空气污染对皮肤角质层蛋白羰基化水平的影响及粉红胡椒木提取物和脂质混合物对皮肤损伤的防护作用

目的 研究空气污染对皮肤角质层蛋白羰基化水平的影响,评估粉红胡椒木提取物和脂质混合物对皮肤损伤的防护作用。方法 预实验分析影响因素后,荧光标记法检测34例健康受试者不同部位皮肤角质层蛋白羰基化水平。利用定制的污染模拟箱,以香烟烟雾模拟污染物, 将15名健康受试者前臂屈侧向上暴露于污染模拟箱中,分别于暴露后0、1、2、4、5 h用D?squame胶片采集角质层样本。选14例健康受试者,在单侧前臂屈侧选择相邻的3个区域分别外用1%粉红胡椒木提取物的水溶液（胡椒木组）、去离子水（对照组）或不涂任何样品（空白组）,然后将手臂在污染模拟箱中暴露5 h,暴露前后采集各区域角质层样本。另选16例健康受试者,在单侧前臂屈侧选取3处区域分别外用含5% 脂质混合物的乳液（脂质混合物组）、不含脂质混合物的安慰剂乳液（对照组）或不涂任何样品（空白组）,然后将手臂在污染模拟箱中暴露5 h,暴露前后采集各区域角质层样本。纳入20例健康受试者进行双盲半脸临床测试,即随机选择半脸外用含1%粉红胡椒木提取物的乳液,另外半脸外用安慰剂乳液,于产品使用前和使用56 d后,采用D?Squame胶片在受试者的面颊部分别采集角质层样本。采用荧光标记法检测上述角质层样本中皮肤蛋白羰基化水平。结果 对34名受试者检测显示,人体不同部位蛋白羰基化水平（平均荧光强度）存在显著差异（P < 0.001）,其中,面颊（26.3 ± 7.1）和额部（22.9 ± 7.9）显著高于手臂（14.7 ± 4.9）和腰背部（12.6 ± 4.2）（均P < 0.001）,且手臂蛋白羰基化水平显著高于腰背部（P = 0.046）。短期模拟加速暴露实验中,蛋白羰基化水平随污染暴露时间的增加而持续升高（R2 = 0.995 9）,暴露5 h后,胡椒木组和脂质混合物组皮肤角质层蛋白羰基化水平升高值分别为9.7 ± 5.2和5.8 ± 4.9,低于各自的空白组（19.0 ± 10.0、17.4 ± 8.8,均P < 0.005）和对照组（18.5 ± 7.3、15.9 ± 6.4,均P < 0.005）,差异均有统计学意义。长期人体测试中,20名受试者使用含1%粉红胡椒木提取物的乳液8周后,与安慰剂侧相比,面部蛋白羰基化水平显著降低。结论 空气污染加剧皮肤角质层蛋白羰基化损伤,粉红胡椒木提取物和脂质混合物能有效降低蛋白羰基化水平。     

蛋白激酶C抑制剂GF109203X诱导角质形成细胞去分化形成表皮干细胞的初步研究

目的探讨蛋白激酶C(PKC)抑制剂GF109203X诱导角质形成细胞去分化形成表皮干细胞的可能性。方法采用酶消化法结合Ⅳ型胶原快速贴壁法获得人原代表皮干细胞及角质形成细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长状况,免疫细胞化学染色法检测GF109203X诱导培养后角质形成细胞的表型及功能改变。同期分离培养的人在体表皮干细胞作为本次实验的阳性对照,原代角质形成细胞培养2 d后加等体积二甲基亚砜为阴性对照。结果表皮干细胞快速黏附,培养4 d后细胞呈圆形,形态规则,折光性强,明显克隆,β1整合素、CK19及CK14呈阳性表达,CK10阴性表达;已分化角质形成细胞不能快速黏附,培养4 d细胞呈类圆形,大小不一,折光性较差,无明显克隆,β1整合素、CK19及CK14呈阴性表达,CK10呈阳性表达。角质形成细胞经GF109203X诱导培养2 d后,实验组与阳性对照组细胞群β1整合素、CK19、CK14均呈阳性表达,但实验组较阳性对照组中细胞β1整合素、CK19、CK14阳性细胞数少,CK10均呈阴性表达;阴性对照组中细胞群β1整合素、CK19及CKl4呈阴性表达,CKl0呈阳性表达。结论 GF109203X能够诱导角质形成细胞去分化形成表皮干细胞。     

银屑病患者皮损间充质干细胞的培养鉴定及其表达HES1和CXCL6的研究

【摘要】 目的 培养鉴定银屑病患者皮损处真皮间充质干细胞（DMSC）,并研究DMSC的发状分裂相关增强子1（HES1）和趋化因子配体6（CXCL6）表达情况。方法 分离培养15例银屑病患者皮损及18例正常人皮肤的DMSC,利用流式细胞仪进行表型鉴定,实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）及免疫印迹（Western blot）检测HES1和CXCL6的mRNA及蛋白表达水平,两组间比较采用t检验。结果 银屑病组DMSC形态与正常对照组无差异,但HES1 和CXCL6基因的mRNA水平分别是对照组的3.56和3.44倍,且差异有统计学意义（P < 0.05）。在蛋白水平,银屑病组DMSC中HES1和CXCL6的表达明显高于对照组（P < 0.05）。结论 银屑病患者皮肤DMSC HES1及CXCL6表达升高可能参与银屑病的发病。