参苓白术散加味大黄保护肠黏膜屏障功能的实验研究

目的用动物实验的方法观察参苓白术散加味大黄能否保护肠黏膜屏障功能。方法将45只雄性NIH小鼠随机分为3组,即实验组、西药对照组、空白对照组,每组15只。分别在相同时间内灌服相同剂量的实验药物、瑞素、生理盐水;于实验的第24小时以颈椎脱臼法处死小鼠,取全部小肠称重,量长度,并收集小肠灌洗液、匀浆液。分别检测小肠灌洗液、匀浆液中磷脂酶AⅡ（Lp-PLA2）及溶细菌酶（LZM）含量。采用SPSS13.0方差分析进行各组间的差异性统计分析。结果参苓白术散加味大黄组小鼠的小肠灌洗液Lp-PLA2、LZM含量与正常对照组比较差异有非常显著性（P〈0.01）,与瑞素组小鼠比较差异有显著性（P〈0.05）。结论参苓白术散加味大黄具有保护肠黏膜屏障功能的作用。     

大黄促进人体小肠溶菌酶分泌的临床研究

目的 观察大黄对肠道溶茵酶分泌的影响.方法 将80个患有胃肠道肿瘤的病人随机分为两组,实验组给患者在术前2 d晚间1次,术前1 d早,晚各1次共3次,每次口服10%大黄液100 mL,对照组相应服用饮用水.所有患者均应在距曲氏韧带80～100 cm的范围内用肠钳限制10 cm长度的肠段用细针穿刺肠管注入生理盐水10mL.轻揉肠管后回收液体.立即冷冻保存.分别测定两组溶液中溶菌酶的含量.结果 大黄口服灌洗液中的溶菌酶的含量与饮用水相比明显增高(P＜0.01).两者之间的差异有统计学意义.结论 大黄促进人体小肠溶茵酶的分泌,这是大黄保护、增强肠道黏膜的作用机制之一.     

小鼠小肠抗生素肽的初步分离

目的 初步分离小鼠小肠抗生素肽.方法 将12只健康ICK小鼠剖腹切取从屈氏韧带到回盲部的小肠,以10%乙酸溶液冲洗肠腔收集灌洗液,并以30%乙酸溶液制备小肠组织匀浆,反复离心,聚乙二醇浓缩后透析,冰冻干燥,进行AU-PAGE、Tricine-SDS-PAGE、考马斯亮蓝R-250染色或银染显示多肽条带,然后进行凝胶成像分析和杀菌试验.结果 小鼠小肠组织匀浆和灌洗液中均含有可杀灭细菌、真菌的抗生素多肤,其中组织匀浆中所含的此类多肽较多;小鼠小肠抗生素肽的杀菌作用具有剂量依赖关系,且对不同细菌、真菌的杀灭作用也不同;小鼠小肠抗生素肽的分子量主要集中于3.0kD～14.3kD和29.0kD.结论 小鼠小肠含有多种抗生素肽,具有广谱的杀灭微生物的作用.     

淫羊藿次苷Ⅱ对气管切开插管留置大鼠sIgA、rBD2和IL-6的影响

目的:探讨淫羊藿次苷Ⅱ(icarisideⅡ,ICS-Ⅱ)对气管切开插管留置大鼠肺泡灌洗液分泌型免疫球蛋白A(secretory immunoglobulinA,sIgA)、肺组织β-防御素-2(rat Beta-defensin-2,rBD2)和外周血白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量的影响。方法:将54只SPF级雄性SD大鼠随机分成3组,正常对照组(A)、模型对照组(B)及用药组(C),每组18只。制备大鼠气管切开插管留置模型。模型成功6 h后给予C组ICS-Ⅱ[30 mg·(kg·d)~(-1)]灌胃,A、B组灌胃等量生理盐水。分别于24 h、72 h、168 h 3个时间段取外周血、肺泡灌洗液及肺组织,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肺泡灌洗液sIgA及外周血IL-6含量,PCR检测肺组织rBD2 mRNA相对表达量。结果:气管切开后肺泡灌洗液sIgA含量24 h即明显升高(P<0.01),但在72 h后又降至正常水平;用ICS-Ⅱ干预后肺泡灌洗液sIgA含量在3个时间段均明显升高(P<0.05),以72 h升高最明显。气管切开插管后大鼠外周血清IL-6含量72 h明显降低(P<0.01),在24 h和168 h没有明显变化;用ICS-Ⅱ干预后,IL-6含量在3个时间段均明显下降(P<0.05)。气管切开插管后24 h rBD2表达明显增加(P<0.01),随后72 h、168 h时间段逐渐降低;用ICS-Ⅱ干预后,rBD2表达量没有升高,反而明显下降(P<0.05)。结论:ICS-Ⅱ能够提高气管切开插管大鼠sIgA分泌,改善肺部局部免疫功能。     

肺炎支原体感染对小鼠干扰素γ和白细胞介素-4的影响

目的探讨肺炎支原体(MP)感染对小鼠干扰素-γ(IFN-γ)和白细胞介素-4(IL-4)的影响,研究MP感染Th1/Th2免疫应答状况。方法 60只小鼠随机分为实验组与对照组,每组30只。实验组建立MP感染小鼠模型,对照组小鼠滴鼻吸入等量磷酸盐缓冲液,分别在3、5、7、14、21 d取小鼠肺组织,测量肺指数及肺泡灌洗液中IFN-γ和IL-4水平。结果 2组小鼠不同时间点肺指数比较差异均有统计学意义(P<0.01)。实验组小鼠3 d时肺泡灌洗液中IFN-γ水平较对照组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠3、5、7 d肺泡灌洗液中IL-4水平与对照组比较均有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。2组小鼠3、5、7 d时IFN-γ/IL-4比值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 MP感染后以Th2介导的免疫反应为主,IFN-γ/IL-4失衡是MP感染发病的危险因素之一。     

The study of ventilator induced lung injury in mice

目的 建立小鼠机械通气肺损伤(VILI)模型,研究大潮气量、高浓度氧疗以及不同机械通气时间对VILI的影响及其可能机制.方法 将C57BL/6雄性小鼠随机分为9组,对小鼠进行机械通气,再对小鼠进行支气管肺泡灌洗,采用双抗体夹心法检测肺泡灌洗液中总蛋白含量和炎症因子水平;小鼠肺组织石蜡包埋切片后行HE染色,显微镜下观察肺组织形态变化及损伤程度.结果 大潮气量组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低潮气量组(P<0.05);高浓度氧疗组小鼠肺泡灌洗液中总蛋白、炎症因子含量明显高于低浓度氧疗组(P<0.05),并且随着通气时间的延长而升高;与正常对照组相比,各实验组小鼠肺泡灌洗液中蛋白含量明显升高(P<0.01);HE染色显示大潮气量机械通气4 h后,小鼠肺组织肺间隔明显增厚、炎性细胞浸润以及肺泡中出现渗出物,部分肺泡中出现红细胞的渗出等.结论 大潮气量、高浓度氧疗均产生了明显的VILI,主要表现为肺组织急性炎症反应、渗透性肺水肿、氧化应激反应.     

支气管肺灌洗200例临床分析

本文报告支气管肺灌洗200例。灌洗液标本处理后进行了五项生化测定:癌胚抗原,铁蛋白,溶菌酶,β_2-微球蛋白,分泌型 IgA。同时测定了铁蛋白、溶菌酶、β_2-微球蛋白的血清含量,目的在于探讨它们各自在临床应用的可能性以及数项指标的综合应用价值。结果表明:灌洗液中铁蛋白、溶菌酶测定值在肺良恶性病变组中有显著差异,而分泌型 IgA,β_2-微球蛋白、癌胚抗原无差异,同时比较了灌洗液中铁蛋白与分泌型 IgA 比值以及灌洗液与血清中铁蛋白比值对诊断肺癌的敏感性特异性,可作为肺癌辅助诊断的参考。结果还表明,矽肺灌洗液中磷脂含量与矽肺分期、脱尘时间、吸烟量与细胞数多少有一定关系。     

ATP敏感的钾通道开放剂对离体肺保护的实验研究

目的研究ATP敏感的钾离子通道开放剂(PCOs)吡那地尔(pinacidil)在离体兔肺保护中的作用。方法将18只杂种灰色家兔随机分成3组,建立离体肺缺血再灌注模型。对照组(n=6)以自体温血直接再灌注2 h;缺血组(n=6)用低钾右旋糖酐保存液(LPD) 二甲基亚砜(DMSO)灌洗,4℃保存8 h后自体温血再灌注2 h;实验组(n=6)用LPD 100μmol.L-1吡那地尔(溶于DMSO中)灌洗,4℃保存8 h后自体温血再灌注2 h。每隔30 min分别经肺动脉和左房插管取血行血气分析,评估离体肺功能;测量湿/干重比,估计肺水含量;光镜下行肺组织形态学检查;制作肺组织匀浆测定超氧化物歧化酶(SOD)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-8(IL-8)含量。结果实验组氧分压差(ΔPO2)和SOD与缺血组比较明显升高(P<0.05);组织形态学检查显示,实验组损伤较缺血组轻;实验组的TNF-α和IL-8含量明显低于缺血组(P<0.05)。结论在保存时间不超过8 h的情况下,用加入吡那地尔的LPD灌洗和保存肺能更好地保护肺功能。     

吸入脂多糖诱导小鼠急性肺炎模型的建立

目的：用吸入脂多糖(lipopolysaccharide, LPS）的方法建立简便、经济、稳定的小鼠急性肺炎模型。方法：将正常BALB/c小鼠麻醉后仰位固定,行LPS（50 μL, 1 g/L）吸入,于不同时间点获取支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid,BALF)后取肺组织制备匀浆,对支气管肺泡灌洗液进行细胞染色分类计数,用ELISA的方法检测肺组织匀浆和支气管肺泡灌洗液白介素-1β(（interleukin-1β,IL-1β）的含量。再取肺组织固定、切片,用HE染色鉴定炎症程度。结果：LPS吸入2~4 h后,支气管肺泡灌洗液和肺组织匀浆中IL-1β水平即明显增加。2 h时肺内就开始出现炎性细胞浸润,12~24 h炎症加剧甚至形成脓肿。支气管肺泡灌洗液中中性粒细胞增多最早出现,从2 h即开始增加,巨噬细胞和淋巴细胞则在1 d后开始明显增加,一直持续3 d。结论：用LPS吸入的方法可以建立快速、稳定、典型的小鼠急性肺炎模型。     

外源性心钠素对小鼠过敏性哮喘气道炎症的影响及其机制分析

目的 探讨外源性心钠素对过敏性哮喘小鼠模型气道炎症的影响作用及其作用机制.方法 选取SPF级BALBc小鼠48只,采用随机数字表法分为对照组(等量生理盐水干预)、模型组(等量生理盐水干预)、实验组A(外源性心钠素0.5,μg/g)、实验组B(外源性心钠素0.5 μg/g+A71915).模型组、实验组A、实验组B建模成功后给予对应处理措施,在最后一次激发实验后24 h,采集各组血清、支气管肺泡灌洗液检查炎症因子,采用HE染色观察肺组织病理变化,采用Western blot技术检测肺组织中锌指转录因子(GATA3)蛋白的表达水平.结果 模型组小鼠的血液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞所占比例均高于对照组(P＜0.05),实验组A的血液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞所占比例均高于模型组、实验组B(P＜0.05);模型组小鼠的肺泡灌洗液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞计数、IL-6、TNF-α水平均高于对照组(P＜0.05),实验组A的肺泡灌洗液中EOS、淋巴细胞、中性粒细胞计数、IL-6、TNF-α水平均高于模型组、实验组B(P＜0.05);模型组小鼠的肺组织中GATA3蛋白表达水平均高于对照组(P＜0.05),实验组A肺组织中GATA3蛋白表达水平高于模型组、实验组B(P＜0..05).结论 外源性心钠素会进一步加剧过敏性哮喘小鼠模型的气道炎症反应,与激活炎性细胞、炎症因子释放及增强肺组织中GATA3蛋白表达有关.     

大黄抗衰老作用的实验研究

目的探讨大黄的抗衰老效果和作用机理．方法３月龄昆明种健康雄性小鼠４０只，随机分为低剂量组、中剂量组、高剂量组、对照组，观察不同浓度的大黄水煎液对小鼠血中过氧化氢酶（ＣＡＴ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱苷肽过氧化物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）活性及过氧化脂质（ＬＰＯ）含量的影响．结果大黄可增强小鼠血中ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ活性（Ｐ＜０．０５～０．０１），使ＬＰＯ含量降低（Ｐ＜０．０５～０．０１），其中尤以中、高剂量给药组作；用明显（Ｐ＜０．０１）．结论大黄可能具有延缓衰老的作用．中图分类号Ｒ２８）．Ｊ     

1 型糖尿病模型小鼠空间学习记忆障碍及海马组织氧化应激的变化

目的：探讨1型糖尿病模型小鼠空间学习记忆功能障碍与海马组织诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)活性、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondiadehyde,MDA)含量变化的 关系。方法：将60只雄性FVB-Tg(Gad GFP)4570Swn/J小鼠随机分为对照组(NC组,n=20)和1型糖尿病模型组(DM组, n=40)。采用链脲佐菌素(100 mg/kg)诱导1型糖尿病小鼠模型,用Morris水迷宫行为学实验检测小鼠空间学习及记忆 能力(逃避潜伏期、目的象限内徘徊时间、穿越平台次数),测定DM组中选出的空间学习和记忆能力最差的20只小鼠 (糖尿病脑病小鼠)和NC组小鼠海马组织中iNOS活性、SOD活性及MDA含量。结果：链脲佐菌素腹腔注射后12周, 与NC组比,DM组小鼠逃避潜伏期延长(P<0.01),在目的象限内徘徊时间和穿越平台次数减少(P<0.01),小鼠空间学 习和记忆能力明显受损;糖尿病脑病小鼠海马组织中iNOS活性及MDA含量明显增高,SOD活性明显降低(P<0.01)。 结论：小鼠海马组织中氧化应激明显增加可能是引发1型糖尿病脑病认知功能障碍的因素之一。     

加味茯苓甘草汤防治慢性常压缺氧性肺动脉高压的实验研究

目的：探讨中药复方制剂加味茯苓甘草汤（茯苓、甘草、桂枝、桃仁、苇茎等组成）对慢性肺动脉高压（HPH）的防治作用。方法：常压缺氧法建立HPH大鼠模型，以生理盐水为对照药，设对照组、缺氧组和中药治疗组，灌胃3周，检测平均肺动脉压力（mPAP)，观察右心室与左心室加室间隔重量之比[mR/(mL mS]、血浆及肺匀浆中磷脂酶A2（PLA2）、血栓素B2（TXB2）、6－酮－前列腺素（6－keto-PGF1α）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的变化。结果：①缺氧组大鼠mPAP、mR/(mL mS)、 PLA2、TXB2、MDA含量增加，6－keto-PGF1α、SOD含量下降，与对照组相比有显著性差异（P＜0．01）；②加味茯苓甘草汤能降低mPAP、mR/(mL mS)，与缺氧组相比，前者有显著性差异（P＜0．01）；③加味茯苓甘草汤能使肺组织中PLA2、6－keto-PGF1α、TXB2、MDA含量降至正常水平，与缺氧组相比差异有显著性（P＜0．01或P＜0．05）；④加味茯苓甘草汤能使血浆中PLA2、6－keto-PGF1α、SOD含量下降，与缺氧组相比差异有显著性（P＜0．05或P＜0．01），TXB2、MDA含量无明显变化。结论：长期使用加味茯苓甘草汤可有效防治慢性缺氧性肺动脉高压，其机理与抑制PLA2及相关炎性介质，降低自由基的毒性有关。     

加味痛泻要方对小鼠小肠推进及药物性腹泻的影响

目的:观察加味痛泻要方的小肠推进、致泻等药理作用。方法:①将72只小鼠随机分成6组,即正常对照组、空白模型组、阿托品组、加味痛泻要方低、中、高剂量组,各组分别予以生理盐水、阿托品及不同浓度的加味痛泻要方,分别计算小鼠小肠炭末推进百分率。②另取小鼠75只,随机分为5组:空白模型组、补中益气汤组、加味痛泻要方低、中、高剂量组,各组分别予以生理盐水、补中益气汤及不同浓度的加味痛泻要方,以粪点法记录小鼠排便情况,并行统计学分析。结果:加味痛泻要方对小鼠小肠推进亢进有明显的拮抗作用,其高剂量组致泻率明显降低。结论:加味痛泻要方能减少肠蠕动,对腹泻有一定的抑制作用。     

肺积方抗小鼠肺癌转移

目的：观察肺积方对小鼠肺癌转移的疗效。方法：采用小鼠转移瘤模型,24只C57BL/6小鼠分为模型组、顺铂组和肺积方组,每组8只。模型组以生理盐水0.3ml灌胃,肺积方组予肺积方煎剂（4g/ml）0.3ml灌胃,1次/d,顺铂组予顺铂（0.5mg/ml）0.52ml腹腔注射,1次/3d。干预20d后,称取小鼠体质量、瘤质量和肺质量,玻片计数法计数肺部转移灶的数目。结果：顺铂组小鼠的体质量低于模型组和肺积方组（P〈0.01）,而肺积方组体质量最大;顺铂组和肺积方组的瘤质量低于模型组（P〈0.01）;顺铂组和肺积方组小鼠肺部转移灶数目比模型组少（P〈0.01）。结论：肺积方可以抑制肿瘤生长,减少肺部转移瘤的个数,并具有保持小鼠体质量的作用。     

以铁皮石斛花、叶配伍的和胃茶对胃肠运动的影响

目的：通过在体实验胃排空和小肠推进实验及离体实验离体肠管的张力、振幅、频率,探究一种含铁皮石斛叶和花的和胃茶煎剂对胃肠功能的影响。方法在体实验：将小鼠随机分为正常对照组、香砂六君丸组、和胃茶饮用组、和胃茶灌胃组,分别灌服生理盐水20mL·kg^-1,香砂六君丸混悬液2.33g·kg^-1,生理盐水20mL·kg^-1,和胃茶煎剂0.72g·kg^-1,连续灌胃14d后,禁食不禁水12h,以营养性半固体糊灌胃,测定小鼠胃排空率和小肠推进率。离体实验：取SD大鼠离体小肠,按离体肠平滑肌灌注实验方法,观察在正常台氏液条件下加入不同剂量的和胃茶浸提物（浴槽内终浓度为0.0185、0.0370、0.0740、0.1480g·mL^-1）后大鼠肠平滑肌的收缩状况及以生理盐水和香砂六君丸水煎液作为对照,在乙酰胆碱作用下加入和胃茶浸提物后大鼠肠平滑肌的收缩状况。结果在体实验：和胃茶灌胃组小鼠胃排空率明显降低（P＜0.01）。各组小肠推进率两两比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。离体实验：和胃茶煎剂对大鼠离体小肠运动呈明显抑制作用,表现为振幅减弱,张力下降,频率减慢并能拮抗氯化乙酰胆碱引起的肠平滑肌收缩活动。结论和胃茶煎剂对胃肠运动有较明显抑制作用,能解除肠痉挛。     

大黄与谷氨酰胺对肠缺血再灌注大鼠肠道保护作用比较研究

目的 观察肠缺血再灌注损伤时,大黄和谷氨酰胺对大鼠肠黏膜结构和功能的影响,比较两者的肠道保护作用.方法 40只雄性SD大鼠随机分为大黄组、谷氨酰胺组、对照组和伪手术组,前3组建立肠缺血再灌注损伤模型,予持续全胃肠外营养(TPN),每日分别灌胃大黄液、谷氨酰胺和生理盐水.伪手术组分离肠系膜上动脉但不夹闭,自由饮食.收集尿液、小肠、肠系膜淋巴结和门静脉血分别检测小肠通透性、小肠形态学、小肠细菌移位.结果 (1)对照组肠黏膜通透性较伪手术组明显增大(P＜0.005),大黄组和谷氨酰胺组则与伪手术组相似.(2)对照组小肠绒毛高度,黏膜厚度显著低于伪手术组(P＜0.005),大黄组和谷氨酰胺组优于对照组;小肠全层厚度各组间无显著性差异.(3)对照组培养阳性率高于伪手术(P＜0.005),大黄组和谷氨酰胺组阳性率则低于对照组(P＜0.01,P＜0.05);伪手术组和大黄组门静脉血16s rRNA阳性率低于对照组(P＜0.01,P＜0.05),谷氨酰胺组则与对照组无统计学差异.结论 肠缺血再灌注损伤使大鼠小肠黏膜结构破坏和通透性增加,细菌移位;肠内使用谷氨酰胺或大黄均有肠道保护作用.对于保护小肠绒毛高度、黏膜厚度及降低肠道通透性,大黄与谷氨酰胺效果相仿.作者单位225001 扬州,江苏省苏北人民医院通讯作者谈定玉,电子信箱webtan1981@gmail.com;Tel13665254359大黄能显著降低小肠细菌移位.     

温阳消癥方对5/6肾切除小鼠肾纤维化的作用及其机制

目的：观察温阳消癥方对5/6肾切除小鼠残肾功能及肾脏纤维化的影响,并探讨其作用机制。方法：随机从32只小鼠中取24只制作5/6肾切除慢性肾功能衰竭肾纤维化模型,2周后根据血清肌酐值将24只小鼠分为5/6肾切除组、代文组和温阳消癥方组,另8只作为假手术组。治疗8周后,Western blot检测各组小鼠肾组织JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad3、I型胶原蛋白（Col-I）、III型胶原蛋白（Col-III）、α-SMA蛋白表达水平,免疫组织化学染色法测定小鼠肾组织Col-I、Col-III、α-SMA水平,用RT-qPCR法测定TGF-β1、Smad3 mRNA水平。结果：治疗8周后,模型组小鼠肾组织JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1、Smad3、Col-I、Col-III、α-SMA蛋白表达均较假手术组上调（P＜0.01）,模型组小鼠肾组织TGF-β1、Smad3 mRNA表达较假手术组上调（P＜0.01）;与模型组比较,代文组、温阳消癥方组JAK2、STAT3、p-JAK2、p-STAT3、TGF-β1、Smad3、Col-I、Col-III、α-SMA蛋白表达和TGF-β1、Smad3 mRNA表达均下调（P＜0.01）;与代文组比较,除TGF-β1、α-SMA外,温阳消癥方组其余指标均下调（P＜0.01）。结论：温阳消癥方能够保护5/6肾切除小鼠残肾功能,减轻肾纤维化病变程度,其机制可能与抑制TGF-β1/Smad3、JAK2/STAT3通路相关。     

健脾汤防治脾虚证的实验研究

目的:探讨健脾汤防治脾虚证的作用.方法:以生大黄液造成小鼠脾虚证模型,同时观察健脾汤(黄芪、白术、淫羊藿)对脾虚证的防治作用.结果:健脾汤组症状和体征明显改善,体重明显增加,游泳时间、血浆总蛋白、白蛋白明显好于模型对照组,与正常对照组比较无显著性差异.结论:健脾汤能补脾助运,具有防治脾虚证的作用.