grafts.     

供体骨髓间充质干细胞抑制肝移植大鼠免疫排斥的研究

目的 探讨供体骨髓间充质干细胞(MSCs)抑制肝移植大鼠免疫排斥的作用.方法 实验按照随机数字表法分为3组,每组14对雌性大鼠,建立Wistar-SD大鼠原位肝移植模型.A组:肝移植术中输注生理盐水;B组:肝移植术后隔天一次给予他克莫司(0.25 mg/kg)灌胃2周;C组:肝移植术中输注与A组同剂量的雄性Wistar大鼠的MSCs.观察术后第10天肝功能的变化、病理改变、TGF-β1与IL-10的表达、Y染色体定位及受体存活时间.采用完全随机化设计多组比较方差分析AST、ALT值,LSD法分析组间差异;病理分级采用ridit法分析;Kaplan-Meier法计算存活率,Log-rank检验进行生存分析.结果 肝移植术后第10天A、B、C组ALT分别为(756±104)、(197±49)、(103±31)U/L,AST分别为(635±134)、(331±78)、(150±38)U/L,3组ALT和AST比较差异均有统计学意义(F=158,265,P<0.05);两两比较发现,B组及C组均优于A组,且C组优于B组.A组ridit均值为0.8333,为重度排斥,B、C两组ridit均值分别为0.4583、0.2083,排斥反应较A组显著减轻,且C组较B组级别更低.A、B、C组TGF-β1阳性表达率分别为18%±5%、69%±20%及85%±24%,3组比较差异有统计学意义(F=191,P<0.01).A、B、C组IL-10阳性表达率分别为21%±5%、75%±14%及91%±21%,3组比较差异有统计学意义(F=672,P<0.01);B、C两组TGF-β1和IL-10呈强阳性表达且C组比B组更明显,而A组则为弱阳性表达.原位杂交检测发现,C组含有带Y染色体的雄性MSCs,主要在汇管区聚集.A、B、C组大鼠50 d存活率分别为0、10%、90%,3组大鼠存活率比较差异有统计学意义(χ~2=36,P<0.01),C组中位存活时间为63 d,较A组11 d延长,且C组长于B组.结论 肝移植同时向供体输注MSCs能够抑制受体对移植肝的免疫排斥.     

Time-related histopathologic analyses of immunologically untreated porcine valved conduits implanted in a porcine-to-goat model

This study was performed to evaluate the clinical feasibility of use of immunologically nontreated xenogenic valves, using a porcine-to-goat pulmonary valved conduit implantation model. Porcine pulmonary valve conduits were prepared with no specific immunological treatment and implanted in the right ventricular outflow tract of goats under cardiopulmonary bypass. The goats were assigned at predetermined intervals (1 day, 1 week, and 3, 6, and 12 months) as two animals for each interval. Echocardiographic examinations of the valves were performed before sacrifice. Upon retrieving the xenograft specimens, they were inspected visually and microscopically. Ten of the 12 animals survived the predetermined observation periods. Variable degrees of pulmonary regurgitation were the main findings on echocardiographic evaluations. On gross examination of the explanted specimens, all leaflets, except in one animal that prematurely died, were fairly well preserved. They were slightly shortened but free of thrombosis or vegetation. Aneurysmal dilatations of the anterior wall of the implanted pulmonary artery were observed in one of 12-month-survival animals and in another one of 3-month-survival animals. Microscopically, the three components of implanted xenografts (the pulmonary artery, valve, and infundibulum) were shown to be gradually replaced with host cells in time, while maintaining structural integrity. The nuclei of the donor tissue disappeared through pyknosis and karyolysis. In conclusion, immnunologically untreated xenogenic pulmonary valved conduits can be an alternative potential as valve substitutes with distinctive advantages of providing self-healing potential, despite a few problems observed in the current study such as occurrences of pulmonary regurgitation and sporadic cases of aortic aneurysm.