流式细胞术在白血病免疫分型中的应用

目的探讨流式细胞术CD45/SSC设门在急性白血病免疫分型中的应用。方法分别采用CD45/SSC、FSC/SSC两种设门方法对100例AL患者在确定原始细胞群和免疫分型方面进行比较。结论流式细胞术CD45/SSC设门,容易将原始/幼稚细胞与正常成熟细胞群区分开,使白血病分型结果更准确、可靠。     

成人急性白血病细胞三色流式细胞术的免疫分型

目的:探讨成人急性白血病(AL)细胞三色流式细胞术免疫分型的特点.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法、三色流式细胞术对197例急性白血病细胞进行免疫表型分析.结果:急性淋系白血病细胞均表达淋系抗原,46.7%和11.1%的成人ALL细胞表达CD13和CD33;急性髓系白血病细胞均表达髓系抗原,M3中只有1例表达CD34,HLA-DR均无表达;同时AML中有12例表达淋系抗原CD7,21例表达CD10;197例急性白血病中有11例(占5.6%)为杂舍型急性白血病(HAL),其中有6例B/M型.结论:CD45/SSC设门方法能排除骨髓中正常细胞的干扰,免疫表型的检测和研究对急性白血病的分型和明确诊断有帮助.     

流式细胞仪四色荧光标记技术在急性白血病免疫分型中的临床应用

目的：利用CD45／SSC组合及设门技术,直接溶血的四色流式细胞术,在急性白血病患者骨髓白血病细胞免疫分型的临床应用及其意义。方法：待测骨髓标本以CD45-PC5和一组针对不同细胞抗原系列的单克隆抗体标记,用CD45-PC5／SSC设门,进行荧光染色后上流式细胞仪检测,分析白血病细胞的免疫表型。结果：利用流式细胞仪对15例急性白血病患者骨髓免疫表型分析,确定其免疫表型特点,其中急性淋巴细胞白血病5例,急性髓系白血病10例。结论：利用CD45／SSC组合及设门技术,直接溶血的四色流式细胞术进行急性白血病免疫分型,能快速、多参数、客观地定性或定量测定单个细胞膜上的多种抗原表达或同时测定膜、浆的抗原,可更深入了解白血病的异质性,准确判断细胞的来源和所处的分化阶段,这些都与治疗方案的制定和预后判断有关,有助于指导临床治疗及判断预后。     

三色流式细胞术在急性白血病免疫分型中的临床应用

目的　探讨建立利用CD4 5 /SSC组合及设门技术 ,直接溶血的三色流式细胞术 ,在急性白血病患者骨髓白血病细胞免疫分型的临床应用及其意义。方法　待测骨髓标本以CD4 5 -PC5和一组针对不同细胞抗原系列的单克隆抗体标记 ,用CD4 5 -PC5 /SSC设门 ,进行三色荧光染色后上流式细胞仪检测 ,分析白血病细胞的免疫表型。结果　CD4 5和SSC将白血病细胞从正常的淋巴细胞、单核细胞、粒细胞和有核红细胞中区分开 ,33例急性白血病患者骨髓中在原始细胞部位出现异常增高的原始细胞群 ,确定其免疫表型特点。结论　利用CD4 5 /SSC组合及设门技术 ,直接溶血的三色流式细胞术进行急性白血病免疫分型 ,该技术明显优于传统的前向散射对侧向散射设门的方法 ,有助于指导临床治疗及判断预后。     

CD15在成人白血病诊断中的价值

近年的研究表明,流式细胞术（FCM）检测结果对于确定白血病的诊断与分型至关重要.以往采用横向分析的方法对白血病进行免疫分型的报道较多,而对于某一个特定标志在白血病免疫学诊断中的作用报道较少.笔者采用CD45/SSC双参数设门的多色FCM,对成人白血病患者白血病细胞中CD15的表达进行检测,旨在探讨CD15在白血病诊断中的价值.     

流式细胞术CD45/SSC设门在检测骨髓标本时的意义

目的:探讨用流式细胞术进行白血病免疫的最佳设门方法，以确保分析结果的准确性和可靠性。方法：根据骨髓中原始细胞的CD45表达强度较正常淋巴细胞及单核细胞低的特征，使用三色荧光标记骨髓细胞，采用CD45 PerCP/SSC（对数）进行分析。结果：正常骨髓细胞分为6群，原始细胞的CD45表达低且SSC较小。白血病骨髓中在原始细胞部位出现异常增高的原始细胞群，其位置与其他正常细胞几无重叠。结论：采用CD45 PerCP/SSC（对数）对白血病患骨髓细胞进行分类可以明显提高免疫分型结果的准确性和重复性，特别是对白血病残科病灶检测具有明显优势。     

71例儿童急性髓系白血病多参数流式细胞术免疫表型分析

目的为了解儿童急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)免疫表型特征,分析儿童AML不同亚型抗原表达的差异,并探讨其诊断价值.方法采用三色FCM CD45/SSC双参数散点图设门方法,对71例患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析,结合FAB分类进行比较分析.结果在儿童急性髓系白血病患者中,CD33和CD13的表达最常见,分别达97.2%和94.4%,其次为HLA-DR(69%).57.7%的病例伴有淋系抗原表达,以CD19表达最常见(36.6%),其次为CD7(28.2%),未见CD20的表达.3例M0患儿经免疫分型确诊.结论结合FAB分类,多参数流式细胞术有助于对AML的准确诊断和分型.FAB不同型别具有不同的免疫表型特征.     

36例急性白血病免疫分型特点与临床意义

目的:探讨急性白血病(AL)三色流式细胞术免疫分型的特点及临床意义.方法:采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果:25例急性髓细胞性白血病(AML)主要表达CD13(96.00%)、CD33(92.00%)、MPO(80%)、CD34(68.00%)、HLADR(72.00%).20%的AML患者伴有淋系抗原表达变异型(Ly AML),最常见为CD7.B细胞急性淋巴细胞性白血病(ALL)4例(36.36%),主要表达CD19(100.00%)、HLA-DR(100.00%)、CD22(75.00%)、CD10(50.00%)、CD34(50.00%);T细胞急性淋巴细胞性白血病(ALL)7例(63.64%),主要表达CD7(100.00%)、CD2(71.43%).结论:流式细胞仪三色荧光标记法进行AL免疫分型,对白血病的准确诊断和分型,治疗方案的选择具有重要意义.     

多色流式细胞术对60例成人急性髓系白血病免疫分型的研究

目的探讨成人急性髓系白血病(AML)多色流式细胞术免疫分型的特点。方法采用CD45/SSC双参数散点图设门方法进行多色流式细胞术免疫表型分析。结果髓系抗原CD13和CD33在AML各亚型中均有很高的表达,阳性率分别为98.3%和85.0%。CD14和CD64在AML-M4及AML-M5患者中的表达率较高。CD14和CD64在AML-M4的表达率分别为60.0%和100.0%,在AML-M5的表达率分别为80.0%和100.0%,但CD14的特异性要高于CD64。AML患者CD34、CD117、HLA-DR的表达率分别为59.3%、84.3%和71.7%;AML-M3患者CD117表达率为76.9%,CD34及HLA-DR呈低表达。AML患者淋系抗原CD7和CD19阳性率分别为20.0%和3.3%。结论采用CD45/SSC双参数散点图设门方法,使成人AML免疫分型结果更可靠。CD13、CD33、CD14可作为AML免疫分型的髓系单抗。CD34及HLA-DR低表达为AML-M3的特征。成人AML淋系抗原表达以CD7较常见。     

成人急性髓细胞系白血病免疫分型特点

目的：探讨成人急性髓细胞系白血病（AML）三色流式细胞术免疫分型特点及AML抗原表达规律.方法：采用CD45/侧散射（SSC）双参数散点图设门方法对156例成人AML进行三色流式细胞术免疫表型分析.结果：156例AML主要表达CD117（90.4%）、CD13（87.2%）、CD33（71.8%）、CD34（64.7%）、HLA-DR（60.9%）.34.0%的AML患者伴有淋系抗原表达,最常见为CD7（24.4%）.结论：流式细胞仪三色荧光标记法进行AML免疫分型,对白血病的准确分型诊断、发生发展和预后判断有重要的指导意义.     

儿童期急性白血病免疫分型诊断新方案的临床应用

目的 建立一种胞膜与胞浆抗原相结合、特异与敏感标志相结合的三色流式细胞术检测方法，研究儿童期急性白血病的免疫表型特点。方法 用CD45／SSC双参数点图区分白血病细胞和正常血细胞后，先用系列特异和敏感指标确定白血病细胞的系列来源，然后根据不同系列来源进一步检测。结果 CD45／SSC能明确区分白血病细胞和正常血细胞。胞浆抗原cCD79a、cCD3和MP0分别是B-ALL、T-ALL和AML的特异性抗原，且能够覆盖白血病分化的各阶段。CD19和CD7分别是B-ALL和T-ALL的系列敏感抗原。这两类抗原的结合在确定急性白血病的系列来源时特异、敏感、可靠，避免了仅用胞膜标记时因抗原跨系表达而获得可疑结果。结论 该方案可提高儿童期白血病免疫分型诊断的准确性，对患者的预后进行评估，是一种值得推广的免疫分型方案。     

Application of CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry in the classification of acute leukemia — An analysis of 139 cases

Summary In order to study the significance of flow cytometry immunophenotyping in the diagnosis of acute leukemia, CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry (FCM) was utilized to analyze the immunophenotypes of 139 cases of acute leukemia. 139 cases of acute leukemia were enrolled in our hospital from April 1998 to April 2000. Morphological analysis and FCM immunophenotypic tests were conducted on all cases. Our results showed that CD45/SSC gating multiparameter flow cytometry immunophenotyping could reflect the origin of leukemic cells specifically. It is one of the important methods for the diagnosis of ALL, AML, and HAL. CD45/SSC gating multiparameter FCM analysis is a good technique for immunophenotyping. FCM immunophenotypic analysis can help improve the diagnosis and classification of acute leukemia, and extend the use of FCM in clinical practice.     

Application of CD45/SSC Gating Multiparameter Flow Cytometry in the Classification of Acute Leukemia——An Analysis of 139 Cases

Acute leukemia is a disease of high heterogene-ity.The accurate classification of each individual pa-tient is very important to therapy and prognosis[1,2 ] .To study the significance of CD45 / side scatter( CD45 / SSC) gating multiparameter flow cytometry( FCM) in the classification of acute leukemia,weused this method for analyzing the immunopheno-types of 1 39cases of acute leukemia.1　MATERIALSAND METHODS1 .1　 PatientsAll the patients were admitted into our hospitalfrom April 1…     

CD45作门的三色流式细胞术在白血病免疫分型中的应用

目的 介绍一种直接裂解骨髓样本进行急慢性白血病分型的三色流式细胞术。方法 将这种方法应用于115例急性白血病和10例慢性白血病的免疫分型。利用CD45和侧向散射将白血病细胞从正常的淋巴细胞，单核细胞，粒细胞和有核红细胞中区分出来后，用双参数流式细胞术进行分析。结果 流式细胞术测定得到的幼稚细胞比例在很大程度上与形态学计数相关，不同的FAB亚型白血病在CD45/SS图中的形式也不完全相同，当PC5标记的CD45与异硫氰酸荧光黄和藻红蛋白标记的其他抗体联合应用时，可以在对白血病细胞作门的基础上，同时进行白血病细胞表型表达的双参数分析。结论 在白血病免疫分型时，这种作门技术明显优于传统的前向散射对侧向散射作门方法。     

106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

OBJECTIVE: To study the immunophenotyping of adult patients with acute leukemia and its association with the prognosis. METHODS: Immunophenotyping was performed in 106 adult patients with acute leukemia by three-color flow cytometry analysis using CD34/SSC gating. RESULTS: The antigens expressed in 71 patients with acute myeloid leukemia (AML) were mainly CD13, CD33, HLA-DR, CD34 and CD117. Lymphoid antigen expression was identified in 23.9% adult AML patients and CD56 antigen expression in 15.5% of the AML patients. In 29 patients with acute lymphoblastic leukemia (ALL), the expressed antigens were mainly HLA-DR, CD10, CD19, CD34 and CD7, and 34.5% of these patients were found to be positive for myeloid antigen expression. Complete remission (CR) rate in AML patients with lymphoid antigen expression after chemotherapy was lower than that in AML patients without lymphoid antigen expression (52.9% vs 77.8%, P<0.05), and no significant impact was noted of myeloid antigen expression in ALL on the CR of the patients (70.0% vs 94.7%, P>0.05). The CR rate in AML with CD56 antigen expression was lower than that in AML without CD56 expression (36.4% vs 78.3%, P<0.025), and the CR rate in CD34+ AML was lower than that in CD34- AML (56.0% vs 80.4%, P<0.05). CONCLUSIONS: Gating of CD45/SSC can eliminate the interference of normal cells to render more reliable immunophenotyping results. The expressions of CD56+, CD34+, lymphoid antigen in adult AML patients, who have lower CR rate, often signify poor prognosis.     

106例成人急性白血病流式细胞术免疫分型分析

目的研究成人急性白血病免疫分型及与预后的关系。方法以CD45/SSC双参数散点图设门,采用流式细胞术检测106例成人急性白血病患者免疫分型情况。结果(1)71例急性髓系白血病(AML)患者主要表达CD13、CD33、HLA-DR、CD34和CD117抗原,23.9%的AML患者伴有淋系抗原表达,15.5%的AML病人伴有CD56抗原的表达。(2)29例急性淋巴细胞白血病(ALL)患者主要表达HLA-DR、CD10、CD19、CD34和CD7,34.5%的ALL患者伴有髓系抗原的表达。(3)伴有淋系抗原表达的AML患者化疗完全缓解(CR)率为52.9%(9/17),显著低于未伴有淋系抗原表达的AML病人(77.8%)(P<0.05);伴有髓系抗原表达的ALL患者化疗后CR率为70.0%,而未伴有髓系抗原表达的ALL患者CR为94.7%,两者差异无显著性(P>0.05);CD56 AML患者化疗后CR率仅36.4%,显著低于CD56- AML患者(78.3%)(P<0.025);CD34 AML患者化疗后CR率为56.0%,显著低于CD34- AML患者(80.4%)(P<0.05)。结论采用CD45和SSC双标记设门可较好地排除正常骨髓细胞的影响,较准确地反映病人的免疫学分型;伴淋巴系抗原表达的AML、CD56 AML及CD34 AML化疗后CR率低,预后差。     

92例B系急性淋巴细胞白血病多参数流式细胞术免疫表型分析

目的 探讨B系急性淋巴细胞白血病(B-ALL)患者的免疫表型特点及其临床意义.方法 采用高分辨多参数流式细胞术CD45/SSC散点图设门方法,对92例初发性B-ALL患者的骨髓幼稚细胞表面及胞内分化抗原进行分析.结果 B-ALL患者的免疫表型具有明显特征:HLA-DR、CD10、CD19、CD22、CD34、CD38、cCD79a、TdT最为常见;髓系抗原CD11b、CD13、CD15和CD33亦可见明显表达,表达率分别为16.7%、42.4%、17.4%和37.4%.不同亚型比较,前前B-ALL中HLA-DR、CD10、CD19、CD22、CD34、CD38、cCD79a的表达率均在90%以上,而不成熟B-ALL不表达CD10,CD11b、CD13、CD33主要在前前B-ALL上表达,CD15则在前B-ALL中多见.儿童B-ALL的免疫表型与成人B-ALL之间没有显著性差异.结论 B-ALL的异常骨髓细胞具有明显的本系列特征、原始细胞标记和跨系表达.且不同免疫亚型的B-ALL具有一定的表型差异.