鲍曼不动杆菌分泌物对铜绿假单胞菌及其生物膜的作用

目的探讨鲍曼不动杆菌培养上清对铜绿假单胞菌的浮游菌生长及生物膜形成的影响。方法收集鲍曼不动杆菌标准菌株(ATCC 19606和ATCC 1195)和临床菌株(AB23、AB39和AB53),提取6、12、16、24和48 h培养上清液。利用96孔板结合结晶紫染色法检测其培养上清液对铜绿假单胞菌标准菌株PAO1及其生物膜形成的影响;配制2×LB培养基,排除营养消耗对铜绿假单胞菌的影响;并进一步利用相对分子质量3 000蛋白质浓缩管对其培养上清液进行分离浓缩,初步探讨鲍曼不动杆菌培养上清液中有效成分的相对分子质量。结果 12~24 h内的鲍曼不动杆菌培养上清液,抑制铜绿假单胞菌增殖的效果最为显著,为便于操作,本实验采用16 h培养上清液进行后续实验。50%ATCC 1195和ATCC 19606培养上清液能显著抑制铜绿假单胞菌标准菌株PAO1浮游菌的增殖,可分别使其630 nm处的吸光度从0.688±0.014和0.692±0.014减少至0.431±0.023和0.428±0.020(t=16.780,P0.05;t=18.500,P0.05);且50%ATCC 1195和ATCC 19606培养上清液能显著抑制铜绿假单胞菌PAO1生物膜的形成,可使生物膜的形成量(A_(570 nm))从2.071±0.068和1.986±0.023减少至1.639±0.042和1.525±0.202(t=9.358,P0.05;t=3.924,P0.05);此外,与50%鲍曼不动杆菌培养上清液组相比,培养上清液中相对分子质量3 000的成分抑制作用显著,可使生物膜的形成量从1.177±0.040减少至1.056±0.030(t=4.192,P0.05),而3 000的成分并无抑制作用。结论鲍曼不动杆菌分泌物能有效抑制铜绿假单胞菌浮游菌的增殖和生物膜的形成,其有效蛋白质成分相对分子质量3 000。     

TNF-α、IL-1β、IL-6促进细菌生长的体外研究

目的评价TNF-α，IL-1β和IL-6促进铜绿假单胞菌、金葡菌和鲍曼不动杆菌体外生长作用。方法将铜绿假单胞菌、金葡菌和鲍曼不动杆菌菌液分别加入含有10、50、100、500Pg，1、10ng TNF-α、IL-1β、IL-6的RPMI1640培养液，孵育2、4、6、8、16～18h计数；另将中和量单克隆抗体与细胞因子混合后，做细菌定量培养。结果IL-6对铜绿假单胞菌、IL-1β对金葡菌以及IL-1β对鲍曼不动杆菌在共作用6h时表现为浓度依赖的生长促进作用；特异性细胞因子中和抗体则可显著抑制细胞因子对细菌生长的促进作用。结论细胞因子对细菌的生长促进作用，为迁延性炎症中细菌增殖的机制提供新的依据；而细胞因子对细菌的生长促进作用可被中和抗体所抑制，将为更有效进行抗菌治疗提供有益参考。     

多重及泛耐药铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌医院感染调查及产碳青霉烯酶表型研究

目的 了解铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌院内感染分布、耐药特点以及产碳青霉烯酶表型情况。方法 回顾性收集2012年7月到2013年7月该院分离非重复铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌医院感染菌株及病例。采用纸片扩散法(K-B法)进行药敏试验,改良Hodge试验进行碳青霉烯酶初筛,初筛阳性菌株应用2-巯基丙酸协同法进一步检测金属酶。结果 在研究期间,共纳入非重复铜绿假单胞菌250株,鲍曼不动杆菌132株。菌株标本类型以痰液(55.5%)为主,科室分布以重症监护病房(20.9%)为主。药敏试验显示:铜绿假单胞菌对测试药物敏感性较好,均大于70%以上,对IPM和MEM耐药率较低分别为8.5%、9.5%,然而鲍曼不动杆菌对测试药物耐药率较高达35.2%~77.4%,对IPM和MEM耐药率分别为35.2%、39.1%。多重耐药及泛耐药鲍曼不动杆菌医院感染发生率要高于铜绿假单胞菌分别为44.7%和24.0%;9.1%和2.8%。40株耐碳青霉烯类铜绿假单胞菌,碳青霉烯酶初筛阳性11株占27.5%,金属酶表型阳性2株占18.2%;49株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌,碳青霉烯酶初筛阳性37株占75.5%,金属酶表型阳性1株占2.7%。结论 该院铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物呈现不同耐药性,应加强监测。产碳青霉烯酶是鲍曼不动杆菌耐碳青霉烯类药物主要机制之一。产金属酶铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌检出率较低。     

铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌感染分布特征及耐药性分析

目的 探讨铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的分布特征及对多种抗菌药物的耐药性变迁。方法 收集2012年1月至2014年12月该院分离的铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌,采用琼脂扩散法做药物敏感试验,比较其对抗菌药物的耐药性变迁。结果共分离出病原菌3 710例,铜绿假单胞菌分离214株(5.8%),鲍曼不动杆菌分离347株(9.4%)。铜绿假单胞菌3年感染率分别为7.3%、6.6%、4.7%,呈逐年减少趋势,鲍曼不动杆菌感染率分别为7.6%、8.8%、10.3%,呈逐年增加趋势。标本来源主要以痰液、创面分泌物、尿液为主。铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌感染菌株以重症监护室(ICU)检出率最高,分别为27.6%和34.9%。铜绿假单胞菌对头孢他啶、阿米卡星、亚胺培南的耐药率均有逐年增高趋势;鲍曼不动杆菌对哌拉西林/他唑巴坦、亚胺培南耐药率逐年增高;多粘菌素B耐药率逐年下降。结论 铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对抗菌药物耐药率逐年增高,尤其对碳青霉烯类耐药情况日趋严重,因此需加强对铜绿假单胞菌及鲍曼不动杆菌的耐药性监测,指导临床合理应用抗菌药物。     

鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌在医院感染中的地位及耐药分析

目的了解鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌在医院感染中的地位,分析其对临床常用抗菌药物的耐药情况。方法鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的鉴定和药敏采用法国生物梅里埃公司的VITEK-2系统进行药物的最低抑菌浓度(M IC)检测。结果铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌在医院感染中是重要的致病菌。在呼吸道感染标本中铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌分别位居前一、二。对铜绿假单胞菌仍保持较高的抗菌活性的抗菌药物(耐药率均<20%)有阿米卡星、头孢他啶、环丙沙星、亚胺培南、妥布霉素、头孢吡肟、左旋氧氟沙星、哌拉西林/他唑巴坦、美洛培南。对鲍曼不动杆菌仍保持较高的抗菌活性的抗菌药物(耐药率均<20%)只有阿米卡星和亚胺培南。耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的耐药性很高,除阿米卡星耐药率是28.4%外,其余的抗菌药物的耐药率均高于60%。结论虽然耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的多重耐药性比耐亚胺培南铜绿假单胞菌更为显著,但鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌在我院的医院感染菌中的地位同样重要,在医院感染的防控中值得关注。     

鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌体外抗菌活性的分析及培养基的影响

目的了解当前鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌的体外抗菌活性以及在低碱性氨基酸培养基中对碳青霉烯类抗菌药物最低抑菌浓度（MIC）的影响。方法收集临床分离的鲍曼不动杆菌47株、铜绿假单胞菌53株。按美国临床实验室标准化协会（CLSI）琼脂稀释法检测菌株对帕尼培南、亚胺培南、美罗培南、头孢他啶、头孢哌酮-舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢吡肟、左氧氟沙星、环丙沙星、阿米卡星10种抗菌药物的MIC;同法分别检测鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌在低碱性氨基酸培养基和水解酪蛋白胨（MH）培养基上对帕尼培南、亚胺培南、美罗培南的敏感性。采用配对t检验比较2组试验结果。结果 47株鲍曼不动杆菌对亚胺培南、左氧氟沙星的耐药率最低,分别是17.10%和14.90%,哌拉西林-他唑巴坦耐药率高达78.70%。53株铜绿假单胞菌对阿米卡星的耐药率最低,为20.75%;头孢他啶的耐药率高达71.70%。在低碱性氨基酸的培养基中,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对碳青霉稀类抗菌药物的敏感性差异有统计学意义（P〈0.05）。结论碳青酶烯类药物是治疗鲍曼不动杆菌引起的重症感染的重要药物。由于碱性氨基酸的浓度较高,鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗菌药物的敏感性在使用MH培养基检测时被低估。     

鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌qacEΔ1基因检测及消毒剂抗性研究

目的研究临床分离鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌携带qac EΔ1耐消毒剂基因及对3种常用消毒剂抗性情况。方法选择我院2012年1月至2014年12月临床分离的鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌各30株,采用PCR法检测所有菌株携带qac EΔ1耐消毒剂基因情况,采用定量杀菌试验检测qac EΔ1基因阳性菌株对3种临床常用消毒剂抗性的变化,对检测结果进行统计学分析。结果在30株鲍曼不动杆菌中,有22株携带qac EΔ1基因,阳性率为73.3%(22/30)。在30株铜绿假单胞菌中,有18株携带qac EΔ1基因,阳性率为60.0%(18/30)。标准菌株大肠埃希菌ATCC 25922和铜绿假单胞菌ATCC 27853的qac EΔ1基因检测均为阴性。有效碘、有效氯及快速手消毒剂对鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌及质控菌株的灭菌率均随时间和剂量的提高而提高,呈现明显的量-效关系和时-效关系。在灭菌1 min时,除300 mg/L有效碘对鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌qac EΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于基因阴性菌株,且差异均有统计学意义(P均0.05)外,其他浓度下有效碘对鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌qac EΔ1基因阳性菌株与阴性菌株灭菌率差异均无统计学意义(P均0.05)。其他作用时间下不同浓度有效碘对鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌qac EΔ1基因阳性菌株的灭菌率均低于qac EΔ1基因阴性菌株,且差异均有统计学意义(P均0.05)。不同浓度的有效氯在作用5 min、7min时对鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌qac EΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于基因阴性菌株,且差异均有统计学意义(P均0.05);作用1 min时,500 mg/L有效氯对鲍曼不动杆菌qac EΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于阴性菌株,且差异有统计学意义(P0.05),但对铜绿假单胞菌qac EΔ1基因阳性与阴性菌株灭菌率差异无统计学意义(P0.05)。快速手消毒剂在作用1 min、5 min和7 min时对鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌qac EΔ1基因阳性菌株灭菌率均低于基因阴性菌株,且差异均有统计学意义(P均0.05)。结论我院分离的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌携带qac EΔ1耐消毒剂基因比例较高,qac EΔ1基因阳性菌株对临床常用的3种消毒剂的抗力高于阴性菌株和标准菌株。     

铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌临床感染和耐药性分析

目的探讨铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的筘床感染分布及其药敏情况,为临床合理使用抗菌药物和预防多重耐药菌株的产生提供依据。方法回顾性分析了642株铜绿假单胞茼和570株鲍曼不动杆菌感染科室分布及耐药情况。结果铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌感染的科室主要集中在重症监护病房（ICU）、呼吸科、神经外科、神经内科;氨苄西林和头孢唑啉对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆茸的抗菌作用最差,耐药率大于95％;铜绿假单胞茴对亚胺培南、美洛培南、头孢哌酮／舒巴坦、多粘菌素敏感性最高;鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的敏感性有所降低,其耐药率在15％左右,对多粘菌素的敏感性最高。结论铜绿假单胞菌争鲍曼不动杆茼临床分离株多来自ICU病房;氨苄西林和头孢唑啉已经不适于铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌感染的治疗,亚胺培南、芙洛培南、多粘茼素可作为临床经验性用药;临床应重视合理使用抗生素,加强对铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌的耐药性监蒯,减少多重耐药菌的产生。     

2002～2005年烧伤整形病房感染病原菌的分布和药敏分析

目的:对我院烧伤整形病房感染的病原细菌分布及药敏情况进行分析为临床选药提供参考。方法:回顾分析2002年~2005年间我院烧伤整形病房住院患者感染及药敏情况,细菌的鉴定及药敏采用MicroscanWalka-way40全自动系统。结果:病原菌中75·0%来自分泌物标本。分离数居前四位的细菌是金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌以及阴沟肠杆菌,分别占34·5%、17·0%、12·0%、6·0%。金葡菌中62·3%为耐甲氧西林株,仅对万古霉素和甲氧苄啶/磺胺甲唑的体外敏感性较好。铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌和阴沟肠杆菌对三代头孢菌素耐药率相对较高,对哌拉西林/三唑巴坦、亚胺培南耐药率较低。结论:烧伤感染以金葡菌和铜绿假单胞菌为主,具有高度耐药性和多重耐药的特点。     

某医院鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌耐药性监测

目的 了解2008～2010年本院鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药性.方法 采用VITEK-60全自动细菌分析系统(法国梅里埃公司生产)及其配套试剂对阳性标本进行细菌鉴定和药敏试验.结果 2008～2010年分离的鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌对多种抗菌药物的耐药性严重,对阿米卡星、氨苄西林、头孢唑啉、头孢吡...